Метаболічні зміни під впливом комбінованої терапії при експериментальному гнійно - запальному процесі, спричиненому K. pneumoniae Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК [616-002.3-022.7:579.842.16]-092.9-085.15.2-085.33 Мозгова Ю.А.

МЕТАБОЛІЧНІ ЗМІНИ ПІД ВПЛИВОМ КОМБІНОВАНОЇ ТЕРАПІЇ ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ ГНІЙНО - ЗАПАЛЬНОМУ ПРОЦЕСІ, СПРИЧИНЕНОМУ K. PNEUMONIAE

Харківський національний медичний університет

В останні роки спостерігається значне зростання інфекційних захворювань, етіологічно асоційованих з умовно-патогенними мікроорганізмами, серед яких одне з провідних місць займають бактерії роду Klebsiella. Перебіг і результат гнійно-запальних захворювань в значній мірі залежать від стану імунологічної реактивності організму. У зв'язку з цим набуває актуальності розробка комплексного патогенетично обґрунтованого підходу до терапії даних захворювань з включенням у програми лікування імунокорекції. Тому метою дослідження було визначення метаболічних змін під впливом комбінованої терапії при експериментальному генералізованому гнійно-запальному процесі, спричиненому K. pneumoniae . Моделювання генералізованого гнійно-запального процесу, спричиненого K. pneumoniae проводили на мишах лінії С57Blak, які були розподілені на відповідні групи (контролю та миші, що отримували комбіновану терапію). Вміст малонового діальдегіду, дієнових кон'югатів, активність каталази визначали спектрофотометричними методами. Сульфгідрильні групи визначали за допомогою набору фірми Lachema, Чехія. Для статистичної обробки результатів використовували програму Exel для персонального комп'ютера та t-критерій Стьюдента з попередньою перевіркою нормальності розподілу варіант. В результаті визначення метаболічних змін під впливом комбінованої терапії при експериментальному генералізованому гнійно-запальному процесі, спричиненому K.pneumoniae було виявлено, що в організмі інфікованих тварин, яким вводили різні антибактеріальні та імунокорегуючі препарати, спостерігалась динаміка змін показників стану процесів перекисного окиснення ліпідів та антиоксидантної системи в залежності від комбінації препаратів. Встановлено, що під впливом комбінацій препаратів: меропенему з ронколейкіном або з глутаксимом та левофлоксацину з ронколейкіном або з глутаксимом спостерігається відновлення метаболічних процесів за рахунок підвищення активності каталази і продукції SH-груп та пригнічення вмісту дієнових кон'югатів, гідроперекису та малонового діальдегіду в організмі. Ключові слова: метаболічні зміни, гнійно-запальний процес, K. pneumoniae, комбінована терапія.

Представлену роботу виконано в рамках теми наукових досліджень кафедри мікробіології, вірусології та імунології Харківського національного медичного університету: «Експериментальне мікробіологічне обґрунтування протимікробної терапії гнійно-запальних захворювань», № державної реєстрації 0114U003390.

Вступ

Гнійно-запальні захворювання (ГЗЗ) різної локалізації до теперішнього часу залишаються однією з актуальних проблем сучасної медицини, що зумовлено їх поширеністю, тенденцією до хронічного і рецидивуючого перебігу, недостатньою ефективністю традиційних методів лікування [1]. В останні роки спостерігається значне зростання інфекційних захворювань, етіологічно асоційованих з умовно-патогенними мікроорганізмами, серед яких одне з провідних місць займають бактерії роду Klebsiella [2]. Бактерії даної групи характеризуються вираженою неоднорідністю, бо є, з одного боку, представниками транзиторної нормальної мікрофлори людини, а з іншого - збудниками інфекційних захворювань [3]. Одним з найважливіших аспектів характеристики умовно-патогенних ентеробактерій є їх резистентність до антимікробних препаратів [4]. При цьому масове поширення антибіотикорезистентних штамів в популяціях умовно-патогенних мікроорганізмів стало важливою проблемою клінічної медицини у зв'язку з їх більш високими адаптаційними можливостями в порівнянні зі збудниками класичних інфекцій [5].

