CC BY
196
УДК 636.2.034.003.13
Березовський I.B., к.вет.н., старший викладач © Втныцъкый нацюналъныы аграрныыутеерсытет
М1КРОБЮЛОГ1ЧНИЙ ПЕЙЗАЖ МОЛОКА ЗДОРОВИХ ТА ХВОРИХ НА СУБКЛ1Н1ЧНИЙ МАСТИТ KOPIB
У cmammi представленi результаты наукових дослгдженъ по дослгдження молока на субклШчныы мастит. Встановлено мтробюлог\чний пейзаж молока здоровых та хворых на субклшчныы мастыт Kopie. Наведено результаты проведеных дослгдженъ у Втныцъкш област1 про чутлывктъ выдтено! мтрофлоры з молочног залозы хворых на мастыт, та чутлывктъ выдшеных культур мтрооргашзм1в до антыбактер1алъных npenapamie. Встановлено, що для docmoeipnoi iдентыфтацп збудныюв мастыту Kopie, Heo6xidno проводыты 6aKmep^osi4Hi до^дження патогенных стрептокоюв групы В за запропонованою схемою з выкорыстанням збагаченых жывылъных середовыщ. Встановлено, що застосування препарату БРОВАМАСТ 2Д i3 загалъного чысла проб молока eid Kopie еыдыылы лыше культуры Staph. aureus в 15%.
Ключое1 слова: мастыт, дiaгнocmыкa, жывылът середовыща, мтрооргатзмы родын Streptococcaceae, Staphylococcaceae, Enterobacteriaceae, антыбютыкы,
Вступ Суттевим фактором, який впливае на молочну продуктившсть Kopie та яюсть отримано! продукци, е захворювання маститом. Xeopi тварини знижують надо1, теля того, як вони перехворши маститом, часто взагал1 втрачають властивють продукувати молоко в окремих частках вимеш, внаслщок i'xHboi атрофи. Запальш процеси, як1 розвиваються в молочнш залоз1, приводять до змш х1м1чного складу молока, його ф1зичних та бюлопчних властивостей. Внаслщок цього воно втрачае свою поживну цшшеть, стае малопридатним для переробки, знижуеться яккть виготовлених з нього молочних продукта.
На сьогодш ¿снуе думка, що уведення в дш ДСТУ 3662-97 наближае нас до нормативних документа ЕС. Але директива ЕС 92/46 вщ 16.07.92 року встановлюе ветеринарно-саштарш правила виробництва i розмщення на ринку сирого молока, молока пщданого тепловш обробщ й продукта на молочнш основ! i визначае гранично допустим! норми показниюв соматичних кл1тин. При цьому зазначаеться, що в молощ не повинно бути бшьше шж 100 тис. мжробних тш i не бшьше 400 тис. соматичних кл1тин в 1 мл. В зв'язку з цим вкрай необхщне дотримання правил безпеки молока i молочних продукта, як1 реал1зуються на ринках за прямими зв'язками i надходять у вшьний продаж, а також при постачанш сировини для виробництва молочно! продукци. Тому на думку ряду вчених, дослщження секрету хворо! частки вимеш допомагае
© Березовський I.B., 2013
28
виявити характер процесу запалення, проконтролювати результата л1кування, встановити ешзоотолопчну I епщемюлопчну роль дано! тварини при захворюваннях, пов'язаних з1 споживанням молока I молочних продукив [1,7].
Пщ час лжування кор1в з маститом найчастше використовують антибютики, яю майже витиснули вс1 шш! терапевтичш засоби. Проте широке застосування таких препарат1в для л1кування запальних процеЫв у дшянщ молочно! залози зумовило I нов! негативш проблеми: зниження !х ефективност! внаслщок набуття стшкост! збудниками маститу до багатьох ¿з них, знижения резистентност! оргашзму тварин I тканин молочно! залози - атрофп та шдураци й, вщповщно розвиток гшо- та агалакти, що завдае великих збитюв господарствам. Найнегатившшим наслщком застосування антибютиюв у процес! л1кування кор1в проти маститу е наявшсть !хшх залишюв у зб1рному молощ. Це попршуе його технолопчш властивост! й шкодить здоров'ю людей
[3].
Останшм часом особливого значения набувае вивчення можливост! застосування у загальному комплекс! профшактичних ветеринарних заход1в яю мають безпосереднш вплив на стшюсть тварин до захворювань. Експериментальними дослщженнями доведено, що при однаковш год1вл1 та при аналопчних умовах утримування, до!ння та догляд! за вименем окрем! корови виявляються стшкими до маститу, а шш! уразлив! до нього. Наданий час вчеш класиф1кують р!зш форми прояву резистентност! оргашзму кор1в до захворювань [2].
