CC BY
111
лярного звена антиоксидантной защиты.
2. Значительные физические нагрузки способствовали накоплению продуктов перекисного окисления липи-дов, приводя к окислительному стрессу, что являлось неблагоприятным прогностическим критерием здоровья.
3. Полученные данные подтверждают, что показатели состояния антиоксидантной системы являются маркером здоровья и критерием качества жизни населения. Контроль ее состояния, отдельных компонентов, в частности, в ходе диспансеризации, обращения в лечебно-профилактические учреждения, центры планирования семьи, центры здоровья, позволит оценить популяцион-ный и индивидуальный уровень. Это даст возможность своевременно принимать меры для восстановления системы оксиданты-антиоксиданты с использованием средств неспецифической индивидуальной профилактики, предупреждать развитие многих заболеваний, а также возможность для разработки новых лечебных препаратов.
4. Методы оценки состояния окислительного стресса и антиоксидантной защиты организма должны внедряться в систему гигиенического мониторинга здоровья населения.
Литер ату р а
1. Величковский Б.Т. Жизнеспособность нации. Взаимосвязь социальных и биологических механизмов развития демографического кризиса и изменении состояния здоровья населения России. 2-е изд. М.: Типография «Наука»; 2012.
2. Коденцова В.М., Вржесинская О.А., Мазо В.К. Витамины и окислительный стресс. Вопросы питания. 2013; 3 (82): 11-8.
3. Кулиненков О.С. Фармакологическая помощь спортсмену:
коррекция факторов, лимитирующих спортивный результат. М.: Советский спорт; 2007.
4. Рахманин Ю.А., Литвинов Н.Н. Научные основы диагностики донозологических нарушений гомеостаза при хронических химических нагрузках. Гигиена и санитария. 2004; 6: 48-50.
5. Скулачев В.П. Феноптоз: запрограммированная смерть организма. Биохимия. 1999; 64 (12): 1679-88.
References
1. Velichkovskiy B.T. Viability of nation. Association of social and biological mechanisms of development of demographic crisis and changes in health status of population of Russia [Zhiznesposobnost' natsii. Vzaimozvyaz' sotsial'nykh i biologicheskikh mekhanizmov razvitiya demograficheskogo krizisa i izmenenii sostoyaniya zdorov'ya naseleniya Rossii]. 2nd ed. Moscow: Tipografiya "Nauka"; 2012. (in Russian)
2. Kodentsova V.M., Vrzhesinskaya O.A., Mazo V.K. Vitamins and oxidative stress. Voprosy pitaniya. 2013; 3 (82): 11-8. (in Russian)
3. Kulinenkov O.S. Pharmacological aid to sportsmen: correction of factors limiting sportive results [Farmakololgicheskaya pomoshch sportsmenu: korresktsiya faktorov, limitiruyushchikh sportivnyy resultat]. Moscow: Sovetskiy sport; 2007. (in Russian)
4. Rakhmanin Yu.A., Litvinov N.N. The scientific bases of diagnosis of prenosological homeostatic disorders in case of chronic chemical loads. Gigiena i sanitariya. 2004; 6: 48-50. (in Russian)
5. Skulachev V.P. Phenoptosis: programmed death of organism. Biokhimiya. 1999; 64 (12): 1679-88. (in Russian)
Поступила 24.01.14 Received 24.01.14
О СОСЕДОВА Л.М., 2014 УДК 614.87-092.9
Соседова Л.М.
НЕКОТОРЫЙ ОПЫТ ОЦЕНКИ ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ОРГАНИЗМ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ УСЛОВИЯХ
ФГБУ «Восточно-Сибирский научный центр экологии человека» СО РАМН, 665827, г. Ангарск
В материалах представлены особенности методических подходов при выполнении экспериментальных исследований по изучению воздействия факторов окружающей среды на организм человека. Показаны результаты собственных экспериментов, проведенных в институте, при моделировании биологических эффектов антимикробных нанобиокомпозитов с частицами наносеребра, токсической энцефалопатии, изучении соче-танного действия факторов биологической и химической природы. Доказана значимость внутриклеточной протеомики при оценке эффектов действия наночастиц и наноматериалов на организм. Выявлены ключевые звенья прогредиентного течения ртутной интоксикации в отдаленном периоде.
