60МЕТОДИКА ВСКРЫТИЯ И ИЗВЛЕЧЕНИЯ ОРГАНОВ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ. СООБЩЕНИЕ 6: КАРЛИКОВЫЕ
СВИНЬИ
Е.В. Беляева, ветеринарный врач-патоморфолог отдела гистологии и патоморфологии, Ж.Ю. Устенко, ветеринарный врач-патоморфолог отдела гистологии и патоморфологии, Я.А. Гущин, руководитель отдела
гистологии и патоморфологии
НПО «Дом Фармации», 188663, Россия, Ленинградская обл., Всеволожский р-н, г.п. Кузьмоловский, ул. Заводская, д. 3, корп. 245
Е-шяИ: [email protected]
Резюме. Представлено 6-е сообщение из цикла статей по методологии вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Подробно описывается и иллюстрируется методика последовательного и полного вскрытия и извлечения органов карликовых свиней. В настоящее время карликовые свиньи широко используются в биомедицинских исследованиях в качестве лабораторных животных, так как они по своим анатомическим и физиологическим особенностям наиболее близки к человеку. Карликовые свиньи считаются одной из основных моделей изучения инсульта, диабета, трансплантации органов, хирургических методов лечения, а также они используются для тестирования фармацевтических препаратов и биомеханических устройств. Кроме того, данные животные как лабораторные участвуют в исследованиях строения и физиологии кожи, сердечно-сосудистой, пищеварительной и мочевой систем. Размеры и масса карликовых свиней идеально подходят для моделирования многих патологий, что позволяет в достаточном количестве отбирать материал, в частности внутренние органы, кровь или другие жидкости организма, для дальнейших лабораторных исследований. В статье поэтапно описана методика вскрытия трупа животного от процедуры подготовки к вскрытию, внешнего осмотра, отбора молочных желез и кожи, последовательного вскрытия и осмотра грудной и брюшной полостей до извлечения отдельных систем и органов. Описаны и проиллюстрированы возможные методы извлечения органов ротовой полости, всех органов грудной, брюшной и тазовой полостей; представлен также наиболее быстрый и эффективный способ изъятия головного мозга из черепной коробки без его повреждения. Продемонстрированы методы извлечения глаза вместе с глазным нервом, мышц и прилежащих к ним периферических нервов. Все способы извлечения органов, а также последовательность выполняемых действий, описанные в данной статье, обеспечивают минимизацию повреждений извлекаемых органов, предотвращение их загрязнения. Тщательное выполнение указанных рекомендаций позволит избежать возникновения некоторых артефактов,
которые могут выявится при последующем гистологическом исследовании и оказать влияние на полученные результаты.
Ключевые слова: некропсия, патоморфология.
Для цитирования: Беляева Е.В., Устенко Ж.Ю., Гущин Я.А. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 6: карликовые свиньи. Лабораторные животные для научных исследований.
2019; 4: https://doi.org/10/29926/2618723X-2019-04-08
TECHNIQUE OF DISSECTION AND EXTRACTING ORGANS OF LABORATORY ANIMALS. MESSAGE 6 - MINIPIGS E.V. Belyaeva, J.U. Ustenko, Ya.A. Guschin
Research-and-manufacturing company «Home Of Pharmacy», b. 245, 3, st. Zavodskaya, Kuzmolovskiy, Vsevolozhskiy district, Leningrad region, 188663,
Russia
Е-mail: [email protected]
Abstract. The sixth report from a series of articles on the methodology of necropsy and organ extraction o laboratory animals is presented. The report describes and illustrates in detail the methodology for sequential and complete necropsy and organ extraction of miniature pigs. Currently, miniature pigs are widely used in biomedical research as laboratory animals, since their anatomical and physiological characteristics are most similar to human ones. Miniature pigs are considered among the basic models for studying stroke, diabetes, organ transplantation, surgical treatment methods, and also used for testing of pharmaceutical products and biomechanical devices. Also, these animals are essential in studies of the structure and physiology of skin, cardiovascular, digestive and urinary systems. The size and weight of minipigs are perfect for modeling of many pathologies. Also they provide a sufficient amount of biomaterial, e.g. nternal organs, blood or other body fluids, for further laboratory researches. This article describes the step-by-step procedure of animal necropsy from preparation, external examination, sampling of mammary glands and skin, sequential opening and examination of the thoracic and abdominal cavities, and to the extraction of separate systems and organs. Possible methods of extracting organs of the oral cavity, thoracic, abdominal and pelvic cavities are described and illustrated, and the fastest, most effective and safe method of extraction of the brain from the cranial cavity is presented. The methods of eye extraction along with the optic nerve and the extraction of muscles and adjacent peripheral nerves are demonstrated. All methods of organ extraction, as well as the sequence of actions described in this article minimize damage of harvested organs and prevent their contamination in order to avoid the formation of some artifacts, which might be found during subsequent histological examination and could lead to conflicting results.
