CC BY
68
го, следует отметить, что в группах тренированных детей имело место достоверное увеличение этого показателя с возрастом, что указывает на более мощный воздушный поток во время вдоха, т.е. является отражением работы дыхательной мускулатуры, обеспечивающей у них по сравнению со своими сверстниками больший дыхательный объем, о чем говорилось выше.
Таким образом, проведенные исследования функционального состояния системы внешнего дыхания у детей в период младшего школьного возраста в процессе их роста и развития позволили выявить определенные закономерности становления этой системы, как от возраста, так и от интенсивности физической активности ребенка. Одним из основных признаков становления функциональных систем в процессе онтогенеза являет-
Для системы дыхания это - снижение степени ги-первеитиляции легких, объема альвеолярной вентиляции, увеличение продолжительности периодов дыхательного цикла, сопряженных с наименьшей электрической активностью дыхательных мышц, что способствует повышению эффективности легочного газообмена. У детей, находящихся на повышенном двигательном режиме, функциональные резервы системы внешнего дыхания были выше, а уровень работы данной системы более экономичен по сравнению со сверстниками, находящимися на обычном двигательном режиме. Это проявлялось в достоверном снижении частоты дыхания, жизненной емкости легких, увеличении форсированной жизненной емкости и относительно высокой интенсивности воздушных потоков на фоне одинаковых показателей дыхательного объема, индекса Тифно.
ся их стабильность и экономизация их функций.
FORMATION OF FUNCTION OF EXTERNAL BREATH TN HEALTHY TEENAGERS
WTTH VARTOUS MOTOR ACTTVTTY
LA. Mikhaylova (Krasnoyarsk State Medical Academy)
329 children aged 7-12 years who had usual motive mode and with increased physical activity (15-18 thousand steps a day) are surveyed. The authentic increase in respiratory volume, vital capacity and other dynamic volumes easy in children during the investigation is revealed. It is shown, that in children who have increased motive mode, frequency of breath, vital capacity is reliably lower, and also peak of volumetric speed of an air stream and volume of the forced exhalation during peak volumetric speed on a background of increase in the forced vital capacity of lungs, that shows the greater range of reserve opportunities in these children in comparison with the teenagers who have usual motive mode.
Литература
1. Анохин II.K. Очерки по физиологии функциональных сисісм. - М.:Мсдицина,1 975. - 448 с.
2. Колчинская А.З. Кислородные режимы организма
ребенка и подроеі ка. - Киев: Наукова думка,
1973.-320 с.
3. Кузнецова Т.Д., Гурова O.A., Самбурова И.II. и др Особенности возрасіного развития сисчсмы дыхания у дсісй 6-15 леї // Физиология человека. -1991. - Т.17, №5. - С.142-150.
4. Кузнецова Т.Д., Разживина И.М. Индивидуальные особснносіи развития дыхачелыюй функции легких у дсісй 01 7 до 8 леї // Физиология человека. -1994. - Т.20, №3. - С.68-73.
. Михайлова Л.А. Системный подход в изучении процессов ipancimpia и потребления кислорода организмом человека // Дсп. в ВИНИТИ 20.02.2001., №445 - В2001. - 14 с.
. Ширяева И.С., Савельев В.II., Куприянова О.О. Парамсчры функционального состояния кардиорсс-пираюрной сисчсмы ребенка // Росс. псд. журн. -2000. -№ 1 . - С.41 -43.
Ширяева И.С. Функция внешнего дыхания в дсч-ском возрасчс // Физиология человека. - 1978. -Т.4, №4. - С.716-721.
Ямпольская Ю.А. Физическое развичис и адаптационные возможное!и современных школьников// Росс. псд. журн. - 1998. -№1. - С.9-11.
Случаи из практики
© КУЧУМОВА Л.П., ТАРАБРИН А.Л. -
МЕТОД ИММУНОФИКСАЦИИ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ И НЕФРОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
А .П. Кучумова, A.A. Тарабрин.
(Иркутский областной диагностический центр, гл. врач - к.м.н. И.В. Ушаков)
Резюме. Рассмотрены два клинических случая дифференциальной диагностики нефрита и миеломной болезни.
Ключевые слова: метод иммунофиксации, миеломная болезнь, нефрит, дифференциальная диагностика, случаи из практики.
Парапротеины - это иммуноглобулины или их фрагменты, вырабатываемые плазматическими клетками образующимися из одной специфической клетки линии В-лимфоцитов (моноклон) [1]. В литературе нет однозначной терминологии по значению слова парапротеин, синонимами этого слова являются моноклональный, гомогенный иммуноглобулин, а также М-градиент.