Особый раздел посвящен изучению отдаленных эффектов воздействия антропогенных факторов окружающей среды на последующие поколения. Приведены результаты, свидетельствующие о нарушении функционального состояния ЦНСу крыс в первом и втором поколениях, родители которых подвергались воздействию нейротоксикантов. Доказана отягощающая роль пренатальной гипоксии в развитии интоксикации у крыс в половозрелом возрасте. Экспериментальное биомоделирование направлено на прицельные, патогенетически обоснованные лечебно-профилактические мероприятия: первоначально в экспериментальных условиях, а в дальнейшем и при реабилитации больных или пострадавших.
Ключевые слова: факторы окружающей среды; моделирование; лабораторные животные; токсическая энцефалопатия; потомство белых крыс; пренатальная гипоксия белых крыс; нанобиокомпози-ты; биологический, химический фактор.
Sosedova L.M. - METHODOLOGICAL APPROACHES TO THE EXPERIMENTAL STUDY OF THE IMPACT OF ENVIRONMENTAL POLLUTION ON THE HUMAN BODY
Angarsk Branch of East-Siberian Scientific Center of Human Ecology, Angarsk, Russian Federation, 665827
In the materials there are presentedfeatures of methodological approaches in the performing of experimental studies concerning of the investigation of the impacts of environmentalfactors on the human body. There were shown the results of our experiments performed at the Institute, in the modeling of biological effects of antimicrobial nanobiocomposites with nanosilver particles, toxic encephalopathy, in the study of the combined effect of the factors of biological and
chemical nature. There was proved the importance of intracellular proteomics in the assessment of the effects of the action of nanoparticles and nanomaterials on the body. There were revealed key parts of progredient course of mercury poisoning in the long term.
The special section is presented by the study of long-term effects of anthropogenic environmentalfactors on subsequent generations. There are presented results witnessing to a deterioration of the functional state of the central nervous system in rats in the first and second generations, whose parents were exposed to neurotoxicants. There was proved the aggravating role ofprenatal hypoxia in the development of toxicity in rats in sexually mature age. Experimental biomodeling is aimed at sighting ofpathogenetically substantiated treatment and preventive measures: initially, in experimental conditions, and in the future in the rehabilitation of sick or injured patients.
Key words: environmental factors; modeling; laboratory animals; toxic encephalopathy; the offspring of white rats; prenatal hypoxia of albino rats; nanobiocomposites; biological; chemical factor.
Для принятия управленческих, социальных, технических или медико-биологических решений существенно возрастает роль доказательной медицины, основанной только на строго достоверных научных фактах, исключающих влияние систематических и случайных ошибок. Основным принципам и постулатам доказательной медицины должны соответствовать и результаты экспериментального моделирования при изучении воздействия факторов окружающей среды на лабораторных животных.
Моделирование на экспериментальных животных патологических состояний и различных заболеваний, характерных или в различной степени воспроизводящих таковые у человека, является мощнейшим оружием ученых, позволяющим изучить патогенетическую структуру и механизмы формирования исследуемых процессов. Именно так называемая трансляционная медицина дает возможность моделировать на лабораторных животных патологические состояния и различные характерные для человека заболевания, вызванные загрязнением окружающей среды, и выявлять их основные патогенетические звенья. Результатом должно являться предложение лечебно-профилактических рекомендаций, направленных на установленные при экспериментальных исследованиях точки приложения патологического процесса.
Важной особенностью методологических подходов к экспериментальному моделированию являются адекватность создаваемой модели патологии человека задачам исследований, допустимость переноса экспериментальных данных с модели на человека в совокупности с информативностью и доступностью критериев и методов оценки патологического процесса в организме лабораторных животных. Корректный выбор критериев оценки патологического процесса позволяет в итоге подтвердить правильность способа моделирования. В основе биомоделирования должен быть принцип подобия экспериментальной модели оригиналу [1].