Тим часом для оцінки ефективності лікуван-

ня необхідні контроль і обмеження вільно-радикального окиснення ліпідів, що грає універсальну роль в регуляції гомеостазу і при-чинно-наслідкових механізмах розвитку різноманітних патологічних станів, включаючи тяжкі інфекції [6, 7]. Результати лікування ГЗЗ, незважаючи на застосування сучасних методів і досягнуті певні успіхи, не задовольняють повністю завдань сучасної медицини. Перебіг і результат ГЗЗ в значній мірі залежать від стану імунологічної реактивності організму. У зв'язку з цим набуває актуальності розробка комплексного патогенетично обґрунтованого підходу до терапії ГЗЗ з включенням у програми лікування імунокорекції [8].

Мета дослідження

Визначення метаболічних змін під впливом комбінованої терапії при експериментальному генералізованому гнійно-запальному процесі, спричиненому K. pneumoniae .

Об'єкт і методи дослідження

Моделювання генералізованого гнійно-запального процесу (ГЗП), спричиненого K. pneumoniae [9] проводили на мишах -самцях інбредної лінії C57Blak, масою 20-22 г, які перебували в умовах стандартного лабораторно-

го утримання і раціону харчування. Робота з тваринами проводилася відповідно до Європейської конвенції по захисту хребетних тварин при їх використанні в експериментальних й інших наукових цілях [10].

Розподіл лабораторних тварин (по 20 мишей у кожній групі) був проведений таким чином: 1 група (К-) - інтактні миші; 2 група (К+) -інфіковані; 3 група - інфіковані миші, які отримували терапію амоксиклавом і ронколейкіном (Ам+Rl); 4 група - інфіковані миші, що отримували амоксиклав і глутаксим (Ам+Гл); 5 група -інфіковані миші, які отримували терапію лево-флоксацином і ронколейкіном (Лф+Rl); 6 група - інфіковані миші, що отримували левофлок-сацин і глутаксим (Лф+Гл); 7 група - інфіковані миші, які отримували терапію меропінемом і ронколейкіном (Мр+Rl); 8 група - інфіковані миші, які отримували терапію меропінемом і глутаксимом (Мр+Гл).

Вміст малонового діальдегіду (МДА), дієно-вих кон'югатів (ДК), активність каталази визначали спектрофотометричними методами. Сульфгідрильні групи визначали у відповідності до інструкції за допомогою набору фірми Lachema, Чехія.

Для статистичної обробки результатів використовували програму Exel для персонального комп'ютера (розрахунок середньої арифметичної, стандартної похибки), для перевірки гіпотез щодо рівності генеральних середніх двох незалежних, незв'язаних вибірок використовували t-критерій Стьюдента з попередньою перевіркою нормальності розподілу варіант [11].

Результати досліджень та їх обговорення

В організмі інфікованих тварин, яким вводили різні антибактеріальні та імунокорегуючі препарати, спостерігали таку динаміку змін показників стану процесів перекисного окиснення ліпідів. У сироватці крові тварин, яким уводили на тлі ГЗП, спричиненого K. pneumoniae досліджувані препарати, спостерігали статистично достовірне зниження вмісту дієнових кон'югатів (ДК) порівняно з групою інфікованих тварин. Найбільш виразним це було у тварин, яким уводили комбінації препаратів меропенему з ронколейкіном та меропенему з глутаксимом -спостерігали зниження у 2,9 рази та у 3 рази відповідно. Також суттєвим було зниження рівня ДК на тлі введення комбінацій левофлокса-цину з ронколейкіном та левофлоксацину комплексно з глутаксимом: у 2,8 та у 2,7 рази, відповідно, порівняно з інфікованими тваринами. Для таких комбінацій як амоксиклав з ронколейкіном та амоксиклав з глутаксимом цей показник знижувався в середньому у 1,5 та у 2,3 рази відповідно.

Порівняно з тваринами 1-ої групи рівень ДК залишався підвищеним особливо за дії амок-сиклаву з глутаксимом. Зі всіх комбінацій препаратів, які вводили в організм інфікованих тварин, позитивну дію виявили лише меропе-нем з ронколейкіном, меропенем з глутаксимом, левофлоксацин з ронколейкіном та лево-флоксацин з глутаксимом, бо знижували рівень ДК до рівня контрольної групи.

