CC BY
57
и интенсивность гистогенеза твердых тканей, можно сделать вывод, что наименьший обьем сосуды занимают в зонах с менее активным дентиногенезом, т.е. в при-шеечых зонах и в межбугорном участке (место формирования фиссуры), что также наблюдали другие исследователи [2,8]. В пришеечных зонах обьем сосудов составляет 10,93+0,30%* и 9,80+,22%*, что сопоставимо с обьемом сосудов в межбугорном участке 11,40+0,25%*. По нашему мнению, это отражает фило-
генетические закономерности формирования многокорневых зубов. Мы придерживаемся точки зрения, что многокорневые зубы в процессе эволюции сформировались путем слияния однокорневых зубов (одонтоме-ров по Б.С. Матвееву) [5], и фиссура является границей слияния одонтомеров. Низкая интенсивность гистогенеза в пришеечных зонах и в области будущихй фиссур, и, как следствие, меньшийобьем сосудов в этих местах является косвенным подтверждением этой теории.
MORPHOGENESIS DYNAMICS OF BLOOD VESSEL IN MULTIROOTED MILK TEETH RUDIMENTS
G.G. Manashev (Krasnoyarsk State Medical Academy)
The evaluation of angioarchitecture changes in milk-molar rudiments during pre-natal ontogenesis period was done. It was shown, that the main regularities of volume redistribution of blood vessels in teeth rudiments conform to phylogenetic principles of multirooted teeth forming.
ЛИТЕРАТУРА
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: Руководство. — М.: Медицина, 1990. — 384 с.
2. Варшавский А.И. О венозных структурах зачатков молочных зубов человека. // Труды Поволжской. конф. физиологов, биохимиков, фармакологов с участием морфологов. — Ярославль, 1969. — С.426-427.
3. Вейбель Э.Р. Морфометрия легких человека. — М.: Медицина, 1970. — 176 с.
4. Гемонов В.В. Вопросы морфогенеза зубов человека в процессе их эмбрионального развития. // Стоматология. — 1999. — №1. — С.12-15.
5. Матвеев Б. С. Происхождение зубов млекопитающих по данным онтогенеза. // Сб. тр. V сьезда анатомов, гистологов и эмбриологов. — М., 1951. — С.202-205.
6. Милли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия: Пер. с нем. - М.: Медицина, 1969. — 283 с.
7. Фалин Л.И. Эмбриология человека: Атлас. — М.: Медицина, 1976. — 543 с.
8. Шукаева В.М. Органогенез молочных зубов нижней челюсти в связи с развитием их артериального кровоснабжения в период антенатального онтогенеза человека: Дис. ... канд. мед. наук. — Смоленск, 1972. — 183 с.
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ
© ЛУБСАНДОРЖИЕВА П.Б., АЖУНОВА Т.А., ШАНТАНОВА Л.Н., МУХАНОВА Л.Х., УНАГАЕВА А.А., НИКОЛАЕВ С.М. -
МЕТОДИКА СТАНДАРТИЗАЦИИ АНТИЯЗВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СБОРА
П.Б. Лубсандоржиева, Т.А. Ажунова, Л.Н. Шантанова, Л.Х. Муханова, А.А. Унагаева, С.М.Николаев
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, директор — чл. — корр. РАН проф. В.М. Корсунов, г. Улан-Удэ)
Резюме. На основе данных о количественном содержании биологически активных веществ в 9 — компонентном антиязвенном сборе и степени извлечения предложена методика его стандартизации. Обоснован выбор стандартного вещества для анализа, оптимальных параметров экстракции сбора для определения флавоноидов. Ключевые слова. Антиязвенный сбор, биологически активные вещества, флавоноиды.
Лeкаpствeнныe сбopы являются наиболее пoпyляp-ной и ш^око используемой фopмoй пepepабoтки ле-каpствeннoгo pаститeльнoгo сьфья (ЛРС). Пepспeктив-ность научным исследований в области pазpабoтки ле-каpствeнныx сбopoв oпpeдeляeтся не только ж тepапeв-
тической ценностью, но и наличием в России достаточной сырьевой базы по многим видам лекарственных растений, накопленным опытом производства и клинического применения. Нами разработана рецептура 9компонентного сбора из лекарственного растительно-
го сырья (ЛРС) для лечения и профилактики язвенной болезни желудка. Антиязвенныш сбор (АЯС) состоит из следующих лекарственный растений в весовыхх частях: соцветий календулы лекарственной — 25 ч; листьев подорожника большого — 10 ч; травы сушеницы топяной
— 5 ч; корней солодки — 10 ч; корней девясила — 5 ч; плодов боярышника — 15 ч; плодов шиповника - 20 ч; плодов кориандра — 5 ч; плодов облепихи — 5 ч.
