CC BY
0
Химия растительного сырья. 2024. №2. С. 207-215. Khimiya rastitel'nogo syr'ya, 2024, no. 2, pp. 207-215.
DOI: 10.14258/jcprm.20240212969
УДК 615.322
МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ В ЦВЕТКАХ ЦЕФАЛЯРИИ ГИГАНТСКОЙ
© О.А. Калашникова, В.М. Рыжов, В.А. Куркин'
Самарский государственный медицинский университет, ул. Чапаевская, 89, Самара, 443099, Россия, v.a.kurkin@samsmu.ru
Цефалярия гигантская (Cephalaria gigantea (LEDEB.) BOBROV) - мощный многолетник, высота которого достигает двух метров. Экстракты цефалярии гигантской используются в традиционной медицине в течение многих лет благодаря их антимикробной, противогрибковой, цитотоксической, антиоксидантной, противодиабетической и жаропонижающей активности, которые могут быть обусловлены разными биологически активными соединениями. Известно, что в листьях содержатся тритерпеноиды, фенолкарбоновые кислоты и их производные, флавоноиды, а в цветках - флавоноидные соединения: лютеолин, кверцетин, цинарозид, кверцимеритрин и гигантозид А.
В статье описана разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской. Спектрофотометрический анализ водно-спиртовых извлечений из цветков цефалярии гигантской позволил установить, что основной вклад в кривую поглощения их УФ-спектров в присутствии А1С1з вносят флавонолы, имеющие свободную ОН-группу в положении С-3, причем в дифференциальном варианте максимум поглощения испытуемого раствора близок к таковому стандартному образцу кверцетина (428±2 нм). Определены оптимальные условия экстракции флавоноидов в цветках цефалярии гигантской: экстрагент 70% этиловый спирт; соотношение «сырье-экстра-гент» - 1 : 50; время экстракции - извлечение на кипящей водяной бане в течение 60 мин, степень измельчения сырья -2 мм, аналитическая длина волны - 426 нм.
Определено, что содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин в цветках цефалярии гигантской варьируется от 1.58±0.05 до 2.63±0.05%. Погрешность единичного определения с доверительной вероятностью 95% составляет ±1.75%.
Ключевые слова: цефалярия гигантская, Cephalaria gigantea, цветки, флавоноиды, кверцетин, спектрофотомет-рия, стандартизация.
Для цитирования: Калашникова О.А., Рыжов В.М., Куркин В.А. Методика количественного определения суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской // Химия растительного сырья. 2024. №№2. С. 207-215. DOI: 10.14258/jcprm.20240212969.
Введение
Род Cephalaria (L.) Schrad. ex Steud относится к семейству Ворсянковые (Dipsacaceae). Род включает около 95 видов, которые были выявлены, в частности, в Средиземноморском бассейне и прилегающей к нему западной части Евразии. Некоторые виды встречаются также в Азии и в Восточной и Южной Африке [1].
Экстракты из различных видов цефалярии используются в традиционной медицине в течение многих лет благодаря их антимикробной, противогрибковой, цитотоксической, антиоксидантной, противодиабети-ческой и жаропонижающей активности [1].
Большой интерес вызывает растение цефалярия гигантская (Cephalaria gigantea (LEDEB.) BOBROV) - мощный многолетник, высота которого достигает двух метров. Встречается в Южной Европе, Западной и Центральной Азии, а также в Северной и Южной Африке [2-11]. Культивируется в ботаническом саду Самарского университета.
Анализ научной литературы позволяет говорить о перспективности цефалярии гигантской как источника биологически активных соединений. Так, рядом авторов из корней были выделены и идентифицированы в-ситостерин, олеаноловая кислота, в гидролизате - олеаноловая кислота и хедерагенин [12]. Для надземной части описаны тритерпеноиды, фенолкарбоновые кислоты и их производные, а также флавоноиды. Из цветков данного растения выделены флавоноидные соединения: лютеолин, цинарозид, кверцетин,
* Автор, с которым следует вести переписку.