Найбільш виразною була динаміка змін другого показника стану процесів перекисного окиснення ліпідів, а саме вмісту малонового діальдегіду (МДА). Позитивну дію виявила комбінація препаратів меропенем комплексно з глу-таксимом, яка призвела до зниження в сироватці крові вмісту МДА до значень контрольної групи тварин. Дія амоксиклав з ронколейкіном не викликала будь-яких достовірних змін цього показника, порівняно з інфікованими тваринами й тому рівень залишався суттєво підвищеним порівняно з контролем.

У печінці експериментальних тварин використання комбінацій меропенем з ронколейкі-ном та меропенем комплексно з глутаксимом призводило до зниження рівня ДК та МДА до значень контрольної групи.

У нирках рівень ДК практично не змінювався за дії амоксиклав з ронколейкіном та амоксиклав комплексно з глутаксимом. Але за дії комбінацій левофлоксацин з ронколейкіном, ле-вофлоксацин з глутаксимом, меропенем з рон-колейкіном та меропенем з глутаксимом статистично достовірним було зниження цього показника порівняно з контролем (група інфікованих тварин).

Щодо МДА в нирках то його вміст дорівнював значенню контрольної групи інтактних тварин за дії комбінацій препаратів - левофлоксацину з ронколейкіном, левофлоксацину комплексно з глутаксимом меропенем з ронколей-кіном та меропенем комплексно з глутаксимом (табл. 1).

В інших випадках рівень МДА в нирках залишався статистично достовірно підвищеним. Аналогічна динаміка спостерігалась й щодо рівня гідроперекисів у серці: Комбінації левофлоксацину з ронколейкіном та левофлоксацину з глутаксимом призводили до зниження рівня цього показника до контрольних значень, а дія інших комбінацій не призводила до будь-яких змін гідроперекисів в організмі інфікованих тварин.

Як це видно з табл. 2, дослідження стану показників АОС організму інфікованих мишей за дії комбінацій антибактеріальних та імуноко-регуючих препаратів виявили такі зміни.

Таблиця 1

Вміст дієнових кон'югатів та малонового діальдегіду в організмі мишей з ГЗП, спричиненим K.pneumoniae, за впливу комбінованої терапії (М±т, n=20)

Показники 1 група К - 2 група К + 3 група Ам+Rl 4 група Ам+Гл 5 група Лф+Rl 6 група Лф+Гл 7 група Мр+Rl 8 група Мр+Гл

Сироватка крові

ДКа 45,4±2,1 136,8±2,7 * х93,7±2,5* х60,8±2,7* х49,9±2,3 х48,0±2,3 х46,5±2,0* х45,8±2,1

МДАа 1,6±0,1 18,9±,4* 11,7±1,0* х5,9±0,4* х2,9±0,2* х2,7±0,2* х2,5±0,3* х1,7±0,1

Печінка

ДКЬ 41,1±1,7 69,7±2,6* х52,1±3,6 х53,9±3,3 х43,5±2,4 х43,8±3,5 х41,7±3,8 х42,2±3,9

МДАЬ 13,2±1,1 29,4±1,7* х22,0±0,9 х23,2±1,2 х13,6±1,2 х14,5±1,4 х13,4±1,1 х13,1±1,3

Нирки

ДКЬ 25,2±1,9 46,2±2,1 х32,4±1,1* х39,1±1,6 х26,7±1,2* х28,2±1,4 х19,0±1,5 х21,7±1,9

МДАЬ 16,5±1,1 28,9±2,4* х27,7±1,6 х24,2±1,1 17,8±2,0* 17,5±1,8* 15,2±2,1* 14,4±2,1*

Серце

ГідроперекисиЬ 48,5±3,0 98,3±2,9* х68,5±3,7 х74,5±4,9 х49,1±3,7* х51,3±4,6* х48,8±5,1* х49,5±5,4*

Приміткаa - мкмоль/л, b - мкмоль/г білка, * - р<0,05 відносно 1-ої групи (контролю); х - відносно 2-ої групи (інфікованих тварин).

