CC BY
54
КЛИНИЧЕСКАЯ ОНКОЛОГИЯ НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ДИАГНОСТИКИ... 99
Клинический пример:
Больная, 41 лет. Диагноз: «Рак левой молочной железы Т'¡NgMo после комплексного лечения в 2003 г., метастазы в легкие, мягкие ткани передней брюшной стенки, кости (2005г.)».
В 2003 г. проведено следующее лечение: радикальная секторальная резекции левой молочной железы, лучевая терапия 60Гр, 4 курса терапии по схеме FAC с адъювантной целью.
В феврале 2005 г. выявлено прогрессирование опухолевого процесса - метастатическое поражение грудного (Th10-12) и поясничного отделов отдела позвоночника (L2), метастазы в оба легких, экссудативный плеврит слева, метастазы (N2) на передней брюшной стенке до 1,0 см в диаметре.
Перед началом лечения показатели общего анализа крови были следующие: Эр - 3,5х1012/л; Нв - 98г/л, Ц.п -0,9; тромбоциты - 229,4х1(Р/л; лейкоциты - 4,9х1(Р/л; эоз - 1 %; n - 2 %; с - 68 %; лимфоциты - 25 %; моноциты - 4 %, гематокрит - 33 %, содержание эритропоэти-на в крови - 1,6 нг/мл; сывороточного железа - 20 мкмоль/л.
Пациентка с марта 2005 г. еженедельно получала рекормон по 10 тыс.ед. за сутки химиотерапии по схеме FAC и еженедельно, в течение 6 недель пациентке проведено 3 курса химиотерапии с интервалом 21 день.
Литература
Через 6недель показатели общего анализа крови: Эр - 3,8x10 /л; Нв - 118 г/л, Цп - 0,91; ретикулоциты - 3 %; тромбоциты - 267,4х10Р/л; лейкоциты - 4,1х101г/л, n - 1 %; с - 59 %; лимфоциты - 32 %; моноциты - 8 %, гематокрит - 34 %, содержание эритропоэтина в крови - 3,3 нг/мл; сывороточного железа - 24мкмоль/л. На фоне лечения рекормоном уровень гемоглобина оставался стабильным. Все курсы пациентке проведены своевременно, гемотрансфузий не было. Кроме того, у пациентки улучшилось общее состояние, настроение, качество жизни. После 6 курсов ХТ (через 9 недель после отмены рекормона) уровень Нв у пациентки составил 122 г/л.
Заключение
Предложенный способ позволяет предотвращать и корректировать анемию у больных ранним метастатическим РМЖ, получающих ХТ 1 линии по схеме FAC, а также проводить профилактику путем применения рекормона, способствующего сохранению стабильного уровня показателей гемоглобина, что позволяло своевременно проводить курсы ХТ. Ни у одной пациентки не было гемотрансфузий, отмечено улучшение самочувствия, функционального и эмоционального статуса, а значит и улучшение качества жизни больных.
1. Ludwig H, Bigregard G, Olmi P, Nortier J. European Cancer Anemia Survey (ECAS): prospective evaluation of anemia in over 15,000 cfncer(CA) patients(pts)//Ann Oncol. - 2002. - 13(suppl.5). - 169 (A623PD).
2. LudwigH. Epoetin in cancer-related anemia. - Nep Dail Transplannt, 1999.
3. OberhoffC, Nery B. Recombinant human erytropoetin in the treatment of chemo-induced anemia and prevention of transfusion requirement associated with solid tumors: a randomized, controlled study//An Oncol. - 1998. - 9. - P. 255-60.
4. Olsonn A.M, Svensson J.H. Erytropoetin treatment in metastatic breast cancer: effect on HB, qulity of life and need of transfusion // Acta Oncol. - 2002. - 41(6). - P. 517-24.
5. Tsukuda M, Yuyama S. Effectivneness of weekly subcutaneous recombinant human erytropoetin administration for chemotherapy-induced anemia // Biotherapy. - 1998. - 11(1). - P. 21-5.
6. VaupelP. Biological consequences of tumor hypoxia // Semin Oncol. - 2001. - 28(Suppl.8). - P. 36-4.
7. Wood P.A., Hrushesky J.M. Cisplatin-associated anemia: An erythropoietin deficiency syndrome // J Clin Invest. -
1995. - 95. - P. 1650-9.
«ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ
Новгород, 18-19мая 2010 г.
