CC BY
10МЕТАБОЛИЗМ И ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ С РАЗНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬЮ К АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЕ ПРИ ОСТРОМ КОРОНАРНОМ СИНДРОМЕ
И.Ю. Гринштейн1, А.А. Савченко2, Ю.И. Гринштейн1, И.И. Гвоздев2
ФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» Минздрава России ФГБНУ «Красноярский научный центр Сибирского отделения РАН», обособленное подразделение «НИИ медицинских проблем Севера»
Цель исследования: изучение особенностей хемилюминесцентного состояния и активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофильных гранулоцитах крови у пациентов с разной чувствительностью к ацетилсалициловой кислоте (АСК) при остром коронарном синдроме (ОКС).
Материалы и методы. В исследование включены 53 пациентов с ОКС. Оценка резистентности или чувствительности к АСК выполнялась in vitro инкубированием обогащенной тромбоцитами плазмы с аденозиндифосфатом и АСК с определением уровня их агрегации. Состояние респираторного взрыва нейтрофилов исследовали методом хемилюминесценции. Активность ферментов в нейтрофилах изучалась биолюминесцентным методом.
Результаты исследования. У резистентных к АСК пациентов ОКС понижена скорость синтеза первичных и вторичных активных форм кислорода, уменьшен индекс люминол-зависимой активации нейтрофилов. Повышена интенсивность субстратной стимуляции гликолиза и окисления глюкозы по пентозофосфатному пути.
Заключение. При резистентности к АСК у больных ОКС отмечаются нарушения в метаболизме и функциональной активности нейтрофилов, что представляет интерес при изучении межклеточных взаимоотношений формирования тромба.
Ключевые слова: острый коронарный синдром, нейтрофилы, респираторный взрыв, активность ферментов.
METABOLISM AND CHEMILUMINESCENT ACTIVITY OF NEUTROPHILIC GRANULOCYTES IN PATIENTS WITH DIFFERENT SENSITIVITY TO ACETYLSALICYLIC ACID IN ACUTE CORONARY SYNDROMEI
I.Yu. Grinshtein, A.A. Savchenkol, Yu.I. Grinshtein, I.I. Gvozdev
Objective: to study the features of the chemiluminescent state and the activity of NAD (P) -dependent dehydrogenases in neutrophilic granulocytes of blood in patients with different sensitivity to acetylsalicylic acid (ACA) in acute coronary syndrome (ACS).
Materials and methods: The study included 53 patients with ACS. Evaluation of resistance or sensitivity to ASA was performed in vitro by incubating platelet-rich plasma with adenosine diphosphate and ASA to determine the level of aggregation. The state of respiratory explosion of neutrophils was investigated by the method of chemiluminescence. The activity of enzymes in neutrophils was studied by the bioluminescent method.
Results of the study: In patients with ACS-resistant ACS, the rate of synthesis of primary and secondary active forms of oxygen was reduced, and the index of luminol-dependent activation of neutro-phils was reduced. The intensity of substrate stimulation of glycolysis and oxidation of glucose by the pentose phosphate pathway is increased.
Conclusion: With resistance to ASA in patients with ACS, there are abnormalities in the metabolism and functional activity of neutrophils, which is of interest in studying the intercellular relationships of thrombus formation.
Keywords: acute coronary syndrome, neutrophils, respiratory explosion, enzyme activity
Введение
Неспецифическое воспаление при атеросклерозе - одна из причин разрыва покрышки атеромы, атеротромбоза коронарных артерий и острого коронарного синдрома (ОКС) [1]. Ней-трофильные гранулоциты являются ключевыми клетками воспаления. Они первыми мобилизуются в очаг некроза при инфаркте миокарда и служат основным источником свободных радикалов, вызывающих окислительный стресс [2]. Имеются доказательства непосредственного участия нейтрофилов в повреждении миокарда при острой ишемии [3]. Воспринимая многочисленные сигналы о дестабилизации внутренней среды, нейтрофилы модулируют свои функции, нацеленные на ее восстановление. Активированные нейтрофилы сами становятся мощными эффекторами пусковых и регуляторных механизмов каскадных реакций, обеспечивающих развитие воспаления.