Key words: necropsy, pathomorphology.
For citation: Belyaeva E.V., Ustenko J.U., Guschin Ya.A. Technique оf Dissection а^ Extracting Organs оf Laboratory Animals. Message 6 -Minipigs. Laboratory Animals for Science. 2019; 4 https://doi.org/10/29926/2618723X-2019-04-08
ВВЕДЕНИЕ
После одомашнивания свиньи широко использовались в сельском хозяйстве, а также содержались в качестве домашних животных. В последнее время свиней все чаще стали привлекать для участия в биомедицинских исследованиях, поскольку они имеют некоторые физиологические и анатомические сходства с таковыми у людей [1-6]. Использовать свиней в качестве лабораторных животных, в основном в области доклинических исследований, стали особенно широко с начала 1980-х годов [7].
По сравнению с другими лабораторными животными (например, крысами, мышами, кроликами и пр.), домашние сельскохозяйственные свиньи намного крупнее (масса тела может достигать 300 кг и больше). Они требуют больше места и значительное количество корма, что вызывает определенные трудности в содержании животных в условиях вивария. Поэтому карликовые свиньи наиболее подходят для исследовательских целей [1].
Карликовых свиней применяют для изучения влияния различных факторов на сердечно-сосудистую, покровную, мочевую и пищеварительную системы. Так, например, вследствие высокого сходства кровоснабжения миокарда и проводящей системы сердца с человеком, свиньи широко используются в качестве моделей для экспериментального инфаркта миокарда и аритмий. Кроме того, с их участием проводят исследования сердечной недостаточности, атеросклероза, аневризм, сосудистых трансплантатов и биомеханических клапанов сердца. За счет особенностей строения кожи, схожих с таковыми у человека, на карликовых свиньях изучают заживление ран, пластическую и реконструктивную хирургию. Анатомическая структура почек свиней более схожа с человеком, чем у других лабораторных животных, что позволяет использовать данные, полученные при изучении выделительной системы свиней, в медицине для проведения хирургических операций на почках, а также при изучении патогенеза и терапии гидронефроза и почечной гипертонии. Карликовые свиньи также могут быть полезны при изучении всасывания питательных веществ в органах пищеварительной системы, патогенеза различных желудочно-кишечных заболеваний[1, 5-7].
Кроме того, они используются и в качестве моделей для изучения инсульта, диабета, токсикологии, бактериального шока, а также для исследования стволовых клеток. Свиньи являются уникальными моделями в изучении хирургии, трансплантации органов, эндоскопических и лапароскопических методов, а также в доклинических исследованиях при тестировании фармацевтических препаратов и биомеханических устройств [1, 4, 7].
Как указывалось в предыдущих статьях данного цикла [8-12], некропсия и последующее гистологическое исследование органов и тканей являются основными методами изучения токсичности, без которых невозможна адекватная оценка результатов эксперимента.
Цель данной работы - разработка методики вскрытия и извлечения органов карликовых свиней.
Разработка данной методики в НПО «Дом Фармации» проводилась на 6 самцах и 6 самках карликовых свиней [13]. Масса исследованных животных составляла: самцов - 30-32 кг, самок - 30-38 кг. Для исследования использовали животных, подлежащих эвтаназии в ходе текущих экспериментов. Специально для отработки методики некропсии животных не эвтаназировали.