ТЕЗИСЫ
ХА. Бигвава, Е.Г. Славина, А .И. Черткова,
Т.Н. Заботина, А А. Борунова, Л. Ф.Морозова,
З.Г. Кадагидзе
ИНДУКЦИЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ И АПОПТОЗА
В КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ МЕЛАНОМ ПРИ КОМБИНИРОВАНИИ АЛЬНОРИНА С ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМИ ПРЕПАРАТАМИ
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Задача исследования. Изучить взаимодействие in vitro отечественного рекомбинантного препарата фактора некроза опухоли альфа - альнорина (Ал) с противоопухолевыми препаратами, применяемые для лечения злокачественной меланомы, в индукции ци-тотоксического действия и апоптоза в клеточных линиях меланом.
Материалы и методы. В исследование включены 6 линий меланом человека - mel MTP, mel II, mel Ras, mel P, mel Is, mel Kor, полученные из операционного материала больных; противоопухолевые препараты - дакар-базин (DTIC) и кармустин (BCNU). Цитотоксическую
активность оценивали с использованием МТТ-теста, а апоптоз - методом фиксированного окрашивания про-пидиумом иодида (PJ) и методом двойного прижизненного окрашивания с использованием Аннексина V-FITC в комбинации с PJ с последующим анализом на проточном цитофлуориметре FACScan (Becton Dickinson).
Результаты. При исследовании линии меланом mel Il, mel MTP, mel Kor оказались резистентны к цитотокси-ческому действию DTIC, а линии меланом mel Ras, mel P, mel Is - чувствительны. К цитотоксическому действию BCNU чувствительными оказались линии mel Il, mel MTP, mel Is, а резистентными - mel Ras, mel P, mel Kor. Добавление Ал повышало цитотоксичность DTIC в отношении резистентных линии и в слабой степени в отношении чувствительных линий. Сходные закономерности обнаружены и для BCNU, Ал усиливал цитотоксическое действие BCNU только в отношении резистентных линий. Клетки mel Il и mel MTP оказались резистентными к индукции апоптоза DTIC. Ал в концентрации 500 МЕ/мл усиливал индукцию апоптоза в клетках mel II, а в клетках mel MTP только в концентрации 1,56 МЕ/мл; в концентрациях 500 и 50МЕ/мл он сам индуцировал в этих клетках высокий уровень апоптоза.
Клетки mel Ras и mel P были чувствительны к апоп-тозиндуцирующему эффекту DTIC и Ал его не усиливал. Индукция апоптоза BCNU проявлялась максимально на клетках линий mel Il, Mel MTP.
Однако Ал не усиливал апоптоз, индуцированный BCNU ни на чувствительных, ни на резистентных линиях.
Выводы. Было выявлено, что клетки меланом, происходящие от разных больных, отличаются различной чувствительностью к цитотоксическому и апоптозин-дуцирующему действию противоопухолевых препаратов, и Ал усиливает эту чувствительность только на резистентных, но не на чувствительных клетках.
АА. Борунова, Г.З. Чкадуа, Т.Н. Заботина, ДА. Носов, Е.С. Яковлева, З.Г. Кадагидзе
СУБПОПУЛЯЦИЯ СТ>8+СТ>28СТ>1ШТ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ МЕТАСТАТИЧЕСКИМ РАКОМ ПОЧКИ ПРИ ВАКЦИНОТЕРАПИИ
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Задача исследования. Оценить прогностическую значимость субпопуляции регуляторных CDS+CD2S-CD11bT-лимфоцитов периферической крови больных с диагнозом метастатический рак почки при вакцинотерапии зрелыми дендритными клетками, нагруженными опухолевым лизатом.
Материал и методы. В исследование были включены больные метастатическим раком почки (n=15), получившие вакцинотерапию в терапевтическом режиме (по 6 вакцинаций).
У 5 больных (33,4 %) на фоне лечения была отмечена стабилизация процесса, у остальных 10 больных (66,6 %)- в процессе вакцинотерапии наблюдалось прогрессирование основного заболевания.
В качестве контрольной группы исследовали фенотип здоровых доноров (n=10).
Иммунофенотип лимфоцитов периферической крови оценивали до начала вакцинотерапии в реакции иммунофлуоресценции с коммерческими МКА к CD45, CDS, CD11b и CD2S антигенам, конъюгированными FITC, PE, PE-Cy5 и APC, с последующим анализом на проточном цитофлуориметре FACScan (Becton Dickinson).
Результаты. Субпопуляция регуляторных CDS+CD2S-CD11b-T-лимфоцитов является минорной и составляет менее З % лимфоцитов периферической крови здоровых доноров.