кверцимеритрин и гигантозид А [12, 13]. Изучен также аминокислотный состав цветков данного растения. Установлено, что цветки цефалярии гигантской содержат 4.21% аминокислот, причем восемь из них являются незаменимыми [12-21]. Установлено, что доминирующими веществами в траве цефалярии гигантской являются флавоны [22], в то время как в цветках преобладают флавонолы [12].
Полезные свойства цефалярии гигантской обусловлены жаропонижающим, отхаркивающим, вяжущим и гемостатическим действием. Цветки в виде чая применяются при болезнях печени, туберкулезе легких, простудных заболеваниях, стимулируют органы сердечно-сосудистой системы. Одним из доминирующих веществ является кверцетин [15], относящийся к группе флавоноидов, обладающих Р-витаминной и антиоксидантной активностью, а также другими разнообразными фармакологическими свойствами. Кверцетин используется в медицине для профилактики и лечения нарушений проницаемости сосудов, гипертонической и лучевой болезни, ревматизме, аллергических реакциях и обладает антиоксидантной активностью [16, 17].
Ранее нами была разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в листьях цефалярии гигантской при аналитической длине волны 400 нм в пересчете на флавон цинарозид [22]. Однако данная методика не подходит для количественного определения суммы флавоноидов в цветках цефа-лярии гигантской из-за значительных отличий в их химическом составе: в сырье преобладают флавонолы (кверцетин, кверцимеритрин и гигантозид А), имеющие свободную ОН-группу в положении С-3.
В этой связи актуальной является разработка методики количественного определения суммы флаво -ноидов в цветках цефалярии гигантской.
Цель настоящего исследования - разработка методики количественного определения суммы флаво -ноидов в цветках цефалярии гигантской.
Экспериментальная часть
Для разработки методики использовали цветки цефалярии гигантской, собранные в июле 2022 г. в ботаническом саду Самарского университета. Сушка сырья проводилась естественным способом под навесом без доступа прямых солнечных лучей.
В качестве метода исследования использована прямая и дифференциальная спектрофотометрия в соответствии 0ФС.1.2.1.1.0003.15 «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях» ГФ РФ XIV изд. [23]. Спектральные характеристики водно-спиртовых извлечений оценивали на спектрофотометре 8ресоМ 40 (Лпа1у1к1епа Лв, Германия) в диапазоне длин волн 190-500 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм.
Обсуждение результатов
Нами был проведен спектрофотометрический анализ водно-спиртовых извлечений из цветков цефа -лярии гигантской (рис. 1 и 2), который позволил установить, что доминирующими флавоноидами являются производные кверцетина, имеющие свободную ОН-группу в положении С-3, что подтверждается литературными данными [15].
Сравнительное изучение УФ-спектров водно-спиртовых извлечений из цветков цефалярии гигантской и раствора кверцетина (рис. 1-4) показало, что в обоих случаях наблюдается батохромный сдвиг в длинноволновом области УФ-спектров в присутствии Л1С13 при 426 ±2 нм, что характерно для кверцетина [15]. В соответствии с этим разработанная методика основана на реакции комплексообразования фла-воноидов с хлоридом алюминия (Л1С13) с использованием в качестве стандартного образца кверцетина и аналитической длины волны 426 нм.
В УФ-спектре водно-спиртового извлечения из цветков цефалярии гигантской в дифференциальном варианте обнаруживается максимум поглощения при длине волны 426 нм (рис. 4), который близок к максимуму спиртового раствора кверцетина (рис. 2) [15]. С целью разработки методики количественного определения суммы флавоноидов определены оптимальные условия экстракции флавоноидов в цветках цефалярии гигантской: экстрагент 70% этиловый спирт; соотношение «сырье-экстрагент» - 1 : 50; время экстракции -извлечение на кипящей водяной бане в течение 60 мин, степень измельчения сырья - 2 мм (табл. 1).
