Микробный пейзаж больных с ограниченной стерильной некротической деструкцией, перенесших лапаротомию в динамике комплексного лечения Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК: 616.37 - 002.4 - 022 - 084

© В.П. Саганов, Л.Д. Раднаева, В.Е. Хитрихеев, Б.А. Дониров, В.П. Будашеев

МИКРОБНЫЙ ПЕЙЗАЖ БОЛЬНЫХ С ОГРАНИЧЕННОЙ СТЕРИЛЬНОЙ НЕКРОТИЧЕСКОЙ ДЕСТРУКЦИЕЙ, ПЕРЕНЕСШИХ ЛАПАРОТОМИЮ В ДИНАМИКЕ КОМПЛЕКСНОГО ЛЕЧЕНИЯ

Предложен новый метод диагностики микробного пейзажа больных с острым панкреатитом. Ключевые слова: острый панкреатит, газовая хроматография масс-спектрометрия.

V.P. Saganov, L.D. Radnaeva, V.E. Khitrikheev, B.A. Donirov, V.P. Budasheev

MICROBIAL LANDSCAPE IN PATIENTS WITH LIMITED STERILE NECROTIC DESTRUCTION UNDERGOING LAPAROTOMY IN THE DYNAMICS OF COMPLEX TREATMENT

A new method of diagnosis of microbial landscape has been proposed in patients with acute pancreatitis. Keywords: acute pancreatitis, gas chromatography mass-spectrometry.

Введение

В неотложной панкреатологии определяющим фактором в тактике лечения больных с некротической деструкцией является наличие или отсутствие инфекции в поджелудочной железе и забрюшинном пространстве, определение которой на сегодняшний день является весьма актуальной проблемой [1-3, 7, 8]. Не редко в пользу хирургического лечения склоняет лож-ноположительный результат контаминации некроза поджелудочной железы и забрюшинной клетчатки [4-6]. Это во многом определяет поиск современных маркеров панкреатогенной инфекции.

Материал и методы

Метиловые эфиры жирных кислот и триме-тилсилильные эфиры исследовались методом ГХ-МС на газовом хроматографе Agilent Packard HP 6890 с квадрупольным масс-спектрометром HP MSD 5973N в качестве детектора. Для хро-матографирования использовали колонку - ко-

лонку HP-5MS с внутренним диаметром 0,25 мкм. Процентный состав смеси вычислялся по площади газо-хроматографических пиков. Качественный анализ основан на сравнении времен удерживания и полных масс-спектров соответствующих чистых соединений с использованием библиотеки данных NIST08.L и стандартных смесей (Bacterial Acid Methyl Esters (CP Mix, Supelco, Bellefonte, PA, USA), а также по количеству введенного стандарта (дейтерометиловый эфир тридекановой кислоты).

Определен микробный пейзаж 14 больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом и в сравнительном контексте 18 условно здоровых людей.

Результаты

Динамика изменений концентрации микроорганизмов у оперированных больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом представлена в таблице 1.

№ Микроорганизмы, кл/гх10*5 Здоровые При поступлении Середина лечения При выписке Норма

1 Streptococcus (оральные) 114,8±26.1 [50-275] 3 129,1±76,9 [0-305] 56,4±49,5 [0-155] 77,0±49,5 [14-140] 249

2 Eubacterium lentum (группа А) 56,3±37,7 [95-74] 2'3'4 424,5±44,4 [0-982] 409,7±93,0 [277-589] 291,5±71,5 [220-363] 68

3 Bacillus cereus 27,5±6,9 [0-64]4 11,3±7,0 [0-45] 12,4±12,3 [0-37] 3,4±3,3 [0-10] 23

4 Peptostreptococcus anaerobius 0 2,8±2,7 [0-11] 0 0 0

5 Clostridium hystolyticum 39,7±12,5 [2-116] 22,6±22,5 [0-90] 0 0 95

6 Nocardia, 14:1d11 252,6±56,2 [102-326] 258,0±52,8 [164-403] 259,0±42,8 [164-303] 262,0±38,0 [224-300] 262

7 Peptostrepto-coccus 1,6±1,5 520,8±443,9 258,0±52,8 0 0

Таблица 1

Микробный пейзаж больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом (оперированные) в различные периоды лечения (п=14) М±о

anaerobius [0-14]2 [0-1850] [0-1403]

