CC BY
46
Статья
Раздел I.
БИОЛОГИЯ СЛОЖНЫХ СИСТЕМ. ФИЗИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЕ И МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ОРГАНОВ И СИСТЕМ ЧЕЛОВЕКА
УДК: 616.36-091.8:612.57- 092.9
МИКРО- И УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИЙ ТКАНЕВОГО МИКРОРАЙОНА ПЕЧЕНИ КРЫС В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ ПОСЛЕ ОБЩЕЙ УПРАВЛЯЕМОЙ ГИПЕРТЕРМИИ
А. Д. БЕЛКИН, Г. М. ВАКУЛИН, А. В. ЕФРЕМОВ, С. В. МИЧУРИНА, Е. А. ПАХОМОВ, Ю. В. ПАХОМОВА*
Введение. В современной медицине используется гипертермия, применяемая в народной медицине уже несколько тысячелетий с лечебно-профилактической целью. Гипертермия -состояние, вызванное искусственным согревание всего тела или его части до уровня, превышающего границы обычного теплового режима организма, а точнее - рубеж 37°С [1]. Под термином «гипертермия» понимают повышение температуры тела при условии обычного врачебного контроля, сверх допустимого предела 40-41°С, а под термином «управляемая гипертермия» надо понимать вариант метода гипертермии, допускающий повышение температуры сверх 41°С, но требующий применения особой техники безопасности и участия специалистов.
Воздействие на организм общей управляемой гипертермии (ОУГ) при температуре выше 40-41°С ведет к гибели клеток [2], бактерий [3] и вирусов [4]. Однако ОУГ может оказывать на человека и неблагоприятное воздействие.
Пребывание организма в условиях гипертермического воздействия приводит к метаболическим и функциональным изменениям на трех уровнях: молекулярном, клеточном и тканевом [5]. Рассматривая действие ОУГ на организм, следует иметь в виду два возможных пути развития последующих изменений: повышение температуры органов и тканей и непосредственное влияние температурного фактора на их структуру и обмен веществ в них, на их функцию, на структуру отдельных клеток и макромолекул [6]; включение механизмов адаптации с влиянием на организм тех сдвигов, которые происходят вследствие борьбы организма за постоянство температуры тела [7].
Цель — изучение микро- и ультраструктурных особенностей адаптивных реакций тканевого микрорайона печени у крыс в остром периоде после ОУГ.
Материалы и методы. Исследования проведены на 169 крысах-самцах линии Wistar (возраст 2,5 мес.). Особи содержались в условиях вивария при температуре воздуха 20-22°С и стандартном рационе и свободном доступе к воде, что является важным для избежания неучтенных ненормированных стресси-рующих воздействий. Для изучения адаптивных реакций, возникающих в остром периоде после действия ОУГ, экспериментальные животные были разделены на 4 группы в зависимости от сроков с момента воздействия: 1 группа - контроль (п = 41); 2 группа - 5 часов после перегревания (п = 50); 3 группа - 1-е сутки (п = 37); 4 группа - 3-и сутки с момента перегревания (п = 41).
Экспериментальная модель. Разогревание животных велось в соответствии со «Способом экспериментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных животных» [8], который предполагает разогревание объекта изучения в резервуаре стандартной термобани ТБ-110 при погружении в воду до уровня шеи. Температура теплоносителя составила 45° С. Эту температуру можно считать оптимальной при моделировании ОУГ, т.к.более высокие значения ведут к гибели животных. Уровень гипертермии, когда прекращали разогревание, определялся ректальной температурой 43,5°С (стадия теплового удара).