В основе строения молекулы нормального иммуноглобулина лежит симметричная четырехцепочечная структура, состоящая из двух вариантов полипептидных цепей: двух тяжелых и двух легких. Парапротеины же обычно структурно однородны, т.е. их молекула состоит только или из тяжелых, или легких цепей одного типа. Иногда состоят из отдельных легких цепей одного типа или каппа, или лямбда. В других случаях они представлены тяжелыми цепями (фрагментами иммуноглобулинов). Парапротеинам свойственна закономерность - класс и тип их в течение болезни не меняются. Структурную гомогенность моноклонального иммуноглобулина определяет гомогенность изоэлектрических точек молекул внутри пула, поэтому на электрофореграмме моноклональные иммуноглобулины образуют узкую, четко ограниченную полосу, называемую М-градиентом, локализация которой может быть различной: от зоны гамма-бета-глобулинов до альбумина (рис.1, 2,3).
Парапротеины встречаются наиболее часто при множественной миеломе, при таких системных заболеваниях иммунной системы, как макро-глобулинемия Вальденстрема, остром плазмобла-стном лейкозе, болезни легких и тяжелых цепей, лимфоме с парапротеинемией и др. [1,3,4], при хронической крапивнице [5], при сердечной трансплантации [6], при введении силикона в молочные железы [7], при гепатите С [8], при раке толстого кишечника [9], при системной красной волчанке, волчаночном нефрите [10], при лимфоме щитовидной железы [11], по нашим наблюдениям при раке желудка и прямой кишки.
Так как, выявление М-градиента четко указывает на наличие моноклональной секреции, то для его диагностики необходимо использовать исследования, проводимые в два этапа. На первом этапе проводится электрофоретическое разделение белков сыворотки крови и концентрированной мочи, на втором этапе при подозрении на наличие
моноклональной секреции и для идентификации патологического белка применяется метод иммунофиксации, так как основной недостаток электрофореза - его неспецифичность, то есть невозможность сделать вывод о природе белковой полосы. Особенно это относится к случаям если: 1) М-градиент определяется на следовом уровне при нормальном содержании поликлональных иммуноглобулинов: 2) присутствуют так назы-
ваемые ложные М-градиенты: т.е. острофазные белки не иммуноглобулиновой природы - СРВ, фибриноген, лизоцим и другие белки, дающие четко ограниченную полосу под видом М-гради-ента: 3) скрытые М-градиенты, когда моноклональный белок мигрирует в зоне альфа, бета-глобулинов и маскируется белками этих фракций. В этих случаях для их верификации необходим метод иммунофиксации [1,2].
При выявлении на электрофореграмме сыворотке крови парапротеина (М-градиента) обязательным является электрофоретическое исследование мочи. Примерно в 20% случаев миеломной болезни опухоль продуцирует только легкие цепи иммуноглобулинов, которые их из-за низкой молекулярной массы быстро фильтруются в почках и могут не обнаруживаться в сыворотке, но будут присутствовать в моче. Для подтверждения диагноза в моче методом электрофореза определяют белок Бенс-Джонса (В.Г), который чаще всего располагается в зоне бета-гамма глобулинов (рис.З). Белком Бенс-Джонса названы легкие цепи иммуноглобулинов присутствующие в моче, они накапливаются в 75% случаев миеломной болезни [3,
4]. На рисунке 4 показан электрофорез сыворотки крови и мочи у 10-ти больных, как видим на треке 6, 7 представлен белок Бенс-Джонса в моче.
Используемые в клинических лабораториях методики не всегда позволяют выявить белок Бенс-Джонса в связи с их низкой чувствительностью. Примером тому является часто используемая в практике реакция термопреципитации в кислой среде, которая считается качественной пробой на присутствие белка Бенс-Джонса. Реакция малочувствительна, неспецифична, поэтому часто дает ложноположительные результаты. Потому применение электрофореза белков мочи с последующей иммунофиксацией, что обеспечивает наряду с высокой чувствительностью также специфичность, представляется в настоящее время не-
Рис.1. Элскчрпфорсграмма белков сыво-рочки крови здорового человека
Рис.З. Мислома О, М-градист в зоне гамма-глобулинов
Рис.З. Мислома А, М-градист в зоне бсіа-глобулинов
обходимым методом позволяющим окончательно С мочой выделяются белки не только низкой, но и вы-
охаракт сризоват ь тип и класс моноклональной сокои молекулярной массы,
секреции [2].