8 MoraxeUa/Acinetobacter 3,0±1,6 18,3±7,2 12,7±6,4 4,1±3,9 0

[2-10] 2,3 [0-35] [0-21] [0-8]

9 Pseudomonas aeruginosa 2,4±1,9 58,3±10,4 43,4±22,0 19,5±4,5 0

[2-20] 2'3'4 [29-74] [0-72] [15-24]

10 Clostridium propionicum 84,4±32,9 [0-220] 56,4±56,3 [0-169] 0 0 288

11 Актиномицеты 36,6±4,9 31,3±2,5 23,0±4,0 21,0±3,0 77

[15-59] [26-36] [15-28] [7-25]

12 Pseudonocardia 24,2±5,4 34,8±23,4 16,0±6,4 29,0±8,4 70

[6-60] [6-104] [6-28] [16-99]

13 Streptomyces 49,7±13,7 72,8±42,2 39,0±17,3 29,0±6,4 62

[6-133] 2 [9-193] [9-69] [6-98]

14 Clostridium ramosum 2234,3±230,4 2883,8±559,2 3967,3±929,0 3811,5±1188, 2000

[1051-3241] 3,4 [1908-4397] 3,4 [2187-5318] 5 [2623-5311]

15 Fusobacteri-um/Haemo- 3,7±2,1 25,5±8,9 20,4±10,2 28,5±12,2 0

phylus [0-18] 2,3,4 [0-41] [0-32] [6-63]

16 Alcaligenes 31,7±4,4 118,0±20,2 119,3±19,0 109,3±15,0 48

[6-46] 2Д4 [62-157] [67-157] [67-157]

17 Rhodococcus 283,7±45,4 490,0±110 410,3±90,1 240,3±21,7 423

[63-512] 2,3 [212-751] 4 [234-531] [200-298]

18 Staphylococcus intermedius 355,1±72,9 842,3±46,3 444,0±233,6 404,0±233,6 756

[119-778] 2 [11-1613] 4 [139-903] [109-703]

19 Corineform CDC-group 125,9±22,5 335,0±17,0 341,3±120,7 164,5±12,7 605

XX [32-250] [0-588] [0-588] [68-191]

20 Lactobacillus 5661,5±1868,3 4168,0±2797 3193,5±2612,5 4131,0±969,0 6613

[965-16220] [581-9679] [581-5806] [3062-5001]

21 Campylobacter mucosalis 44,8±16,8 [0-142] 2,3,4 221,0±64,7 [94-306] 204,3±34,7 [143-263] 184,3±14,7 [143-263] 99

22 Mycobacterium/Candida 106,8±25,3 [0-239] 359,8±110,9 [115-594] 275,5±91,5 [169-549] 375,571,5 [169-549] 549

23 сем. Enterobacteri-aceae (E. coli и пр.) 0,11±0,01 [0-0,02] 57,6±57,4 [0-230] 0 0 0

24 Eubacterium moniliforme sbsp 0 233,0±232 [0-700] 0 0 0

25 Cl. difficile 80,2±12,8 439,3±25,9 339,3±23,9 299,0±25,9 385

[43-155] 2,3,4 [83-944] [85-744] [222-376]

26 Prevotella 0 0 34,5±11,5 [9-64] 0 38

27 Eubacterium moniliforme, 6589,8± 17791,8± 21329,3± 10844,0± 6912

E. nodatum, 1385,7 5748,9 5745,3 1844,0

E. sabureum [1049-12508] 2Д4 [3572-29580] [10278-29580] 4 [9000-12688]

28 Staphylococcus 123,0±19,3 396,0±68,4 274,3±22,4 124,3±22,4 120

[57-220] 2,3 [264-581] [120-637] [120-237]