Термометрия осуществлялась с помощью дифференциальной термопары (медь - константан), подключенной к высокочувствительному микровольтметру-микроамперметру постоянного тока типа Ф 116/2, что позволяло с высокой точностью измерять даже небольшие перепады температур. Медные концы дифференциальной термопары подключали к прибору, при этом если
спаи термопар находились при одинаковой температуре, то Тэдс равнялась 0°С. Проверка и градуировка дифференциальной термопары велись путем погружения одного из ее спаев в тающий лед (сосуд Дьюара), где температура составляла 0°С, а другого - в горячую воду определенной температуры, значение которой фиксировали точным ртутным термометром. При этом измеряли Тэдс на выходе дифференциальной термопары. При измерении ректальной температуры нагреваемых животных один из спаев дифференциальной термопары вводили в прямую кишку на глубину 3-4 см, а второй опускали в сосуд Дьюара. Температурная разница между 0°С и ректальной температурой выражалась в мкВ на шкале микровольтметра-микроамперметра. Непрерывное в ходе всего опыта и точное (до десятых долей градуса) измерение ректальной температуры позволяло извлекать крыс из термобани в критический момент - на высоте развития теплового удара, что обеспечило их 100% выживаемость.
Методика забора морфологических препаратов. Материал забирали под эфирным наркозом после декапитации. Кусочки печени фиксировали в нейтральном формалине. Сразу после пропитки ткани печени парафином (при 58°С) на санном микротоме делали парафиновые срезы толщиной 7 мкм и проводили их депарафинизацию в серии спиртов. Далее срезы промывали в течение 3 мин. в дистиллированной воде и помещали на 5 мин. в стандартный фосфатный буфер (ФБ) с рН 7,4 для последующей обработки. Для каждого из этапов эксперимента использовали 57 особей, от каждого из которых получали 5-7 блоков.
Методика электронной микроскопии. Для ультраструктурного исследования кусочки печени крыс (по 5 шт. от каждой особи) величиной <1 мм3 фиксировали методом двойной фиксации: вначале в 4% параформальдегидном изотоническом 0,1М фиксаторе на фосфатном буфере Миллонига (рН 7,4) при комнатной температуре в течение 2 ч, затем после промывки в течение 15 мин. в охлажденном буфере Миллонига образцы в течение 1 ч дополнительно фиксировались на холоде в 1% осмиевом фиксаторе на 0,2 М какодилатном буфере (рН 7,4) с добавлением в него 1,5% ферроцианида калия. После дегидратации образцов в серии спиртов возрастающей концентрации они помещались в эпон-812. Ультратонкие срезы толщиной 35-45 нм получали с эпоновых блоков на ультратоме ЬКБ-8800, контрастировали насыщенным водным раствором уранилацетата при 400С в течение 40 мин, а затем - цитратом свинца при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 20 мин. После напыления углерода в вакууме контрастированные срезы изучались в электронном микроскопе ШМ-7А. Изучению ультратонких срезов предшествовало исследование в световом микроскопе полутонких срезов (1 микрон), окрашенных толуидиновым синим для прицельной ультратомии выбираемых зон печени. Определяли объемные, поверхностные и численные плотности органоидов, включений, везикулярных структур.
Результаты. Через 5 часов с момента окончания ОУГ в печени крыс микроскопически выявлены гемолимфоциркуляторные нарушения в виде чередования участков расширенных внутри-дольковых кровеносных синусоидных капилляров печени с участками их спазмирования.
Рис. 1. Световая микроскопия печени через 5 часов после ОУГ, ув. х10
* 630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52ГОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Росздрава
А. Д. Белкин, Г. М. Вакулин, А. В. Ефремов и др.
В области триад наблюдалось значительное расширение междольковых сосудов (артерий и вен) и лимфатических пространств Малла. Центральные вены печени на этом сроке после ОУГ дилатированы, поддольковые вены значительно расширены и вокруг них определяются расширенные лимфатические коллекторы, что говорит о застойных явлениях и нарушении оттока крови из органа. В области триад междольковые вены переполнены кровью, в некоторых местах стенки вен разорваны, в результате чего происходит их объединение с лимфатическими пространствами Малла (рис. 1). Есть участки лимфоидной инфильтрации вокруг сосудов в области триад и внутри печеночных долек (рис. 2). В ядрах гепатоцитов - выраженные изменения (кариопикноз, кариолизис, кариорексис), из-за чего многие клетки лишены ядер. Цитоплазма большинства гепатоцитов вакуоли-зирована, особенно в перисунусоидальной области, где имеются зоны обводнения. Отмечено просветление цитоплазмы в примем-бранной области, в обменном и билиарном полюсах гепатоцитов. В кровеносных синусоидных капиллярах определяются сладжи-рованные эритроциты, пенистые макрофаги и лимфоциты, апоп-тотически измененные гепатоциты, диплокариоциты.
