CC BY
76
Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298). Биология. Вып. 2. С. 46-47.
О. С. Абрамовских, К. А. Алехина, А. Ю. Савочкина, К. Е. Пряхина
МИКРОБНЫЙ ПЕЙЗАЖ РЕПРОДУКТИВНОГО ТРАКТА ЖЕНЩИН С ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Проведено изучение микрофлоры половых путей женщин с заболеваниями шейки матки, ассоциированными с папилломавирусной инфекцией при помощи микробиологического и молекулярно-биологического методов. Наиболее часто в ассоциации с вирусом папиломы человека (ВПЧ) встречаются Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Candida spp., CMV, Chlamydia trachomatis. Частота ко-инфицирования ВПЧ с другими микроорганизмами снижается по мере увеличения степени тяжести цервикальных поражений.
Ключевые слова: генитальные инфекции, вирус папилломы человека, папилломавирусная инфекция, заболевания шейки матки.
Введение. Слизистая оболочка шейки матки, как пограничный барьер между верхним отделом генитального тракта и внешней средой, постоянно подвергается воздействию повреждающих факторов [2]. Наиболее агрессивным антигенным воздействием на цервикальный слизистый покров обладают возбудители инфекций, передаваемых половым путём (ИППП). На сегодняшний день одной из наиболее распространённых ИППП вирусной этиологии является папилломавирусная инфекция (ПВИ), которая играет ключевую роль в развитии интраэпителиальных дисплазий и выступает в качестве пускового механизма неопластической трансформации эпителия шейки матки
[1; 3; 4].
Поскольку генитальная ВПЧ-инфекция передаётся половым путём, она, как и другие ИППП, часто бывает многоочаговой и ассоциированной с другими генитальными инфекциями [1]. В настоящее время считается, что инфекции, сопутствующие ПВИ, оказывают влияние именно на ранних стадиях развития неопластического процесса. Однако установленные ассоциации ВПЧ с патогенными и/или условно-патогенными микроорганизмами значительно разнятся по литературным данным, что и определило цель исследования.
Цель. Изучить состав микрофлоры половых путей женщин с папилломавирусной инфекцией.
Материалы и методы. В исследование включены 362 пациентки амбулаторно-поликлинического приёма лечебно-профилактических учреждений гинекологического профиля г. Челябинска, у которых на основании комплексного клиниколабораторного обследования врачом акушером-гинекологом была диагностирована следующая патология шейки матки: у 128 женщин — хронический цервицит, у 108 женщин — цервикальная
интраэпителиальная неоплазия (ЦИН) I степени и у 126 женщин — ЦИН II—III степени.
Материалом для молекулярно-биологического исследования послужили соскобы эпителиальных клеток цервикального канала, взятые до начала курса лечения одноразовыми цитощёточками. Для обработки взятого клинического материала и выделения ДНК использовался набор реагентов «ДНК-сорб-АМ». Выявление папилломавирусной, хламидийной, герпесвирусной (ВПГ I и II), цитомегаловирусной (ЦМВ) и трихомонад-ной инфекций проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени на приборах Rotor-Gene 3000 и 6000 (Corbett Research, Австралия) с использованием соответствующих тест-систем производства ФГУН «ЦНИИЭ» Роспотребнадзора (Москва).
Для определения количественного и качественного состава микрофлоры половых путей ВПЧ-позитивным пациенткам осуществлялось микробиологическое исследование, которое включало бактериологический посев на микрофлору и чувствительность к антибиотикам с количественным определением условно-патогенной (энтеробактерий, стафилококков, стрептококков, грибов) и нормальной флоры (бифидо- и лактобактерий), Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum (значимая концентрация более 104 КОЕ/ мл). Культуральной диагностике всегда предшествовало бактериоскопическое исследование материала из заднего свода влагалища и цервикального канала.
Результаты и обсуждение. Идентификация ВПЧ высокого риска (ВПЧ ВР) методом ПЦР показала, что наличие вируса в цервикальном канале регистрировалось у 53 % пациенток с хроническим цервицитом. При ЦИН частота встречаемости ВПЧ ВР была различной в зависимо-
сти от степени тяжести: у 56,5 % больных с ЦИН I и у 84,1 % пациенток с ЦИН II-III определялось присутствие ДНК ВПЧ ВР в цервикальном
канале.