Животные были подвергнуты эвтаназии с помощью передозировки анестетиком - препаратами Ксила и Золетил [14, 15]. После констатации факта смерти проводили некропсию с дальнейшим извлечением органов и тканей [16-20].
МЕТОДИКА ВСКРЫТИЯ И ИЗВЛЕЧЕНИЯ ОРГАНОВ
1. Провести общий осмотр животного на наличие внешних изменений кожного покрова, слизистых оболочек, обнаружения любого рода повреждений.
2. Положить труп животного на спину (рис. 1). Для удобства и придания устойчивости трупу в спинном положении надрезают кожу, мышцы и связки между грудными конечностями и грудной клеткой, а также в области тазобедренных суставов с таким расчетом, чтобы раскинутые в стороны конечности удерживали туловище на спине (рис. 2-4). Производить разрезы следует аккуратно, не задевая органы и ткани, необходимые для исследования.
Рис. 1. Придание положения трупу
спинного Рис. 2. Линия разреза кожи, мышц и связок между правой грудной конечностью и грудной клеткой для придания устойчивости трупу в положении на спине. По аналогии производить разрез с левой стороны
Рис. 3. Линия разреза кожи, мышц и связок в области тазобедренного сустава с правой стороны для придания устойчивости трупу в спинном положении. По аналогии производить разрез с левой стороны
Рис. 4. Вид после разрезов: раскинутые в стороны конечности удерживают туловище на спине
Захватить и приподнять кожу с подлежащей подкожной клетчаткой в каудальной части живота, надрезать ее и сделать продольный разрез по белой линии живота от паха до основания нижней челюсти таким образом, чтобы брюшная стенка осталась неповрежденной. В случае необходимости отбора тканей молочных желез необходимо производить разрезы кожи по бокам белой линии вдоль молочных желез от лонной области до области мечевидного хряща (рис. 5-7).
Рис. 5. Отбор тканей молочной железы: разрезы кожи по бокам белой линии вдоль молочных желез от лонной области до области мечевидного хряща
Рис. 6. Отбор тканей молочной железы
Рис. 7. Отбор тканей молочной железы: брюшная стенка остается неповрежденной_
5. При помощи ножниц или скальпеля отсепарировать кожу и подкожную клетчатку, далее оттянуть кожные лоскуты. При необходимости произвести отбор наиболее тонкого участка кожи.
6. Для вскрытия брюшной полости необходимо сделать разрез мышечной стенки от паха вдоль средней линии, приподняв участок брюшной стенки (рис. 8, 9).
■й! ■%' I Л^
Рис. 8. Вскрытие брюшной полости: начало разреза мышечной стенки
^_&_Шшш
Рис. 9. Вскрытая брюшная полость
7. Грудную полость необходимо вскрыть 2 разрезами (слева и справа) по бокам от грудины, перерезая мягкие ткани и реберные хрящи (рис. 10). Аккуратно отделяя плевру и перикард, удалить грудную кость
Рис. 10. Вскрытие грудной полости: по бокам от грудины аккуратные разрезы мягких тканей и реберных хрящей
Рис. 11 . Вскрытие грудной полости: аккуратное отделение грудины от плевры и перикарда
Рис. 12. Вскрытая грудная полость
8. Извлечь подчелюстные лимфатические узлы (рис. 13, 14).
Рис. 13. Область шеи, кожа и подкожная жировая клетчатка удалены: подчелюстные лимфатические узлы обведены синим пунктиром_
Рис. 14.
лимфатические
извлечения
Подчелюстные узлы после
9. Удалить мышцы, лежащие над трахеей. Извлечь доли тимуса, учитывая, что на вершине шейных долей располагаются бобовидные паращитовидные железы (рис. 15, 16). Извлечь щитовидную железу (рис. 17, 18).
