CC BY
76
— 4-
Оригинальные статьи
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 616.832-004.2-053.2-07:616.153.1
И. Е. Смирнов, А. Г. Кучеренко, Н. Н. Шатилова, Л. М. Кузенкова
МАТРИКСНЫЕ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ ПРИ РАССЕЛННОМ СКЛЕРОЗЕ У ДЕТЕЙ
Научный центр здоровья детей РАМН, 119991, Москва, Ломоносовский просп., 2, стр. 1
Представлены данные обследования 122 детей с рассеянным склерозом. Установлено повышение концентраций матриксных металлопротеиназ (ММП) в стадии обострения Рсу детей с последующим снижением их содержания в стадии его ремиссии, что свидетельствует о патогенетической значимости этих соединений при Рс. выявленная зависимость сывороточных уровней ММП от характера течения Рс позволяет использовать их в качестве дополнительных маркеров степени активности течения Рс и оценки эффективности проводимой терапии. Комплексное исследование неврологического и соматического статуса детей, страдающих Рс, в сочетании с определением сывороточных уровней ММП, их ингибиторов и цитокинов дополняют диагностические критерии определения активности Рс и могут быть рекомендованы к использованию в специализированных отделениях.
Ключевые слова: рассеянный склероз у детей, матриксные металлопротеиназы, ингибиторы металлопротеиназ, цитокины, диагностические критерии активности
I. E.Smirnov, A. G. Kucherenko, N. P. Shatilova, L. M. Kuzenkova
MATRIX METALLOPROTEINASES IN MULTIPLE SCLEROSIS IN CHILDREN
Federal State budgetary Institution "Scientific Centre of Child Healthcare" of the Russian Academy of Medical Sciences, 2/62, Lomonosov avenue, Moscow, 119991
The data of examination of 122 children with multiple sclerosis are presented. Elevated concentrations during exacerbation of MS in children with a subsequent decrease their content in the stage of remission has been established, suggesting the pathogenetic significance of these compounds in the MS. The revealed dependence of the serum levels of MMP on the character of the course of MS allows to use them as additional markers of the degree of activity of MS and the evaluation of the efficacy of the therapy conducted. Comprehensive study of neurological and physical status of children with MS, in combination with the detection of serum levels of MMPs, their inhibitors and cytokines elaborates the diagnostic criteria for determining the activity of MS and can be recommended for use in specialized departments.
Key words: Multiple sclerosis in children, matrix metalloproteinases, metalloproteinase inhibitors, cytokines, diagnostic criteria for activity
ассеянный склероз (РС) - хроническое демие-линизирующее заболевание с многоочаговым поражением ЦНС, протекающее с обострениями и ремиссиями или прогредиентно. РС рассматривают как иммунологически опосредованное заболевание, при котором аутоиммунный ответ индуцируется одним или несколькими экзогенными агентами у генетически предрасположенного индивидуума [1, 3]. Однако выявление различных вариантов демиели-низации при РС - от преобладания воспалительных реакций до олигодендроглиопатии и аномальной ре-миелинизации, а также доказательства аксонального повреждения не только в активных очагах, но и во внешне не измененном белом веществе сблизили РС с дегенеративными заболеваниями ЦНС [2, 4].
несмотря на разнонаправленные исследования, изучение различных аспектов РС остается актуальной проблемой, медицинская и социальная значи-
Для корреспонденции: смирнов Иван Евгеньевич, д-р мед. наук, проф., зав. лаб. патофизиологии с блоком радионуклидных исследований НИИ педиатрии ФГБУ НЦЗД РАМН, e-mail:[email protected]
мость которой обусловлена нарастающей заболеваемостью лиц молодого трудоспособного возраста, возможностью быстрого развития стойкой инвалиди-зации при недостаточной эффективности некоторых терапевтических средств [3].
На современном этапе наличие унифицированных критериев постановки диагноза РС способствует раннему назначению специфического патогенетического лечения, направленного как на купирование симптомов обострения, так и на модулирование течения болезни, что стало возможным благодаря значительному прогрессу в понимании механизмов развития патологического процесса при РС, а также биотехнологическим методам создания новых лекарственных средств [1, 3].
В последние годы дебют РС все чаще отмечается у детей до 16 лет. Установлено, что клинические проявления заболевания в детском возрасте могут последовать за вирусной инфекцией или иммунной стимуляцией. Достаточно хорошо изучена семейная отяго-щенность по РС, распространенность РС составляет около 30% у монозиготных близнецов [1, 2].