Функциональная активность нейтрофилов во многом зависит от интенсивности респираторного взрыва и состояния внутриклеточного метаболизма [4, 5]. Однако особенности функционально-метаболических процессов в нейтрофилах при развитии резистентности к АСК у пациентов ОКС до сих пор остаются неизученными.
Цель исследования: изучение особенностей хемилюминесцентного состояния и активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в нейтро-фильных гранулоцитах крови у пациентов с разной чувствительностью к АСК при ОКС.
Материалы и методы
В исследование включены 53 пациента (средний возраст 61,1 + 1,1 лет, 25 мужчин и 28 женщин). Критериями включения в исследование являлись: ОКС у пациентов обоего пола, в возрасте от 35 до 75 лет, в первые 24 часа поступления в стационар от начала заболевания, не принимавших до госпитализации антиагреганты и антикоагулянты, и подписавших информированное согласие. Диагноз ОКС, а в дальнейшем острого инфаркта миокарда с элевацией или депрессией сегмента ST и положительным тропонином T устанавливался в соответствии с критериями Европейского общества кардиологов [6]. Критерии исключения: сопутствующий сахарный диабет, тяжелая сопутствующая патология (почечная недостаточность, последствия инсульта), сердечная недостаточность III стадии, кардиогенный шок при поступлении в стационар, отсутствие информированного согласия. Всем пациентам была проведена реперфузи-
онная терапия в виде чрескожного коронарного вмешательства или тромболитической терапии. В дальнейшем пациенты получали терапию антитромбоцитарными препаратами (АСК, клопидогрел), p-адреноблокаторами, ингибиторами ангиотензин-превращающего фермента, статинами. Контрольная группа сформирована из 50 относительно здоровых добровольцев без сердечно-сосудистых заболеваний (все испытуемые были обследованы на наличие сердечнососудистых заболеваний), сопоставимых по полу и возрасту (средний возраст 56,9+1,4 года, 27 мужчин и 23 женщины).
Все пациенты до начала лечения и реваску-ляризации были обследованы на резистентность к АСК и, соответственно, разделены на группы чувствительных (АЧ) и резистентных к АСК (АР). Оценка резистентности/чувствительности к АСК осуществлялась in vitro путем последовательного инкубирования обогащенной тромбоцитами плазмы с 5 мкМ аденозиндифосфата (АДФ) и 3,36 мМ АСК и определения уровня агрегации тромбоцитов после каждого инкубирования. Сущность определения заключалась в том, что у больных до начала терапии АСК исследовали АДФ-индуцированную и АСК-зависимую агрегации тромбоцитов и по их разнице определяли величину коэффициента ингибирова-ния агрегации (КИА), величина КИА<24 % свидетельствует о резистентности к АСК, при КИА >24% - о чувствительности к АСК [7].
Нейтрофилы выделяли из цельной гепарини-зированной крови центрифугированием в двойном градиенте плотности фиколл-урографина: р=1,077 г/см3 - для отделения лимфоцитов; р=1,119 г/см3 - для выделения нейтрофилов. Состояние респираторного взрыва нейтрофиль-ных гранулоцитов исследовали с помощью хеми-люминесцентного анализа [8]. В качестве индикаторов хемилюминесценции использовали люминол и люцигенин. Оценка спонтанной и зимозан-индуцированной хемилюминесценции осуществлялась в течение 90 минут на 36-каналь-ном хемилюминесцентном анализаторе "CL3606" (Россия). Определяли следующие характеристики: время выхода на максимум (Tmax), максимальное значение интенсивности (Imax), а также площадь под кривой (S) хемилюминесценции. Усиление хемилюминесценции, индуцированной зимозаном, оценивали отношением площади индуцированной хемилюминесценции ^инд.) к площади спонтанной ^спонт.) и определяли как индекс активации ^инд.^спонт.).