Рис. 2. Световая микроскопия печени через 5 часов после ОУГ, ув.х 10
На 1-е сутки с момента ОУГ в печени крыс микроскопически выявлено сохранение гемодинамических нарушений с преобладанием баллонообразно расширенных капилляров во всех печеночных дольках (рис. 3). Реже, по сравнению с предыдущим сроком, встречаются гепатоциты с деструктивно измененными ядрами и цитоплазмой, увеличивается число диплокариоцитов. В области триад лимфатические пространства Малла расширены и заполнены лимфоидными элементами.
Рис. 3. Световая микроскопия печени на 1 сутки после ОУГ, ув. х4
Ультраструктурно выявлено довольно частое сужение си-нусоидов в печени, нередко в них имеется сладжирование эритроцитов и появление в просветах кровеносных терминалей хлопьевидного диффузного материала, что обусловлено, по-видимому, синтезом в печени белков теплового шока [9] и отложением фибрина в пространствах Диссе в условиях гипоксии.
Рис. 4. Электронная микроскопия печени на 1 сутки после ОУГ, увеличение х10000
Обращает на себя внимание нечеткость плазмолемм гепа-тоцитов, клеток стромы - эндотелиоцитов и клеток Купфера (рис. 4), что, вероятно, связано с изменением свойств мембран, которое, в свою очередь, приводит к повышению их повреждаемости, вызывающей деструктивные изменения как клеток эндотелиальной выстилки синусоидов в виде расширения фенестр эндоте-лиоцитов в зонах решетчатых пластинок с утратой в них диафрагм, так и гепатоцитов, цитоплазматические органоиды которых нередко обнаруживаются в просветах синусоидов в этом сроке после ОУГ. Появление детрита разрушенных клеток в синусоидах вызывает активацию печеночных макрофагов -клеток Купфера, что позволяет выявить в них крупные гетерофа-госомы, переваривающие клеточные остатки. Обращает на себя внимание изменение структуры хроматина и ядерного матрикса с усилением конденсации гетерохроматина по периферии ядер эндотелиоцитов, происходящих в апоптозно измененных клетках.
Весьма характерными субклеточными изменениями гепа-тоцитов на этом этапе воздействия ОУГ являются нарушения ультраструктуры митохондрий, исчезновение из цитоплазмы клеток энергетического субстрата - гранул гликогена и значительная липидная инфильтрация цитоплазмы - признак нарушения выведения из клеток триглицеридов. В зонах печеночных долек было выражено набухание матрикса митохондрий с появлением в нем электронопрозрачных участков и нарушением структуры крист, что является выражением торможения митохондриального транспорта электронов. Торможение транспорта электронов в митохондриях гепатоцитов сопровождается компенсаторным гликолизом, при котором мобилизованный расщеплением гликоген используется для поддержания нормальной концентрации АТФ в клетках. В других зонах печеночных долек, где дефицит кислорода был менее выражен, отмечалась конденсация матрикса митохондрий, в результате чего почти не определяются в нем кристы, что характеризует конденсированную энергетическую, митохондриальную конфигурацию по Чансу, когда не идет отвод электронов от митохондрий для метаболических целей клеток [10]. Часть гепатоцитов имела митохондрии с набухшим матриксом и с конденсированным, что может быть следствием перехода митохондрий от стадии набухания к стадии уплотнения матрикса. Для такого рода клеток было типичным появление в них большого количества первичных лизосом, которые часто тесно контактируют с липидными каплями, что обычно характеризует начальную фазу липолиза при обратном развитии липидной инфильтрации клеток. Накопление липидных капель в цитоплазме гепатоцитов на 1-е сутки после ОУГ сопровождается и их появлением в ядрах клеток, что нередко связывают со снижением синтеза белков и ДНК.