Таблиця 2

Показники стану антиоксидантної системи в організмі мишей з ГЗП, спричиненого K.pneumoniae, при використанні комбінованої терапії (М±т, n=20)

Показники 1 група К - 2 група К+ 3 група Ам+Rl 4 група Ам+Гл 5 група Лф+Rl 6 група Лф+Гл 7 група Мр+Rl 8 група Мр+Гл

Сироватка крові

Каталазаа 3,5±0,3 2,8±0,2 2,5±0,4 х2,8±0,3 2,9±0,3 3,2±0,2 2,9±0,3 3,0±0,3

SH-групиЬ 18,6±1,6 13,2±1,0* х14,7±1,4 х15,9±1,6 х17,0±1,3 х19,3±1,2 х19,2±1,4 х19,5±1,5

Нирки

Каталазас 194,5±5,5 121,7±4,7* х152,2±7,5 х164,7±5,6 х186,2±8,2 191,1±7,3* х192,7±6,9 х194,5 ±5,8

Серце

Каталазас | 379,4±7,5* 1 144,5±6,3 х314,1±6,6* х325,4±6,3* х348,9±5,5* 1 х352,8±5,3* 1 х364,5±7,0* 1 х369,4 ±6,0*

Примітка:a - мккат/г Нв, b - ммоль/л, с - ммоль/хвг білка;

* - р<0,05 відносно 1-ої групи; х - відносно інфікованих тварин (2-ої групи).

У крові експериментальних тварин активність каталази не змінювалася й залишалася на рівні контрольних значень інфікованих тварин, тільки для комбінації левофлоксацин з глутаксимом спостерігалося незначне підвищення активності ферменту порівняно з інфікованими тваринами.

Для сульфгідрильних груп крові характерним було досягнення рівня контрольної групи інтактних тварин для комбінацій меропенем з ронколейкіном та меропенем комплексно з глу-таксимом. У нирках активність каталази мала тенденцію до підвищення порівняно з інфікованими тваринами й дорівнювала значенням контролю першої групи тварин, крім дії амоксиклав з рон-колейкіном та амоксиклав комплексно з глутаксимом. У серці на фоні комбінованої терапії простежувалася динаміка підвищення активності ферменту порівняно з інфікованими тваринами, але воно не досягало рівня контролю.

Висновки

Отже, в результаті проведеного дослідження визначено зміни стану перекисного окиснення ліпідів та антиоксидантної системи під впливом комбінованої терапії при експериментальному генералізованому гнійно-запальному процесі, спричиненому K. pneumoniae. Встановлено, що за впливу комбінацій препаратів: меропенему з ронколейкіном або з глутакси-мом та левофлоксацину з ронколейкіном або з глутаксимом спостерігається відновлення метаболічних процесів, за рахунок підвищення активності каталази і продукції SH-груп та при-

гнічення вмісту дієнових кон'югатів, гідропере-кису та малонового діальдегіду в організмі.

Перспективою подальших досліджень в даному напрямку є вивчення стану імунної системи при експериментальному ГЗП, спричиненому K. pneumoniae, під впливом комбінованої терапії.

Література

1. Абакумов М.М. Роль иммунокоррекции в профилактике и комплексном лечении госпитальной хирургической инфекции / М.М. Абакумов, Г.В.Булава, Ш.Н.Даниелян // Актуальные проблемы современной хирургии: материалы конгресса, 22-25 февраля 2003г., Москва - М., 2003. - С. 105.

2. Анганова Е.В. Условно-патогенные энтеробактерии: доминирующие популяции, биологические свойства, медико-экологическая значимость : дис. ... доктора биол. наук : спец. 03.02.03 / Е.В. Анганова - Иркутск, 2012. - 216 с.

3. Бондаренко В.М. Роль условно-патогенных бактерий при хронических воспалительных процессах различной локализации / В.М. Бондаренко. - Тверь : Изд-во «Триада», 2011. - 88 с.

4. Лакомкин B.JI. Изменение антиоксидантного статуса миокарда под влиянием коэнзима Q10 при окислительном стрессе / B.JI. Лакомкин, Г.Г. Коновалова, Е.И. Каленикова [и др.] // Биохимия. - 2005. - Т. 70, Вып. 1. - С. 97-104.

5. Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / С.Н. Лапач, А.В. Чу-бенко, П.Н. Бабич - К. : МОРИОН, 2000. - 320 с.

6. Медведев А.И. Применение локальной иммунокоррекции в сочетании с ультразвуковой кавитацией в лечении детей с гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей : дис. . канд. мед. наук : спец. 14.00.35, 14.00.36 / А.И. Медведев -Курск, 2005. - 140 с.

7. Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии: Практическое руководство / Г.Н. Першин. - М. : Медицина, 1971. - 539 с.