Исследование активности НАД(Ф)-зави-симых дегидрогеназ в нейтрофилах проводили с помощью биолюминесцентного метода [9]. Метаболизм клеток оценивали по активности следующих ферментов: глюкозо-6-фос-фатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фос-фатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фермента (НАДФМДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции малатде-гидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ- и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД- и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАД- и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДИЦДГ и НАД-ФИЦДГ, соответственно) и глутатионредук-тазы (ГР). Активность дегидрогеназ выражали в ферментативных единицах на 104 клеток, где 1 Е = 1 мкмоль/мин [10]. Исследование проводили на ферментативном препарате МАБ(Р): БЫМоксидоредуктаза-люцифераза из РЬо^Ьайепиш 1е^паШ1 (получен в ФГБНУ «НИИ биофизики», Красноярск).
Все исследования выполнены с информированного согласия испытуемых и в соответствии с Хельсинской декларацией Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения науч-
ных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2013 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 266.
Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75, соответственно). Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивали по Mann-Whitney U test. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0 (StatSoft Inc., 2004).
Результаты исследования
При исследовании люцигенин-зависимой хемилюминесценции нейтрофильных грану-лоцитов обнаружено снижение площади под кривой спонтанной хемилюминесценции у АР пациентов относительно показателей, выявленных у АЧ пациентов при ОКС (табл. 1). Также у АР пациентов снижена площадь под кривой зимозан-индуцированной люцигенин-зависимой хемилюминесценции как относительно контрольного диапазона, так и значений, выявленных у АЧ пациентов. Особенностями люцигенин-зависимой хемилюминесценции у АЧ пациентов является сокращение времени
Таблица 1
Люцигенин-зависимая хемилюминесцентная активность нейтрофильных гранулоцитов у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС
(Ме> С25 - С75)
Показатели Контроль n=50 1 Чувствительные к АСК пациенты n=34 2 Резистентные к АСК пациенты n=19 3
Ме С - С 25 75 Ме С - С 25 75 Ме С - С 25 75
Спонтанная хемилюминесценция
Tmax, сек. 2246,5 1538,0 - 3418,2 1902,5 1563,5 - 3248,0 2821,8 2113,0 - 4223,5
Imax, о.е. х 103 7,38 2,58 - 15,61 11,98 7,00 - 20,00 10,70 5,48 - 14,70
S, о.е.г 4,28 0,44 - 24,78 6,25 1,15 - 20,34 3,52 1,01 - 15,77
p2=0,045
Зимозан-индуцированная хемилюминесценция
Tmax, сек. 1830,9 1489,0 - 2439,1 1535,5 1262,5 - 1755,5 3084,0 2887,0 - 3724,1
p,=0,005 p2=0,020
Imax, о.е. х 103 14,03 7,61 - 28,49 17,45 5,12 - 34,21 17,41 14,95- 20,31
S, о.е.г 10,77 7,14 - 43,31 7,11 2,70 - 15,68 4,37 0,81 - 12,58
p1=0,044 p,=0,037
Sинд./Sспонт. 1,80 1,17 - 3,19 1,16 0,84 - 2,41 1,35 1,41 - 4,02
Примечания: р] - статистически значимые различия с контролем, р2 - статистически значимые различия между АЧ и АР пациентами.
Таблица 2
Люминол-зависимая хемилюминесцентная активность нейтрофильных гранулоцитов у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС
(Ме, С25 - С75)
Показатели Контроль п=50 1 Чувствительные к АСК пациенты п=34 2 Резистентные к АСК пациенты п=19 3
Ме С - С С25 С75 Ме С - С С25 С75 Ме С - С С25 С75
Спонтанная хемилюминесценция
Ттах, сек. 634,0 506,5 - 1332,5 1913,0 1092,0 - 2594,0 1957,0 1595,0 - 2137,0
р,=0,049 р=0,014
1тах, о.е. х 103 45,21 12,60 - 61,59 31,73 17,85 - 56,16 52,04 35,39 - 68,58
Б, о.е.г 3,21 1,43 - 8,51 5,23 3,28 - 70,70 5,46 4,02 - 14,98
Зимозан-индуцированная хемилюминесценция
Ттах, сек. 664,0 580,0 - 1285,5 1091,0 987,0 - 1819,0 1559,0 1374,0 - 1692,0
р=0,041 р=0,041
1тах, о.е. х 103 64,69 23,01 - 118,70 81,12 31,53 - 118,15 61,95 30,43 - 109,96
Б, о.е.г 6,74 1,23 - 23,50 8,52 5,71 - 170,80 5,52 4,42 - 34,61
Бинд./Бспонт. 2,17 1,61 - 3,63 2,19 1,45 - 2,78 1,36 1,19 - 1,84
р, ,=0,040
Примечания: пациентами.