Изучение ультраструктуры ядер на 1-е сутки после ОУГ выявило изменение круглой формы ядер на неправильную, трансформацию конденсированного гетерохроматина в глыбча-тые, раздробленные осмиофильные сгустки. Отмечается появление мелкодисперсных, слабоосмиофильных хлопьевидных зон в эухроматине, видимо представляющих собой стрессорные белки. На 1-е сутки после действия ОУГ наблюдается 2 типа изменения ядрышек в ядрах гепатоцитов. В части ядер выявлена сегрегация и фрагментация ядрышек на фибриллярный и гранулярный компоненты, что свидетельствует о сохранении процессов синтеза ядрышковой РНК. Второй тип изменений ядрышек заключается в исчезновении из них гранулярного ультраструктурного компонента и конденсации утратившего осмиофильность фибриллярного компонента, превращающегося в ядрышковый фибриллярный слабоосмиофильный остаток с зонами просветлений и осмо-фильных вкраплений неясной природы. Отмеченная в данном эксперименте вариабельность ультраструктуры ядрышек в различных гепатоцитах в 1-е сутки после ОУГ может быть связана с тем, что органоиды клетки являются самыми лабильными органоидами, которые способны к эффективной репарации нарушенной ультраструктуры после прекращения действия повреждающего агента, а в ряде случаев и во время его действия [11].
Исходя их вышеописанных субклеточных изменений гепа-тоцитов следует, что их ультраструктурные особенности отражают преобладание в печени катаболических процессов на 1-е сутки после ОУГ. Снижение контраста клеточных мембран чаще всего объясняется их порозностью и рыхлостью, в силу происходящих в них изменений, ведущих к цитолизу клеток.
А. Д. Белкин, Г. М. Вакулин, А. В. Ефремов и др.
Рис. 5. Электронная микроскопия печени на 1 сутки после ОУГ, ув.х 10000
На 1-е сутки после ОУГ при ультраструктурном анализе наблюдались микроциркуляторные нарушения, демонстрирующие явления стаза крови в синусоидах, за счет сладжирования эритроцитов (рис.5), перекрывающего капиллярный кровоток, либо замедления кровотока большим количеством тонкофибриллярного белкового материала в просветах синусоидов, видимо, осаждающегося на плазмалеммах клеток, из-за чего практически не определяются границы клеток, т.к.их мембраны нечетко кон-турируются. Наблюдаемая размытость плазмолемм клеток у мест стаза или замедления кровотока (рис. 5), очевидно, являлась следствием развивающейся в таких зонах печеночных долек гипоксии, в результате чего страдала функция митохондрий, которые сильно набухали. В них дезинтегративно нарушается структура крист, а в матриксе этих органоидов появляются ауто-литические, осмиофильные флокуляты [12], как следствие проте-олиза белков митохондрий, обычно проявляющегося в них в условиях кислородной недостаточности или ишемии. Не исключено, что в условиях воздействия ОУГ имела место и дискоорди-нация цитозольных белков теплового шока 60 и 70 кДа, способствующих импорту белков для матрикса митохондрий [13]. В таких гипоксических зонах печеночных долек, в ядрах гепатоци-тов и эндотелиоцитов обнаруживаются компактизация ядрышек, накопление в ядрах плотных гранулярных тел и перихроматино-вых гранул - признаки подавления синтеза рРНК и блокировки транспорта РНК из ядер, выявляемые при тепловом шоке, что сопровождается значительным увеличением в клетках одного общего для всех воздействий белка молекулярной массой 68 кДа, что видимо, имело приспособительный характер.
На 3-и сутки после ОУГ микроскопически выявлены сохраняющиеся гемодинамические нарушения: центральные вены расширены, эндотелиальная выстилка в кровеносных капиллярах и в центральных венах во многих местах нарушена. Сосуды в области триад в ряде зон резко расширены (рис. 6).