Рис. 15. Топографическое расположение органов шеи: щитовидная железа обведена желтым пунктиром, доли тимуса -синим
Рис. 16. Топографическое расположение паращитовидной железы (на примере левой стороны): орган имеет бобовидное строение и располагается на вершине шейной доли тимуса_
Рис. 17. Топографическое расположение щитовидной железы после извлечения тимуса_
Рис. 18. Извлечение щитовидной железы
10. Для извлечения языка и глотки сделать разрезы дна ротовой полости, уздечки языка (рис. 19, 20). После этого захватить отсепарированные мышцы и язык и оттянуть каудально (рис. 21). Далее сделать надрез в области твердого неба у входа в глотку, сохранив целостность глотки (рис. 22) и отделить язык вместе с глоткой.
Рис. 19. Извлечение языка: разрез дна ротовой полости
МЁ
Рис. 20. Извлечение языка: разрез здечки языка
Рис. 21. Извлечение языка и глотки: Рис. 22. Извлечение языка и глотки:
отсепарированные мышцы и язык оттянуты каудально
линия надреза в области твердого неба у входа в глотку, позволяющая сохранить целостность глотки
11. Для извлечения сердца, участка аорты, легких, участка трахеи и пищевода перерезать зафиксированные пинцетом трахею, пищевод и аорту в области шеи (рис. 23). Затем аккуратно подтягивать органокомплекс каудально, после чего перерезать трахею, аорту и пищевод в области диафрагмы (рис. 24) и извлечь органокомплекс (рис. 25). Перерезав удерживающие сердце сосуды отделить орган (рис. 26), а затем - пищевод (рис. 27) и аорту (рис. 28). На рис. 29, 30 показаны сердце и легкие с трахеей после извлечения.
Рис. 23. Извлечение
органокомплекса: пинцетом
захвачены трахея, пищевод и аорта
Рис. 24.
органокомплекса
Извлечение
Рис. 25. Органокомплекс после извлечения: легкие, трахея, сердце, аорта, пищевод_
Рис. 26. Отделение сердца: перерезка сосудов, удерживающих сердце_
Рис. 27. Отделение пищевода
Рис. 28. Отделение аорты
Рис. 29. Сердце после извлечения
Рис. 30. Легкие с трахеей после извлечения
12. Извлечь участок поджелудочной железы, лежащий в брыжейке двенадцатиперстной кишки (рис. 31, 32). Далее извлечь селезенку, расположенную в области левого подреберья брюшной полости, отделив от нее сосуды, связки и брыжейки (рис. 33, 34).
Рис. 31. Извлечение селезенки и поджелудочной железы: желтым пунктиром обведена поджелудочная железа
Рис. 32. Извлечение поджелудочной железы
участка
13. Извлечь желудок, отделив его в краниальной части от пищевода (рис. 35), а в каудальной - от двенадцатиперстной кишки (рис. 36). Сделать разрез желудка по большой кривизне (рис. 37) и прополоскать в физиологическом растворе, освободив от содержимого (рис. 38). Обратите внимание, что после вскрытия желудка нельзя прикасаться к его слизистой оболочке, для промывания захватить его с внешней стороны (со стороны серозной оболочки).
Рис. 35. Отделение желудка от пищевода
Рис. 36. Отделение желудка от двенадцатиперстной кишки_
Рис. 37. Разрез желудка по большой Рис. 38. Желудок после извлечения и
кривизне
промывания
14. Извлечь фрагменты тонкой и толстой кишки длиной 4-5 см: тонкую - отступив от желудка (рис. 39); толстую - извлечь часть ободочной кишки (рис. 40). После извлечения отделить от окружающих тканей и освободить от содержимого, прополоскав в физиологическом растворе.
Рис. 39. Иссечение фрагмента тонкой кишки (двенадцатиперстной, отходящей от желудка)_
Рис. 40. Извлечение ободочной кишки
участка
15. Извлечь печень вместе с желчным пузырем. Для этого перерезать удерживающие орган серозные связки: венечную, прикрепляющуюся к диафрагме, почечно-печеночную, желудочно-печеночную и печеночно-двенадцатиперстную (рис. 41, 42). После взвешивания отбирается по кусочку размером около 3х3 см от каждой доли, а также участок, к которому прилежит желчный пузырь.