Залежно вщ тяжкосп захворювання та його впливу на функщю молочно! залози мастита подшяють на кшшчш, субклмчш та латентш (останш два ще називають прихованими). Незалежно вщ етюлогп маститу (шфекцшний або нешфекцшний) у молощ уражено! чверт! вимеш збшьшуеться кшькють соматичних кл1тин. Саме !х вмкт I кшьккть дае надшне уявлення про запальш процеси [5].
Передуам, розглянемо, у тому числ1 I в кторичному аспект!, способи виявлення приховано! (субклмчно!) форми маститу у кор1в. Для установления субклмчних мастигав важливо провести ретельне обстеження стану молочно! залози. Субклмчний запальний процес можна виявити за зменшенням молокоутворення пщчас визначення молочно! продуктивное^ кор!в. В д!агностищ субкл!н!чного маститу перевага надаеться пробам (тестам), як! виявляють зм!ни х!м!чного складу молока, його ф!зичн! та бюлопчш властивост!, к!льк!сть кл!тин у молощ, а також бактер!олог!чному дослщженню молока [6].
Пост!йною ознакою запального процесу в молочнш залоз! е п!двищена к!льк!сть у молоц! соматичних кл!тин, головним чином лейкоцит!в. Найзручшшою у практичних умовах виявилась проба Уайтсайда, запропонована ще в 1939 рощ англшським вченим Уайтсайдом; в подальшому цей метод вдосконалювався багатьма вченими. Так, у 1957 рощ американський вчений Шалм для д!агностики мастит!в запропонував кал!форн!йську маститну пробу, на основ! використання поверхнево-активних речовин типу
29
алкшарилсульфат1в I сульфонат1в. Однак, деяю автори вважають цей метод недосконалим. Основною причиною такого ставлення е те, що результати його не завжди вщповщають отриманим даним при бактерюлопчних дослщженнях молока.
Метою роботи було дослщження молока бактерюлопчними методами як1 проводили з метою визначення загального бактер1ального забруднення, а також диференщацш субклмчного I клмчного маститу, а також призначення ефективних метод1в л1кування. Нами проведен! пор1вняльш дослщження з оцшки р1зних способ1в д1агностики субклмчно! форми маститу у кор1в, у тому числ1 з використанням ряду перспективних. 3 щею метою нами вивчались ветеринарно-саштарш заходи на однш з тваринницьких ферм Крижопшьського району Вшницько! област1 на коровах чорно-рябо! породи та можливкть впливу 1х на виникнення мастигав у кор1в.
Матер1али та методи дослщження. Експериментальш дослщження проводились на кафедр1 мшробюлогп ВНАУ. Безпечшсть молока вщ кор1в хворих на мастит, визначають за результатами бактерюлопчного дослщження (видшення патогенно! мжрофлори), I наявшстю специф1чних ознак запалення, пов'язаних з1 збшьшенням кшькост1 соматичних кл1тин у секрет! молочно! залози.
Терапевтичну ефектившсть р1зних схем лжування вивчали на 140 коровах ¿з 1-ю та 2-ю лактащею з урахуванням пори року. У зимово-весняний I л1тньо-осшнш перюди формували по три дослщш та однш контрольнш груш тварин (по 20 у кожнш), пвдбраних за принципом аналопв ¿з д1агнозом приховано! (субклмчно!) форми маститу.
У вЫх групах ураховували таю показники: кшькють I вщсоток кор1в, що одужали, кшькють I вщсоток ускладнень та переходу у хрошчну чи шш1 форми, середш строки одужання, кшьккть I вщсоток кор1в, у яких вщбулась атроф1я та шдурацш уражених чвертей, показники вщновлення молочно! продуктивное^, кшьккть I вщсоток вибракуваних теля терапи особин [4].
В процес1 розмноження м1крооргашзм1в в молощ як вщомо виробляеться фермент1в (редуктазу, фосфатаза I пероксидаза). Тому за допомогою редуктазною проби ми визначали р1вень м1кробного обЫменшня молока I подш молока на класи. При постановщ редуктазною проби И показники пор1внювали ¿з вмютом мжрооргашзм1в в молощ, визначеним чашковим методом теля вирощування на живильних середовищах при 37°С протягом 12 годин.
Для визначення кшькост1 м1кроб1в у молощ нами виавалось молоко на бактерюлопчш чашки ¿з МПА, агаром Плосюрева, солевим агаром { середовищем ВКГ. ПоЫви витримувались при температур! 37°С з наступним пщрахунком колонш \ визначеш за 1х числом кшькост1 мжрооргашзм1в в 1 см3.