8. Шепелев А.П. Роль процессов свободнорадикального окисления в патогенезе инфекционных болезней / А.П. Шепелев, И.В. Корниенко, А.В. Шестопалов [и др.] // Вопр. Мед. Химии. -2000. - Т. 46, № 2. - С.35-38.

9. Фиалкина С.В. Генетические детерминанты патогенности клинических штаммов Klebsiella pneumoniae : дис. ... канд. биол. наук : спец. 03.00.07 / С.В. Фиалкина - М., 2004. - 140 с.

10. Bradford P.A. Extended-spectrum beta-lactamases in the 21st century: characterization, epidemiology, and detection of this im-

11.

portant resistance threat / P.A. Bradford // Clin Microbiol Rev. -2001. - Vol. 14, Issue 4. - P. 933-951.

European Convention for the protection of vertebratae animals used for experemental and opher scientific purposes // Strasbourg. Counsil Treatu Series, 1987. - №123. - 52 р.

References

Abakumov M.M. Rol' immunokorrekcii v profilaktike i kompleksnom lechenii gospital'noj hirurgicheskoj infekcii / M.M. Abakumov, G.V.Bulava, Sh.N.Danieljan // Aktual'nye problemy sovremennoj hirurgii: materialy kongressa, 22-25 fevralja 2003g., Moskva - M., 2003. - S. 105.

Anganova E.V. Uslovno-patogennye jenterobakterii: dominirujushhie populjacii, biologicheskie svojstva, mediko-jekologicheskaja znachimost' : dis. ... doktora biol. nauk : spec. 03.02.03 / E.V. Anganova - Irkutsk, 2012. - 216 s. Bondarenko V.M. Rol' uslovno-patogennyh bakterij pri hronicheskih vospalitel'nyh processah razlichnoj lokalizacii / V.M. Bondarenko. - Tver' : Izd-vo «Triada», 2011. - 88 s. Lakomkin B.JI. Izmenenie antioksidantnogo statusa miokarda pod vlijaniem kojenzima Q10 pri okislitel'nom stresse / B.JI. Lakomkin, G.G. Konovalova, E.I. Kalenikova [i dr.] // Biohimija. - 2005. - T. 70, Vyp. 1. - S. 97-104.

10.

11.

Lapach S.N. Statisticheskie metody v mediko-biologicheskih issledovanijah s ispol'zovaniem Excel / S.N. Lapach, A.V. Chubenko, P.N. Babich - K. : MORION, 2000. - 320 s. Medvedev A.I. Primenenie lokal'noj immunokorrekcii v sochetanii s ul'trazvukovoj kavitaciej v lechenii detej s gnojno-vospalitel'nymi zabolevanijami mjagkih tkanej : dis. ... kand. med. nauk : spec. 14.00.35, 14.00.36 / A.I. Medvedev - Kursk, 2005. - 140 s. Pershin G.N. Metody jeksperimental'noj himioterapii: Prakticheskoe rukovodstvo / G.N. Pershin. - M. : Medicina, 1971. - 539 s.

Shepelev A.P. Rol' processov svobodnoradikal'nogo okislenija v patogeneze infekcionnyh boleznej / A.P. Shepelev, I.V. Kornienko, A.V. Shestopalov [i dr.] // Vopr. Med. Himii. - 2000. -T. 46, № 2. - S.35-38.

Fialkina S.V. Geneticheskie determinanty patogennosti klinicheskih shtammov Klebsiella pneumoniae : dis. . kand. biol. nauk : spec. 03.00.07 / S.V. Fialkina - M., 2004. - 140 s. Bradford P.A. Extended-spectrum beta-lactamases in the 21st century: characterization, epidemiology, and detection of this important resistance threat / P.A. Bradford // Clin Microbiol Rev. -2001. - Vol. 14, Issue 4. - P. 933-951.

European Convention for the protection of vertebratae animals used for experemental and opher scientific purposes // Strasbourg. Counsil Treatu Series, 1987. - №123. - 52 r.

Реферат

МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПОД ВЛИЯНИЕМ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНОМ ПРОЦЕССЕ, ВЫЗВАННОМ K. PNEUMONIAE Мозговая Ю.А.

Ключевые слова: метаболические изменения, гнойно-воспалительный процесс, K. pneumoniae, комбинированная терапия.

