CC BY
71ИЮЛЬ - АВГУСТ 2О 1 6
►
НОВЫЕ СВЕДЕНИЯ О ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ
УДК 592 : 615.9
МИКРООРГАНИЗМ BACILLUS
AMYLOLIQUEFACIENS OPS-32
Н.И. Шеина1, Э.Г. Скрябина1, Л.И. Мялина1, Е.В. Буданова2, Л.П. Сазонова1, В.В. Колесникова1, Г.Г. Чуб1
1ГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 117997, г. Москва, Российская Федерация
2ФГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет» им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации, 119991, г. Москва, Российская Федерация
В статье приведена оценка токсичности и опасности микроорганизма Bacillus amylo-liquefaciens OPS-32. На основании полученных данных для атмосферного воздуха населенных мест рекомендована ПДКав штамма на уровне 5х103 кл/м3, 4 класс опасности. Ключевые слова: микроорганизм, токсичность, опасность.
Штамм Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 выделен из почвы вокруг ризосферы яровой пшеницы, не является генетически модифицированным штаммом. Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 проявляет высокую антагонистическую активность в отношении широкого ряда фитопато-генных грибов, обладает устойчивостью к ряду антибиотиков и способен расти на средах с нафталином в качестве единственного источника углерода.
Штамм является активным компонентом микробиологического фунгицида Оргами-ка С (Orgamica S). Препарат предназначен для предпосевной обработки семян, для обработки сельскохозяйственных культур в период вегетации для защиты растений и посадочного материала от бактериальных и грибковых заболеваний в сельскохозяйственном производстве и личных подсобных хозяйствах.
Биофунгицид колонизирует корневую систе-
му растений, лишает фитопатогенные грибы источников питания и угнетает их рост выделяемыми метаболитами.
Механизм действия на целевой объект обусловлен возникновением антагонистических отношений между активными вегетативными клетками штамма Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 и вредоносным объектом, посредством воздействия антибиотиков, гидролитических ферментов, синтезируемых клетками штамма.
Клетки палочковидные размером (0,6-0,8х1,7-2,2)мкм, подвижные при помощи пери-трихий, грамположительные, образуют споры, занимающие центральное положение и имеют овальную форму.
Штамм хорошо растет на следующих средах: мясо-пептонный агар (МПА), картофель-но-глюкозный агар (КГА), LB-агар. Колонии штамма круглые, с фестончатым краем, центр выделен в виде кратера и заметно приподнят.
Шеина Наталья Ивановна (Sheina Natalja Ivanovna), доктор биологических наук, доцент, профессор кафедры гигиены ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация, ni_sheina@mail.ru
Скрябина Эмилия Григорьевна (Skrjabina Jemilija Grigor'evna). кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела иммунологии ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация
Мялина Любовь Ивановна (Mjalina Ljubov' Ivanovna), кандидат медицинских наук, доцент кафедры гигиены ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация, gigea@rsmu.ru
Буданова Елена Вячеславовна (Budanova Elena Vjacheslavovna), кандидат медицинских наук, доцент, доцент кафедры микробиологии, вирусологии, иммунологии ФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России, 119991, г. Москва, Российская Федерация, e.v.budanova@mail.ru Сазонова Любовь Павловна (Sazonova Ljubov' Pavlovna), кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры гигиены ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация, gigea@rsmu.ru
Колесникова Валентина Васильевна (Kolesnikova Valentina Vasil'evna), кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры гигиены ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация, gigea@rsmu.ru
Чуб Галина Георгиевна (Chub Galina Georgievna), кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры гигиены ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация, gigea@rsmu.ru
Токсикологический вестник №4 (139)
Размеры колеблются от 5-8 до 12-15мм в диаметре в зависимости от ростовой среды и возраста колонии. Поверхность шероховатая, хорошо заметна тенденция к появлению складок. Край колонии может быть ровным, чаще складчатый, шероховатый.
Для культивирования используется ЬБ-агар, оптимальная температура (28±2)0С. Колонии плоские или слегка выпуклые, непрозрачные, матовые, молочно-белые, в агар не врастают; по консистенции вязкие и тягучие, поверхность колонии мягкая, но плотная.
В рамках проведенных экспериментальных исследований с целью установления лимитирующего критерия вредного действия (ЛКВД) и установления ПДК штамма в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест были исследованы влияние микроорганизма на интегральные показатели состояния организма экспериментальных животных и микрофлору кишечника, иммунотоксические свойства и возможность диссеминации его во внутренние органы.
Обследование экспериментальных животных показало, что воздействие микроорганизма в изучаемых концентрациях (5х104 и 5х105 кл/м3) в течение 1 месяца не приводило к изменению интегральных показателей состояния организма экспериментальных животных, которое оценивалось по динамике массы тела в процессе эксперимента и в восстановительном периоде, а также по величине коэффициентов массы внутренних органов. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии токсического действия штамма на организм крыс при хронической экспозиции в изученных концентрациях.