При помощи микробиологического и молекулярно-биологического (ПЦР) методов установлено, что только у пациенток с хроническим церви-цитом, ассоциированным с ПВИ, определялись Streptococcus agalactiae (0,63 %), Corynebacterium spp. (3,8 %),Mobiluncus spp. (0,63 %) и Trichomonas vaginalis (1,3 %). Наиболее часто у больных с хроническим цервицитом выявлялись Ureaplasma urealyticum (25,9 %), Chlamydia trachomatis (18,9 %) и CMV (14,5 %). Также у пациенток данной группы выделялись грамположительные палочки (12,6 %), Mycoplasma hominis (10,8 %), Enterococcus fecalis (8,3 %), Candida spp. (8,2 %), в одинаковом проценте случаев Gardnerella vaginalis и HSVI, II (4,4 %).
У пациенток с ЦИН I, ассоциированной с ПВИ, наиболее часто выделяемыми возбудителями были Ureaplasma urealyticum (24,6 %), грампо-ложительные палочки (14,7 %) и CMV (13,1 %). В равном проценте случаев у пациенток данной группы определялись Candida spp. и Mycoplasma hominis (11,5 %), Enterococcus fecalis и Gardnerella vaginalis (8,2 %), что несколько чаще, чем у пациенток с хроническим цервицитом. Реже у пациенток с ЦИН I относительно женщин с хроническим воспалительным процессом шейки матки обнаруживались Chlamydia trachomatis (9,8 %) и HSV I, II (3,3 %).
В группе больных с ЦИН II-III, ассоциированной с ПВИ, в большем проценте случаев определялись следующие микроорганизмы: Ureaplasma urealyticum (9,4 %), грамположительные палочки и Candida spp. (7,5 %),Mycoplasma hominis и CMV (6,6 %). Также у пациенток с ЦИН II, но с меньшей частотой обнаруживались Enterococcus fecalis (5,8 %), Gardnerella vaginalis (5,7 %), и Chlamydia trachomatis (3,8 %).
Выводы и заключение. Результаты проведённого молекулярно-биологического исследования показали, что максимальная встречаемость ВПЧ ВР среди женщин с патологией шейки матки наблюдалась у больных ЦИН II-III, что не противоречит результатам отечественных и зарубежных исследований. Обращает внимание большая час-
тота (53 %) выявления ВПЧ-инфекции у пациенток с хроническим цервицитом, так как постоянная нагрузка вирусами в условиях хронического воспаления инициирует генетическую нестабильность эпителиоцитов и обеспечивает вероятность появления трансформированных клеток.
При изучении количественного и качественного состава микрофлоры половых путей ВПЧ-позитивных пациенток с хроническим цервици-том, ЦИН I, ЦИН II-III при помощи микробиологического и ПЦР методов установлено, что наиболее часто в ассоциации с ВПЧ ВР были выявлены Ureaplasma urealyticum (>104 КОЕ/ мл), Mycoplasma hominis (> 104 КОЕ/мл), Candida spp., CMV, Chlamydia trachomatis. Только для пациенток с хроническим цервицитом и наличием ВПЧ ВР характерно выделение Streptococcus agalactiae, Corynebacterium spp., Mobiluncus spp. и Trichomonas vaginalis. С увеличением степени тяжести цервикальных неоплазий частота коин-фицирования ВПЧ ВР с другими определяемыми микроорганизмами снижалась.
Принимая во внимание частую ассоциацию ВПЧ с другими микроорганизмами, которые могут играть определённую роль в малигнизации, а также требуют более широкого спектра терапевтических и противоэпидемических мероприятий, целесообразно у ВПЧ-позитивных женщин с патологией шейки матки проводить качественное и количественное изучение микрофлоры половых путей методом ПЦР в режиме реального времени.
Список литературы
1. Бебнева, Т. Н. Некоторые клинические аспекты папилломавирусной инфекции // Гинекология. 2007. Т. 9, № 1. С. 20-24.
2. Грибова, С. Н. Современные представления об этиологии, патогенезе, методах диагностики и лечения фоновых и предраковых заболеваниях шейки матки / С. Н. Грибова, Г. И. Хрипунова // Сарат. науч.-мед. журн. 2008. № 2 (20). С. 18-23.
3. Stanley, M. A. HPV: from infection to cancer / M. A. Stanley, M. R. Pett, N. Coleman // Biochem. Soc. Trans. 2007. Vol. 35, pt. 6. Р. 1456-60.
4. Hausen, H. zur. Papillomaviruses in the causation of human cancers — a brief historical account // Virology. 2009. Vol. 384, № 2. P. 260-265.