29 Bifidobacterium 2395,4±453,5 6701,3±2571,4 4129,5±754,9 3023,0±754,9 5067

[355-3973] [664-11533] [2031-5374] [2031-5374]

30 Helicobacter pylori, h18 12,0±2,5 [0-22] 2,4 95,0±48,5 [0-227] u 28,5±14,3 [0-66] 2,4 100,1±17,3 [66-132] 14

31 Clostridium perfringens 19,6±3,4 49,3±16,8 26,0±7,2 36,0±7,2 12

[4-35] 2,3,4 [24-97] [12-46] [12-46]

32 Enterococcus 1,9±1,3 61,8±49,6 79,3±70,4 42,3±20,4 290

[0-11] 2Д4 [0-208] [0-290] [3-71]

33 Eubacterium 0 0 0 0 59

34 Propionibac-terium spp (P. 2033,4±339,1 4150,0±1536,9 2967,0±564,8 2430,5±564,8 4480

freudenreichii) [747-3305] [967-8078] [965-4480] [965-4480]

35 Streptococcus mutans (анаэробные) 253,7±45,8 [89-525] 2,3,4 873,0±261,4 [139-1340] 3 304,8±63,2 [171-444] 584,8±63,2 [171-744] 229

36 Herpes 60,4±12,4 366,3±166,2 187,0±45,7 287,0±45,7 59

[19-112] 2,3,4 [65-740] 3 [59-276] [59-276]

37 Микр. грибы, кампесте- 130,1±27,5 354,0±112,5 308,0±182,3 265,1±182,3 842

рол [24-293] 3,4 [63-552] [29-842] [29-842]

38 Nocardia asteroides 287,3±115,2 2,4 677,5±112,5 641,5±259,4 541,5±259,4 274

[184-1194] [299-806] [201-1321] [201-721]

39 Цитомегало-вирус 30,2±3,7 235,0±67,4 230,2±36,9 83,2±36,9 166

[15-42] 2,3 [76-388] [46-426] [46-126]

40 Микр. грибы, ситостерол 130,1±27,5 227,0±86,8 166,8±72,6 86,8±22,6 384

[24-293] 4 [35-446] [82-384] [82-112]

41 Ruminicoccus 372,6± 50,1 [119547] 2,3,4,5 1268,3± 363,2 3,4 [3221997] 673,5± 79,4 [485869] 873,5± 79,4 [485869] 640

42 Actinomyce-tes 10Me14 165,4±20,0 [95-260]4 153,3±37,3 [87-235] 4 129,5±64,7 [34-309] 79,5±14,7 [34-99] 309

43 E. lentum 7741 (группа В) 6,0±20,1 [0-190] 2,3,4 290,3±86,4 [46-425] 3,4 96,1±27,5 [0-381] 86,1±17,5 [0-181] 0

44 Actinomyces viscosus 503,4± 84,6 [165-855] 2 1309,0± 341,9 4 [288-1719] 827,8± 154,9 [501-1190] 727,8± 154,9 [501-1190] 119 0

Примечание: 2 3 4 - достоверность различий (р<0,05) между сроками лечения и определения ГХ-МС больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом

Нами установлено увеличение микробной флоры выше нормы, имеющей тенденцию к повышению у больных с ограниченным стерильным ПН, которым было выполнено хирургическое вмешательство: Clostridium ramosum, Fusobacterium/Haemophylus, Helicobacter pylori, h18.