Механизмы повреждения нервной ткани при РС включают иммуновоспалительную демиелинизацию с олигодендропатий и постепенно нарастающую ней-родегенерацию. Эти явления связывают с нарушениями проницаемости гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) и активным проникновением в ткань мозга Т-лимфоцитов, сенсибилизированных к антигенам миелина [1, 2]. Т-лимфоциты под действием ряда факторов активируются, пролифирируют и включают эффекторные реакции, повреждающие миелин и аксоны. В результате активации Т-лимфоциты (СЭ4+) становятся аутоагрессивными.
На следующей стадии происходит проникновение С04+-Т-клеток в ЦНС через поврежденный ГЭБ, набухание Т-клеток и прикрепление их к эндотелиаль-ным клеткам сосудов. Т-клетки инфильтрируют сосудистую клетку и секретируют ферменты - матрикс-ные металлопротеиназы (ММП), обеспечивающие проникновение Т-лимфоцитов в ЦНС. Активация С04+-Т-клеток происходит на фоне одновременного снижения супрессорной активности субпопуляции С08+-Т-клеток, нарушения В-клеточной толерантности, что ведет к нарастанию титра аутоантител к структурам миелина и олигодендроглии. проникнув в ЦНС, Т-клетки, уже активированные по отношению к аутоантигену, взаимодействуют с антигенпре-зентирующими клетками, в роли которых выступают периваскулярные макрофаги и микроглия. Аутоанти-генами в ЦНС являются белки миелина: основной белок миелина, протеолипидный протеин, миелиноли-годендроцитарный гликопротеин. Активированные Т-клетки, макрофаги и микроглия продуцируют про-воспалительные цитокины: у-интерферон (у-ИФН), фатор некроза опухоли а (ФНОа), ИЛ-2 и др. [2].
Воспалительные процессы ведут к разрыву мие-линовой оболочки. В результате дальнейшей активации патологического процесса прогрессирует демие-линизация и гибель олигодендроцитов, усиливаются глиотоксические факторы, происходит накопление свободнорадикальных соединений и медиаторов воспаления [2, 5, 6].
Данные нейровизуализации головного и спинного мозга позволили выявить очаги снижения интенсивности сигнала (чаще перивентрикулярные, реже одиночные в ножках мозга, полушариях) в Т-1W режиме и одновременного повышения интенсивности сигнала в Т-2W режиме в начальном периоде РС у 70,7% взрослых больных в головном и у 54,7% - в спинном мозге. Несмотря на наличие четких клинических симптомов РС, диагностическая значимость МРТ головного и спинного мозга в начальном периоде РС не высокая [1, 4].
В связи с этим, несомненно, значимым является поиск специфических молекулярных маркеров, способных дополнить традиционное неврологическое и мРТ исследование больных РС. Для их разработки нужно учитывать, что ведущим фактором, повреждающим ГЭБ, является нарушение баланса между синтезом и разрушением белков внеклеточного матрикса (ВКМ), определяющее темпы патологического ремо-делирования ГЭБ, которое происходит на фоне формирования и прогрессирования воспаления, может
нарушать баланс клеточной пролиферации, миграции и тканевой деструкции [7, 8].
ММП являются ферментами, участвующими как в поддержании матриксного гомеостаза, так и в ма-триксном ремоделировании [5, 9]. ММП принадлежат к многочисленному семейству секретируемых различными типами клеток Zn2+- и Са2+-содержащих эндопеп-тидаз, разрушающих все протеиновые и протеоглика-новые компоненты ВКМ, включающие фибриллярный и нефибриллярный коллагены, фибронектин, ламинин и гликопротеины базальной мембраны. Основными свойствами ММП являются: способность гидролизи-ровать протеиновые и протеогликановые компоненты ВКМ; каталитическая активность, обусловленная Zn2+-и Ca2+; наличие неактивной формы, способной активироваться при включении в клеточную мембрану; подавление активности под действием тканевых ингибиторов металлопротеиназ (ТИМП); структура, гомологичная интерстициальной коллагеназе (ММП-1) [9].
В настоящее время известны более 20 ММП, разделяемых в зависимости от их субстратной специфичности на интерстициальные коллагеназы, стро-мелизины, желатиназы, эластазы и металлопротеи-назы мембранного типа [9-11].