Цель настоящих исследований - выяснение роли биомоделирования в решении вопросов, связанных с воздействием объектов окружающей среды на организм человека.
Материалы и методы
Модельные эксперименты проводили на лабораторных животных - белых нелинейных крысах и морских свинках. Экспериментальных животных содержали в специальном помещении с 12-часовым светлым/темным циклом, регулируемой температурой и влажностью, со свободным доступом к чистой водопроводной воде и пище, включающей все необходимые витамины и микроэлементы в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных
Для корреспонденции: Соседова Лариса Михайловна; sosedlar@mail.ru
For correspondence: Sosedova L.M., sosedlar@mail.ru.
животных, которых используют для экспериментальных и иных целей (Страсбург, 1986), а также «Правилами лабораторной практики» (приказ Минздравсоцразвития от 23 августа 2010 г. № 708н). Во всех сериях моделирования использовали белых нелинейных крыс массой от 180 до 260 г, при этом в каждой экспериментальной группе было по 8-10 животных. Умерщвление животных проводили методом декапитации в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными приказом Минздрава СССР от 12.08.1977 г.
Экспериментальное моделирование биологических эффектов действия нового перспективного антимикробного нанобиокомпозита на основе трансмембранного биополимера арабиногалактана и инкапсулированных в него наночастиц серебра, разработанного в Институте химии им. А.Н. Фаворского [2], выполняли на белых крысах в подострых опытах путем внутрижелудочного введения биокомпозита наносеребра (размер наночастиц 10-12 нм, содержание серебра 16,73%) в дозе 100 мкг на 1 кг массы тела животного. Оценку воздействия на-нобиокомпозита проводили интегрально, изучая состояние системы перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиокислительной системы (АОС) и на субклеточном уровне при помощи иммуногистохимического метода определения экспрессии белка bcl-2 и каспазы 3 в нервных клетках в соответствии с протоколом, предложенным производителем (Menzel, Германия).
Экспериментальное моделирование нейроинтокси-каций включало воздействие на лабораторных животных винилхлоридом, дихлорэтаном, парами металлической ртути, сулемой, толуолом при различных путях (ингаляционный, внутрижелудочный) и сроках (от 2 до 8 нед) введения их в организм белых крыс. Наряду с этим для решения поставленных задач в динамике обследовали морфофункциональное состояние ЦНС у новорожденного и половозрелого потомства, полученного от животных с нейроинтоксикацией сулемой (6 нед самцам белых крыс подкожно вводили раствор сулемы: 0,05 мг ртути на 100 г массы тела животного) и винилх-лоридом (8 нед самцы опытной группы ингаляционно получали винилхлорид в концентрации 1200 мг/м3).
Отдельно моделировали воздействие толуолом на животных с грузом внутриутробной гипоксии. Моделирование пренатальной гипоксии проводили нитритом натрия по собственной оригинальной методике [3]. Ингаляцию толуолом 3-месячных белых крыс с пренаталь-ной гипоксией осуществляли в газовых камерах на протяжении 1 мес по 4 ч 5 дней в неделю в концентрации 150 ppm.
Сочетанное воздействие биологического и химического факторов проводили путем сенсибилизации морских свинок белоксодержащей пылью (БСП) микробиологического производства и диоксидом серы в разных сочетаниях и последовательностях. БСП вво-
дили морским свинкам по 500 мкг в смеси с неполным адъювантом Фрейнда под апоневроз задней лапки. Обязательным условием являлось создание у морских свинок низкодозной или высокодозной толерантности, индукцию которой вызывали по методике, предложенной Л.А. Дуевой, О.Г. Алексеевой, Т.И. Гришиной [4]. Ингаляционную затравку диоксидом серы осуществляли, помещая морских свинок в затравочные камеры на 4 ч в течение 10 дней. Концентрацию SO2 (2-4 мг/м3), температуру и влажность поддерживали на одном уровне. Ингаляционную экспозицию диоксидом серы проводили за 14 дней, или через 14 дней, или одновременно с сенсибилизирующими инъекциями БСП. Тестирование животных осуществляли на 21-28-е сутки после окончания всех затравок.