При иммунологическом исследовании до начала лечения было выявлено, что у 33,3 % больных (n=5) количество СТ8+СТ28-СТ11Ь-Т-лимфоцитов составляло более 10 % (10-20 %) и на фоне лечения оставалось стабильным.
У 13,3 % больных (n=2) исходно эта субпопуляция была в пределах нормы, а после 3-й вакцинации составила более 10 %.
Проводимая вакцинотерапия для этих больных была не эффективна.
У остальных больных 53,3 % (n=8) субпопуляция регуляторных CDS+CD2S-CD1 ^-Т-лимфоцитов была в пределах нормы, как до начала терапии, так и в процессе лечения.
При этом у 3 больных в процессе вакцинотерапии было выявлено прогрессирование основного заболевания, тогда как у остальных больных (33,3 %) на фоне лечения наблюдалась стабилизация процесса.
Выводы. Полученные нами результаты позволяют рассматривать субпопуляцию регуляторных CDS+CD2S-CD11bT-лимфоцитов как показатель неблагоприятного прогноза и возможный критерий отбора больных для вакцинотерапии.
М.Д. Огородникова1, Т.Н. Заботина2, А.А. Борунова2, Н.Ю. Очеева2, З.Г. Кадагидзе2, О.А. Рукавицын1,
А.Д. Онуфриевич1
АКТИВАЦИЯ И АПОПТОЗ ТРОМБОЦИТОВ ПРИ ГАММА-ОБЛУЧЕНИИ
1ГВКГ им. академика Н.Н. Бурденко, Москва 2РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМн, Москва
Технология гамма-облучения компонентов крови, в том числе, тромбоконцентратов (ТК), применяется для инактивации аллогенных Т-лимфоцитов с целью профилактики реакции трансплантат против хозяина, ассоциированной с гемотрансфузией. В России принятой дозой у-облучения является 25 Грей.
Цель. Оценить функциональную состоятельность и жизнеспособность тромбоцитов на основании экспрессии маркеров активации и апоптоза при у-облучении тромбоконцентратов в дозе 25 Грей.
Материалы и методы. Были исследованы 10 образцов ТК до и после у-облучения. ТК получали на сепараторе клеток Amicus (Fenwal). Количество тромбоцитов в полученных дозах 1д1ля обработки варьировало в диапазоне 2,5-3,5x10 1, объем ТК составлял 250-300 мл. у-облучение выполнялось на установке БИОБИМ 8000 (BEBIG) в дозе 25 Грей в течение первых суток после тромбоцитафереза. Оценивали экспрессию фосфатидилсерина (PS) на поверхности тромбоцитов с помощью FITC-меченного Annexin V. Активацию тромбоцитов оценивали по экспрессии мембранного Р-селектина с помощью моноклональных антител анти-СБ62Р. Анализ образцов проводили методом проточной цитометрии (FACS Calibur, BD Biosciences) в первые 2 ч после облучения.
Результаты. Базовый уровень экспрессии поверхностного маркера активации CD62P на поверхности тромбоцитов, полученных от разных доноров, варьировал от
13,3 % до 44,7 % и составил 26,0±1,8 %. После у-облу-чения в дозе 25 Грей достоверного повышения экспрессии CD62P не отмечено. Экстернализация фосфатидилсерина на поверхности тромбоцитов до обработки составляла не более 13,6 % (1,1-13,6 %). После у-облучения повышение связывания с Annexin V наблюдалось лишь в некоторых образцах не более чем в 2,5 раза и не превышало максимального базового уровня.
Выводы. Изменений маркеров апоптоза и активации тромбоцитов, как показателей функциональной активности и жизнеспособности тромбоцитов, после гамма-облучения в дозе 25 Грей не было выявлено.
ЕГ. Славина, А .И. Черткова, ЭК. Шоуа, В А. Нуртдинова, А А. Борунова, Т.Н. Заботина, И.П. Ганьшина,
К.Р. Зейналова, З.Г. Кадагидзе, М.Р. Личиницер ВЛИЯНИЕ ТЕРАПИИ ГЕРЦЕПТИНОМ НА КОЛИЧЕСТВО РЕГУЛЯТОРНЫХ CD4+CD25+FOXP3+ Т-КЛЕТОК (ТРЕГ)
У БОЛЬНЫХ РМЖ С ГИПЕРЭКСПРЕССИЕЙ HER2/NEU РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Ранее нами было показано, что применение герцеп-тина (Гц) приводит к уменьшению доли CD4+Т-клеток, экспрессирующих маркер CD25+, среди Т-лимфоцитов периферической крови больных РМЖ.