В подсемейство коллагеназ включены 3 ММП: интерстициальная коллагеназа (ММП-1), нейтро-фильная коллагеназа (ММП-8) и коллагеназа-3 (ММП-3). коллагеназы являются единственными ММП, способными расщеплять тройной спиральный фибриллярный интерстициальный коллаген I,
II и III типов, продукты распада которого становятся доступными для дальнейшей деградации желатина-зами и стромелизинами. Нейтрофильная коллагеназа активна преимущественно в отношении коллагена I типа, интерстициальная коллагеназа - коллагена
III типа, а коллагеназа-3 - коллагена II типа [5, 9]. Подсемейство стромелизинов состоит из 4 ММП: стромелизина-1 (ММП-3), стромелизина-2 (ММП-10), стромелизина-3 (ММП-11) и матрилизина. Стро-мелизины проявляют протеолитическую активность в отношении казеина, фибронектина, желатина, ла-минина, эластина, протеогликанов хряща и коллагена III, IV, V типов. Стромелизин-1 и стромелизин-2 активируют про-ММП-1. Активный матрилизин способен расщеплять казеин, желатин, фибронектин и активировать проколлагеназу-1. Из подсемейства желатиназ в настоящее время известны 2 фермента: желатиназа-А (ММП-2) и желатиназа-В (ММП-9) -основные ферменты, разрушающие коллаген базаль-ной мембраны IV типа. они также растворяют эластин, фибронектин, коллагены IV, V и VII типов [6,9]. Желатиназы экспрессированы в хондроцитах, фи-бробластах, а ММП-9 - в нормальных макрофагах, гранулоцитах, активированных т-лимфоцитах, в инфицированных клетках (инфицированных вирусом Эпштейна-Барр клетках лимфомы). Увеличение концентрации ММП-1, ММП-2, ММП-9, стромелизина-1 и стромелизина-2 выявляют в ранах, язвах и культурах химически поврежденного эпителия.
Активность ММП регулируется на уровне транскрипции генов; с помощью посттрансляционных модицификаций фермента (таких как протеолиз
проформ ММП с последующей их активацией); посредством действия эндогенных ТИМП [8]. Протео-литическая активность контролируется активацией латентных проэнзимов и ингибированием как активированных, так и латентных форм протеиназ семейством эндогенных ингибиторов - ТИМП [9, 12]. Сильными активаторами проформ ММП являются эндопептидазы: трипсин, химотрипсин, плазмин, калликреин, тромбин, катепсин G, нейтрофильная эластаза и термолизин.
Многие ММП со сходной субстратной специфичностью, такие как ММП-2 и ММП-9, различно реагируют на действие факторов роста и цитокинов. Так, желатиназа-А слабо регулируется факторами роста, а секрецию и экспрессию жедатиназы-в, наоборот, значительно увеличивают ростовые факторы (тром-боцитарный фактор роста - ТФР), молекулы адгезии сосудистого эндотелия - VCAM-1, VCAM-2, основной фактор роста фибробластов - ФРФ, фактор роста эндотелия сосудов - VEGF, эпидермальный фактор роста - ЭФР, фактор некроза опухолей-а (ФНОа), интерлейкины - ИЛ-1а, 1р. Экспрессия интерстици-альной коллагеназы также значительно индуцируется факторами роста и цитокинами, увеличиваясь под действием ультрафиолетового излучения и механического повреждения тканей [5, 9, 13]. Экспрессию ММП подавляют некоторые полипептидные факторы роста, матриксные гепариновые сульфаты, глюкокортикоид-ные гормоны и аналоги ретиноидной кислоты [9, 14]. Помимо проферментной активации, существует инактивация ММП такими ингибиторами, как ТИМП и а2-макроглобулин, тетрамерный гликопротеин 727 кД, функционирующий как ферментный регулятор (про-теаза) в жидкостных средах организма, единственный белок, ингибирующий почти все эндопептиды, независимо от их субстратной специфичности [9].
Главные белки, регулирующие активность ММП, - ТИМП, секретируемые белки, способные за счет структурной гомологии ингибировать ММП. К настоящему времени известны 4 ингибитора ММП: ТИМП-1, ТИМП-2, ТИМП-3 и ТИМП-4. ТИМП-1 -гликопротеин массой 28 кД с множественными дис-ульфидными мостиками - считают специфичным ингибитором коллагеназ, хотя он способен также ингибировать другие ММП. ТИМП-2 - негликолизиро-ванный белок массой 21 кД, на 41% гомологичный ТИМП-1 и ингибирующий обе коллагеназы - инте-стициальную и IV типа [9, 12].