ФсошъГ Paragon' SPE Gel *
Ф с о ш i ? " Paragorr SPH Gel *
«Ml mm шшш pm *<» tfft "***
: • ' 5i;i ' m* ■
t, м ттШ
ШШШ Ш ъууут
123«S6?«3 10‘
Рис.4. Электрофорез белков сыворотки крови и мочи.
Преимуществом этого метода еще является возможность определить тип протсипурии, так как выявление и дифференцировка плазменных белков в моче с помощью электрофореза - весьма информативный тест для оценки почечной функции, нарушения которой может быть обусловлены ослабленной канальцевой рсабсорбцисй. В большинстве же случаев является результатом патологической проницаемости гломерулярных капилляров.
Вез применения иммунофиксации нельзя сказать о наличии или отсутствии парапротсипа в сыворотке крови и мочи только на основании методов широко используемых в ЛПУ, таких как турбидимстричсский, реакция тсрмопрсципита-ции в кислой среде, нефелометричсский.
Приводим два клинических примера.
Вольная Г. Амбулаторная карта (77495), которая была направлена в 2003 г. одной из поликлиник города в Иркутский областной диагностический центр (ИОДЦ). Цель направления верификация диагноза мисломпой болезни, так как у больной был найден белок Вснс-Джонса в моче реакцией тсрмопрсципитацисй, В выписке из истории болезни больной, следовало ,410 у нес на протяжении 6 лет наблюдалась ускоренная СОЭ-54-72 мм/час, протсинурия (2,2 г/л), гематурия, повышенный уровень крсагинина и мочевины, высокое артериальное давление.
В биохимической лаборатории ИОДЦ было проведено электрофоретическое разделение белков сыворотки крови и мочи на аппарате Парагон-Вэкман с использованием геля агарозы. Подтверждена высокая протсинурия (7 г/л).
На рисунке 5, показана пластина с элсктрофорс-граммами десяти больных, на 2-м треке этой пластины - показана элсктрофорсграмма белков сыворотки крови больной Г., на которой отчетливо видим увеличение острофазных белков альфа 1,2 глобулинов. Интенсивно окрашенная полоса альфа 2-глобулинов может вызвать предположение о наличии в этой фракции скрытых моноклональных легких цепей. На 3-м треке -элсктрофорсграмма белков концентрированной мочи больной Г., здесь отмечаем массивную нссслсктивную протсинурию, на форсграммс представлены все фракции белков плазмы,что чаше наблюдается при глубоком поражении гломерулярного аппарата почкш когда
‘ 123456789 10'
•к.'. Ф
Рис.5. Элсктрофорсграмма белков крови (трек 2)и мочи (3) больной Г.
Однако, визуально не установлено наличие на данных фореграммах М-градиснта как в сыворотке, так и в моче. В связи с этим у данной больной был выполнен метод иммунофиксации в сыворотке крови (рис.6) и мочи (рис.7).
Фсоиигя1'1 Paragon' IFE Gel
1
2 ■ *
3
4
S
6
7
SPE igG igA igM К
№ А* 1 2 3 4 5 6
Рис.6. Иммунофиксация сыворотки крови больной Г.
&BLCKMAN ' Ф
. «гсооив? Paragon IFE Gel .
1 2 3 4 5 6
— ф Рис.7. Ииммупофиксация мочи больной Г.
Данные исследования четко показали отсутствие моноклональных иммуноглобулинов и их фрагментов в сыворотке крови и моче, что позволило исключить мисломную болезнь как причину протсипурии. Следовательно, в данном случае обнаружение белка Вснс-Джонса в моче с помощью реакции тсрмопрсципитации оказалось ложнопо-ложитсльпым. Полученные с помощью электрофореза и иммунофиксации лабораторные данные позволили верифицировать диагноз нефрит.
Наблюдение 2. Вольная 3. Амбулаторная карча (45702). проходила обследование в ИОДЦ в 2001 г. у нефролога, где был высчавлсм диагноз хронический гломсруломсфрич, хроническая почечная нсдосчачоч-ноечь 3-й сч. Из направления больной следовало, ччо у нес была прочеинурия (2,8 г/л), крсагининсмия (0,94 мммоль/л), снижение коицсч рационной способности почек (уд. вес мочи - 1004). скоросчь оседания эричро-цичов - 52 мм.час.
па (рис.8) и парапрочеинурия BJ каппа чипа (рис.9, чрек
5).
BECKMAN „ * ,
'W'coulter . Paragon IFE Gel
О
BECKMAN COULTER-
Paragon IFE Gel
S'
SPE
1
igG
2
IgA
3
igM
4
Рис.8. Иммунофиксация сыворочки крови больной 3.