Методика количественного определения суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Около 1 г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл,
прибавляют 50 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарированных весах с точностью до ±0.01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин. Затем ее охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (красная полоса). Испытуемый раствор готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (испытуемый раствор А). Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 426 нм через 40 мин после приготовления. В качестве раствора сравнения используют раствор, полученный следующим образом: 1 мл извлечения (1 : 50) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора спиртом этиловым 96% до метки.
|А|
1
/ \
f\ \ \
\ V
200 2 Absotpton 50 3 00 SO 400 4 50 M
Рис. 1. Электронные спектры поглощения раствора водно-спиртового извлечения из цветков цефалярии гигантской (1) и раствора водно-спиртового извлечения из цветков цефалярии гигантской с добавлением алюминия хлорида (2)
Рис. 2. Спектральная кривая поглощения раствора водно-спиртового извлечения из цветков цефалярии гигантской (дифференциальный спектр)
Рис. 3. Электронные спектры поглощения раствора кверцетина (1) и раствора кверцетина с добавлением алюминия хлорида (2)
Рис. 4. Спектральная кривая поглощения раствора кверцетина (дифференциальный спектр)
Таблица 1. Влияние различных факторов на полноту извлечения флавоноидов из цветков цефалярии гигантской
№ Экстрагент Соотношение «сырье-экстра-гент» Время экстракции, мин Степень измельчения, мм Содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин и абсолютно сухое сырье, %
Экстрагент
1 этиловый спирт 60% 2.39±0.05
2 этиловый спирт 70% 2.27±0.05
3 этиловый спирт 80% 1 : 50 60 2 2.42±0.05
4 этиловый спирт 90% 2.14±0.05
5 этиловый спирт 96% 1.03±0.05
Время экстракции
6 30 2.50±0.05
7 8 70% этиловый спирт 1 : 50 45 60 2 2.47±0.05 2.63±0.05
9 90 2.53±0.05
Степень измельчения
10 1 2.38±0.05
11 1 : 50 1 : 50 1 : 50 2 2.52±0.05
12 3 2.41±0.05
Соотношение «сырье-экстрагент»
13 1 : 30 2.29±0.05
14 1 : 50 1 : 50 1 : 50 2 2.48±0.05
15 1 : 100 2.42±0.05
Приготовление раствора стандартного образца кверцетина. Около 0.02 г (точная навеска) кверце-тина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 15 мл 96% этилового спирта при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры доводят объем раствора 96% этиловым спиртом до метки (раствор А кверцетин). 1 мл раствора А кверцетина помещают в мерную колбу на 25 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (испытуемый раствор Б кверцетина). Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл раствора А кверцетина помещают в мерную колбу на 25 мл и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (раствор сравнения Б кверцетина). Содержание суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле
_ В ■ то ■ 50 • 50 • 1 -100 • 100
X _->
Во ■ m ■ 1-25 ■ 25 ■ (100 - W)
где В - оптическая плотность испытуемого раствора; Во - оптическая плотность раствора СО кверцетина; m - масса сырья, г; то - масса СО кверцетина, г; W - потеря в массе при высушивании, %.
В случае отсутствия СО кверцетина целесообразно использовать рассчитанное значение удельного показателя поглощения при 426 нм - 692.
В■50•50-100
х _->
т ■ 692 ■ (100 - W)
где В - оптическая плотность испытуемого раствора; т - масса сырья, г; 692- удельный показатель поглощения (ЕЦМ) СО кверцетина при 426 нм; Ж - потеря в массе при высушивании, %.
Критерием оценки аналитической методики является валидационная оценка. Валидацию методики проводили в соответствии с ГФ РФ XIV издания [24-26].
Валидационная оценка разработанной методики проводилась по показателям: специфичность, линейность, правильность.
Специфичность методики определялась по соответствию максимумов поглощения комплекса флаво-ноидов цветков цефалярии гигантской и раствора СО кверцетина с алюминием хлоридом (дифференциальный вариант).
Линейность методики определяли для серии растворов кверцетина (с концентрациями в диапазоне от 0.04 до 0.2 мг/мл) с алюминием хлоридом при длине волны 426 нм. На основании полученных данных строили график зависимости значений оптической плотности растворов кверцетина с алюминием хлоридом от концентрации кверцетина и затем рассчитывали уравнение линейной регрессии (рис. 5).
При изучении линейной зависимости вида у = Ьх + а коэффициент корреляции составил 0.9921, следовательно, данную методику можно использовать для анализа суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской в пересчете на кверцетин в указанном диапазоне концентраций (рис. 5).
Метрологические характеристики методик количественного определения содержания суммы флавоноидов в водно-спиртовом извлечении цветков цефалярии гигантской представлены в таблице 2. Ошибка единичного определения суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской с доверительной вероятностью 95% составляет ±1.75% (табл. 2).
Установлено, что среднее содержание флавоноидов в исследуемом образце сырья составило 2.26% (относительная погрешность определения составила ±1.75%).
Таким образом, исходя из результатов валидационной оценки результатов эксперимента, можно сделать вывод о пригодности использования данной методики для количественной оценки суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин.
С использованием этой методики было проанализировано четыре образца цветков цефалярии гигантской, заготовленных в летний период в разные фазы вегетации. Определено, что содержание суммы флавоноидов в анализируемых образцах варьирует от 1.58±0.05 до 2.63±0.05% в зависимости от месяца сбора растительного сырья (табл. 3) [27].
1.5
___________у^^__________
0.0 •-
0.00 0.02 0.04 0,06 0.08
Рис. 5. Зависимость значений оптической плотности раствора кверцетина с алюминия хлоридом от концентрации кверцетина (дифференциальный вариант)
Таблица 2. Результаты оценки прецизионности методики количественного определения суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской (уровень повторяемости)
Метрологические характеристики п f Х,% Б Бх Р, % Т (Р, 1) (табл.) ±дх, % Е, %
Значения 11 10 2.26 0.0254 0.00644 95 2.23 0.0112 ±1.75
Таблица 3. Содержание суммы флавоноидов в образцах цветков цефалярии (в %) в пересчете
на кверцетин
Содержание суммы фла-
№ Характеристика образца сырья воноидов в абсолютно сухом сырье (в %) в пересчете на кверцетин
1 Ботанический сад Самарского университета (июнь 2022 г.) Дата сбора: 06.07.2022 г. 1.58±0.05
2 Ботанический сад Самарского университета (июль 2022 г.) Дата сбора: 13.07.2022 г. 2.42±0.05
3 Ботанический сад Самарского университета (август 2022 г.) Дата сбора: 21.07.2022 г. 2.63±0.05
4 Ботанический сад Самарского университета (август 2022 г.) Дата сбора: 27.07.2022 г. 1.79±0.05
Заключение
Таким образом, выявлено, что доминирующими флавоноидами в цветках цефалярии гигантской являются производные кверцетина, имеющие свободную ОН-группу в положении С-3, которые определяют
у = 16.4 07х - 0.011
11-
характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из данного растительного сырья в условиях дифференциальной спектрофотометрии. При проведении количественного анализа суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской целесообразно осуществлять пересчет содержания действующих веществ на кверцетин при аналитической длине волны 426 нм. Определено, что содержание суммы флавоноидов в цветках цефалярии гигантской варьируется от 1.58±0.05 до 2.63±0.05%. Погрешность единичного определения с доверительной вероятностью 95% составляет ±1.75%.
Проведена валидационная оценка разработанной методики по показателям специфичность, линейность в соответствии с ГФ РФ XIV издания. Исходя из результатов валидационной оценки результатов эксперимента, можно говорить о пригодности использования данной методики для количественной оценки суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин в цветках цефалярии гигантской.
Полученные результаты исследования могут быть использованы при разработке нормативной доку -ментации на перспективный вид лекарственного растительного сырья «Цефалярии гигантской цветки» для внедрения в Государственную фармакопею Российской Федерации.
Финансирование
Данная работа финансировалась за счет средств бюджета Самарского государственного медицинского университета. Никаких дополнительных грантов на проведение или руководство данным конкретным исследованием получено не было.
Конфликт интересов
Авторы данной работы заявляют, что у них нет конфликта интересов. Открытый доступ
Эта статья распространяется на условиях международной лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (https://creativecommons.Org/licenses/by/4.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что вы дадите соответствующие ссылки на автора(ов) и источник и предоставите ссылку на Лицензию Creative Commons и укажете, были ли внесены изменения.