Всего в экспериментальных исследованиях использовали 760 самцов и 250 самок белых крыс, 380 морских свинок.
Обследование животных осуществляли классическими методами, принятыми в токсико-гигиенических исследованиях, которые включают биохимический, ал-лергологический, поведенческий, электронейрографи-ческий, гистологический, морфометрический анализы [5], а также в соответствии с разработанными нами методическими рекомендациями «Методы комплексной оценки поведения лабораторных крыс, используемых для экспериментально-гигиенических исследований», утвержденными на заседании научного совета по медико-экологическим проблемам здоровья работающих РАМН 24 июня 2011 г.
Результаты и обсуждение
На протяжении многих десятилетий нормирование факторов окружающей среды, включающее изучение изолированного, комбинированного, комплексного и сочетанного действий, оставалось ведущим экспериментальным исследованием в гигиене [6-8]. Именно на основании данного рода экспериментов основано законодательно утверждаемое регламентирование воздействия основных неблагоприятных факторов. Вместе с тем в последние годы появился новый класс соединений, требующий пристального исследования специфических биологических эффектов на организм человека и лабораторных животных, - это наночастицы, наноматериалы и нанокомпозиты. Существующий подход к проведению исследований и оценке безопасности наноматериалов основан на принципах и критериях классической токсикологии. При этом учитывают зависимость доза-эффект критических систем или доза-статус организма. Мы считаем такой подход недостаточным для наночастиц и наноматериалов. По нашему мнению, оценка эффекта действия наночастиц и наноматериалов на организм должна проводиться на основании результатов ультрамикроскопических исследований клеток-мишеней (электронно-микроскопическая, конфокальная микроскопия, внутриклеточная протеомика, метаболомика с использованием различных меток) и в течение длительного периода наблюдений. К сожалению, остается вне зоны внимания возможность воздействия наночастиц на генетические структуры соматических и половых клеток организма. Создание в стране опытно-промышленных производств нанопрепаратов и предприятий с использованием нанотехнологий опережает разработку методических подходов к гигиеническому нормированию наночастиц в окружающей среде.
В наших экспериментах при изучении ответной реакции организма экспериментальных животных на вве-
дение нанобиокомпозита на основе трансмембранного биополимера арабиногалактана и инкапсулированных в него наночастиц серебра установили повышение активности процессов АОС ^Н-глутатиона, каталазы), отсутствие изменений в системе ПОЛ. Несмотря на кажущееся благополучие со стороны интегральных показателей организма, выявили дистрофические нарушения в нейронах, инфильтрацию ткани головного мозга клетками крови в районе центральной извилины, под эпендиму, глиальные рубцы, утолщение эндотелия сосудов; в ткани печени мелкоочаговый некроз, фиброз, стаз сосудов с явлениями тромбоза, расширение синусоидов [9]. Мы обнаружили, что нагрузка на организм нанобиокомпо-зитом является модулятором апоптоза в нервных клетках, так как наблюдается резкое возрастание экспрессии маркеров апоптоза (каспаза 3, Ьс1-2), что свидетельству -ет о готовности клеток к программированной смерти.