Рис. 6. Световая микроскопия печени на 3 сутки после ОУГ, ув. х4
На 3-е сутки после ОУГ при ультраструктурном анализе в части синусоидов печени выявлялось сравнительно небольшое количество тонкофиллярного белкового материала (рис. 7), среди которого реже, чем на 1-е сутки опыта, определялись остатки разрушенных клеток в виде детрита, представляющего собой цитоплазматические органоиды, гранулы гликогена, клеточные мембраны. Это позволяет предполагать снижение протео- и цитолиза клеток, обусловленных уменьшением деструктивных метаболических преобразований в мембранах. На последнее указывала выраженная четкость плазмалеммальных и внутриклеточных мембран клеток вне гипоксических зон печени. Исходя из концепции тепловой гибели клеток, началом этого процесса служит накопление вторичных повреждений, индуцированных первичным поражением анизотропного гидрофобного ядра клеточной мембраны, приводящего к нарушению четвертичной структуры ферментов, снижающему их каталитическую способ-
ность, а также в результате нарушения липидного компонента мембраны, ведущего к падению градиента концентрации ионов внутри и вне клетки, что индуцирует каскад нарастающих повреждений функций клеток. Утрата ионного клеточного гомеостаза в условиях ОУГ и ограничения клеток кислородом чаще всего приводит к их необратимым повреждениям, но механизм выживания части из них заключается в способности к переводу клеточного метаболизма в новое гипометаболическое устойчивое состояние путем равновесия АТФ-зависимых и АТФ-обеспечивающих путей [14]. Более выраженная прозрачность просветов капиллярного русла может быть свидетельством меньшей наработки в печени тепловых стрессорных белков. На 3-и сутки после ОУГ имеется снижение степени липидной инфильтрации гепатоцитов, приобретающей характер мелкокапельной и, в основном, по периферии клеток в зонах гипоксических печеночных долек и за их пределами. Очевидно, выявляемая в настоящем эксперименте уже на 1-е сутки после ОУГ в части гепатоцитов липолитическая активность лизосомального аппарата вызывает существенную «разгрузку» клеток от избытка триглицеридов к 3-м суткам, т.к. во многих гепатоцитах видны мелкие вакуоли резорбции липидных капель с их остатками (рис. 8).
Рис. 7. Электронная микроскопия печени на 3 сутки после ОУГ, ув.х 10000
Рис. 8. Электронная микроскопия печени на 3 сутки после ОУГ, ув.х 10000
Наблюдаемая на 1-е сутки после ОУГ утрата гепатоцитами гликогена в результате гликолиза, создающего гипергликемию, сменяется интенсивным липолизом на 3-и сутки после ОУГ, что, очевидно, приводит к выраженной стимуляции глюконеогенеза, о чем говорит появление в части гепатоцитов большого количества гранул гликогена, буквально перенасыщающих цитоплазму клеток в виде полей розеток, или занимающих все свободные пространства между органоидами (рис.8). Исходя из того, что белок теплового шока 70 кДа может взаимодействовать с гидрофобными участками белков в ядре и цитоплазме, с растущими цепями белков при трансляции и препятствовать их агрегации, можно предположить, что он может оказывать влияние на регуляторные геномные процессы путем взаимодействия с ядерными факторами. На вероятность такой экспрессии генов может указывать характер изменений ультраструктуры ядер и ядрышек гепа-тоцитов, субклеточные параметры которых были близки к физиологической норме. В таких гепатоцитах обнаруживается значительное уменьшение конденсированного хроматина по периферии ядер-носителей временно заблокированной информации, в котором, по мере конденсации, происходит активация ранее не активированных генов [15]. Опыты по кратковременному тепловому воздействию на крыс показали, что в клетках активируются ранее неактивные специфические гены, отчего образующиеся мРНК транслируются в белки теплового шока,
Статья
число типов которых варьируется, но среди них обязательно есть белки с молекулярной массой 84-70 кДа [16], нужные для поддержания гомеостаза. Субклеточные изменения ядрышек таких клеток сводились к гипертрофии размеров ядрышек, что всегда связано с усилением синтеза РНК и белка. Отмеченные субклеточные изменения части гепатоцитов на 3-и сутки после ОУГ свидетельствовали о начале адаптивных изменений в печени, направленных на компенсацию функций поврежденных или необратимо измененных гепатоцитов.
