CC BY
26
Приложение 1
Использование плазмафереза с целью коррекции реперфузионной травмы при трансплантации почки
Салимов Э.Л., Рагимов А.А., Каабак, М.М., Байрамалибейли И.Э., Нечаев И.А. Кафедра клинической трансфузиологии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России, Москва
Введение. Одна из центральных ролей в развитии синдрома ишемии-реперфузии (И/Р) принадлежит циркулирующим факторам, таким как хемокины, цитокины и молекулы адгезии, которые регулируют процесс проникновения лейкоцитов в травмированный орган.
Цитокины - низкомолекулярные белки, чья биологическая активность осуществляется через специфические рецепторы, расположенные на клеточных мембранах. Именно цитокины являются медиаторами первого ряда, которые сами способны вызывать каскады гуморальных реакций.
Коррекция синдрома ишемии-реперфузии с помощью плазмафереза осуществляется благодаря снижению иммунного ответа организма в ранние сроки после экспозиции ал-лоантигенов путем удаления циркулирующих цитокинов и хемокинов, т.е. происходит минимизация последствий репер-фузионного повреждения вследствие снижения интенсивности развития процессов, приводящих к усилению иммуно-генности трансплантата.
Материалы и методы. Оценка эффективности использования плазмафереза после пересадки трупной почки для коррекции реперфузионного повреждения основана на наблюдении за 15 больными, которым проводился интраопера-ционный плазмаферез с заменой 1 объема циркулирующей плазмы. В качестве замещения использовали 10% альбумин с физиологическим раствором (1:1) и свежезамороженную
донорскую плазму. Контрольную группу составили 15 реципиентов парных почек, плазмаферез которым не проводили.
Результаты и обсуждение. Следует полагать, что чем менее выражена степень реперфузионного синдрома, тем скорее восстанавливается функция пересаженной почки. Именно исходя из этого положения мы взяли следующие критерии для оценки эффективности проводимого плазмафереза: диурез в течение первых 24 ч, количество сеансов гемодиализа после операции, время субнормализации концентрации кре-атинина крови (Сгр < 3 мг%). В основной группе первичная функция трансплантата была лучше, чем в соответствующей контрольной: диурез в 1-е сутки после операции - 2636 против 2104 мл в контрольной группе; снижение креатинина до 3 мг% наступило через 12,8 против 18,6 сут в контроле (р < 0,05); количество сеансов гемодиализа на одного больного в послеоперационном периоде составило 0,83 против 2,21 в контроле (р < 0,05); количество больных с послеоперационным гемодиализом - 40 против 67% в контроле (р < 0,05).
Заключение. Сравнение обеих групп показало, что начальная функция трансплантированной почки была значительно лучше в основной группе. Таким образом, можно говорить об эффективности использования интраопера-ционного плазмафереза после трансплантации почки для коррекции посттрансплантационного синдрома ишемии-реперфузии.
Мезенхимные стволовые клетки, экспрессирующие чужеродный ген, отторгаются при переносе в организм
Сац Н.В., Шипунова И.Н., Костюшев Д.С., Дризе Н.И. ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России, Москва
Введение. Мезенхимные стволовые клетки (МСК) переносят кроветворное микроокружение и являются привлекательным объектом для генотерапии. Считается, что они им-мунотолерантны и длительно функционируют в организме реципиента. Маркирование МСК открывает новые возможности для изучения отдела стволовых клеток стромы. Так как МСК редко делятся в условиях физиологической стабильности, для переноса маркерного гена в них удобно использовать векторную систему на основе лентивирусов.
Цель работы. Изучить судьбу МСК, несущих ген зеленого флюоресцентного белка (EGFP), в организме реципиента.
Материалы и методы. МСК мыши в длительной культуре костного мозга инфицировали лентивекторами, несущими ген EGFP с активным или инактивированным промотором. Маркированные МСК имплантировали под капсулу почки сингенных мышей. В очагах эктопического кроветворения, образованных из МСК, анализировали долю маркированных колониеобразу-ющих единиц фибробластов (КОЕф) методом ПЦР.
Результаты и обсуждение. Доля в культуре маркированных клеток, экспрессирующих ЕGFP, составила 43,3 ± 11%, а КОЕф, полученных из подслоя, - 32 ± 4,3%. При имплантации таких подслоев под капсулу почки образовывались очаги эктопического кроветворения, в которых не всегда выявлялись маркированные стромальные клетки. Ни в одном эксперименте не обнаружены светящиеся клетки. В очагах эктопического кроветворения, образованных МСК, несущими ген EGFP, было выявлено 6,3 ± 2,8% КОЕф. При использовании ленти-вектора, несущего ген ЕGFP с инактивированным промотором, обнаруживалось 68 ± 6% маркированных КОЕф. В обоих случаях флюоресцентный белок в КОЕф не обнаружен.
Заключение. Процент КОЕф, маркированных EGFP с активным промотором, снижен в 10 раз, что указывает на возможное иммунологическое отторжение клеток с чужеродным белком. При использовании МСК, несущих встроенный ген интереса, необходимо включать анализ на их иммуното-лерантность.
Ингибиторы защитных систем клетки усиливают эффект противолейкозных лекарственных средств in vitro
Свирновский А.И., Пасюков В.В., Дрейчук Н.А., Тарас И.Б., Федуро Н.А., Сергиевич О.В. ГУ Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий, Минск, Беларусь
Введение. При повреждении опухолевых клеток в них запускаются несколько репаративных систем, восстанавливающих определенный тип повреждений, что вносит вклад в формирование устойчивости опухолевых клеток к терапии.
Цель работы. Оценить возможность модификации лекарственной резистентности клеток хронического лим-фоцитарного лейкоза (ХЛЛ) в присутствии ингибиторов
выведения из клетки цитостатиков, их детоксикации и репарации ДНК.
Материалы и методы. В культуре клеток ХЛЛ определяли их чувствительность к повреждению в условиях соче-танного воздействия лекарственных средств, циклоспорина А, бутионин сульфоксимина, кофеина, ванилина, Ки 7026 и CGK 733 с помощью проточной цитофлюориметрии и теста на цитотоксичность.