Отмечено снижение микроорганизмов от высоких до нормальных показателей: Peptostrep-tococcus anaerobius, Streptomyces, Rhodococcus, Staphylococcus intermedius, Cl. difficile, Staphylococcus, цитомегаловирус, Actinomyces viscosus. Также выявлено, что концентрация следующих микроорганизмов имела тенденцию к снижению, однако, не достигла нормальных показателей: Eubacterium lentum (группа А), Moraxella / Acinetobacter, Pseudomonas aerugi-nosa, Campylobacter mucosalis, Eubacterium moniliforme, E. Nodatum, E. sabureum, Clostridium perfringens, Streptococcus mutans (анаэробные), Herpes, Nocardia asteroides, Ru-minicoccus, E. lentum 7741 (группа В).

Отмечена тенденция к уменьшению количества микроорганизмов в конце лечения, не превышавших нормальные показатели при госпитализации в следующих случаях: Streptococcus (оральные), Bacillus cereus, Актиномицеты, Corineform CDC-group XX, Propionibacterium spp (P. freudenreichii), Actinomycetes 10Me14.

Выявлена недостаточность Bifidobacterium к концу лечения, что создает дисбиоз кишечника.

Таким образом, примененный метод газовой хроматографии масс-спектрометрии является перспективным методом диагностики микроорганизмов больных с острым панкреатитом, позволяет коррегировать результаты комплексного лечения этих больных и требует дальнейших исследований в этой области.

Литература

1. Верховцева Н.В., Осипов Г. А. Свойства и трофические связи основных групп микроорганизмов отделов кишечника и фекалий по данным измерений микробных маркеров методом ГХ-МС // Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы: сб. материалов междунар. конф. - М., 2004. - С. 20-21.

2. Минорные жирные кислоты биологических жидкостей урогенитальных органов и их значимость в диагностике воспалительных процессов / Т. А. Крымцева и др. // Журн. микроб. эпидем. и иммун. -2003 - № 2. - С. 92-101.

3. Спектр и уровень содержания низкомолекулярных соединений микробного происхождения при периодической болезни / Ж. А. Кцоян и др. // Вестник РАМН. - 2002. - №2. - С. 41-45.

4. Состав кожного сала, микроэкология кожи и кишечника у больных себорейным дерматитом и ак-не (исследование методом газовой хроматографии масс-спектрометрии) / И.В. Полеско и др. // Рос. журн. кож. и вен. бол. - 2007. - № 2. - С. 43-50.

5. Хабиб О.Н., Белобородова Н.В., Осипов Г.А. Детектирование молекулярных маркеров бактерий в ткани клапанов сердца в норме и при патологии с применением метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии // Журн. микроб. эпидем. и иммун. -2004. - Т. 7, № 3. - С. 62-65.

6. 1992. Meningococcal endotoxin in lethal septic shock plasma studied by gas chromatography, mass-spectrometry, ultracentrifugation and electron microscopy / P. Brandtzaeg et al. J. Clin. Investig. 89. -Р. 816-823.

7. Comparison of species distribution and antimicrobial susceptibility of aerobic actinomycetes from clinical specimens / M.M. McNeil et al. // Rev Infect Dis. 1990. Sep-Oct. - 12(5). - Р. 778-83.

8. Evaluation of a commercial microbial identification system based on fatty acid profiles for rapid, accurate identification of plant pathogenic bacteria / D.E. Stead et al. // J. Appl. Bacteriol. - 1992. - 72. -Р. 315-321.

Саганов Владислав Павлович - доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой госпитальной хирургии Медицинского иститута Бурятского государственного университета. Тел. 8 (3012) 43-61-03. Е-mail: vlad-saganov@yandex.ru

Раднаева Лариса Доржиевна - доктор химических наук, профессор, заведующая кафедрой фармации Бурятского государственного университета, заведующая лабораторией химии природных систем Байкальского института природопользования СО РАН. Тел. 8 (3012) 43-62-03. Е-mail: radld@mail.ru

Хитрихеев Владимир Евгеньевич - доктор медицинских наук, профессор, директор Медицинского иститута Бурятского государственного университета. Тел. 8(3012)44-55-03. Е-mail: hitriheev@rambler.ru