Рис. 41. Извлечение печени: иссечение венечной связки, прикрепляющейся к диафрагме
Рис. 42. Извлечение печени: иссечение почечно-печеночной, желудочно-печеночной и печеночно-двенадцатиперстной связок_
16. Органокомплекс переложить дорсальной стороной вверх. Отделяя от окружающей жировой ткани, извлечь продолговатые, часто крючковидные, надпочечники, лежащие параллельно аорте (рис. 43, 45). Отделить почки от окружающей жировой клетчатки и, аккуратно
Рис. 43. Извлечение надпочечников: синим пунктиром отмечена область расположения надпочечника,
имеющего неправильную форму
Рис. 44. Извлечение почки
ШШ | ^^НЕр Я Щрг 4 ^рг * 1 ЙЪ Г* . -
[Д Ц Р и 6 1 5 |щ
Рис. 45. Почки и надпочечники после извлечения
17. При необходимости исследования мочи провести ее отбор при помощи шприца перед иссечением мочевого пузыря. Извлечь орган, перерезав шейку пузыря (рис. 46).
18. У самцов можно извлечь мочевой пузырь в органокомплексе с семенными пузырьками, предстательной железой и частью уретры (рис. 47, 48). Затем отделить семенные пузырьки (рис. 49, 52), предстательную железу (рис. 50, 53), мочевой пузырь (рис. 51).
Рис. 46. Извлечение мочевого пузыря, перерезая его шейку
Рис. 47. Извлечение
органокомплекса: мочевой пузырь, семенные пузырьки, предстательная железа, часть уретры
Извлеченный
Рис. 49. Отделение семенных
органокомплекс: мочевой пузырь, семенные пузырьки, предстательная
пузырьков
Рис. 50. Отделение предстательной железы от уретры
Рис. 52. Семенные пузырьки после извлечения
Рис. 51 . Отделение мочевого пузыря от уретры
Рис. 53. Предстательная железа после извлечения
19. У самцов отделить семенники вместе с придатками (рис. 54), отделить придатки от семенников (рис. 55, 56).
Рис. 54. Извлечение семенников вместе с придатками
Рис. 55. Отделение придатка от семенника
Рис. 56. Семенник и придаток семенника после извлечения и отделения 20. У самок извлечь матку с правым и левым яичниками (рис. 57, 58); отделить яичники от матки (рис. 59, 60).
Рис. 57. Извлечение матки с правым и левым яичниками
Рис. 58. Матка и яичники после извлечения
Рис. 59. Отделение яичников от рогов матки
Рис. 60. Яичники после извлечения
21. Извлечение глаза вместе со зрительным нервом. Сделать круговой надрез кожи вокруг глаза (рис. 61 ). Далее, удерживая подлежащие глазу ткани пинцетом, постепенно надрезать их (рис. 62), извлекая глазное яблоко и зрительный нерв
Рис. 61 . Извлечение правого глаза: удаление век
Рис. 62. Извлечение правого глаза: постепенное надрезание подлежащих глазу тканей_
Рис. 63. Глаз и участок глазного нерва (синий пунктир) после извлечения
Рис. 67. Извлечение головного мозга:
22. Извлечение головного мозга осуществляется следующим образом. Отсепарировать кожу и подлежащие мягкие ткани от затылка до носовой кости (рис. 64, 65). Для удобства при помощи кусачек удалить скуловые отростки височной кости (рис. 66), вскрыть черепную коробку тремя распилами (рис. 67, 68, 69). После вскрытия черепа удалить черепную коробку, аккуратно удалить твердую мозговую оболочку и извлечь головной мозг (рис. 70, 71
Рис. 64. Извлечение головного мозга: удаление кожи черепа
Рис. 65 - Извлечение головного мозга: удаление подлежащих мягких тканей
Рис. 66. Извлечение головного мозга: удаление скулового отростка височной кости
первая линия распила - на уровне между центрами правой и левой глазницы
Рис. 68. Извлечение головного мозга: следующие две линии распила (с правой и левой стороны) - на уровне между центром глазницы и
отверстием слухового прохода
Рис. 70. Извлечение головного мозга: вскрытая черепная коробка, головной мозг в твердой мозговой оболочке
Рис. 69. Извлечение головного мозга: четвертая линия распила - на затылочной кости, на уровне между отверстиями слуховых проходов, выше большого отверстия_
Рис. 71 . Головной мозг после извлечения
23. Извлечь скелетную мышцу и периферический нерв (на примере мышц бедра и седалищного нерва). Для этого сделать глубокий разрез кожи по задней поверхности бедра, отпрепарировать кожу и фасции, в тупую раздвинуть мышцы, обнажив нерв. Извлечь скелетную мышцу и нерв (рис. 72-76).