Одним из фундаментальных направлений работы института стала разработка методических подходов к моделированию на лабораторных животных (белых крысах) токсической энцефалопатии. В качестве нейротоксиче-ских агентов исследовали винилхлорид, дихлорэтан, пары металлической ртути, сулему. При анализе результатов биомоделирования токсической энцефалопатии установили следующее: экспериментальная модель токсической энцефалопатии максимально приближена к клиническим особенностям, наблюдаемым у человека; независимо от природы воздействующих химических соединений, а также путей поступления в организм структурно-морфологические и функциональные нарушения нервной системы, формирующиеся при воздействии нейротоксикантов, имеют общие патогенетические закономерности; как правило, нарушения в организме лабораторных животных с экспериментальной токсической энцефалопатией носят стойкий необратимый характер и прогрессируют в динамике постконтактного периода. Экспериментальное моделирование позволило выявить основные точки реализации патологического процесса и факторы, обусловливающие формирование и прогрес-сирование токсической энцефалопатии в отдаленном периоде у лиц, уже не контактирующих с нейротоксиче-ским фактором. В результате предложена методология биомоделирования токсической энцефалопатии. На примере ртутной токсической энцефалопатии обоснованы критерии достоверности формирования энцефалопатии у лабораторных животных [10-13]. Нейровизуализация патологического процесса при ртутной энцефалопатии с позиций доказательной медицины позволила выявить ключевые звенья ее прогредиентного течения в отдаленном периоде интоксикации:
- сохранение дистрофии нейронов;
- прогрессирующее снижение плотности расположения нормальных нейронов на единицу площади;
- сохранение нарушений ультраструктуры нейронов (увеличение площади ядер, уменьшение суммарной площади митохондрий);
- нарастающую демиелинизацию нейронов;
- наличие периваскулярного и перицеллюлярного отека;
- стаз сосудов:
- изменение экспрессии нейроспецифических белков.
Чрезвычайно важной и актуальной на современном
этапе становится проблема отдаленных последствий воздействия химических токсикантов в последующих поколениях [14, 15]. Актуальность такого рода исследований определяется не только недостаточным количеством в современной отечественной и зарубежной литературе сведений о влиянии интоксикаций родителей
на становление основных физиологических функций организма потомства, но и необходимостью изучения вклада предшествующих неблагоприятных факторов в течение патологических процессов с целью прогнозирования персонифицированного риска развития заболеваний, обусловленных воздействием факторов окружающей среды. На примере интоксикаций белых крыс сулемой и винилхлоридом мы совершенствуем методические подходы к изучению влияния химического груза родителей на последующие поколения. Показано, что у новорожденных белых крыс наблюдается отставание развития сенсорно-двигательных реакций, а у половозрелого потомства первого и второго поколений возникают нарушения со стороны ЦНС, проявляющиеся снижением общей двигательной активности, сокращением ориентировочно-исследовательских реакций, формированием нейрофизиологических нарушений по результатам электромиографии, изменением морфологии ткани головного мозга и явлениями генотоксично-сти в соматических клетках по методу ДНК-комет [16]. Поставленная проблема требует дальнейшего изучения для выявления механизмов данного явления и поднимает вопрос о значимости химического "груза" родителей для последующих поколений.
Во многих случаях воздействие неблагоприятных факторов окружающей среды, тропных к нервной системе, вызывает нарушения церебрального гомеостаза лишь у отдельных высокочувствительных лиц среди всех, получивших экспозицию. Изменение чувствительности к различным химическим веществам является весьма актуальной и малоизученной медико-биологической проблемой в настоящее время. Вместе с тем предрасполагающие факторы риска возникновения патологии ЦНС, без знания которых невозможна разработка профилактики и коррекции нарушений, пока еще недостаточно изучены и могут иметь важное прикладное значение для диагностики предпатологических состояний, а также процессов, связанных с нейродегенеративными процессами и гибелью нервных клеток [17-19]. В основе проведенных исследований лежала выдвинутая нами гипотеза о пренатальной гипоксии как факторе возможного риска развития нейродегенеративных нарушений при воздействии нейротоксикантов в процессе онтогенеза человека. Актуальность настоящих исследований определяется не только недостаточным количеством в современной отечественной и зарубежной литературе сведений о влиянии пренатальной гипоксии на характер последующей интоксикации в половозрелом возрасте, но и необходимостью изучения вклада предшествующих неблагоприятных факторов в течение патологических процессов с целью прогнозирования персонифицированного риска развития заболеваний, обусловленных воздействием экологических факторов.