Експрес-методами дослщження проб молока ставиться тшьки попереднш д1агноз на субклмчний мастит. Для його уточнения проби паренх1много молока дослщжують ¿з застосуванням проби на мастидин. Якщо
30
1х кшьккть перевищуе 500000 кл1тин у 1 мл, то дал1 проби паренх1много молока дослщжували за допомогою бактерюлопчного методу за наведеною схемою.
Проба на мастидш
Виавки на МПБ, МПА або сольовий агар i3 манштом, ВКГ
Проба паренх1много молока
Виави на середовище Ендо (Плосшрева, Левша)
Приготування та мжроскошя мазшв
Виготовлення i nepeciB на МПБ та МПА Виготовлення Вщав колонш
м1кроскотя чистих культур 1 м1кроскошя emepixiH в дв1
мазшв стафшокошв мазшв проб1рки з МПБ
та МПА
Стафшококи
Emepixii
Рис 1. Схема бактершлоНчних дослщжень проб молока для д1агностики
субклш1чного маститу
Таким чином, схема бактерюлопчного дослщження включае видшення збудниюв на поживних середовищах, одержання чистих культур, щентифшащю до виду та визначення комплексу ознак.
Результати дослщжень. Встановлено, що прихована (субклмчна) форма маститу у даному господарств1 за три останш роки рееструвався у 11,4% тварин. Найчастше корови хворши пщ час лактаци, включаючи й молозивний вщр1зок тсляродового перюду.
Для встановлення мжробюлопчного пейзажу молока здорових та хворих на субклмчний мастит кор1в брали проби молока з кожно! частки вим'я вщ 7 кор1в, хворих на субклмчний мастит (20 проб), 1х дослщили за допомогою бактерюлопчного методу. Результати дослщжень наведен! у табл.1.
Таблиця 1
Результати бактершлоНчних дослщжень проб молока 7 ко|Мв хворих
на субкл1шчний мастит
Видшено культур
Види бактерш бактерш i3 проб молока, n = 20
Абсолютне число %
Staph. aureus 7 35
Staph. epidermidis 2 10
E. coli 5 25
Приметка. 1з кожно! частки вим'я брали по однш проб1 молока.
31
1з 14 видшених культур бактерш бшьшу частку складав Staph. aureus - бшя 35%, Staph. epidermidis - 10% та E.coli - 25%. Мкрофлора молока здорових тварин наведена у табл. 2.
Таблиця 2
Види бактерш проби молока, n = 20
Абсолютне число %
Str. lactis 6 30
Staph. epidermidis 2 10
Staph. aureus 1 5
Str. faecalis 1 5
Як показують дат табл. 2, вщ здорових тварин з проб молока i3 загального числа видшених бактерш бшьшу частку складали культури Str. lactis - 30%, Staph. epidermidis - 10%, Staph. aureus i Str. faecalis - no 5%.
Таким чином, i3 проб молока хворих на субклшчний мастит Kopie переважно видшяли культури Staph. aureus i Sir. agalactiae, а клЫчно здорових -Str. lactis та Staph. epidermidis.
Результата дослщжень по видшенню культур бактерш i3 проб молока Kopie хворих на субклмчний мастит, до та теля застосування препарату БРОВАМАСТ 2Д наведен! у табл. 3.
Таблиця 3
По|Мвняння частот впдшення культур бактерш ¡з проб молока Kopie у хворих на субклш1чннй мастит, до та шеля застосування препарату
БРС »BAMACT 2Д
Види бактерш Проби молока, n = 20
БРОВАМАСТ 2Д
до застосування теля застосування
абс. число % абс. число %
Staph. aureus 8 40 3 15
Staph. epidermidis 2 10 - -
E. coli 5 25 - -
Як видно i3 MaTepianiß табл. 3 до застосування препарату БРОВАМАСТ 2Д з проб молока видшили культури Staph. aureus, Staph. epidermidis i E. coli. У 40% випадюв - Staph. aureus у 10% випадках Staph. epidermidis i в 25% випадюв - культури E. coli.
Шсля застосування препарату БРОВАМАСТ 2Д i3 загального числа проб молока вщ Kopie вид1лили лише культури Staph. aureus в 15%.
Вщ Kopie, яким вводили антиб1отики, ¿золювали i3 молока Staph. aureus в 15% випадюв, а культури E.coli у 5% випадюв. Результата бактерюлопчних дослщжень проб молока Kopie у доелда до та теля застосування антибютиюв наведен!у табл.4
32
Таблиця 4
По|Мвняння частоти ¡золяцй* рпннх вид1в бактерш ¡з молока хворих на
субклш1чний мастит KopiB до та теля застосування антнбштнкш
Види бактерш Проби молока, n = 20
Антибютики
до застосування теля застосування
абс. число % абс. число %
Staph. aureus 6 30 3 15
Staph. epidermidis 2 10 - -
E. coli 3 15 1 5
Даш табл. 4 свщчать про те, що дослщжених проб молока, Kopie хворих на субклмчний мастит культури бактерш були малочутлив1 до дп антибютиюв тобто резистентш (неомщину, тетрацикл1ну, стрептомщину, еритромщину та левомщетину). Таким чином, теля застосування препарату БРОВАМАСТ 2Д в1н д1яв бшьш ефектившше проти бактерш що знаходились у молощ Kopie при субклшчному мастит! шж антибютики.
Висновки:
1. Для вдосконалення технолог!! виробництва молока в даний час n0Tpi6H0 особливу увагу звернути на заходи по зниженню р1вня захворювання Kopie маститом, 1хню д1агностику, своечасне лжування та профшактику. Проведения, згщно з дшчими "Правилами машинного дошня Kopie", перюдично! д1агностики маститу у Kopie для виявлення хворих тварин та ix подальшого лжування на piBHi господарств е неабияким резервом оздоровления погол1в'я.
2. Мастит у Kopie чорно-рябо! породи рееструвався у 76,6% випадюв клмчного маститу, частше в зимово-весняний перюд, переважно у тварин з 1, 2 та 5-ю лактащею з ураженням одше! чверт1 вим'я (85,0%). При цьому абсолютна бшьшють випадюв (95,1%) припадала на перюд лактаци, включаючи молозивний та тсляродовий.
3. У результат! бактерюлопчних дослщжень 20 проб молока хворих на субклшчний мастит Kopie господарства вид ¿лили 14 культур бактерш, в тому числ! 7 (50%) Staph. aureus, 5 (25%) E. coli та 2 (10%) Staph. epidermidis. 1з 20 проб молока здорових Kopie ¿золювали 10 культур бактерш, ¿з яких вщнесли 6 (60%) до Str. lactis, 2 (20%) Staph. epidermidis, по 1 (по 5%) Staph. aureus та Str. faecalis.
4. 1з молока хворих на субклмчний мастит Kopie видшили переважно культури Staph. aureus, Str. agalactiae i рщше - E. Coli, а клЫчно здорових - Str. lactis та Staph. epidermidis.
Л1тература
1. Бабак I.M. Л!кування Kopie при серозному мастит! / I.M. Бабак // Ветеринарна медицина Украши - 2010. - №4. - С. 18-19.
33
2. Болгов А.Е. Повышение резистентности крупного рогатого скота к маститу./ А.Е. Болгов, Е.П. Карманова, Л.Н. Мурав1я, В.Е. Макарова // -Перозаводск, 1996. - 179с.
3. Крижашвський Я.Й. Профшактика мастит1в у кор!в безмедикаментозними еколопчно безпечними методами: Автореф. дис. ... канд. вет. наук. - Кшв, 1994. - 24 с.
4. Харенко M.I. Ефектившсть метод1в Tepanii' кор!в, хворих на серозний мастит / M.I. Харенко, Ю.В. Байдевлятова // Ветеринарна медицина Украши -2009. - №10. - С. 16-19.
5. Хомин С. Окрем1 аспекта патогенезу маститу в кор!в / Хомин С., Стефаник В., Дмитр1в О. та ш. // Ветеринарна медицина Украши - 2005. - №10. - С. 27-29.
6. Шпилева Л.О. 1мунобюлопчна реактившсть кор!в, хворих на субклшчний мастит, i И змши теля лазеротерап11: Автореф. дис. ... канд. вет. наук. - Луганськ, 2003. - 14 с.
7. Яблонський В.А. Патолопя молочно! залози / В.А. Яблонський, В.Й. Любецький, В.Л. Бороданя // - Ки!в, 2004. - 45 с.
Summary Berezovsky I.V., k.vet.n., Senior lecturer Vinnitsa National Agrarian University MICROBIOLOGICAL LANDSCAPE OF MILK OF HEALTHY AND SICK ON SUBKLINICAL MASTITIS COWS
The article presents the results of research scientific studies of milk on subclinical mastitis. It is established microbiological landscape of milk of healthy and sick on subclinical mastitis cows. It is given the results of the studies of sensitivity of isolated microorganisms from breast with mastitis and sensitivity of isolated cultures of microorganisms to antibiotics made in Vinnytsia region. Found that for precise identification of pathogens mastitis cows should be conducted bacteriological research of pathogenic streptococci group B on the proposed scheme using enriched culture medium. Found that the drug BROVAMAST 2D of the total number of samples of milk of cows identified only culture Staph. aureus 15%.
Key words: mastitis, diagnostics, culture medium, microorganisms of families Streptococcaceae, Staphylococcaceae, Enterobacteriaceae, antibiotics
Рецензент - д.вет.н., професор Стефаник В.Ю.
34