Список литературы
1. Chrzaszcz M., Krzeminska B, Celinski R., Szewczyk K. Phenolic Composition and Antioxidant Activity of Plants Belonging to the Cephalaria (Caprifoliaceae) Genus // Plants. 2021. Vol. 10. 952. DOI: 10.3390/plants10050952.
2. Бобров Е.Г., Васильченко И.Т., Горшкова С.Г., Федоров А.А. Флора СССР. М.; Л., 1957. Т. XXIV. С. 29-30.
3. Губанов И.А., Киселёва К.В., Новиков В.С., Тихомиров В.Н. Иллюстрированный определитель растений Средней России. Т. 2: Покрытосеменные (двудольные: раздельнолепестные). М., 2003.
4. Шанцер И.А. Растения средней полосы Европейской части России // Полевой атлас. 2-е изд. М., 2007. С. 98-99.
5. Киселева Т.Л., Смирнова Ю.А. Лекарственные растения в мировой медицинской практике: государственное регулирование номенклатуры и качества. М., 2009.
6. Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов (факультетов). Самара, 2020. 1278 с.
7. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М., 1977. 275 с.
8. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: учебник. М., 2002. С. 620-621.
9. Самылина И.А., Аносова О.Г. Фармакогнозия. Атлас: учебное пособие в 2-х т. М., 2007. Т. 2. С. 364.
10. Меницкий Ю.Л., Михеев А.Д. Dipsacaceae Juss. // Конспект флоры Кавказа. СПб; М., 2008. Т. 3-1. С. 128-139.
11. Цефалярия // Большая советская энциклопедия: в 30 т. / гл. ред. А.М. Прохоров. М., 1969-1978.
12. Мовсумов И.С., Гараев Э.А. Изучение химических компонентов некоторых растений из флоры Азербайджана с целью получения биологически активных веществ // Химия растительного сырья. 2010. №3. С. 5-10.
13. Мовсумов И.С., Гараев Е.А., Исаев М.И. Флавоноиды из цветков цефалярии гигантской // Химия природных соединений. 2006. №6. С. 552-554.
14. Movsumov I.S., Garaev E.A., Isaev M.I. Flavonoids from Cephalaria gigantea flowers // Chemistry of Natural Compounds. 2006. Vol. 42. Pp. 677-680. DOI: 10.1007/s10600-006-0250-z.
15. Куркина А.В. Флавоноиды фармакопейных растений: монография. Самара, 2012. 290 c.
16. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск, 1990. С. 236-238.
17. Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А., Музычкина Р.А., Толстиков Г.А. Природные флавоноиды. Новосибирск, 2007. 232 с.
18. Калашникова О.А., Рыжов В.М., Куркин В.А. Цефалярия гигантская как перспективный источник биологически активных соединений // Сборник трудов конференции «Фармацевтическое образование СамГМУ. История, современность, перспективы», посвященная 50-летию фармацевтического образования СамГМУ. Самара, 2021. С. 291-295.
19. Калашникова О.А., Рыжов В.М., Куркин В.А. Цефалярия гигантская как перспективный фармацевтический объект // Фундаментальная наука в современной медицине-2022: материалы научно-практической конференции студентов и молодых ученых. Минск, 2022. С. 428-432.
20. Тараховский Ю.С., Ким Ю.А., Абдрасилова Б.С., Музафарова Е.Н. Флавоноиды: биохимия, биофизика, медицина. Пущино, 2013. 310 с.
21. Ладыгина Е.Я., Сафронович Л.Н., Отряшенкова В.Э. и др. Химический анализ лекарственных растений: учебное пособие для фармацевтических вузов. М., 1983. С. 85-86.
22. Калашникова О.А., Рыжов В.М., Куркин В.А. Методика количественного определения суммы флавоноидов в листьях цефалярии гигантской // Химико-фармацевтический журнал. 2023. Т. 57, №3. С. 29-34. DOI: 10.30906/0023-1134-2023-57-3-29-34.
23. Государственная фармакопея РФ. XIV изд. М., 2018. Т. I-IV. URL: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php.
24. Бубенчикова В.Н., Старчак Ю.А. Валидация методики количественного определения суммы флавоноидов в траве чабреца // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация. 2012. №22-1(141). С. 157-160.