Выявленные различия субклеточных изменений в гепато-цитах на 3-и сутки после ОУГ могут быть связаны со структурнофункциональной гетерогенностью гепатоцитов в печеночных дольках, определяемых различиями в кровоснабжении, т.е. степенью оксигенации и трофики перипортальных и перивенозных клеток, их ответами на повреждения и регенераторные стимулы.
На 3 сутки после ОУГ в печени обнаружены эндотелиоци-ты с начальными признаками развития апоптозных изменений в одних клетках, заключающихся в конденсации хроматина ядер и утрате гранулярного компонента ядрышек и прогрессии апоптоз-ных изменений в других - со значительно более выраженной конденсацией хроматина ядер, уплотнением цитоплазмы клеток без изменений ультраструктуры органоидов и «отшнуровкой» от клеток апоптозных телец в просвет синусоидов, что являются типичными признаками апоптоза, который может быть вызван различными факторами, включая ОУГ.
Были обнаружены на 3-и сутки после ОУГ в лимфатических терминалиях печени - пространствах Диссе - скопления плазматических клеток с выраженным развитием ГЭР, каналы которого были переполнены иммуноглобулинами, что свидетельствовало об интенсивной наработке антител. Имелось «заякори-вание» плазмацитов за пучки коллагеновых фибрилл, образующих стромальных каркас печени и тесную их адгезию к плазма-леммам отростков эндотелиоцитов, выполняющих синусоидальную выстилку. Интересным было то обстоятельство, что часть из таких плазмоцитов обнаруживали конденсацию хроматина ядер, характерную для апоптоза. Причиной накопления плазмоцитов в пространствах Диссе на 3 сутки после ОУГ также могут быть продолжающиеся деструктивные изменения клеток в печени и связанные с этим возрастания уровня хемокинов в органе.
Выводы. Патоморфологическое и ультрамикроскопическое исследование тканевого микрорайона печени в остром периоде после ОУГ позволило выявить разнообразие адаптивных реакций в ответ на действие высокой температуры: в ответ на резкое увеличение потребностей в энергетических субстратах на фоне истощения запасов гликогена в печени при ОУГ можно рассматривать активацию глюконеогенеза; гепатоциты могут длительно сохранять хотя бы минимум своих функций; нарушение детокси-кационной функции печени, адсорбция токсичных продуктов из кровотока в лимфатическое русло.
В то же время можно говорить, что цена адаптации при ОУГ является достаточно высокой, поскольку белок используется не прямому (пластическому) назначению, а расходуется на обеспечение организма энергетическим субстратом, который оказывается при этом слишком уж «дорогим». Выражение «печка топится ассигнациями» максимально характеризует критическое положение дел в остром постгипертермическом периоде, когда организм живет только за счет внутренних резервов и расходует на покрытие энергетических потребностей собственные белки. Развитие при ОУГ метаболической перестройки в организме за счет активации протеолиза и выраженной деструкции мембран клеток, что подтверждается результатами исследования, может быть расценено как положительный момент при использовании высокой температуры в качестве лечебного метода, т. к. в остром периоде после ОУГ клеточные структуры переходят на новый уровень своей организации.
Литература
1. Swan H. Thermoregulation and bioenergetic.- Amsterdam: Elsevier, 1974.- 342 p.
2. Udagawa Y. et al. // Anticancer Res.- 1999.- № 19 (5B).-P.4125-4130.
3. Ступко А., Служинская А.// Здравоохр. Белоруссии.-1990.- № 9.- С. 59-61.
4. Herman P.P., Yatvin M.B. // Int. J. Hyperthermia.- 1994.-Vol. 10, № 5.-P. 627-641.
5. Баллюзек Ф.В. и др. Управляемая гипертермия.- СПб.: Невский Диалект, 2001.- 123 с.
6. Александров В.Я. Клетки, макромолекулы и температура.- Л.: Наука, 1975.- 330 с.