ТИМП ингибируют активность коллагеназы, стро-мелизина и желатиназы благодаря образованию стойкого ферментного ингибиторного комплекса в стехи-ометрическом соотношении 1:1 с активной формой ММП. ТИМП-1 и ТИМП-2 формируют стойкий комплекс преимущественно с проформами желатиназы А и желатиназы В соответственно, а также с простро-мелизином. Удаление ТИМП из комплекса вызывает аутокаталитическую активацию соответствующей ММП, что подтверждает стабилизирующую функцию ТИМП, сохраняющего ММП в латентном состоянии. При образовании комплекса ТИМП-2 - про-ММП-2 активность ММП блокируется, а ТИМП сохраняется [7, 9, 13].
Все ТИМП структурно и функционально идентичны, но различно экспрессированы в нормальных и трансформированных клетках, по-разному регулируются и играют различную физиологическую роль [12]. Локализация ТИМП также различна: ТИМП-1 и ТИМП-2 растворимы и находятся преимущественно во внеклеточной пространстве, а нерастворимый ТИМП-3 связан с компонентами ВКМ. В норме экспрессия ТИМП-1 выявлена в ткани головного мозга, в люминальном эпителии, железах, строме, в эндоте-лиальных и гладких мышечных клетках сосудов.
В последние годы появились публикации, посвященные выявлению определенных изменений уровней ММП в крови при различных формах патологии [5, 9, 14, 15]. Однако в педиатрической клинике таких исследований все еще недостаточно, поэтому целью нашей работы явилось определение изменений содержания ММП в сыворотке крови детей, страдающих РС. Работа была одобрена локальным этическим комитетом. На проведение всех необходимых исследований было получено добровольное информированное согласие.
Материалы и методы
Под наблюдением находилось 137 детей в возрасте от 10 до 8 лет. Все дети были комплексно обследованы с использованием современных клинических, инструментальных и лабораторных методов. Из них у 122 детей был диагностирован РС. Все больные РС были распределены на 3 группы.
1-ю группу составили 64 больных в стадии обострения РС, которое проявлялось наличием неврологического дефицита в виде сенсорных, двигательных, координаторных, офтальмологических нарушений, а также нарушений функций тазовых органов и психики. При нейровизуализации с помощью МРТ определялись контрастпозитивные очаги с накоплением контрастного вещества как по типу кольцо/полукольцо, так и диффузные, а также новые (свежие) очаги демиелинизации.
Во 2-ю группу вошли 45 детей с ремиссией заболевания. Все больные этой группы находились на лечении препаратами интерферона бета 1а и в зависимости от получаемого препарата были распределены на 3 подгруппы; 2а - лечение авонексом (в дозе 30 мкг/нед, внутримышечно; n = 13), 2б - лечение препаратом ребиф 22 (в дозе 66 мкг/нед подкожно; n = 21) и 2в - лечение препаратом рабиф 44 (в дозе 132 мкг/нед подкожно; n = 11).
3-ю группу составили 13 больных детей, у которых при отсутствии клинического неврологического дефицита на томограммах определялись очаги (нередко множественные, новые) накопления контрастного вещества по типу кольцо/полукольцо, что свидетельствовало о прогрессировании РС.
Референтную группу составили 15 условно здоровых детей [15].
У всех обследованных больных наличие очагов демиелинизации определялось методом магнитно-резонансной томографии (МРТ) головного мозга в режимах T-1W, T-2W и FLAIR в 3-х ортогональных про-
екциях - сагиттальной, коронарной и аксиальной до и после парамагнитного контрастного усиления гадови-стом. Эти исследования были проведены на магнитно-резонансном томографе Signa HDX 1,5 Т (GE, США).
У всех обследованных детей в сыворотке крови иммуноферментным методом определяли концентрации матриксных металлопротеиназ 2, 3, 8 и 9 (ММР-2, -3, -8, -9), их тканевого ингибитора (TIMP-1), а также фактора некроза опухоли а (ФНОа) и трансформирующего фактора роста бета-1 (ТФР-ß!) с помощью специальных наборов реагентов.
Все полученные данные были обработаны статистически с использованием пакета прикладных программ Statistica-6.