Антиязвенными свойствами обладают многие растения, включенные в состав указанного сбора. Так, сумма флавоноидов из соцветий календулы составляет основу «Калефлона», полисахаридный комплекс из листьев подорожника — «Плантаглюцида»; известно облепиховое масло из плодов облепихи; холосас и карото-лин получены из плодов шиповника [7]; сумма сескви-терпеновык лактонов девясила высокого — «Алантона» [11]. Антиязвенными и противовоспалительными свойствами обладают и индивидуальные соединения, содержащиеся в компонентах сбора. Так, урсоловая кислота подавляет воспалительные процессы, препятствует распространению язвы, ингибирует рост раковых клеток, проявляет антивирусные, иммуномодулирующие свойства [9]. Глицирризиновая кислота солодки обладает противовоспалительной и антиязвенной активностью
[1]. Наиболее эффективны при язвенной болезни фла-воноиды, обладающие широким спектром фармакологического действия: антиязвенной, спазмолитической, антимикробной, противовоспалительной [14,15].
Цель данной работы — разработать методику стандартизации антиязвенного сбора. С целью выбора методики стандартизации по одному определенному классу соединений были изучены количественный и качественный состав биологически активным веществ (БАВ) сбора и отвара (1:10). Учитывая высокую эффективность флавоноидных соединений в терапии язвенных повреждений желудка, для стандартизации антиязвен-
ного сбора была выбрана спектрофотометрическая методика определения флавоноидов в пересчете на рутин. Рутин является доминирующим флавоноидныым глико-зидом в плодах шиповника, кориандра, цветках календулы, а гиперозид — в плодах боярышника [16].
Методы и материалы
Для анализа использованы образцы сбора, приготовленные из сырья, отвечающим по качеству требованиям соответствующих ГОСТов и статей Государственной Фармакопеи XI изд. (ГФ XI). Количественное определение БАВ в сборе проведено по описанным в литературе методам: флавоноидов, дубильных веществ, антоцианов, органических кислот, водорастворимых полисахаридов - по методикам ГФ XI; аскорбиновой кислоты — фотоколориметрическим [10]; каротиноидов
[2], тритерпеновым сапонинов [8], кумаринов [12], фе-нолокислот — спектрофотометрическим [3], глицирри-зиновой кислоты [13], гиперозида, рутина [4; 5] — хроматоспектрофотометрическим методами (табл. 1).
Для хроматографического разделения флавоноидов на тонком слое силикагеля использована система растворителей этилацетат — муравьиная кислота — уксусная кислота — вода (100 : 11 : 11 : 26) в двух направлениях. Параллельно хроматографировали аликвоты «свидетелей» - по 0,1 мл 0,05 % спиртовым растворов рутина и гиперозида. Пятна флавоноидным гликозидов отвара
— рутина и гиперозида на уровне «свидетелей» отделяли от пластинки, элюировали 10-ю мл 50 % этанола. В УФ спектре элюатов регистрировали максимумы поглощения при 363-365 нм.
Для определения вклада каждого компонента в суммарное содержание флавоноидов в сборе определено их содержание в образцах сырья, использованного для приготовления сбора. УФ спектры спиртовых экстрактов растений регистрировали с добавлением хлористого алюминия. Полученные данные приведены в табли-
Таблица і
Количественное содержание БАВ в антиязвенном сборе растений
Наименование Средние величины содержания
БАВ в сборе, % БАВ в отваре (1:10), мг/мл
Экстрактивные вещества, извлекаемые водой 44,89±0,28 35,80+0,24
Аскорбиновая кислота 0,33+0,01 0,188+0,01
Флавоноиды, общее содержание 0,92±0,01 0,53+0,01
в том числе: рутин 0,179+0,008 0,0406+0,001
гиперозид 0,107+0,002 0,053+0,001
Антоцианы, в пересчете на цианидин-3,5-диглюкозид 0,34+0,01 0,16+0,01
Фенолокислоты в пересчете на феруловую кислоту 0,012+0,001 0,026+0,001
Дубильные вещества в пересчете на таннин 2,20±0,10 1,20+0,07
Органические кислоты в пересчете на яблочную кислоту 4,73+0,08 3,11+0,05
Полисахариды водорастворимые 10,40+0,92 7,50+0,75
Тритерпеновые сапонины в пересчете на урсоловую кислоту, 9,79+0,001 0,081+0,001
в т.ч., глицирризиновая кислота 6,79+0,10 2,61+0,07
Каротиноиды в пересчете на ^-каротин, мг% 25,64+0,03 -
Кумарины в пересчете на скополетин 0,028+0,001 -
Примечание, прочерк означает, что не обнаружено.
це 2. Произведен подбор оптимальных параметров экстракции сбора: тип экстрагента, соотношение сырье : экстрагент, кратность экстракции (табл. 3).