7. Козлов Н.Б. Гипертермия: биохимические основы патогенеза, профилактики, лечения.- Воронеж: Изд-во Воронежского унив-та, 1990.- 103 с.
8. Патент РФ № 2165105. Опубл. в Бюл. № 102001/Ефремов А.В. и др./ Способ экспериментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных животных.
9. Carper S. W. et al. // Cancer. Res.- 1987.- Vol. 47(20).-P.5249-5255.
10. Chanse E. // J. Biol. Chem.- 1965.-Vol. 240, № 6.- P. 2729.
11. Ломагин А. Г. //Успехи соврем. биол.- 1987.- Т. 103, № 1.- С. 81-95.
12. Myagkaya G. L. et al. // Virchows Arch. Cell. Pathol.-1985.- Vol. 49, № 1.- P. 61-72.
13. Cheng M. Y. et al. // №ature.- 1989.- Vol. 337, № 6208.-P. 620-622.
14. Boutilier R. G. // J. Exp. Biol.- 2001.- Vol. 204, № 8.-P. 3171-3181.
15. Збарский И. Б. Организация клеточного ядра.- М.: Медицина, 1988.- 367 с.
16. Burdon R. H. // Cambridge, 1987.- P. 113-133.
MICRO- AND ULTRASTUCTURE FEATURES OF LIVER TISSUE ADAPTIVE REACTIONS IN RATS IN ACUTE PERIOD AFTER GENERAL CONTROLLED HYPERTHERMIA
A.D. BELKIN, G.M. VAKULIN, A.V. EFREMOV, S.V. MICHURINA, E.A. PAKHOMOV, Y.V. PAHOMOVA
Summary
We have studied pathomorphologic and ultrastructure reactions of liver tissue blood in rats in 5 hours, on the first and third day after hyperthermia in water medium at the temperature of 45o C till rectal temperature rose to 43.5° C. Signes of gluconeogenesis activation on the back of hepatocyte atrophy were revealed that keep their functional activity during an acute period with hypoxia after controlled hyperthermia.
Key words: general controlled hyperthermy
УДК 615.4:54
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИОКИСЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ АНАЛОГОВ ЭТИЛМЕТИЛГИДРОКСИПИРИДИНА СУКЦИНАТА И ПРОИЗВОДНЫХ ГИДРОКСИПИРИДОБЕНЗИМИДАЗОЛА
Ю.В. КУЗНЕЦОВ, И.А. МАТЮШИН, Л.Д. СМИРНОВ, В.В. ЯСНЕЦОВ*
Введение. Наблюдается интенсивное развитие химии и фармакологии производных 3-гидроксипиридина (3-ГП) и 7-гидроксипиридобензимидазола (7-ГПБИ), являющихся важнейшим классом азотистых гетероциклов [3-7]. Интерес к изучению химических и фармакологических свойств производных 3-ГП обусловлен, в частности, тем, что они являются структурными аналогами соединений группы пиридоксина (витамина В6), имеющих значение в жизнедеятельности организма, в том числе выполняющих роль физиологических антиоксидантов [7-8].
Одним из эффективных лекарственных средств этой группы, является этилметилгидроксипиридина сукцинат (ЭС; мекси-дол, мексикор, мексидант), имеющий антиоксидантный и мембранопротекторный механизм действия и обладающий уникальным спектром фармакологических свойств [3-7]. ЭС оказывает умеренное антиоксидантное действие. Это послужило основанием для дальнейшего поиска веществ с более выраженными анти-оксидантными свойствами среди новых аналогов ЭС и ГПБИ.
Цель работы - антиокислительной активности (АОА) новых аналогов ЭС и ГПБИ.
Методика исследования. АОА новых аналогов ЭС и ГПБИ исследовали методом хемилюминесценции (ХЛ) в модельной системе многослойных липосом из липопротеинов желтка куриных яиц [2]. Для изучения АОА фармаковеществ наиболее удобными стадиями ХЛ являются стадии медленной вспышки и латентный период (ЛП). Расчет АОА веществ вели по формуле [1, 9]:
* Лаборатория низкомолекулярных биорегуляторов Института биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН
