CC BY
36
капсульных личинок трихинелл //Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: матер.докл. науч. конф. 2006. №. 7. С. 375-378.
13. Успенский А.В., Скворцова Ф.А. Метод вете-ринарно-санитарной экспертизы мяса промысловых животных при паразитарных зоонозах // Российский паразитологический журнал. 2014. № 3. С.151-157.
Исследования поддержаны грантом РФФИ14-34-50405
Сведения об авторах
Жданова Ольга Борисовна - д.б.н., доцент, зав. кафедрой гистологии, эмбриологии и цитологии Кировской ГМА. E-mail: [email protected]., тел: (8332) 67-88-11.
Окулова Ираида Ивановна - к.в.н., ст.н.с. отдела разведения «ФГБНУ ГНУ ВНИИОЗ им. Б.Н. Житкова». Тел: (8332) 64-78-57.
Ашихмин Сергей Петрович - к.м.н., доцент, зав. кафедрой топографической анатомии Кировской ГМА. Тел: (8332) 37-20-19.
Бельтюкова Зинаида Николаевна - к.в.н., ст.н.с. отдела разведения «ФГБНУ ГНУ ВНИИОЗ им. Б.Н. Житкова». Тел: (8332) 64-78-57.
Домский Игорь Александрович - д.в.н., профессор, директор «ФГБНУ ГНУ ВНИИОЗ им Б.М. Житкова». Тел: (8332) 64-78-57.
Хайдарова Амина Аслановна - к.б.н., ст.н.с. лаборатории иммунодиагностики ФГБНУ «ВНИИП им. К.И. Скрябина». Тел: (8495) 124-68-11.
Написанова Людмила Александровна - к.б.н., ст.н.с. лаборатории иммунодиагностики ФГБНУ «ВНИИП им. К.И. Скрябина». Тел: (8495) 124-68-11.
УДК 612.33-053.2(470.342) О.Ю. Носкова1, М.С. Григорович2, М.Д. Ардатская3
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ СТАНОВЛЕНИЯ МИКРОБИОТЫ КИШЕЧНИКА У ДЕТЕЙ -ЖИТЕЛЕЙ ГОРОДА КИРОВА
'Детское поликлиническое отделение № 2 Кировского детского городского клинического лечебно-диагностического центра (Киров, Россия) 2Кировская государственная медицинская академия (Киров, Россия) 3ООО «Уни-мед» (Москва, Россия)
O.Y. Noskova1, M.S. Grigorovich2, M.D. Ardatskaya3
MICROBIOLOGICAL AND FUNCTIONAL ASPECTS OF GUT MICROBIOTA FORMATION IN CHILDREN IN KIROV
'Children's polyclinic department № 2 of Kirov children's clinical medical- diagnostic center (Kirov, Russia)
2Kirov State Medical Academy (Kirov, Russia) 3LLC «Uni-med» (Moscow, Russia)
Актуальность дальнейшего исследования процессов становления микробиоты у детей, направлен-
ного на поиск физиологических путей биокоррекции, не вызывает сомнений. Целью данной работы явилось изучение состава и параметров метаболической активности микробиоценоза у здоровых детей второго полугодия жизни, жителей г. Кирова. Выявлено, что состояние микробиоты в 99% случаев характеризуется дефицитом представителей индигенной и избыточным ростом условно-патогенной флоры в виде снижения титров бифидобактерий и лактобактерий и увеличения роста условных патогенов, что проявляется в виде двух типов метаболической активности симбионтов при оценке спектра короткоцепочечных жирных кислот в кале (n=103) с преобладанием у 70% детей «анаэробного» типа.
Ключевые слова: кишечная микробиота, дети раннего возраста.
Considering the risks of forming non-optimal composition of microbiota in children of the first years of life in modern conditions and data to prove the influence of microbiocenosis on the status of the immune response, metabolism and receptivity to illness in further stages of life, it is essential to investigatе and search for ways of preventive biocorrection. The article presents the results of the investigation of gut microbiota composition in children of the first years of life in Kirov. The study shows that in 99% of cases the condition of microbiota is characterized by a deficiency of representatives of indigenous and excessive growth of opportunistic pathogens. While evaluating the level of short-chained fatty acids (SCFA) in feces of the infants of 8-12 months old (n=103) two types of metabolic profile have been found: 'anaerobic' in 70% and 'aerobic' in 30%.
Key words: gut microbiota, infants.
Введение
Сегодня не вызывает сомнений влияние кишечного микробиоценоза на все процессы, связанные с развитием и функционированием макроорганизма [4, 7, 10, 12, 14]. Большая часть кишечной микро-биоты представлена мукозальной флорой, которая формирует на поверхности кишечника биопленку. С функциональной точки зрения образуемую микроорганизмами пленку сравнивают с плацентой за счет регулирующего влияния на взаимоотношения между организмом человека и окружающей средой посредством обмена широкого спектра веществ, продуцируемых представителями кишечной эндоэкологии [7, 10]. Исследованиями последних лет убедительно доказано, что особенности функционирования микробиоценоза у детей первых лет жизни определяются нестабильностью популяционной численности и низким разнообразием симбионтов, увеличением условно-патогенных представителей и снижением облигатных, проявляющимся изменением их метаболической активности и повышением провоспалитель-ного потенциала [3, 6, 9]. В последние годы все чаще подчеркивается, что состав микробиоты кишечника человека может отличаться в различных популяциях, что связано с особенностями места обитания и влияния конкретной среды, традиций питания и других факторов. На территории г. Кирова проводились единичные работы по оценке состояния микробиоценоза кишечника у детей раннего возраста, основанные на использовании микробиологического метода исследования кала [9]. Выявленные особенности микро-биоты обусловлены воздействием целого ряда нега-
тивных факторов уже на ранних этапах онтогенеза: экология, состав микрофлоры матери, значительная распространенность урогенитальной инфекции и использование антибактериальной терапии у беременных женщин, особенности ведения и течения родов, санитарное состояние среды, в которых они проходили, раздельное пребывание новорожденного с матерью, нерациональное использование антибиотиков широкого спектра действия и других противоми-кробных агентов у детей раннего возраста и матерей, снижение распространенности и продолжительности грудного вскармливания, нерациональное питание [2, 8, 10, 13]. Одним из значимых для детей раннего возраста является фактор питания, а именно вид и продолжительность вскармливания, состав и свойства продуктов [2, 8-10]. Введение прикорма, характеризующегося изменением консистенции пищи (более густой и твердой) и одновременным снижением доли грудного молока, является критическим периодом для становления микробиоценоза ребенка на фоне продолжающегося формирования деятельности ЖКТ [6, 7, 11]. Следовательно, изучение особенностей становления кишечной микробиоты у детей второго полугодия жизни на региональном уровне с целью поиска физиологичных путей оптимизации становления микробиоценоза являются актуальными.
Цель работы: изучение состава и параметров метаболической активности показателей микробиоценоза у здоровых детей второго полугодия жизни.
Пациенты и методы
Исследование проводилось на клинической базе ГБОУ ВПО Кировская ГМА - в детском поликлиническом отделении № 2 КОГБУЗ «Кировский детский городской клинический лечебно-диагностический центр» г. Кирова и носило характер открытого проспективного клинического наблюдения. В группу наблюдения вошли первоначально 150 детей. Критериями исключения являлись: наличие острых инфекционных заболеваний в течение 30 дней до начала исследования, индивидуальная непереносимость молочных продуктов (непереносимость белка коровьего молока в анамнезе, положительный тест на лактазную недостаточность
по методике Бенедикта); наличие признаков анемии; симптомов нарушений пищеварения к моменту исследования (боли, метеоризм, вздутие, воспалительные изменения при копроскопии); а также развитие острых инфекционных заболеваний в период наблюдения.
С учетом критериев исключения под дальнейшим наблюдением находилось 103 практически здоровых ребенка в возрасте от 8 до 12 месяцев жизни включительно, средний возраст детей составил 9,9 ±0,14 месяцев. Среди детей девочек - 55 чел. (53,4%), мальчиков - 48 чел. (46,6%). Распределение детей по видам вскармливания: на грудном вскармливании находились 52 ребенка (50,5%), на смешанном вскармливании - 11 (10,7%), искусственном - 40 (38,8%). Все дети были практически здоровыми и относились: к 1 группе здоровья - 54 человека (52,4%), ко 2-й группе - 49 человек (47,6%). По данным оценки физического развития: 63 ребенка (61,2%) относились к мезосоматотипу, 23 человека (22,3%) - к микросома-тотипу, 17 человек (16,5%) - к макросоматотипу; 62 ребенка (60,2%) соответствовали гармоничному типу развития, 41 чел. (39,8%) - негармоничному.
У всех детей оценивали показатели микробиоценоза кишечника по данным микробиологического исследования кала на дисбактериоз и по уровню ко-роткоцепочечных жирных кислот (КЖК) в кале методом газо-жидкостного хроматографического анализа в биохимической лаборатории ООО «Уни-мед» (г. Москва) под руководством д.м.н. Ардатской М.Д. [1]. Результаты микробиологического исследования оценивали в соответствии с возрастными референс-ными значениями параметров, представленными в ОСТ, 2003 (Дисбактериоз кишечника) [5].
Статистическая обработка результатов исследования осуществлялась с использованием лицензионных программных средств Microsoft Excel XP, STATISTICA 10. Рассчитывались среднее арифметическое значение, доверительный интервал и стандартное отклонение для вероятной ошибки 95% (р < 0,05), стандартная ошибка среднего арифметического. Различия считались достоверными при р<0,05, высокодостоверными - при p < 0,01 и p < 0,001, недостоверными при р < 0,05.
Таблица 1
Содержание основных представителей микрофлоры толстого кишечника у детей при первичном
обследовании кала, п = 103 (М ± m)
Виды микроорганизмов НГВН Общая группа n = 103
Бифидобактерии, lg КОЕ/г 10 8,11 ± 0,21
Лактобактерии, lg КОЕ/г 6 5,55 ± 0,22
Типичная кишечная палочка, lg КОЕ/г 7 7,57± 0,08
Энтерококки, lg КОЕ/г 5 2,07± 0,30
Стафилококк золотистый, lg КОЕ/г 0 1,91 ± 0,18
Дрожжеподобные грибы рода Candida, lg КОЕ/г 3 0,79 ± 0,18
Клебсиеллы, lg КОЕ/г 4 1,44 ± 0,27
Протей, lg КОЕ/г 4 0,77± 0,21
Клостридии, lg КОЕ/г 3 2,87 ± 0,09
Синегнойная и другие неферментирующие палочки, lg КОЕ/г 3 0,28 ± 0,14
Лактозонегативные энтеробактерии1, % 5 26,82 ± 3,44
Гемолизирующая кишечная палочка1, % 0 11,83 ± 2,05
Кишечная палочка со слабовыраженными ферментативными свойствами1, % 10 2,98 ± 1,15
'Оценка проводилась в соответствии с нормами по Р.В. Эпштейн-Литвак и Ф.П. Вильшанской, 1977 г.
Результаты исследования и их обсуждение
При оценке данных бактериологического исследования кала (n=103) у подавляющего большинства (99 %) детей выявлен ряд особенностей состава микробиоты кишечника в сравнении с нижней границей возрастной нормы (НГВН), что представлено в таблице 1.
Дефицит бифидобактерий (54,4% детей) и лак-тобацилл (58,3% детей) проявлялся снижением на 4-5 порядков от значений НГВН, реже - отклонением на 1-2 порядка (20 и 30% соответственно). Угнетение роста типичной кишечной палочки встречалось нечасто (12,6% детей) и в основном было представлено снижением на 1 порядок (77%), максимальное снижение на 4 порядка наблюдалось у 8% детей. Подавление нормальных симбионтов сопровождалось избыточным ростом, прежде всего, золотистого стафилококка (у 68,9% детей) на 2 порядка, а также лактозонегатив-ных энтеробактерий (44,7% детей), гемолизирующей кишечной палочки (35,9% детей), клебсиеллы (24,3%), реже - грибов рода Candida (12,6%), протей (12,6%), энтерококков (14,6%), кишечной палочки со слабо-выраженными ферментативными свойствами (6,1%), синегнойной и других неферментирующих палочек (4,9%), клостридий (2,9%).
При анализе данных количественного и качественного содержание КЖК в кале у детей зарегистрированы 2 типа изменений: анаэробный тип - у 70% детей и аэробный - у 30%. При анаэробном типе наблюдалось достоверное повышение содержания пропионовой (С3) и масляной (С4) кислот и достоверным снижением уксусной кислоты (С2); тенденция к снижению суммарного абсолютного содержания кислот (САСК) и суммарного относительного содержания изоСн, отклонение анаэробного индекса (АИ) в область отрицательных значений в сравнении с референсными показателями.