25. Васильев В.П. Аналитическая химия. Книга 2: Физико-химические метода анализа: учеб. для студ. вузов, обучающихся по химико-технол. спец. М., 2005. 383 с.
26. Куркин В.А., Браславский В.Б., Авдеева Е.В., Правдивцева О.Е. и др. Производственная практика по стандартизации лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов: учеб. пособие для студентов фармацевтических вузов. Самара, 2007. 126 с.
27. Куркина А.В. Экспериментально-теоретическое обоснование подходов к стандартизации сырья и препаратов фармакопейных растений, содержащих флавоноиды: автореф. ... докт. фарм. наук. Самара, 2013. 48 с.
Поступила в редакцию 17 мая 2023 г.
После переработки 22 ноября 2023 г.
Принята к публикации 30 января 2024 г.
Kalashnikova O.A., Ryzhov V.M., Kurkin V.A.* THE METHOD OF QUANTITATIVE DETERMINATION OF THE AMOUNT OF FLAVONOIDS IN THE FLOWERS OF GIANT CEPHALARIA
Samara State Medical University, Chapaevskaya st., 89, Samara, 443099, Russia, v.a.kurkin@samsmu.ru
Giant cephalaria (Cephalaria gigantea (LEDEB.) BOBROV) is a powerful perennial whose height reaches two meters. This plant is found in Southern Europe, Western and Central Asia, as well as in North and South Africa. It is cultivated in the Botanical garden of Samara University. The extracts of giant cephalaria have been used in traditional medicine for many years due to their antimicrobial, antifungal, cytotoxic, antioxidant, antidiabetic and antipyretic activities, which may be due to various biologically active compounds. It is known that the leaves contain triterpenoids, phenolic carboxylic acids and their derivatives, flavonoids, and the flowers contain flavonoid compounds: luteolin, quercetin, cynaroside, quercimeritrin and gigantoside A.
The article describes the development of a technique for quantifying of the amount of flavonoids in the flowers of giant cephalaria. Spectrophotometric analysis of water-alcohol extracts from giant cephalaria flowers allowed us to establish that the main contribution to the absorption curve of their UV-spectra in the presence of AlCb is made by flavonols having a free OH group at the C-3 position, and in the differential version, the maximum absorption of the tested solution is close to that of the standard sample of quercetin (428±2 nm). Optimal conditions for the extraction of flavonoids in giant cephalaria flowers were determined: extractant 70% ethyl alcohol; the ratio "raw material-extractant" - 1 : 50; extraction time - extraction in a boiling water bath for 60 minutes, the degree of grinding of raw materials - 2 mm, analytical wavelength - 426 nm.
It was determined that the content of the total flavonoids calculated on quercetin in the flowers of giant cephalaria varies from 1.58±0.05% to 2.63±0.05%. The error of a single determination with a 95% confidence probability is ±1.75%.
The obtained results were used in the development of the FS project for a new type of medicinal plant raw materials "Cephalaria giant flowers" for introduction into the State Pharmacopoeia of the Russian Federation.
Keywords: giant cephalaria; Cephalaria gigantean; flowers; flavonoids; quercetin; spectrophotometry; standardization.
For citing: Kalashnikova O.A., Ryzhov V.M., Kurkin V.A. Khimiya Rastitel'nogo Syr'ya, 2024, no. 2, pp. 207-215. (in Russ.). DOI: 10.14258/jcprm.20240212969.
* Corresponding author.
References
1. Chrzaszcz M., Krzeminska B, Celinski R., Szewczyk K. Plants, 2021, vol. 10, 952. DOI: 10.3390/plants10050952.
2. Bobrov Ye.G., Vasil'chenko I.T., Gorshkova S.G., Fedorov A.A. Flora SSSR. [Flora of the USSR]. Moscow, Leningrad, 1957, vol. XXIV, pp. 29-30. (in Russ.).
