ПРАКТИКУМ
Метод взятия крови из малой подкожной вены голени у мышей
О.И.Степанова
Научный центр биомедицинских технологий РАМН, Москва
Описан простой метод взятия крови, который позволяет многократно брать разные порции крови у мышей без анестезии, обездвиживания и сохранять жизнь животным,
Ключевые слова: подкожная вена голени, мышь, метод, кровь, капилляры..
Существуют разные способы взятия крови у мышей: прокол лапки, ампутация хвоста, из ретроорбитального или подъязычного венозных сплетений и пункция сердца, но каждый из вышеперечисленных методов имеет свои недостатки: это применение анестезии, веду ил ее к искаженным результатам, обездвиживание, отсутствие специального вакуумного прибора, образование культи вместо хвоста, недостаточные объемы крови при многократных взятиях в течение дня.
Для многократных взятий крови, необходимых для биохимических или других постоянных исследований, существует простой альтернативный метод - это взятие крови из латеральной подкожной вены голени и стопы у мышей (малая подкожная вена). Данный метод был разработан сотрудниками Forsoksdyrveterinar-tjeneste Laboratory Animal Veterinary Services Vivarium Universitetel i Bergen, 5021- Bergen. NORGE, авторами Hemas A., Smith A.J., Solberg P. (1998 r. )
Особую благодарность выражаем директору отдела лабораторного оборудования ООО «РТС Инжиниринг» A.B. Нар-нову за любезно предоставленную информацию.
Материалы и метод
Рис. 1. Для использования этого метода
необходимо иметь:
♦ центрифужную пробирку' из пластмассы (фалькон) на 50 мл с удаленным дном для поступления воздуха;
♦ инсулиновую иглу 23в (0,6 мм):
♦ капилляры для взятия крови разных объёмов (5,35 мкл и т.д. или микровет-ты до 300 мкл).
id
Рис. 2. Животное помещаем в пробирку (фалькон) для фиксации
Рис. 3. Фиксируем заднюю (левую) лапку за складку кожи между голенью и бедром, придерживая хвост.
Рис. 4. Шёрстный покров голени удаляем безопасной бритвой и место прокола дезинфицируем 70%-ным спиртом.
Рис. 5. На голени хорошо видна латераль-ная подкожная вена (малая подкожная вена).
Рис. 6. Делаем прокол вены стерильной инсулиновой иглой.
Рис. 7. Вытекающую кровь собираем капиллярами, а для снижения свертываемости крови используем 5%-ный раствор лимоннокислого натрия, предварительно смочив им кожный покров голени.
Рис. 8. Лапку фиксируем в положении, замедляющем ток крови, затем место пункции тампонируем до полной остановки крови и прижигаем ранку 3%-ным раствором йода.
Вскоре на месте пункции у мыши образуется корочка, которую нужно удалить при повторном заборе крови. Использовать место пункции можно многократно в течение дня или провести забор крови на другой лапке.
Предложенный метод весьма прост и удобен, исключает использование анестезии и обездвиживание, сохраняет жизнь животного и позволяет многократно и в разных объёмах (до 500 мкл) собирать кровь для необходимых исследований. Этот метод подходит и для более крупных лабораторных грызунов.
ALTERNATIVE METHOD OF BLOOD SAMPLING FROM MOUSE’S SAPHENOUS VEIN
O.I. Stepanova
Research Center for Biomedical Technologies of RAMS, Moscow
This method allows us to take different portions of blood, repeatedly, without anesthesia. Also the method presented reduces mice mortality.
Keywords: saphenous vein, mouse, method, blood, capillary.
Рис. 9. Фиксируем заднюю (правую) лапку за складку кожи между брюшком и бедром. Мышь готова к повторному взятию крови.