При аэробном типе наряду с выраженной тенденцией к снижению суммарного содержания кислот отмечено достоверное повышение относительного количества С2, суммарного относительного содержания изоСн и смещение АИ в область слабо отрицательных значений. Оба типа характеризуются резким увеличением абсолютного содержания отношения абсолютного содержания изовалериановой кислоты к валериановой кислоте (изоС5/С5). Результаты представлены в таблице 2.
Обсуждение результатов
Результаты анализа данных микробиологического исследования кала большинства детей выявили наличие отклонений от нижних границ референтных значений по основным исследуемым параметрам, свидетельствующие о наличии угнетения облигатных представителей микробиоты и избыточного роста условных патогенов, что согласуется с ранее полученными данными. Впервые параллельно с микробиологической оценкой у здоровых детей 8-12-месячного возраста, жителей г. Кирова, проведено исследование функциональной активности кишечных симбионтов по уровню короткоцепочечных жирных кислот, которое показало существенное преобладание лиц (70%) с анаэробным типом метаболического профиля. Последнее, по-видимому, свидетельствует о преобладании роста некультивируемых в условиях традиционного бактериологического анализа кала на дисбактериоз, анаэробов при дефиците бифидо- и лактофлоры и активации роста грамотрицательных патогенов.
Полученные данные свидетельствуют о том, что оптимизация процессов становления микробио-ты у детей, по-видимому, возможна при ориентации на оценку метаболического профиля и может быть реализована в процессе адресного подбора прикорма из группы функциональных пробиотических продуктов детского питания.
Выводы
1. У здоровых детей второго полугодия жизни (8-12 месяцев включительно), жителей г. Кирова, состояние кишечного микробиоценоза характеризуется дефицитом облигатных представителей и избыточным ростом условно-патогенной флоры.
2. Особенности состава кишечных симбионтов у детей сопровождаются изменением функциональной активности микробиоты с преобладанием анаэробного метаболитного профиля (70% пациентов) над аэробным (30%).
3. Полученные данные могут быть использованы для поиска путей рациональной (диетической) коррекции процессов становления микробиоценоза кишечника у детей раннего возраста.
Таблица 2
Результаты первичного исследования показателей метаболической активности микробиоты у детей
при анаэробном и аэробном типах, п = 103, (М ± т)
Группы Суммарное содержание КЖК, мг/г Уксусная кислота, мг/г Пропионовая кислота, мг/г Масляная кислота, мг/г АИ изоС5/С5, ед. изоСн, ед.
Референсные значения возрастных границ нормы (6-12 мес.) по данным лаборатории М.Д. Ардатской 4,81 ± 1,51 0,768 ± 0,009 0,141 ± 0,008 0,091 ± 0,005 -0,302 (±0,012) до 2,1 ед 0,059 ± 0,004
Анаэробный тип 4,15 ± 1,32 0,665 ± 0,012* 0,186 ± 0,010* 0,149 ± 0,009* -0,504 (±0,031)* 7,51 ± 4,46* 0,056 ± 0,006
Аэробный тип 3,11 ± 1,16 0,859 ± 0,019* 0,095 ± 0,008* 0,046 ± 0,007* -0,164 (±0,011)* 10,08 ± 4,51* 0,072 ± 0,011*
Примечание: p < 0,05 *при сравнении показателей с референсными значениями
Список литературы
1. Ардатская М.Д. Клиническое значение ко-роткоцепочечных жирных кислот при патологии желудочно-кишечного тракта: автореф. дисс. ... док. мед. наук. М., 2003. 45 с.
2. Блат С.Ф., Хавкин А.И. Микробиоценоз кишечника и иммунитет // Российский вестник перина-тологии и педиатрии. 2011. № 1. С. 66-72.
3. Конь И.Я., Сафронова Л.И., Сорвачева Т.Н., Куркова В.И., Тоболева М.А., Калашникова Г.В. и др. Состояние микрофлоры кишечника у детей 1-го года жизни в зависимости от вида вскармливания //Российский педиатрический журнал. 2002. № 1. С. 1-11.
4. Макарова С.Г., Намазова-Баранова Л.С. Кишечная микробиота и использование пробиотиков в практике педиатра. Что нового? //Педиатрическая фармакология. 2015. № 1. С. 38-45.
5. ОСТ 91500. 11. 0004-2003 «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника», утвержденный приказом № 231 Минздрава России от 09.06.2003.
6. Плоскирева А.А., Николаева С.В. Пробио-тическая поддержка питания- современный подход детской нутрициологии //Педиатрия. 2011. №5. С. 107-111.