Гипоксическое повреждение головного мозга в период эмбрионального развития являлось фактором, оказывающим влияние на последствия интоксикации толуолом крыс в половозрелом возрасте. Наиболее выраженные изменения в структуре поведения при ингаляционном воздействии толуола наблюдали у животных с хронической (с 10-х по 19-е сутки эмбриогенеза) внутриутробной гипоксией. У данных животных повышался уровень тревожности, они были менее подвижны и демонстрировали значительное снижение поисковой активности. При действии толуола на крыс, подвергавшихся острому (13-14-е сутки эмбриогенеза) гипокси-ческому воздействию, толуол также вызывал повыше-
ние тревожности, однако в целом структура поведения соответствовала показателям при интоксикации здоровых крыс. Учитывая тот факт, что тормозное влияние на ЦНС и снижение когнитивных функций у животных толуол вызывает при воздействии высоких доз (500 ppm и выше), можно предположить, что животные, подвергавшиеся пренатальной гипоксии, являются более чувствительными к воздействию токсиканта, демонстрируя подобные изменения уже при дозе 150 ppm [20].
Проведенное в институте экспериментальное моделирование сочетанного действия БСП микробиологического производства и диоксида серы позволило разработать методологические основы изучения сочетанного действия факторов биологической и химической природы, особенностью которых является необходимость учитывать первоначальный статус организма в целом и последовательность воздействия изучаемых факторов [21, 22]. Принимая во внимание возрастающее биологическое загрязнение как промышленных зон, так и атмосферного воздуха населенных мест, считаем, что предложенные методические подходы будут являться актуальными и лежать в основе биомоделирования при изучении сочетанного действия различных биологических и химических факторов.
Заключение
Таким образом, биомоделирование дает возможность объективно оценивать воздействие различных факторов окружающей среды на организм, выявлять точки приложения и механизмы их неблагоприятного действия. Визуализация патологического процесса с позиций доказательной медицины направлена на прицельные, патогенетически обоснованные лечебно-профилактические мероприятия: первоначально в экспериментальных условиях, а в дальнейшем и при реабилитации больных или пострадавших.
В целом фундаментальные исследования в гигиене дают возможность управления рисками и механизмами формирования патологических процессов при воздействии экологических факторов на организм человека и существенно повышают эффективность разработанных способов диагностики, лечения, профилактики и реабилитации. Особая значимость экпериментального моделирования заключается в разработке подходов к персонифицированной медицине, так как знания о предшествующей пренатальной патологии или нейроин-токсикации родителей дают возможность обоснования индивидуальных мер профилактики, лечения, а также принятия решений о трудоустройстве подрастающего поколения. Несомненно, обоснование персонифицированных критериев риска c использованием экспериментального моделирования требует осторожного подхода к интерпретации полученных на лабораторных животных результатов, вместе с тем они способствуют развитию новых направлений научных исследований как в клинической практике, так и в эксперименте.
Литер атур а
1. Каркищенко Н.Н. Основы биомоделирования. М.: Изд-во ВПК; 2004.
2. Shurygina I.A., Sukhov B.G., Fadeeva T.V., Umanets V.A., Shurygin M.G., Ganenko T. V. et al. Bactericidal action of Ag(0)-antithrombotic sulfated arabinogalactan nanocomposite: coevo-lution of initial nanocomposite and living microbial cell to a novel nonliving nanocomposite. Nanomed. Nanotechnol. Biol. Med. 2011; 7: 827-33.
3. Соседова Л.М. и др. Способ моделирования гипоксической энцефалопатии в пренатальный период у мелких лабораторных животных. Патент № 2497202, РФ. 2013.
4. Дуева Л.А., Алексеева О.Г., Гришина Т.И. Вопросы адаптации и дезадаптации иммунной системы организма при воздействии промышленных химических аллергенов. Гигиена труда и профессиональные заболевания. 1982; 4: 8-12.
5. Курляндский Б.А., Филов В.А., ред. Общая токсикология. М.: Медицина; 2002.
6. Измеров Н.Ф., Суворов Г.А., Радионова Г.К., Корбакова А.И. Новые методические подходы к изучению и оценке состояния здоровья в медицине труда. Медицина труда и промышленная экология.1997; 3: 1-5.
7. Курляндский Б.А. Об основных тенденциях развития профилактической токсикологии. Токсикологический вестник. 2002; 5: 2-5.