Рис. 72. Извлечение скелетной Рис. 73. Получение доступа к мышцы и периферического нерва на седалищному нерву примере ягодично-двуглавой мышцы и седалищного нерва: линия разреза кожи и мышц
Рис. 74. Извлечение седалищного Рис. 75. Извлечение участка
нерва_ягодично-двуглавой мышцы_
24. Извлечение спинного мозга из спинномозгового канала. При необходимости, предусмотренной планом исследования, извлечь определенный участок позвоночника. Для извлечения спинного мозга необходимо рассечь вдоль позвоночника мышцы спины, пересечь с обеих сторон поперечные отростки позвонков, ребра, после чего максимально очистить позвоночный столб от мягких тканей, а затем произвести распилы костной ткани, удалив тела позвонков, что открывает доступ к спинному мозгу.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ Предложенная нами методика позволяет:
1) Обеспечить полное и последовательное вскрытие лабораторных животных для детального исследования всех полостей, систем органов, органов, тканей и различных частей тела животного;
2) Провести извлечение всех необходимых органов и тканей, предусмотренных планом исследования;
3) Минимизировать в процессе некропсии потенциальные повреждения и избежать загрязнения органов и тканей, исключив таким образом возможность возникновения некоторых артефактов, которые обнаруживаются в процессе последующего гистологического исследования.
ЛИТЕРАТУРА
1. Gutierrez K., Dicks N., Glanzner W.G., Agellon L.B., Bordignon V. Efficacy of the porcine species in biomedical research. Frontiers in Genetics. 2015; 6. DOI: 10.3389/fgene.2015.00293.
2. Marchant-Forde J. N., Herskin M. Pigs as laboratory animals. Advances in Pig Welfare. 2018: 445-76. DOI: 10.1016/B978-0-08-101012-9.00015-0.
3. Nunoya T., Shibuya K., Saitoh T., Yazawa H., Nakamura K., Baba Y., Hirai T. Use of miniature pig for biomedical Research with reference to toxicologic studies. Journal Toxicology Pathology. - 2007; 20: 125-32.
4. Rozkot M., Vaclavkova E., Belkova J. Minipigs as laboratory animals - review. Researchin breeding, 9. 2015; 2: 10-4.
5. Bode G., Clausin P., Gervais F., Loegsted J., Luft J., Nogues V., Sims J. The utility of the minipig as an animal model in regulatory toxicology. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 2010; 62: 196-220.
6. Swindle M. M., Makin A., Herron A. J., Clubb Jr F. J., Frazier K. S. Swine as models in biomedical. Research and Toxicology Testing. Veterinary Pathology. 2012; 49 (2): 344-56. OI: 10.1177/0300985811402846
7. Smith A.C., Swindle M.M. Preparation of Swine for the Laboratory. ILAR Journal. 2006; 47 (4): 358-63. DOI: 10.1093/ilar.47.4.358.
8. Коптяева К.Е., Мужикян А.А., Гущин Я.А., Беляева Е.В., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 1: крыса. Лабораторные животные для научных исследований. 2018; 2; 71-92. [Koptyaeva K.E., Muzhikyan A.A., Guschin Ya.A., Belyaeva E.V., Makarova M.N., Makarov V.G. Technique of dissection and extracting organs of laboratory animals. Massage 1: rat. Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii. 2018; 2: 71-92 (in Russ)]. DOI: 10.29296/ 10.29296/2618723X-2018-02-08.