р1 - статистически значимые различия с контролем, р2 - статистически значимые различия между АЧ и АР а) б) :
£ 1
Р1=0,037
р2=0,046
Р1=0,048 Р2=0,033
в)
¿1*
I11 =
\ " I О
р1=0,002 Р2=0,006
£
е
^ о : *
Р1=0,017 р2=0,009
Рис. 1. Активность НАДФ-зависимых дегидрогеназ в нейтрв-филах крови у чувствительных и ренисгентных к АСК пациентов ОКС.
1К • N
с
= *
2 <■ - 4
р1<0,001 р2=0,012
р1=и,028
Р1=0,045
I £
Р2=0,037
1
Кин.р-м
I.,
в)
Р1=0,008 р2=0,004
Г~.п
■,! ч
«г
Рис. 2. Активность НАД-зависимых дегидрогеназ в нейтро-филах крови у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС.
Примечание к рис. 1 и 2: рИ - статиытичевит значимые различия с контролем,р2 - сгатисгически значимые различия между АЧ и АР пациентами.
выхода на максимум индуцированном хемилю-минесценции.
Исследование люминол-зависимой хемилю-минесценции позволило обнаружить, что независимо от чувствительности к АСК у пациентов
ОКС увеличивается время выхода на максимум спонтанной и зимозан-индуцированной хеми-люминесценции относительно контрольных значений (табл. 2). Кроме того, у АР, по сравнению с АЧ пациентами и контролем, снижен
индекс активации люминол-зависимой хемилюминесценции.
При исследовании активности НАДФ-зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах крови обнаружено, что у АЧ пациентов в 2,7 раза выше активность ГР по сравнению с контрольными значениями (рис. 1 а). В то же время, у АР пациентов в нейтрофилах крови активность Г6ФДГ и НАДФГДГ значительно выше, а активность НАДФМДГ ниже, чем у АЧ пациентов и контроля (рис. 1, б-в).
Изучение активности НАД-зависимых деги-дрогеназ в нейтрофилах крови позволило установить, что независимо от чувствительности к АСК у пациентов ОКС повышена активность Г3ФДГ (рис. 2 а). Только у АЧ пациентов повышена активность НАДН-ГДГ относительно контроля (рис. 2 б). У АР пациентов с ОКС в нейтрофилах крови повышена активность НАДГДГ по сравнению с АЧ пациентами и контрольными значениями. (рис. 2 в).
Обсуждение полученных результатов
Активность респираторного взрыва в нейтро-филах определяется уровнями синтеза первичных и вторичных АФК [11]. Состояние респираторного взрыва было исследовано с помощью двух хемилюминесцентных индикаторов: люцигенина и люминола. Люцигенин окисляется и люминесцирует только под влиянием супероксид-радикала, который определяется как первичная АФК и синтезируется в системе НАДФН-оксидазы [8]. Люцигенин не проходит через мембрану клеток и связывается с супероксид-радикалом только во внеклеточном пространстве. Соответственно, исследование люцигенин-зависимой хемилюминесценции нейтрофилов позволяет охарактеризовать состояние активности НАДФН-оксидазы и уровень выделения супероксид-радикала для реализации механизма внешнего киллинга у больных ОКС.