Результаты и обсуждение
По данным, приведенным в таблице 1, в отвар (1:10) сбора переходит гидрофильная часть БАВ сбора, в основном, фенольные соединения. Выход отдельных БАВ в отвар от содержания в сборе составляет: флавоноидов
— 61,7%; антоцианов — 50 %; дубильных веществ — 58%; аскорбиновой кислоты — 60,6 %; водорастворимых полисахаридов — 76,7 %; органических кислот — 69,9 %. Из гидрофобной части БАВ сбора горячей водой экстрагируются агликоны тритерпеновых сапонинов — 10, 9 % (в
пересчете на урсоловую кислоту). Каротиноиды и другие липофильные вещества не экстрагируются водой.
В УФ спектрах спиртовых экстрактов компонентов сбора с добавлением хлористого алюминия наблюдается батохромный сдвиг I полосы поглощения флавоноидов
- до 390-415 нм (табл. 2). Аналогичный спектр спиртовых растворов антиязвенного сбора имеет максимум поглощения при 410 нм и эта длина волны выбрана в качестве аналитической.
Указанная полоса поглощения отсутствует в УФ — спектрах спиртовых экстрактах корней девясила, хотя известно о содержании в экстракте из корней девясила незначительных количеств рутина и кверцетина [6].
Таблица 2
Содержание флавоноидов в компонентах антиязвенного сбора
Наименование р, m , S й Ф- пе % S Содержание флавоноидов в извлеченияx, в пересчете на рутин, %*
4O% этанол 7O% этанол 96% этанол
Rosa 4lO O, і8З O,l67 O,O58
Crataegus 4lO O,l6.^ O,ll4 O,ll2
Hinnonhae rhamnoides L. 4O5 O,284 O,56З O,4З6
Coriandrum sativum L. 4O5 O,O7 O,l27 O,OЗ7
Calendula officinalis L. 4lO l,44 O,З79 і,28З
Glycyrrhiza glabra L. 4l5 l,69 і,52З U4O
Plantago major L. З9O O^l O,7OЗ O,47l
Gnanhalium uliginosum L. З9O O,98l l,282 l,2l9
- означает среднее значение из трех определений.
Примечание: *
Наиболее оптимальным экстрагентом для большинства компонентов сбора (кроме девясила) является 40 — 70 % этанол, позволяющий извлечь из растений максимальное количество флавоноидов. По результатам анализов по изучению влияния различных факторов на экстракцию флавоноидов из сбора (табл. 3), оптимальными признаны следующие параметры: экстрагент - 70 % этанол, кратность экстракции - 3, время первой экстракции - 45 мин, последующие — по 30 мин, соотно-
шение сырье: экстрагент 1:100 (первая экстракция - 1:50 и 2 и 3 экстракции - по 1:25). Относительная погрешность отдельного определения при доверительном уровне 0,95 составляет 2,07 %; среднего результата — 0,62 %. Опыты с добавками рутина подтвердили отсутствие систематической ошибки. Содержание флавоноидов определено в разных сериях сбора и на основе этих данных норма их содержания — не менее 0,8 % .
Таблица 3
Результаты ^лоте^ен^го oi іределения флaвoнoидoв в антиязвентм c6ope
Испытуемый параметр Средние величины содержания флавоноидов
I. Выбор концентрации экстрагента этанола
4O% O^2±O,OO2%
5O% O^l±O,OO2%
7O% O,92O±O.OO2%
96% O,7l76±O,OO2%
вода(lOOoС) O,6l8±O,OOl%
II. Время экстракции (время нагревания при 90- 100°С, мин)
ЗO O,9585±O,OO2%
45 O,965±O,Ol8%
6O O,959±O,OOЗ%
III. Выбор кратности экстракции и соотношения сырье: экстрагент
Число экстракции в сборе, %
А). 1. 1:25 0,788
2. 1:12,5 0,082
3. 1:12,5 0,040
Итого: 1:62,5 Итого: 0.910
Б) 1. 1:50 0,959
2. 1:25 0,0689
3. 1:25 0,059
Итого: 1:100 Итого: 1,087
В лаборатории экспериментальной фармакологии ного сбора на моделях язвенной болезни желудка и две-ИОЭБ СО РАН доказана эффективность разработан- надцатиперстной кишки.
THE METHOD OF STANDARTIZATION OF THE ANTIULCEROGENIC PLANT DRUG MIXTURE
P.B. Lubsandorjieva, T.A. Azunova, L.N. Shantanova, L.Ch. Muchanova, A.A Unagaeva, S.M. Nicolaev (The institute of the General and Experimental Biology, Siberian Department of the Russian Academy of
Sciences, Ulan-Uda)
The standartization metod of 9- component drug plant mixture based on a quantative content of hydroffllic biological active compounds data in decoction were proposed. The choice of the standard compound and flavonoid extraction optimal conditions for their analysis were based.