В последние годы наблюдается значительный рост инфекционных заболеваний, этиологически ассоциированных с условно-патогенными микроорганизмами, среди которых одно из ведущих мест занимают бактерии рода Klebsiella. Течение и исход гнойно-воспалительных заболеваний в значительной степени зависят от состояния иммунологической реактивности организма. В связи с этим приобретает актуальность разработка комплексного патогенетически обоснованного подхода к терапии данных заболеваний с включением в программы лечения иммунокоррекции. Целью исследования было определение метаболических изменений под влиянием комбинированной терапии при экспериментальном генерализованном гнойно-воспалительном процессе, вызванном K. pneumoniae. Моделирование генерализованного гнойно-воспалительного процесса, вызванного K. pneumoniae, проводили на мышах линии С57Blak, которые были разделены на соответствующие группы (контроля и мыши, получавшие комбинированную терапию). Содержание малонового диальдегида, диеновых конъюгатов, активность каталазы определяли спектрофотометрическим методом. Сульфгидрильные группы определяли с помощью набора фирмы Lachema, Чехия. Для статистической обработки результатов использовали программу Exel для персонального компьютера. В результате определения метаболических изменений под влиянием комбинированной терапии при экспериментальном генерализованном гнойно-воспалительном процессе, вызванном K.pneumoniae было обнаружено, что в организме инфицированных животных, которым вводили различные антибактериальные препараты и иммунокорректоры, наблюдалась динамика изменений показателей состояния процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы в зависимости от комбинации препаратов. Установлено, что под влиянием комбинаций препаратов: меропенема с ронколейкином или глутаксимом и левофлоксацина с ронколейкином или глутаксимом наблюдается восстановление метаболических процессов за счет повышения активности каталазы и продукции SH-групп и угнетение содержания диеновых конъюгатов, гидроперекиси и малонового диальдегида в организме .

Summary

METABOLIC CHANGES DUE TO COMBINED THERAPY IN EXPERIMENTAL PYO-INFLAMMATORY PROCESS CAUSED BY K.

PNEUMONIAE

Mozgova Ya. A.

Key words: metabolic changes, pyo-inflammatory process, K. pneumoniae, combine therapy.

Recent years have seen a significant increase in infectious diseases, etiologically associated with opportunistic microorganisms, including bacteria from genus Klebsiella in a leading position. The course and outcome of inflammatory diseases largely depend on the state of immunological reactivity. The development of combine pathogenetically reasonable treatment becomes actual and necessary together with immunocorrec-tion for including in therapy programs. The aim of the study was to determine metabolic changes under the influence of combined therapy in experimental generalized pyo-inflammatory process caused by K. pneumoniae. Materials and methods. Model of generalized pyo-inflammatory process caused by K. pneumoniae was performed on C57 Black mice divided into 2 control groups and a group of comparison which received combined therapy. The content of malonic dialdehyde, diene conjugates, catalase activity was assessed by spectrophotometry technques. Sulfide-hydride groups were defined by Lachema kit (Czech Republic). Exel was used to process data. Research results. It was found that under the influence of combine therapy in experi-

5

6

7

8

2

9

3

4

mental generalized pyo-inflammatory process caused K. pneumoniae in infected animals the dynamics of lipid peroxidation and antioxidant system indicators depended on the combination of drugs. Conclusions. It was established that combinations of meropenemum with roncoleukin or glutoxymum and levofloxacinum with roncoleukin or glutoxymum restore metabolic processes by increasing the activity of catalase and production of SH-groups and decreasing of diene conjugates, hydroperoxide and malonic dialdehyde.

УДК 616.316-001-092.9:547.271 Нагорняк І.В., Костенко В.О.

ЕФЕКТИВНІСТЬ ПОЄДНАНОГО ЗАСТОСУВАННЯ L-АРГІНІНУ ТА ІНГІБІТОРА ЯДЕРНОГО ФАКТОРА kB ДЛЯ КОРЕКЦІЇ ВІЛЬНОРАДИКАЛЬНИХ ПРОЦЕСІВ І ФУНКЦІЙ СЛИННИХ ЗАЛОЗ ЩУРІВ ЗА УМОВ ДІЇ МЕТИЛОВОГО ЕФІРУ МЕТАКРИЛОВОЇ КИСЛОТИ