Результаты и их обсуждение
Проведенные исследования показали, что у больных детей с обострением РС отмечалось значительное (в 4,8 раза) увеличение сывороточного содержания ММП-9 на фоне значимого снижения ММП-2 по сравнению с референтными уровнями (табл. 1). У этих же больных было выявлено увеличение (в 1,4 раза) концентрации ингибитора ТИМП-1, направленное, по-видимому, на подавление гиперпродукции ММП-9. Однако выявленное повышение образования ТИМП-1 было, по-видимому, недостаточным, что сопровождалось выраженным дисбалансом фибротических и фи-бролитических факторов с преобладанием последних, на что указывает существенное (в 3 раза) повышение соотношения ММП-9/ТИМП-1 [8, 15].
В последнее время появились данные, указывающие на возможное участие в патогенезе РС ММП-3 и ММП-8, относящихся к группе стромелизина и коллаге-наз соответственно [17, 18]. По нашим данным у детей в стадии обострения РС содержание ММП-3 и ММП-8 в крови более чем в 2 раза превышало их уровни в стадии ремиссии РС и референтные значения (табл. 1).
Полученные нами данные согласуются с представлениями об участии ММП в повреждении ГЭБ и обусловленной этим миграции активированных Т-лимфоцитов через ГЭБ в нервную ткань, продукции ими и вторично активированными макрофагами и микроглией провоспалительных цитокинов (у-ИФН, лимфотоксина, ФНО и др.), что в еще большей степени индуцирует и поддерживает воспалительные реакции и усиливает нарушение проницаемости ГЭБ [7, 1, 14, 19].
Действительно, определение концентраций ФНОа в крови больных PC в стадии обострения заболевания выявило двукратное повышение его содержания по сравнению с контролем (табл. 1).
при обострении рс происходит активация иммунных и патохимических реакций с нарастающей продукцией цитокинов и ммп, что приводит к про-грессированию повреждений ГЭБ и увеличению разрушений миелиновой оболочки и формированию новых очагов демиелинизации, что было установлено нами при МРТ обследовании больных этой группы. при этом обращало на себя внимание наличие множественных очагов гиперинтенсивного мр сигнала в режимах T2W и FLAIR с накоплением контрастного вещества по типу кольцо/полукольцо [2, 4].
Особый интерес представляет исследование ММП и цитокинов у больных на фоне лечения PC. Как известно, качественно новым направлением патогенетической терапии PC является внедрение в клиническую практику средств модифицирующей (превентивной) терапии, к которым относятся препараты рекомбинантного Р-интерферона, в частности Р-ЙФИ 1а (ребиф, авонекс), используемые в педиатрической клинике [3, 20]. Одним из возможных механизмов действия этих препаратов является подавление миграции Т-клеток через ГЭБ, который может опосредоваться снижением экспрессии различных хемокинов, молекул адгезии на поверхности Т-клеток и изменения эндогенной продукции ММП [ 21, 22].
Проведенные исследования показали, что у детей, страдающих PC, на фоне лечения препаратами рекомбинантного Р-ИФИ развивалась стойкая ремиссия с характерным для нее уменьшением количества очагов на МРТ, накапливающих контраст. При этом было установлено значимое уменьшение содержания ММП-9 (в 2,1 раза) по сравне-
Таблица 1
Изменения содержания ММП, их тканевого ингибитора и цитокинов в крови детей,
страдающих РС
Изученные соединения Изменения показателей в зависимости от стадии РС
стадия обострения (n = 64) стадия ремиссии (n = 45) субклиническое обострение (n = 13) референтная группа (n = 15)
ММП-9, нг/мл 610,60 ± 29,72** 288,91 ± 33,90** 227,93 ± 25,90** 127,32 ± 312,1
ММП-2, нг/мл 231,42 ± 8,25* 277,80 ± 20,33 250,08 ± 24,83* 298,60 ± 19,63
ТИМП-1, нг/мл 418,32 ± 16,58* 327,45 ± 31,70* 314,18 ± 11,62** 300,56 ± 17,60
ММП-9/ТИМП-1, усл. ед. 1,64 ± 0,13* 0,99 ± 0,14* 0,80 ± 0,11* 0,54 ± 0,04
ММП-2/ТИМП-1, усл. ед. 0,63 ± 0,06 1,05 ± 0,16 0,95 ± 0,12* 0,68 ± 0,04
ММП-3, нг/мл 11,98 ± 3,44* 5,14 ± 0,68** 9,37 ± 2,03** 4,15 ± 1,42
ММП-8, нг/мл 27,06 ± 4,35* 15,33 ± 1,94** 28,11 ± 3,23* 13,35 ± 2,18
ФНОа, нг/мл 8,75 ± 1,27* 6,19 ± 1,16* 6,94 ± 1,28* 3,05 ± 0,36
ТФР-ßl, нг/мл 30,68 ± 0,91* 33,86 ± 2,65* 40,37 ± 2,33* 15,42 ± 2,72
Примечание. Здесь и в табл. 2 звездочками обозначены уровни статистической значимости различий показателей: * -р < 0,05 по сравнению с контрольной группой, ** -р < 0,05 по сравнению со стадией обострения.
Таблица 2
Изменения содержания в крови ММП, их тканевого ингибитора и цитокинов у больных с рассеянным склерозом в стадии ремиссии на фоне лечения различными препаратами ИНФ-Р (М ± т)
Изученные соединения Содержание ММП и цитокинов при лечении различными препаратами ИНФ-Р Референтная группа (n = 15)
авонекс (n = 13) ребиф 22 (n = 21) ребиф 44 (n = 11)
ММП-9, нг/мл 255,71 ± 34,11* 308,44 ± 42,33* 238,30 ± 25,30* 127,32 ± 12,1
ММП-2, нг/мл 267,34 ± 15,82 264,9 ± 17,70 290,21 ± 27,75 298,60 ± 19,63
ТИМП-1, нг/мл 324,93 ± 25,82 309,39 ± 26,44 335,43 ± 43,04 300,56 ± 17,60
ММП-9/ТИМП-1, усл. ед. 0,87 ± 0,14* 1,16 ± 0,21* 0,75 ± 0,06* 0,54 ± 0,04
ММП-2/ТИМП-1, усл. ед. 0,90 ± 0,09* 1,04 ± 0,12* 1,15 ± 0,29* 0,68 ± 0,04
ФНОа, нг/мл 6,45 ± 1,17* 6,25 ± 1,16* 5,94 ± 1,28* 3,05 ± 0,36
ТФР-р1, нг/мл 32,94 ± 2,83* 33,86 ± 2,65* 33,56 ± 2,97* 15,42 ± 2,75
нию с фазой обострения, не достигающее референтных уровней (табл. 2).
Одновременно была отмечена нормализация содержания ТИМП-1, сопровождавшаяся значимым снижением соотношения ММП-9/ТИМП-1, которое, однако, оставалось повышенным по сравнению с референтным уровнем.
Эти данные свидетельствуют, что положительный эффект лечения препаратами в1-ИФИ обеспечивается преимущественно за счет уменьшения активности патологического процесса. При этом интерферон бета повышает супрессорную активность мононуклеарных клеток периферической крови, а существенное уменьшение продукции ММП способствует стабилизации ГЭБ, что во многом обусловливает противовоспалительный эффект [3, 21]. На это указывает также отмеченная нами стимуляция экспрессии ТФР-Р1, как основного противовоспалительного и иммуносупрессорного цитокина у детей с ремиссией РС (табл. 2).
Вместе с тем нами не было отмечено снижения продукции провоспалительного цитокина - ФНОа в крови больных рС детей в стадии ремиссии, что возможно свидетельствует о пролонгированном течении у них воспалительного процесса.
Следует отметить, что значимых различий концентраций ММП и ТИМП-1 в крови больных, получавших различные формы препаратов, ИНФ-Р-1а, нами не было выявлено (табл. 2). Можно полагать, что эти эффекты ММП обусловлены не только различиями механизмов действия, но и фармакодинамикой этих лекарственных средств. имеются данные, что препараты ИФН-Р-1а (Ребиф для подкожного введения и Авонекс для внутримышечного введения) имеют разные механизмы действия [2, 20]. Так, терапевтические эффекты ИФН-Р связаны с угнетением пролиферации и активации воспалительных клеток, включая ТЫ-лимфоциты; усилением ^2-супрессорной функции; изменением цитокинового профиля в сторону проти-
вовоспалительного фенотипа; угнетением продукции ИФН-у и ФНОа; уменьшением поступления лейкоцитов в ЦНС через ГЭБ за счет влияния на продукцию ММП [19, 21].
по результатам мультицен-тровых двойных слепых плаце-боконтролируемых испытаний, одним из основных параметров, определяющих эффективность всех этих препаратов при ремит-тирующем течении PC у взрослых больных, явилось снижение числа обострений; за два года терапии Ребифом - на 33% (в дозе 44 мкг) и на 27% (в дозе 22 мкг), Авонексом - на 18% [20]. при использовании всех этих препаратов при ремиттирующем PC установлено замедление про-грессирования инвалидизации пациентов (по шкале Expanded Disability Status Scale, EDSS) [2, 3, 16].
полученные нами данные свидетельствуют также, что особого внимания требуют дети с субклиническим обострением PC (3 группа), у которых, несмотря на отсутствие признаков неврологического дефицита и изменений содержания ММП, соответствующих стадии ремиссии, при МРТ исследовании определялись множественные свежие (новые) очаги демиелинизации. обращает на себя внимание у детей этой группы статистически значимое увеличение соотношения ММП-9/ТИМП-1, указывающее на преобладание процессов разрушения ВКМ, способствующих нарастанию демиелинизации. Эти данные указывают, что больные этой группы составляют группу риска и требуют тщательного наблюдения.
Таким образом, повышение концентраций ММП в стадии обострения PC у детей с последующим снижением их содержания в стадии его ремиссии свидетельствует о патогенетической значимости этих соединений при PC. выявленная четкая зависимость сывороточных уровней ММП от характера течения PC позволяет использовать их в качестве дополнительных маркеров степени активности течения PC и оценки эффективности проводимой терапии [23].
комплексное исследование неврологического и соматического статуса детей, страдающих PC, в сочетании с определением сывороточных уровней ММП, их ингибиторов и цитокинов дополняют диагностические критерии определения активности PC и могут быть рекомендованы к использованию в специализированных отделениях для повышения эффективности лечебных и реабилитационных мероприятий.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гусев Е. И., Завалишин И. А., Бойко А. н. Рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания. - М.: Миклош, 2004.
2. Завалишин И. а., Головкин в. И. Рассеянный склероз. Избранные вопросы теории и практики. - М., 2000.
3. Бойко А. н., столяров И. Д., сидоренко Т. в. и др. Патонене-тическое лечение рассеянного склероза: настоящее и будущее //
Журн. неврол. и психиатр. - 2009. - № 7. - С. 90-99.
4. Филиппович А. Н. Роль магнитно-резонансной томографии и миелинотоксической активности сыворотки крови в диагностике начального периода рассеянного склероза // Новости лучевой диагностики. - 2001. - № 1-2. - С. 70-72.
5. Rosenberg G. A. Matrix metalloproteinases and their multiple roles in neurodegenerative diseases // Lancet Neurol. - 2009. - Vol. 8, N 2. - P. 205-216.
6. Cauwe B., Opdenakker G. Intracellular substrate cleavage: a novel dimension in the biochemistry, biology and pathology of matrix metalloproteinases // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. - 2010. - Vol. 45, N 5. - P. 351-423.
7. Grocker J., GhorpadeA. Tissue inhibitor ofmetalloproteinase (TIMP)-1: the TIMPed balance of matrix metalloproteinases in the central nervous system // J. Neurosci. Res. - 2003. - Vol. 74, N 6. - P. 801-806.
8. Crocker S. J., Pagenstecher A., Campbell I. L. The TIMPs tango with MMPs and more in the central nervous system // J. Neurosci. Res. -2004. - Vol. 75, N 1. - P. 1-11.
9. Гайдамака Н. В., Паровичникова Е. Н., Завалишина Л. Э. и др. Значимость матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов в норме, онкологии и онкогематологии // Тер. арх. - 2009. - Т. 81, № 7. - С. 91-96.
10. Yang Y., Hill J. W., Rosenberg G. A. Multiple roles of metalloproteinases in neurological disorders // Prog. Mol. Biol. Transl. Sci. -2011. - Vol. 99, N 2. - P. 241-263.
11. Candelario-JalilE., Yang Y., Rosenberg G. A. Diverse roles of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in neuroinflammation and cerebral ischemia // Neuroscience. - 2009. - Vol. 158, N 3. - P. 983-994.
12. Wojtowicz-Praga S. M., Dickson R. B., Hawkins M. J. Matrix metal-loproteinase inhibitors // Invest. New Drugs. - 1997. - Vol. 15, N 1.
- P. 61-75.
13. Romi F., HelgelandG., GilhusN. E. Serum levels of matrix metalloproteinases: implications in clinical neurology // Eur. Neurol. - 2012.
- Vol. 67, N 2. - P. 121-128.
14. Zhang H., Adwanikar H., Werb Z. et al. Matrix metalloproteinases and neurotrauma: evolving roles in injury and reparative processes // Nweuroscientist. - 2010. - Vol. 16, N 2. - P. 156-170.
15. Смирнов И. Е., Соболев С. С., Кучеренко А. Г. и др. Матариксные металлопротеиназы при хронической бронхолегочной патологии у детей // Рос. педиат. журн. - 2010. - № 6. - С. 11-14.
16. BernalF., Elias B., HartungH. P. et al. Regulation of matrix metalloproteinases and their inhibitors by interferon-beta: a longitudinal study in multiple sclerosis patients // Mult. Scler. - 2009. - Vol. 15, N 6. - P. 721-727.
17. Alexander J. S., Harris M. K., Wells S. R. et al. Alterations in serum MMP-8, MMP-9, IL-12p40 and IL-23 in multiple sclerosis patients treated with interferon-beta1b // Mult. Scler. - 2010. - Vol. 16, N 7.
- P. 801-809.
18. VilaltaA., SahuquilloBarris J., PocaM. A. Matrix metalloproteinases in neurological brain lesions: a new therapeutic target? // Rev. Neurol.
- 2010. - Vol. 51, N 2. - P. 95-107.
19. Boz C., Ozmenoglu M., Velioglu S. et al. Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase (TIMP-1) in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis with interferon beta // Clin. Neurol. Neurosurg. - 2006. - Vol. 108, N 2. - P. 124-128.
20. Завалишин И. А., АлексееваH. С., Переседова А. В. Диагностика и лечение рассеянного склероза // Журн. неврол. и психиатр. -2012. - № 6. - С. 89-96.
21. Opdenakker G., Van Damme J. Probing cytokines, chemokines and matrix metalloproteinases towards better immunotherapies of multiple sclerosis // Cytokine Growth Factor Rev.- 2011. - Vol. 22, N 5-6. - P. 359-365.
22. Fainardi E., Castellazzi M., Tamborino C. et al. Potential relevance of cerebrospinal fluid and serum levels and intrathecal synthesis of active matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) as markers of disease remission in patients with multiple sclerosis // Mult. Scler.- 2009. -Vol. 15, N 5. - P. 547-554.
23. Benesová Y, Vasku A., Novotná H. et al. Matrix metalloproteinase-9 and matrix metalloproteinase-2 as biomarkers of various courses in multiple sclerosis // Mult. Scler. - 2009. - Vol. 15, N 3. - P. 316-322.
Поступила 17.04.12
Сведения об авторах:
Кучеренко Алла Георгиевна, доктор мед. наук, проф., вед. науч. сотр. лаб. патофизиологии с блоком радионуклидных исследований НИИ педиатрии ФГБУ НЦЗД РАМН; Шатилова Надежда Николаевна, аспирант отд-ния психоневрологии и психосоматической патологии НИИ педиатрии ФГБУ НЦЗД РАМН; Кузенкова Людмила Михайловна, доктор мед. наук, проф., зав. отд-нием психоневрологии и психосоматической патологии НИИ педиатрии ФГБу НЦЗД РАМН.
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 616.127-053.2-092:612.6.05]-07
Н. А. Березнева, Н. С. Аверьянова, О. Е. Громыко, А. П. Иванов, А. Ю. Асанов, Е. Н. Басаргина, В. Г. Пинелис
влияние полиморфизмов ш гена ангиотензинпревращающего
ФЕРМЕНТА И C677T гЕНА МЕТИЛЕНТЕТРАгИДРОФОЛАТРЕДУКТАЗЫ НА ТЕЧЕНИЕ ДИЛАТАЦИОННОЙ КАРДИОМИОПАТИИ У ДЕТЕЙ
Научный центр здоровья детей РАМН, 119961, Москва, Ломоносовский просп., 2, стр. 1
Представлены данные исследований полиморфизмов генов ангиотензинпревращающего фермента - АПФ (1Ю) и метилентетрагидрофолатредуктазы (С677Т) у 55 детей с дилатационной кардиомиопатией (ДКМП). Установлено, что для больных с DD-генотиnом АПФ характерен дебют заболевания в школьном возрасте и чаще наблюдается медленно прогрессирующее и рецидивирующее течение болезни. У больных, имеющих 11-генотип, чаще наблюдалось благоприятное течение ДКМП. Пациенты с ДКМП, гомо- и гетерозиготные по Т-аллелю гена метилентетрагидрофолатредуктазы имеют более выраженные изменения структурно-функциональных показателей сердца и больший риск неблагоприятного исхода, чем больные, гомозиготные по С-аллелю.
Ключевые слова: дилатационная кардиомиопатия, полиморфизмы генов ангиотензинпревращающего фермента (!Ю), метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), генетическая диагностика