3. Gubanov I.A., Kiselova K.V., Novikov V.S., Tikhomirov V.N. Illyustrirovannyy opredelitel' rasteniy Sredney Rossii. T. 2: Pokrytosemennyye (dvudol'nyye: razdel'nolepestnyye). [Illustrated guide to plants of Central Russia. Vol. 2: An-giosperms (dicots: dioecytes)]. Moscow, 2003. (in Russ.).
4. Shantser I.A. Polevoy atlas. 2-ye izd. [Field Atlas. 2nd ed.]. Moscow, 2007, pp. 98-99. (in Russ.).
5. Kiseleva T.L., Smirnova Yu.A. Lekarstvennyye rasteniya v mirovoy meditsinskoy praktike: gosudarstvennoye reguli-rovaniye nomenklatury i kachestva. [Medicinal plants in world medical practice: state regulation of nomenclature and quality]. Moscow, 2009. (in Russ.).
6. Kurkin V.A. Farmakognoziya: uchebnik dlya studentov farmatsevticheskikh vuzov (fakul'tetov). [Pharmacognosy: a textbook for students of pharmaceutical universities (faculties)]. Samara, 2020, 1278 p. (in Russ.).
7. Dolgova A.A., Ladygina Ye.Ya. Rukovodstvo kprakticheskim zanyatiyampo farmakognozii. [Guide to practical exercises in pharmacognosy]. Moscow, 1977, 275 p. (in Russ.).
8. Murav'yeva D.A., Samylina I.A., Yakovlev G.P. Farmakognoziya: uchebnik. [Pharmacognosy: textbook]. Moscow, 2002, pp. 620-621. (in Russ.).
9. Samylina I.A., Anosova O.G. Farmakognoziya. Atlas: uchebnoye posobiye v 2-kh tomakh. [Pharmacognosy. Atlas: textbook in 2 volumes]. Moscow, 2007, vol. 2, p. 364. (in Russ.).
10. Menitskiy Yu.L., Mikheyev A.D. Konspekt flory Kavkaza. [Synopsis of the flora of the Caucasus]. St. Petersburg; Moscow, 2008, vol. 3-1, pp. 128-139. (in Russ.).
11. Bol'shaya sovetskaya entsiklopediya: v 301. [Great Soviet Encyclopedia: 30 volumes], ed. A.M. Prokhorov. Moscow, 1969-1978. (in Russ.).
12. Movsumov I.S., Garayev E.A. Khimiya rastitel'nogo syr'ya, 2010, no. 3, pp. 5-10. (in Russ.).
13. Movsumov I.S., Garayev Ye.A., Isayev M.I. Khimiyaprirodnykh soyedineniy, 2006, no. 6, pp. 552-554. (in Russ.).
14. Movsumov I.S., Garaev E.A., Isaev M.I. Chemistry of Natural Compounds, 2006, vol. 42, pp. 677-680. DOI: 10.1007/s10600-006-0250-z.
15. Kurkina A.V. Flavonoidy farmakopeynykh rasteniy: monografiya. [Flavonoids of pharmacopoeial plants: monograph]. Samara, 2012, 290 p. (in Russ.).
16. Georgiyevskiy V.P., Komissarenko N.F., Dmitruk S.Ye. Biologicheski aktivnyye veshchestva lekarstvennykh rasteniy. [Biologically active substances of medicinal plants]. Novosibirsk, 1990, pp. 236-238. (in Russ.).
17. Korul'kin D.Yu., Abilov Zh.A., Muzychkina R.A., Tolstikov G.A. Prirodnyyeflavonoidy. [Natural flavonoids]. Novosibirsk, 2007, 232 p. (in Russ.).
18. Kalashnikova O.A., Ryzhov V.M., Kurkin V.A. Sbornik trudov konferentsii «Farmatsevticheskoye obrazovaniye SamGMU. Istoriya, sovremennost', perspektivy», posvyashchennaya 50-letiyu farmatsevticheskogo obrazovaniya SamGMU. [Collection of proceedings of the conference "Pharmaceutical education of SamSMU. History, modernity, prospects", dedicated to the 50th anniversary of pharmaceutical education at SamSMU]. Samara, 2021, pp. 291-295. (in Russ.).