Для выявления харакчера прочеинурии было проведено элскчрофорсчичсскос разделение белков сыворочки крови и конценчрированной мочи с последующей иммунофиксацисй. В резульчаче были усчамовлсмы М-градиенч в сыворочкс и моче, иденчифицированный по данным иммунофиксации как парапрочсинсмия В.) (Вснс-Джонса, моноклональные легкие цепи) каппа чи-
SPE IgG IgA IgM К A.
1 2 3 4 5 6
Рис.9. Иммунофиксация мочи больной 3.
Вольная 3. срочно была отравлена в гсмачологичс-скос очделение областей клинической больницы г.Ир-кучека. У больной были обнаружены осчсодссчрукции в косчях свода черепа, компрессионный перелом Д1 1, в мислограммс - 41.2% плазмачичсских клечок. Оконча-чельмый диагноз мислома.
Таким образом, как видим, на данных клинических примерах, что электрофорез белков сыворотки крови и мочи с последующей иммунофиксацией позволяет отдифференцировать заболевания, сопровождающиеся протеинурией, ускоренной СОЭ, установить характер и источник про-теинуриии, что дает клиницисту информацию для окончательной постановки диагноза.
TMMUNOFTXATTON METHOD FOR DIFFERENTIAL DIAGNOSTICS OF HEMATOLOGICAL
AND NEPHROLOGICAL DESEASES
L.P. Kuchumova, A.L. Tarabrin
(Irkutsk Regional Diagnostic Center)
Two clinical cases of differential diagnostics of nephrites and myelomic desease have been considered.
Литература
.Андреева H.H., Чсрнохвосчова H.В. Иммуноглобу-лимоиачии. - М.: Медицина, 1985. - 360 с.
. Варламова Н.Ю. Парапроч синсмии. Клиническая онкогемачология // Под ред. М.А. Волковой. - Медицина, 2000. - 571 с.
. Долгов В.В., Шевченко О.II. Лаборачорная диагностика нарушения обмена белков. - М., 1997. -PMAIIO. - 63 с.
. Луговская С.А., Морозова В.Т., Поччарь М.И. Лаборачорная диагносчика лейкозов. - М., 1999. -
PMAIIO. - 69 с.
. Urn W; Shurnak К.Н.; Reis М.; Pcrcz-Ordoncz В.; Saudcr D.; Forn A.; Irnric K.R. Malignan evolution of Schnilzlcrs syndronic-chronic urticaria and IgM monoclonal ganiniopalhy; report of a new case and review of the literature. Leukemia and lymphoma. - 2002. -Vol.43,N.I. -P.181-186.
Caforio A.L.;Gambino A.; Bclloni Fortina A.; Pi-ascrico S.; Scarpa I;.; Fcltrin G.; Топа I'.; Pompci T.; Tonin I;.; Amodori G. Monoclonal ganiniopalhy in heart transplantation; risk factor analysis and relevance of immunosuppressive load. Transplantation proceedings. - 2001. - Vol.33, N.l-2. - P.1583-1587. Karlson H.W.; Tanasijcvic V.; Hankinson S.I;.; Liang M.N.; Colditz G.A.; SpcizcrF.L.; Schur P.H. Mono-
clonal gammopathy and exposure to breast implants. Archives of internal medicine. - Boston, 2001. -Vol.161, N.6.-P.864-871 .
8. Pcrronc A.; Dcramo M.T.; Spaccavcnto F.; Santarcan-
gclo P.; I'avoino B.; Antonaci S. Hepatitis C virus genotypes, human leucocyte antigen expression and monoclonal gammopathy prevalence during chronic HCV infection. CYTOBIOS. - 2001. - Vol.106,
Suppl.l. - P.125-159.
9. Hori H.; Kihara Y.; Nagoshio ,;Hirohatas Y.; Abe S.; Murata I.; Otsuki M. Signet ring cell carcinoma ofthc colon with monoclonal gammopathy // Japanese Journal of Gastroenterology. - 2000. - Vol.97, N.ll. -P.1373-1380.
10. Strobel H.S; Fritschka I;.; Schmitt - Graff A.; Peter H.H. An unsual case of systemic lupus nephritis, and transient monoclonal gammopathy. Rheumatology international // Klinikum der Albert- LudwigsUniversität Freiburg. - 2000. - Vol. 19, N.6. - P.235-276.
11.Ncriishi K.; Hzaki H.; Arichiro K.; Okamato H. Thyroid lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissua with monoclonal gammopathy occurring in an atomic bomb survior: rcprt of case // Surgery today. - 2000. -Vol.30, N.2. - P.202-208.