ЛИТЕРАТУРА
1. Давыдова ВА., Балтина Л.А., Сердюк Н.Г. и др. Противовоспалительные и противоязвенные свойства новых эфиров глицирризиновой кислоты. // Химико- фарма-цевтич. журнал. — 1997. — № 8. — С.23-25.
2. Евдокимова О.В., Самылина ПА, Нестерова О.В. Определение содержания суммы фосфолипидов и кароти-ноидов в плодах некоторых видов боярышника. // Фармация. — 1992. — №9 6. — С.70-72.
3. Крутикова ТА. Количественное определение оксико-ричных кислот в листьях кукурузы. // Растит. ресурсы.
— 1971. — Т. 7, Вып. 3. — С.449-453.
4. Левашова И.Г., Комиссаренко В.П., Жданова В.П., Шатунов Л.В. Гиперозид — как стандарт для контроля качества лекарственных средств и средств медицинского микроанализа. // Проблемы стандартизации и контроля качества лекарственных средств. — М.,1991. - Т. 2, Ч.
2. — С.37-38.
5. Лукьянчиков М. С. Количественное определение флаво-ноидов в некоторых представителях семейства БаЬасеае. //Химия природн. соединений. — 1984. — №°
1. — С.43.
6. Матасова С.А., Митина НА, Рыжова Г.Л. и др. Получение сухого экстракта из корней девясила высокого и изучение его химического состава. // Химия растит. сырья. — 1999. — №9 2. — С.119.
7. Машковский М.Д. Лекарственные средства. — М., 2000.
— Т.1. — 540 с.; — Т. 2. — 608 с.
8. Муравьев ИА, Шатило В.В., Семенченко В. Ф. Спектро-
фотометрический метод количественного определения урсоловой кислоты. // Химия природн. соедин. — 1972.
- № 6. — С.738.
9. Покровский АГ., Ильичева Т.Н., Проняева Т.Р. и др. Иммуномодулирующая активность производныгх урсоловой кислоты. // Доклады Академии наук. — 1999. — Т. 369, №9 3. — С.414-415.
10. Приступа ЕА, Попов Д.М. Совершенствование технологии приготовления и контроля качества витаминных чаев. // Акт. проблемы фармацевтической технологии: Научн.труды ВНИИФ. — Т. XXXII. — М., 1994. — С.151-159.
11. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия). — М., 1990. — 428 с.
12. Чемесова И.И., Чубарова С.Л., Саканян Е.И. и др. Спектрофотометрический метод количественной оценки содержания полифенолов в сухом экстракте из надземной части Melilotus officinalis (L.) Pall. и в его лекарственной форме (таблетках). // Растит. ресурсы. — 2000.
— Т. 36, Вып. 1. — С.86-91.
13. Якубова М.Р., Генкина Г.Л., Шакиров Г.Г. УФ спектрофотометрическое определение глицирризиновой кислоты в Glycyrrhiza glabra. // Химия природн. соедин. — 1977. — №9 6. — С.802-806.
14. Brasseur Т. Medikaments renfermant des flavonoids. // J. Pharm. Belg. — 1989. — Vol. 44, №9 6. — P.403-410.
15. Elliott Middleton Jr. The flavonoids. // Trends in Pharmac. Sci. — 1984. — Vol. 5, №9 8. — P.335-338.
16. Wagner H., Bladt S. Plant drug analysis — athin layer chromatography atlas. — Berlin, 1995. — 384 p.
© РАЗУВАЕВА Я.Г., УБАШЕЕВ И.О., ЛОНШАКОВА К.С., ЖАПОВА В.В. -
НЕЙРОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ КОМПЛЕКСНОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА НООФИТ ПРИ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ У БЕЛЫХ КРЫС
Я.Г. Разуваева, И. О. Убашеев, К. С. Лоншакова, В.В. Жапова
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — чл.-корр. РАН, д.б.н., проф.
В.М.Корсунов)
Резюме. Установлено, что комплексное растительное средство Ноофит обладает выраженным нейропротектор-ным действием в условиях экспериментальной алкогольной интоксикации. Базисным механизмом нейропротек-торного действия Ноофита является способность его ингибировать процессы перекисного окисления липидов, и стимулировать антиоксидантную систему.
Ключевые слова. Фитосбор Ноофит, этанол, условный рефлекс пассивного избегания, гиппокамп.
Формирование алкогольной зависимости обуслов- говых структур и негативно сказывается на познаватель-
лено нарушением функционирования различных био- ных функциях мозга. В клинике алкоголизма приме-
химических и физиологических процессов, что приво- няется широкий набор лекарственных средств, влияние
дит к морфологическим изменениям большинства моз- которых направлено на нормализацию структурно-