ВДНЗУ «Українська медична стоматологічна академія», м. Полтава

У експерименті на 50 білих щурах досліджено поєднаний вплив L-аргініну та інгібітора ядерного фактора kB JSH-23 (4-метил-^(3-фенілпропіл)бензол-1,2-діаміну) на стан вільнорадикальних процесів і білоксинтезуючу функцію піднижньощелепних слинних залоз за умов тривалої аплікації 1 % розчину метилового ефіру метакрилової кислоти на слизову оболонку порожнини рота. Показано, що поєднане введення тваринам L-аргініну та інгібітора активації NF-kB JSH-23 за умов експерименту сприяє покращенню білоксинтезуючої функції слинних залоз, що відбивається у підвищенні активності орнітиндекарбоксилази та a-амілази, нормалізує рівень генерації супероксидного аніон-радикала НАДН-залежним (мітохондріальним) і НАДФн-залежним (мікросомальним і NO-синтазним) електронно-транспортними ланцюгами, виявляє адитивну дію щодо обмеження пероксидного оки-снення ліпідів.

Ключові слова/ метиловий эфір метакрилової кислоти, L-аргінін, ядерний фактор кВ, NO-синтаза, орнітиндекарбоксилаза, а-амілаза, супероксидний аніон-радикал, пероксидне окиснення ліпідів, слинні залози.

Робота є фрагментом НДР «Роль активних форм кисню, системи оксиду азоту та транскрипційних факторів у механізмах патологічного системогенезу» (№ держреєстрації 0114U004941).

Метиловий ефір

метакрилової кислоти використовується для виготовлення знімних конструкцій зубних протезів. Кількість цієї сполуки у вільному стані становить у пластмасі 58% [6]. Нами показано, що 30-денна аплікація 1% розчину метилового ефіру метакрилової кислоти на слизову оболонку порожнини рота супроводжується істотними функціонально-метаболічними змінами у піднижньощелепних слинних залозах (СЗ) щурів - підвищенням у них сумарної активності No-синтаз (NOS), зменшенням білоксинтезуючої функції, активацією вільнорадикальних процесів [5]. Введення тваринам L-аргініну за умов експерименту суттєво не впливає на активність NOS, орнітиндекар-боксилази та білоксинтезуючу функцію СЗ, проте обмежує у них вироблення активних форм кисню та пероксидне окиснення ліпідів, підвищує антиоксидантний потенціал без істотного впливу на активність супероксиддисмута-зи та каталази [4].

Відомо, що розвиток вільнорадикальних процесів у тканинах ссавців у значній мірі пов'язаний з дією активованого ядерного фактора кВ (NF-кВ). Останній є індуцибельним чинником транскрипції, що активує експресію генів, продукти яких грають ключову роль у розвитку окиснювального стресу [13,14]. Нещодавно встановлено, що введення інгібітора NF-кВ JSH-23 за умов експериментального метаболічного синдрому супроводжується

підвищенням антиоксидантної та

колагенопротективної дії L-аргініну в м'яких і кістковій тканинах пародонта [2].

Проте ефективність поєднаного застосування L-аргініну та інгібітора ядерного фактора кВ для корекції вільнорадикальних процесів і функцій СЗ за умов дії токсичних чинників залишається нез'ясованою.

Метою роботи було вивчення поєднаного впливу L-аргініну та інгібітора ядерного фактора кВ JSH-23 на стан вільнорадикальних процесів і білоксинтезуючу функцію піднижньощелепних СЗ щурів за умов тривалої аплікації 1 % розчину метилового ефіру метакрилової кислоти на слизову оболонку порожнини рота.

Матеріали та методи дослідження

Дослідження були проведені на 50 білих щурах-самцях лінії Вістар масою 180-220 г у 5-ти серіях дослідів: у першій необхідні показники вивчали у інтактних тварин (контрольна серія), у другій - після 30-денної аплікації 1% розчину метилового ефіру метакрилової кислоти на слизову оболонку порожнини рота, у третій і четвертій - поряд з аплікацією 1% розчину метилового ефіру метакрилової кислоти на слизову оболонку порожнини рота (протягом 30 діб) тваринам вводили відповідно субстрат NO-синтазної реакції L-аргінін та інгібітор активації NF-кВ - JSH-23 (4-метил-^(3-фенілпропіл)бензол-1,2-діамін), у п'ятій серії -останні два засоби за умов експерименту вво-