8. Bhattacharya S. The genesis, stadies and future of environmental toxicology. Indian J. Exp. Biol.1996; 6: 491-5.
9. Новиков М.А., Титов Е.А., Вокина В.А., Якимова Н.Л., Соседова Л.М., Коржова С.А. и др. Биологические эффекты нового серебросодержащего полимерного нанокомпозита. Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2012; 2: 121-5.
10. Титов Е.А., Соседова Л.М., Якимова Н.Л. Методические подходы к моделированию токсической энцефалопатии с позиции морфометрии. Сообщение 2. Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2011; 3 (ч. 2): 161-5.
11. Соседова Л.М. Научно-методические основы моделирования ртутной токсической энцефалопатии. Токсикологический вестник. 2010; 1: 21-5.
12. Соседова Л.М. и др. Способ моделирования отдаленной токсической энцефалопатии. Патент № 2341828, РФ. 2008.
13. Соседова Л.М. и др. Способ диагностики отдаленной токсической энцефалопатии. Патент № 2383060, РФ. 2010.
14. Потемина Т.Е., Рыжакова Д.И., Кузнецова С.В. Влияние факторов внешней среды крупных промышленных городов на развитие мужского бесплодия. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2007; 3: 26-8.
15. Домшлак М.Г., Макарова-Землянская Е.Н. Информационное письмо о необходимости расширения генетических исследований при оценке влияния химических веществ на половую функцию работающих. Медицина труда и промышленная экология. 2009; 10: 45-8.
16. Рукавишников В.С., Соседова Л.М., Капустина Е.А. Оценка проявлений химического мутационного груза на потомстве белых крыс. Гигиена и санитария. 2011; 6: 61-4.
17. Yoshimasu K., Yamashita H., Kiyohara C., Miyashita K. Epidemiology, treatment and prevention of attention deficit/hyperactivity disorder: a review. Nippon Koshu Eisei Zasshi. 2006; 53 (6): 398-410.
18. Отеллин В.А., Хожай Л.И., Ватаева Л.А., Шишко Т.Т. Отдаленные последствия воздействия гипоксии в перинатальный период развития на структурно-функциональные характеристики мозга у крыс. Российский физиологический журнал. 2011; 10: 1092-100.
19. Игнатьева Р.К. Перинатальные проблемы в России. М.: Медицина; 2006.
20. Вокина В.А., Соседова Л.М., Катаманова Е.В., Рукавишников В.С., Журба О.М. Влияние пренатальной гипоксии на характер нейротоксического эффекта толуола у крыс. Токсикологический вестник. 2013; 4: 47-51.
21. Рукавишников В.С., Соседова Л.М. Методологические аспекты оценки сочетанного действия биологического и химического факторов. Медицина труда и промышленная экология. 2006; 9: 23-7.
22. Соседова Л.М., Рукавишников В.С. Оценка риска сочетанно-го воздействия биологических и химических факторов окружающей среды на организм человека. Гигиена и санитария. 2010; 5: 75-9.
References
1. Karkishchenko N.N. Bases of biomodeling [Osnovy biomod-elirovaniya]. Moscow: Izd-vo VPK; 2004. (in Russian)
2. Shurygina I.A., Sukhov B.G., Fadeeva T.V., Umanets V.A.,
Shurygin M.G., Ganenko T.V. et al. Bactericidal action of Ag(0)-antithrombotic sulfated arabinogalactan nanocomposite: coevo-lution of initial nanocomposite and living microbial cell to a novel nonliving nanocomposite. Nanomed. Nanotechnol. Biol. Med. 2011; 7: 827-33.