Дониров Батор Аюржанович - кандидат медицинских наук, доцент кафедры факультетской хирургии Медицинского иститута Бурятского государственного университета, заведующий отделением ССХ РКБ им. Н.А. Семашко. Тел. 8 (3012) 23-04-84. Е-mail: donirova@mail.ru

Будашеев Вячеслав Петрович - кандидат медицинских наук, ординатор отделения гнойной хирургии РКБ им. Н.А. Семашко. Тел. 8 (3012) 43-62-03. Е-mail: bavgai@fromru.com

Saganov Vladislav Pavlovich - doctor of medical sciences, associate professor, head of the department of hospital surgery, Medical Institute, Buryat State University. Tel. 8 (3012) 43-61-03, vlad-saganov@yandex.ru

Radnaeva Larisa Dorzhievna - doctor of chemical sciences, professor, head of department of pharmacy, Buryat State University; head of the laboratory of chemistry of natural systems, Buryat State University and Baikal Institute of Nature Management SB RAS. Tel. 8 (3012) 43-62-03, radld@mail.ru

Khitrikheev Vladimir Evgenevich - doctor of medical sciences, professor, director of Medical Institute, Buryat State University. Tel. 8(3012)44-55-03, hitriheev@rambler.ru

Donirov Bator Ayurzhanaevich - candidate of medical sciences, associate professor, department of faculty surgery, Medical Institute, Buryat State University, head of the department of cardiovascular surgery, Republican Clinical Hospital named after N.A.Semashko.Tel. 8-914-835-29-60; 8 (3012) 41-66-70. Е-mail: DonirovBA@yandex.ru

Budasheev Vyacheslav Petrovich - candidate of medical sciences, ordinator of the department of purulent surgery, Republican Clinical Hospital named after N.A. Semashko. Tel. 8 (3012) 43-62-03. Е-mail: bavgai@fromru.com

УДК 615.32: 591.44

© Э.В. Архипова, Л.Н. Шантанова, А.Г. Мондодоев

ТИРЕОТРОПНЫЕ СВОЙСТВА POTENTILLA ALBA L.

В статье приводятся результаты по определению острой токсичности экстракта лапчатки белой, его влияния на течение экспериментального гипотиреоза и состояние морфофункциональной характеристики щитовидной железы.

Ключевые слова: экстракт лапчатки белой, гипотиреоз, гормоны щитовидной железы, структура.

E.V. Arkhipova, L.N. Shantanova, A G. Mondodoev THYROTROPIC PROPERTIES OF POTENTILLA ALBA L.

In the article the results of the identification of acute toxicity of extract Cinquefoil white are presented as well as its influence on the course of experimental hypothyroidism and status of multifunctional characteristic of thyroid gland.

Keywords: extract of cinquefoil white, hypothyroidism, thyroid hormones, structure.

Введение

Фармакотерапия заболеваний щитовидной железы в настоящее время является актуальной проблемой медицинской науки и практического здравоохранения. В наибольшей степени на частоту тиреоидной патологии влияет потребление йода населением. В России более 2/3 населения проживает на территориях с недостатком йода в почве, воде, воздухе, продуктах питания и др. [3, 4]. Социальный аспект проблемы заключается в том, что наиболее часто болеют люди трудоспособного возраста от 20 до 50 лет, и нередко данное заболевание и его осложнения служат причиной стойкой нетрудоспособности. Среднесу-

точное потребление йода по России 40-80 мкг в сутки, тогда как требуется 150-200 мкг в сутки для взрослого. В этой связи остается актуальным поиск новых эффективных лекарственных средств на основе растительного сырья, обладающего тиреотропными свойствами [5].

Средства растительного происхождения являются перспективным источником биологически активных веществ, в том числе тиреотроп-ного действия с широким спектром активности и высокой степенью безопасности. Одним из таких растений является лапчатка белая (Potentilla alba L.) семейства Розоцветных. Лапчатка белая является эффективным регулятором