Обнаружено, что активность НАДФН-оксидазы в нейтрофилах крови у больных ОКС зависит от их чувствительности к АСК. Так, у АЧ больных ОКС выявляются минимальные отличия кинетики люцигенин-зависимой хемилюми-несценции нейтрофилов, которые определяются только снижением времени выхода на максимум индуцированной хемилюминесценции. Данный показатель характеризует скорость развития респираторного взрыва от момента регуля-торного или антигенного воздействия на клетку до максимальной активации ферментов, синтезирующих АФК. Следовательно, у АЧ больных
ОКС состояние респираторного взрыва характеризуется повышением скорости активации синтеза первичных АФК при антигенной стимуляции функциональной активности нейтрофилов. У АР больных ОКС особенность синтеза первичных АФК нейтрофилами характеризуется снижением площади под кривой спонтанной и индуцированной люцигенин-зависимой хеми-люминесценции. Подобное состояние хемилю-минесцентной активности клеток отражает снижение активности НАДФН-оксидазы в синтезе супероксид-радикала.
В формировании пула вторичных АФК в ней-трофильных гранулоцитах принимают участие такие ферменты, как супероксиддисмутаза, ката-лаза, миелопероксидаза и др. Для оценки интенсивности синтеза вторичных АФК нейтрофилами крови нами использовалась люминол-зависимая хемилюминесценция. Необходимо отметить, что люминол способен вступать в хемилюминес-центную реакцию, как с первичными, так и вторичными АФК [8]. Особенность респираторного взрыва в нейтрофилах у АЧ больных ОКС определяется увеличением времени активации синтеза вторичных АФК. У АР пациентов особенность синтеза вторичных АФК в фагоцитирующих клетках также определяется ускоренной активацией ферментов, но при снижении величины индекса активации, который характеризует уровень активации респираторного взрыва при антигенной стимуляции нейтрофилов.
Респираторный взрыв тесно связан с основными метаболическими процессами в клетках. Так доказано, что активность НАДФН-оксидазы зависит от образования НАДФН в системе пентозофосфатного цикла [12, 13]. В связи с этим мы исследовали уровни активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в ней-трофилах крови у больных ОКС в зависимости от их чувствительности к АСК.
Установлено, что метаболизм нейтрофи-лов у АЧ больных ОКС характеризуется повышением активности ГР и НАДН-ГДГ. ГР является ферментом глутатион-зависимой антиок-сидантной системы клеток, активность которой может увеличиваться при повышении интенсивности перекисных процессов [10]. При этом повышение интенсивности перекисных процессов может привести к стимуляции активности внтуриклеточных антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы, каталазы и других), что может проявляться в увеличении времени развития респираторного взрыва за счет синтеза
вторичных АФК. НАДН-ГДГ - фермент, осуществляющий НАДН-зависимое перераспределение интермедиатов с цикла трикарбоновых кислот на реакции аминокислотного обмена. В связи с тем, что у АЧ пациентов отсутствуют изменения активности ферментов лимонного цикла (НАДИЦДГ и МДГ) можно предположить, что стимуляции аминокислотного обмена не приводит к ингибированию энергетических процессов в нейтрофилах крови.
У АР больных ОКС особенности метаболизма нейтрофилов определяются выраженным повышением активности Г6ФДГ, НАДФГДГ и НАДГДГ, а также снижением активности НАДФМДГ. Г6ФДГ - инициализирующий и ключевой фермент пентозофосфатного цикла, основными продуктами которого являются рибозо-5-фосфат и НАДФН, используемые преимущественно в пластических процесса, но и, в том числе, для реализации ферментативной активности НАДФН-оксидазы [10]. Между тем, активность самой НАДФН-оксидазы в нейтрофилах у лиц данной группы снижена. Можно предположить, что метаболические процессы в нейтрофилах даже при высокой активности Г6ФДГ не могут обеспечить достаточную активность НАДФН-оксидазы. Тем более, что у АР пациентов значительно снижена активность НАДФМДГ - фермента цитоплазматического компартмента, в ходе ферментативной реакции которого также образуется НАДФН. НАДГДГ и НАДФГДГ - ферменты, преимущественно локализующиеся в митохондриальном компартменте и осуществляющие отток субстратов с реакций аминокислотного обмена на цикл трикарбоно-вых кислот [10]. Активация данных ферментов связана с необходимостью субстратной стимуляции энергетических процессов клетки.