19. Kalashnikova O.A., Ryzhov V.M., Kurkin V.A. Fundamental'naya nauka v sovremennoy meditsine-2022: materialy nauchno-prakticheskoy konferentsii studentov i molodykh uchenykh. [Fundamental science in modern medicine-2022: materials of a scientific and practical conference of students and young scientists]. Minsk, 2022, pp. 428-432. (in Russ.).
20. Tarakhovskiy Yu.S., Kim Yu.A., Abdrasilova B.S., Muzafarova Ye.N. Flavonoidy: biokhimiya, biofizika, meditsina. [Flavonoids: biochemistry, biophysics, medicine]. Pushchino, 2013, 310 p. (in Russ.).
21. Ladygina Ye.YA., Safronovich L.N., Otryashenkova V.E. i dr. Khimicheskiy analiz lekarstvennykh rasteniy: uchebnoye posobiye dlya farmatsevticheskikh vuzov. [Chemical analysis of medicinal plants: a textbook for pharmaceutical universities]. Moscow, 1983, pp. 85-86. (in Russ.).
22. Kalashnikova O.A., Ryzhov V.M., Kurkin V.A. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal, 2023, vol. 57, no. 3, pp. 29-34. DOI: 10.30906/0023-1134-2023-57-3-29-34. (in Russ.).
23. Gosudarstvennaya farmakopeya RF. XIV izd. [State Pharmacopoeia of the Russian Federation. XIV ed.]. Moscow, 2018, vol. I-IV. URL: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php. (in Russ.).
24. Bubenchikova V.N., Starchak Yu.A. Nauchnyye vedomosti Belgorodskogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya: Meditsina. Farmatsiya, 2012, no. 22-1(141), pp. 157-160. (in Russ.).
25. Vasil'yev V.P. Analiticheskaya khimiya. Kniga 2: Fiziko-khimicheskiye metoda analiza: ucheb. dlya stud. vuzov, obuchayushchikhsyapo khimiko-tekhnol. spets. [Analytical chemistry. Book 2: Physico-chemical methods of analysis: textbook. for students universities studying chemical engineering. specialist]. Moscow, 2005, 383 p. (in Russ.).
26. Kurkin V.A., Braslavskiy V.B., Avdeyeva Ye.V., Pravdivtseva O.Ye. i dr. Proizvodstvennayapraktikapo stan-darti-zatsii lekarstvennogo rastitel'nogo syr'ya i fitopreparatov: ucheb. posobiye dlya studentov farmatsev-ticheskikh vuzov. [Industrial practice on the standardization of medicinal plant raw materials and herbal remedies: textbook. manual for students of pharmaceutical universities]. Samara, 2007, 126 p. (in Russ.).
27. Kurkina A.V. Eksperimental'no-teoreticheskoye obosnovaniye podkhodov к standartizatsii syr'ya i preparatov farmakopeynykh rasteniy, soderzhashchikhflavonoidy: avtoref. ... dokt. farm. nauk. [Experimental and theoretical justification of approaches to standardization of raw materials and preparations of pharmacopoeial plants containing flavonoids: abstract of thesis. ... doc. pharm. Sci.]. Samara, 2013, 48 p. (in Russ.).
Received May 17, 2023 Revised November 22, 2023 Accepted January 30, 2024
Сведения об авторах
Калашникова Ольга Александровна - аспирант,
o.a.kalashnikova@samsmu.ru
Рыжов Виталий Михайлович - кандидат
фармацевтических наук, доцент кафедры
фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии,
lavr_rvm@mail.ru
Куркин Владимир Александрович - заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии, доктор фармацевтических наук, профессор, kurkinvladimir@yandex.ru
Information about authors
Kalashnikova Olga Aleksandrovna - graduate student, o.a.kalashnikova@samsmu.ru
Ryzhov Vitaly Mikhailovich - Candidate of Pharmaceutical Sciences, Associate Professor of the Department of Pharmacognosy with Botany and Basics of Herbal Medicine, lavr_rvm@mail.ru
Kurkin Vladimir Aleksandrovich - Head of the Department of Pharmacognosy with Botany and Basics of Herbal Medicine, Doctor of Pharmaceutical Sciences, Professor, kurkinvladimir@yandex.ru