7. Смирнова Г.И., Ляликова В.Б. Методы диагностики и лечения дисбактериоза у детей: Учебное пособие для врачей. Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова. М.-Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2012. 72 с.
8. Урсова Н.И. Формирование кишечного микробиоценоза: состояние проблемы // Вопросы современной педиатрии. 2011. № 4. С. 62-69.
9. Частоедова И.А. Гомеостаз пепсиногена, амилазы и щелочной фосфатазы у детей с эубиозом и дисбактериозом: дис. ... канд. мед. наук. Архангельск, 2001. 20 с.
10. Шендеров Б.А. Микробная экология человека и ее роль в поддержании здоровья// Метаморфозы. 2014. № 5. С. 72-80.
11. Guerin-Danan C., Andrieux C., Popot F., Charpilienne A., Vaissade P., Gaudichon C. et al. Pattern of metabolism and composition of the fecal microflora in infants 10 to 18 months old from day care centers //J Pediatr Gastroenterol Nutr. 1997. № 3. Р. 9-281.
12. Licciardi P. V., Sook-San Wong, Mimi L.K. Tang, Karagiannis Т.С. Epigenome targeting by probiotic metabolites // Gut Pathogens. 2010. Р. 2-24. http://www. gutpathogens.com/content/2/1/24 [cited 2015 June 2]. Available from: PubMed Resources Guide.
13. Penders J., Thijs C., Vink C., Stelma F., Snijders B. et. al. Factors influencing the composition of the intestinal microbiota in early infancy //Pediatrics. 2006. № 2. Р. 511-521.
14. ShidaK., NannoM. Probiotics and immunology: separating the wheat from the chaff //Trends in immunology. 2008. № 29. Р. 73-565.
Сведения об авторах
Носкова Ольга Юрьевна - ассистент кафедры семейной медицины и поликлинической терапии Кировской ГМА. E-mail: [email protected], тел. (8332) 64-07-37.
Григорович Марина Сергеевна - д.м.н., до-
цент, зав. кафедрой семейной медицины и поликлинической терапии Кировской ГМА. E-mail: kf25@ kirovgma.ru, тел. (8332) 64-07-37.
Ардатская Мария Дмитриевна - д.м.н., профессор, генеральный директор биохимической лаборатории ООО «Уни-мед», г. Москва. E-mail: ma@ uni-med.ru, тел. 8 (495) 146-80-34.
УДК: 616.61
Г.М. Хасанова12, А.Н. Хасанова1
ОСВЕДОМЛЕННОСТЬ НАСЕЛЕНИЯ Г. УФЫ О ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКЕ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ
Работа опубликована по материалам проекта, поддержанного ФГБУ Российский фонд фундаментальных исследований, проект № 15-04-20833
1Башкирский государственный медицинский университет (Уфа, Россия)
2Башкирский государственный университет (Уфа, Россия)
G.M. Khasanova12, A.N. Khasanova1
HEMORRHAGIC FEVER WITH RENAL SYNDROME AWARENESS AMONG UFA'S POPULATION
The study was supported by Federal State Budgetary Institution «Russian Fundamental Research Fund», project № 15-04-20833
1Bashkir State Medical University (Ufa, Russia) 2Bashkir State University (Ufa, Russia)
Широкое распространение ГЛПС, высокие показатели заболеваемости, которая сопровождается длительным периодом временной нетрудоспособности, обуславливают высокую социальную и медицинскую значимость ГЛПС в РБ, а также определяют необходимость оптимизации профилактики данного заболевания. Здесь на первое место выходит своевременное и полное информирование населения о заболевании. Цель исследования - изучить уровень знаний населения о ГЛПС. Всего было опрошено 448 человек в возрасте от 18 до 60 лет. Анкета была разделена на 2 тематических блока: 1) знания населения о ГЛПС; 2) источники информации о ГЛПС. Анализ результатов исследования показал неплохой уровень знания населения о путях передачи ГЛПС, но горожане практически не знают о том, что переносчиками геморрагической лихорадки с почечным синдромом помимо мышей могут быть другие мышевидные грызуны. Население плохо осведомлено о первых симптомах ГЛПС и об осложнениях при данном заболевании. Этим фактом можно объяснить позднее обращение за медицинской помощью больных ГЛПС.
В качестве основного источника информации о ГЛПС уфимцы выделили родственников и знакомых - 58,2%. Информацию в лечебно-профилакти-