Г3ФДГ - фермент, осуществляющий перенос продуктов липидного катаболизма на окислительно-восстановительные реакции гликолиза [10]. Активность фермента повышается в нейтрофилах как у АЧ, так и у АР пациентов с ОКС. Можно предположить, что подобное изменение активности данного фермента определяется необходимостью субстратной стимуляции гликолиза. Тем более, что в нейтрофи-лах АР пациентов более выраженное увеличение активности Г3ФДГ совпадает с активацией Г6ФДГ, которая является основным конкурентом гликолиза за субстрат.
Необходимо отметить, что особенности состояния респираторного взрыва и метабо-
лизма нейтрофилов крови у больных ОКС, зависимые от чувствительности к АСК, могут определяться как внутриклеточными процессами, так и регуляторными реакциями в иммунной системе и гемостазе. Доказано участие циклоок-сигеназы в реализации функциональной активности нейтрофилов [4]. Ингибирование метаболизма арахидоновой кислоты приводит к выраженному снижению фагоцитарной и переваривающей активности нейтрофильных гранулоци-тов [5]. Установлено значение тромбоцитарно-нейтрофильной ассоциации в патогенезе ОКС, которая реализуется через рецепторное взаимодействие и с помощью гуморальных факторов [14].
Таким образом, у больных ОКС обнаружены изменения кинетики и интенсивности респираторного взрыва и активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах крови, зависимые от чувствительности к АСК. У АЧ пациентов выявляются минимальные изменения кинетики респираторного взрыва, которые определяются ускоренной активацией синтеза первичных АФК в клетках при антигенной индукции, а также замедлением синтеза вторичных АФК. Метаболизм нейтрофилов характеризуется увеличением активности ферментов, продукты которых стимулируют энергетические процессы, а также повышением интенсивности внутриклеточных перекисных процессов. У АР больных ОКС состояние респираторного взрыва определяется понижением скорости синтеза первичных АФК, замедлением синтеза вторичных АФК и снижением индекса активации нейтрофилов по люминол-зависимой хеми-люминесцентной реакции. Изменения активности ферментов в нейтрофилах АР больных также более выражены, чем при наличии чувствительности к АСК и характеризуются активацией пен-тозфосфатного цикла и повышением интенсивности субстратной стимуляции гликолиза, но при повышении уровня оттока интермедиатов с реакций цикла трикарбоновых кислот. При резистентности к АСК отмечается понижение функциональной активности нейтрофилов, что представляет интерес при изучении межклеточных взаимоотношений формирования тромба. Возможной причиной понижения функциональной активности нейтрофилов являются энергетические потери клетки, обусловленные повышением интенсивности субстратной стимуляции гликолиза и активацией окисления глюкозы по пенто-зофосфатному пути.
Литература:
1. Falk E. Pathogenesis of atherosclerosis. J Am Coll Cardiol 2006; 47: 7-12.
2. Borekci A., Gur M., Turkoglu C. Oxidative Stress and Spontaneous Reperfusion of infarct-Related Artery in Patients With ST-Segment Elevation Myocardial Infarction. Clin Appl Thromb Hemost 2014; ii:1076029614546329.
3. Engler R. Free radical and granulocyte-mediated injury during myocardial ischemia and reperfusion. Am J Cardiol 1989; 63:19-23.
4. Domingo-Gonzalez R., Martínez-Colón G.J., Smith A.J. et al. Inhibition of Neutrophil Extracellular Trap Formation after Stem Cell Transplant by Prostaglandin E2. Am J Respir Crit Care Med 2016; 193 (2): 186-197.
5. Martin M.J. Hypertonic saline inhibits arachidonic acid priming of the human neutrophil oxidase. J Surg Res 2013; 179 (1): 39-40.