В результате проведенных исследований по изучению иммунотоксических свойств микроорганизма установлено, что коэффициенты массы селезенки и тимуса экспериментальных животных не различались с таковыми у животных контрольной группы.
В лейкограмме периферической крови не обнаружено изменений как относительного, так и абсолютного количества лимфоцитов, а также числа эозинофилов у подопытных животных.
При оценке сенсибилизирующей активности штамма в эксперименте на мышах не выявлено формирования клеточной реакции замедленного типа (ГЗТ) и гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) реагинового типа.
Изучаемый микроорганизм не вызывает им-
мунного ответа при используемом способе исследования и указанных уровнях воздействия. Не обнаружено образования специфических гуморальных антител (агглютининов) в сыворотке подопытных животных обеих групп.
Бактериологические исследования микрофлоры кишечника показали, что на фоне субхронического воздействия Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 не происходило значимого изменения (дисбаланса) микробиоценоза кишечника крыс. Штамм не оказывал ощутимого влияния на показатели анаэробной составляющей (бифи-добактерии, лактобациллы) микробиоценоза кишечника. Не изменялась высеваемость стафилококков, энтерококков и энтеробактерий у подопытных животных. Коэффициент массы слепой кишки не различался у крыс контрольной и подопытных групп. Однако в этот период воздействие штамма сопровождалось незначительными изменениями со стороны аэробных и факультативно-аэробных микроорганизмов кишечника, и прежде всего протеев.
В восстановительном периоде микрофлора кишечника крыс, подвергшихся воздействию микроорганизма в концентрации 5х105 кл/м3, по качественным и количественным показателям не отличалась от таковых контрольных животных.
Штамм при субхроническом воздействии в большей концентрации 5х105 кл/м3 не обладал способностью к диссеминации в кровь и внутренние органы (легкие, печень, почки, селезенка) экспериментальных животных ни через 1 месяц введения микроорганизма, ни через 2 недели восстановительного периода.
На основании полученных данных установлено, что пороговая концентрация воздействия штамма не была достигнута. В соответствии с этим величина ПДК в воздухе рабочей зоны устанавливается на уровне максимально рекомендованной МУ, а именно 5х104 кл/м3, 4 класс опасности. С учетом коэффициента запаса 10 для атмосферного воздуха населенных мест рекомендована ПДКав штамма на уровне 5х103 кл/ м3, 4 класс опасности.
Для близкородственного штамма B. amyloliquefaciens ВКПм В-10291 продуцента а-амилазы установлены ПДК в воздухе рабочей зоны 5х104 кл/м3, в атмосфере - 5х103 кл/м3, пометка А, 4 класс опасности (ГН2.2.6.2178-07), что в целом находится на одном уровне с рекомендованной величиной для изучаемого штамма.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Критерии оценки патогенных свойств штаммов-продуцентов, предлагаемых для использования в промышленности микробиологического синтеза.
Методические рекомендации РГМУ, М., 1992. - 22с.
2. Методические указания по экспериментальному обоснованию ПДК микро-
организмов-продуцентов и содержащих их готовых форм препаратов в объектах производственной и окружающей среды. №5789/1-91.- М., 1991. - 22с.
3. Определитель бактерий Берджи. Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига и др. -9-ое издание в 2-х томах. - М., «Мир», 1997. - Т.2.
и юл ь
- АВГУСТ 2О 1 6
REFERENCES:
1. Criteria of assessment the pathogenic properties of producer strains proposed for use in industrial microbiological synthesis. Method. Recommendations, Medical
University. - Moscow, 1992. - 22p.(in Russian).
2. Guidelines on experimental justification of the limit permitted concentration of
producing microorganisms and their containing strains products in industrial and environmental objects. №5789/191. - M., 1991. - 22p. (in Russian).
3. The determinant of bacteria Bergey. Ed. J. Hoult, N. Krig et al. - M.,"Mir". - 1997. -V.2 (in Russian).
N.I. Sheina1, J.G. Skryabina1, L.I. Myalina1, E.V. Budanova2, L.P. Sazonova1, V.V Kolesnikova1, G.G. Chub1.
MICROORGANISM BACILLUS AMYLOLIQUEFACIENS OPS-32
1N.I. Pirogov Russian National Research Medical University, 117997 Moscow, RF Ministry of Healthcare, Russian Federation 2 I.M. Sechenov Moscow State Medical University , RF Ministry of Healthcare, 119991 Moscow, Russian Federation
Hazard and toxicity assessment of the microorganism Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 was performed. Based on data obtained, MAC t ... of the strain on the level of 5x103 cells/m3, hazard
* 7 atmospheric air 7
class 4 is recommended for the atmospheric air of residential areas. Keywords: microorganism, toxicity, hazard.
Материал поступил в редакцию 29.02.2016 г.