9. Коптяева К.Е., Мужикян А.А., Гущин Я.А., Беляева Е.В., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 2: мышь. Лабораторные животные для научных исследований. 2018; 4: 50-73. [Koptyaeva K.E., Muzhikyan A.A., Guschin Ya.A., Belyaeva E.V., Makarova M.N., Makarov V.G. Technique of dissection and extracting organs of laboratory animals. Massage 2: mouse. Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii. 2018; 4: 50-73 (in Russ)]. DOI: 10.29296/2618723X-2018-04-05.
10. Коптяева К.Е., Мужикян А.А., Гущин Я.А., Беляева Е.В., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 3: хомячок. Лабораторные животные для научных исследований. 2019; 1: 50-73. [Koptyaeva K.E., Muzhikyan A.A., Guschin Ya.A., Belyaeva E.V., Makarova M.N., Makarov V.G. Technique of dissection and extracting organs of laboratory animals. Massage 3: hamster. Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii. 2019; 1: 50-73 (in Russ)]. DOI: 10.29296/2618723X-2019-01-02.
11. Коптяева К.Е., Мужикян А.А., Гущин Я.А., Беляева Е.В., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 4: морская свинка, песчанка, дегу. Лабораторные животные для научных исследований. 2019; 2: 50-73. [Koptyaeva K.E., Muzhikyan A.A., Guschin Ya.A., Belyaeva E.V., Makarova M.N., Makarov V.G. Technique of dissection and extracting organs of laboratory animals. Massage 4:
12. guinea pig, gerbil, degu. Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii. 2019; 2: 50-73 (in Russ)]. DOI: 10.29296/2618723X-2019-02-05.
13. Коптяева К.Е., Устенко Ж.Ю., Беляева Е.В., Гущин Я.А., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Методика вскрытия и извлечения органов лабораторных животных. Сообщение 5: кролик, хорек. Лабораторные животные для научных исследований. 2019; 3. [Koptyaeva K.E., Ustenko J.U., Belyaeva E.V., Guschin Ya.A., Makarova M.N., Makarov V.G. Technique of dissection and extracting organs of laboratory animals. Massage 4: Rabbit, ferret. Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii. 2019; 3 (in Russ)]. DOI: 10.29296/2618723X-2019-03-05.
14. Мужикян А.А., Макарова М.Н., Гущин Я.А. Особенности патологоанатомического исследования группы экспериментальных животных. Международный вестник ветеринарии. 2014; 1: 75-80. [Muzhikyan A.A., Makarova M.N., Guschin Ya.A. Features of the pathoanatomical study of a group of experimental animals. Mezhdunarodnyi vestnik veterinarii. 2014; 1: 75-80 (in Russ)].
15. Рыбакова А.В., Макарова М.Н. Методы эвтаназии лабораторных животных в соответствии с европейской директивой 2010/63. Международный вестник ветеринарии. 2015; 2: 96-107. [Rybakova A.V., Makarova M.N. Methods of euthanasia for laboratory animals in accordance with European Directive 2010/63. Mezhdunarodnyi vestnik veterinarii. 2015; 2: 96-107 (in Russ)].
16. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals: 2013 Edition. American Veterinary Medical Association, Schaumburg, IL 2013.
17. McDonough S.P., Southard T (Ed.). Necropsy Guide for Dogs, Cats, and Small Mammals, First Edition. John Wiley & Sons. 2017: 21-150.
18. McInnes E. (Ed.). Pathology for Toxicologists: Principles and Practices of Laboratory Animal Pathology for Study Personnel. Chichester: John Wiley & Sons. 2017: 25-6.
19. Parkinson C. et al. Diagnostic necropsy and selected tissue and sample collection in rats and mice. Journal of Visualized Experiment. 2011; 54: 2-7. DOI: 10.3791/2966.
20. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice - Part 1. Experimental and Toxicologic Pathology. 2003; 55: 91-106. DOI: 10.1078/0940-2993-00311.
21. King J.M., Roth-Johnson L., Dodd D. C., Newsom M.E. The necropsy book. College of Veterinary Medicine Cornell University. Ithaca, New York. 2013, 7th Ed.: P.248.