6. Hamm C.W., Bassand J.-P., Agewall S. et al. ESC Guidelines For the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation: The Task Force for the management of acute coronary syndromes (ACS) in patients presenting without persistent ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC). European Heart Journal 2011; 32 (23): 2999-3054.
7. Гринштейн Ю.И., Филоненко И.В., Савченко А.А. и др. Способ диагностики резистентности к ацетилсалициловой кислоте. Патент № 2413953 РФ. МПК G01N 33/86 (2006.01). Опубл. 10.03.2009. Бюл. № 7. 8 с. (Grinshtein Y.I., Filonenko I.V., Savchenko A.A. et al. A method of diagnosing resistance to acetylsalicylic acid // Patent No. 2413953 of the Russian Federation. MPK G01N 33/86 (2006.01). Publ. 10.03.2009. Bull. No. 7. 8 p.)
8. Шкапова Е.А., Куртасова Л.М., Савченко А.А. Показатели люцигенин- и люминол-зависимой хемилюминесценции нейтрофилов крови у больных раком почки. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2010; 149 (2): 201-203. (Shkapova
E.A., Kurtasova L.M., Savchenko A.A. The performance of lucigenin- and luminol-dependent chemiluminescence of blood neutrophils in patients with kidney cancer. Bulletin of experimental biology and medicine 2010; 149 (2): 201-203.)
9. Савченко А.А. Определение активности NAD(P)-3aBHCHMbix дегидрогеназ в нейтрофильных гранулоцитах биолюминесцентным методом. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2015; 159 (5): 656-660. (Savchenko A.A. The determination of the NAD(P)-dependent dehydrogenases activity in neutrophilic granulocytes by a bioluminescent method // Bulletin of experimental biology and medicine 2015; 159 (5): 656-660.)
10. Биохимия /Под ред. Е.С. Северина. М., 2004: 784. (Biochemistry /Ed. by E.S. Severin. M., 2004: 784.)
11. Kobayashi Y. Neutrophil biology: an update. EXCLI J 2015; 14: 220-227.
12. Han C.Y., Umemoto T., Omer M. et al. NADPH oxidase-derived reactive oxygen species increases expression of monocyte chemotactic factor genes in cultured adipocytes. J Biol Chem 2012; 287 (13): 10379-10393.
13. Rosa A.P., Jacques C.E., de Souza L.O. et al. Neonatal hyperglycemia induces oxidative stress in the rat brain: the role of pentose phosphate pathway enzymes and NADPH oxidase. Mol Cell Biochem 2015; 403 (1-2): 159-167.
14. Гринштейн И.Ю., Савченко А.А., Гринштейн Ю.И. и др. Состояние гемостаза и функциональной активности нейтрофилов у больных с разной чувствительностью к ацетилсалициловой кислоте при остром коронарном синдроме. Кардиоваску-лярная терапия и профилактика 2015; 14 (5):29-34. (Grinshtein I.Yu., Savchenko A.A., Grinshtein, Y.I. et al. Hemostasis and functional activity of neutrophils in patients with different sensitivity to acetylsalicylic acid in acute coronary syndrome. Cardiovascular Therapy and Prevention 2015; 14 (5):29-34.)
Информация об авторах:
Гринштейн Игорь Юрьевич, к.м.н., ассистент кафедры поликлинической терапии, семейной медицины и здорового образа жизни с курсом ПО Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого
(660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1). Тел.: +7(391)2642718, E-mail: [email protected]
Савченко Андрей Анатольевич, д.м.н., профессор, руководитель лаборатории НИИ медицинских проблем Севера (660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 37). Тел.: +7(391)228-06-62, E-mail: [email protected]
Гринштейн Юрий Исаевич, д.м.н., профессор, заведующий кафедрой терапии ИПО Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого (660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1). Тел.: +7(391)2211540, E-mail:[email protected]
Гвоздев Иван Игоревич, младший научный сотрудник лаборатории НИИ медицинских проблем Севера (660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 37). Тел.: +7(391)228-06-62, E-mail: [email protected]
Адрес для переписки: Гринштейн Юрий Исаевич,e-mail: [email protected]