3. Sosedova L.M. et al. A method of modelling of hypoxic encephalopathy in the prenatal period of small laboratory animals. Patent N 2497202, Rossiiyskaya Federatsiya. 2013. (in Russian)
4. Dueva L.A., Alekseeva O.G., Grishina T.I. The issues of adaptation and disadaptation of the immune system of the organism under influence of industrial chemical allergens. Gigiena truda i professional'nye zabolevaniya.1982; 4: 8-12. (in Russian)
5. Kurlyandskiy B.A., Filov V. A., eds. General toxicology [Obsh-chaya toksikologiya]. Moscow: Meditsina; 2002. (in Russian)
6. Izmerov N.F., Suvorov G.A., Radionova G.K., Korbakova A.I. New methodological approaches to the study and assessment of the state of health in occupational medicine. Meditsina truda i promyshlennaya ekologiya. 1997; 3: 1-5. (in Russian)
7. Kurlyandskiy B.A. About the main trends in the development of preventive toxicology. Toksikologicheskiy vestnik. 2002; 5: 2-5. (in Russian)
8. Bhattacharya S. The genesis, stadies and future of environmental toxicology. Indian J. Exp. Biol.1996; 6: 491-5.
9. Novikov M.A., Titov E.A., Vokina V.A., Yakimova N.L., Sosedova L.M., Korzhova S.A. et al. Biological effects of new polymeric nanobiocomposites with nanosilver particles. Byulleten' VSNTsSO RAMN. 2012; 2: 121-5. (in Russian)
10. Titov E.A., Sosedova L.M., Yakimova N.L. Methodical approaches to the modelling of toxic encephalopathy with position morphometrics. Message 2. Byulleten' VSNTs SO RAMN. 2011; 3 (Pt 2): 161-5. (in Russian)
11. Sosedova L.M. Scientific-methodical bases of modelling of mercury toxic encephalopathy. Toksikologicheskiy vestnik. 2010; 1: 21-5. (in Russian)
12. Sosedova L.M. et al. A method of modelling of remote toxic encephalopathy.Patent N 2341828, Rossiyskakya Federatsiya. 2008. (in Russian)
13. Sosedova L.M. et al. Method of remote diagnostics of toxic encephalopathy. Patent N 2383060, Rossiyskakya Federatsiya. 2010. (in Russian)
14. Potemina T.E., Ryzhakova D.I., Kuznetsova S.V. The influence of environmental factors in the large industrial cities in the development of male infertility. Patologicheskaya fiziologiya i eksperimental'naya terapiya. 2007; 3: 26-8. (in Russian)
15. Domshlak M.G., Makarova-Zemlyanskaya E.N. Information letter about the necessity of expansion of genetic research to gauge the impact of chemicals on sexual function working. Meditsina truda i promyshlennaya ekologiya. 2009; 10: 45-8. (in Russian)
16. Rukavishnikov V.S., Sosedova L.M., Kapustina E.A. Assessing the manifestations of chemical mutation of cargo in the offspring of white rats. Gigiena i sanitariya. 2011; 6: 61-4. (in Russian)
17. Yoshimasu K., Yamashita H., Kiyohara C., Miyashita K. Epidemiology, treatment and prevention of attention deficit/hyperactivity disorder: a review. Nippon Koshu Eisei Zasshi. 2006; 53 (6): 398-410.
18. Otellin VA., Khozhay L.I., Vataeva L.A., Shishko T.T. Long-term effects of influence of hypoxia in the perinatal period of development on the structural and functional characteristics of the brain in rats. Ros-siyskiyfiziologicheskiyzhurnal. 2011; 10: 1092-100. (in Russian)
19. Ignat'eva R.K. Perinatal problems in Russia [Perinatal'nye prob-lemy v Rossii]. Moscow: Meditsina; 2006. (in Russian)
20. Vokina V.A., Sosedova L.M., Katamanova E.V., Rukavishnikov V.S., Zhurba O.M. Impact of prenatal hypoxia on the nature of neurotoxic effect of toluene in rats. Toksikologicheskiy vestnik. 2013; 4: 47-51. (in Russian)
21. Rukavishnikov V.S., Sosedova L.M. Methodological aspects of assessment of combined effect of biological and chemical factors. Meditsina truda i promyshlennaya ekologiya. 2006; 9: 23-7. (in Russian)
22. Sosedova L.M., Rukavishnikov VS. Risk assessment ofthe combined effects of biological and chemical environmental factors on the human organism. Gigiena i sanitariya. 2010; 5: 75-9. (in Russian)