Целью настоящего исследования было определение изменения %-го содержания Трег у больных РМЖ, получавших терапию Гц в комбинации с химиотерапией, а также влияние проводимой терапии на субпопу-ляционный состав лимфоцитов периферической крови.
Материалы и методы. В исследование были включены 15 больных РМЖ с IIIb, IIIc и IV стадиями болезни.
На I этапе лечения больные получали Гц в монорежиме еженедельно в течение 1 мес. На II этапе лечения Гц применялся совместно с химиотерапией. В последующем больные подвергались оперативному лечению. Популяционный состав лимфоцитов изучали цитофлюо-риметрией с использованием панели моноклональных антител к дифференцировочным антигенам лимфоцитов человека на проточном цитофлюориметре FACSCalibur (Becton Dickinson, USA). Для определения количества Трег среди CD4+лимфоцитов использовали Human Regulatory Т cell Staining Kit (eBioscience). Кровь больных тестировали до лечения и после I и II этапов терапии.
Результаты и выводы. У 7 из 15 больных после I и II этапа лечения отмечалось заметное снижение количества CD4+CD25+FOXP3+ Трег: 2,96±0,8 % (P=0,0088) после I и 2,28±0,75 % (P =0,029) после II этапа по сравнению с 6,9±1,6 % до лечения (Группа А). При этом количество CD4+CD25+ клеток практически не изменялось, а количество CD4+FOXP3+ снижалось с 5,51±1,26 % до 2,16±0,49 %, Р=0,014). В то же время у 5 пациенток после монотерапии Гц % Трег повышался до 10,5±1,77 % по сравнению с 4,08±1,32 % до лечения (P=0,013) (Группа Б). Однако после II этапа лечения % этих клеток снижался практически до исходного уровня (3,39±2,03 %, Р=0,043). У 3 больных % Трег после I этапа лечения практически не изменялся: 4,02±2,27 % и 3,93±2,16 % соответственно. Наблюдение за больными будет продолжено. По предварительным данным, снижение пропорции Трег наиболее характерно для больных с положительным клиническим эффектом лечения. Однако, учитывая разнообразие эффектов Гц на количество Трег клеток в достаточно ограниченной группе пациентов (15 человек), в дальнейшем необходимо расширить исследование, значительно увеличив число больных.
М.Н. Якунина, Е.М. Трещалина, А А. Шимширт РЕТРОСПЕКТИВНЫЙ анализ ЭФФЕКТИВНОСТИ
АДЪЮВАНТНОЙ ХТ ДОКСОРУБИЦИНОМ СПОНТАННОГО РМЖ СОБАК И КОШЕК
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Введение. Спонтанный РМЖ собак и кошек является одной из наиболее распространенных форм злокачественных новообразований домашних животных.
Определенные результаты при РМЖ кошек и собак дает послеоперационная (адъювантная) ХТ на основе антрациклинов. Опыт применения доксорубицина (Док-со) при лечении РМЖ у домашних животных имеется в КЭТ НИИ КО РОНЦ.
Цель работы - оценка эффективности Доксо при адъювантной ХТ РМЖ собак и кошек - пациентов КЭТ.
Материалы и методы. Ретроспективно проанализировано 100 историй болезни (ИБ) получивших лечение Доксо животных с верифицированным по ТЫМ РМЖ III ст. В исследовании 54 кошки (50 самок и 4 самец) среднего возраста 12,6 [8^16] лет, 13 стерилизованы. Группа контроля (n=18) получили оперативное лечение; группа эксперимента (n=36) получили Доксо после РМЭ. Исследованы данные 46 собак (41 самок и 1 самец) среднего возраста 11,2 [8^15] лет, 10 стерилизованы. Группа контроля (n=15) получили оперативное лечение; группа эксперимента (231 собак) получили Доксо после РМЭ. Доксо 30 мг/м вводили на 3-10 сут после РМ в/в капельно в течение 1 ч с премедикацией преднизолоном, супрастином и церу-калом. Проведено 3 цикла с интервалом 21 день. Оценка эффективности выполнена по выживаемости, рассчитанной по СПЖ, МПЖ и МБП.
Результаты. РМЖ кошек. В группе контроля: МПЖ=4,2 мес, при этом 3 мес пережили 65,4 %, 6 мес -
36.8 %, 1 год - 5,3 % кошек; МБП=4,1 мес, 6 мес пережили 36,8 %, 1 год - 5,3 % кошек. В группе эксперимента: СПЖ=10,4 мес, МПЖ=8,7 мес, при этом 6 мес пережили
67.9 %, 1 год - 41,7 %, а 3 года - 12,6 % кошек; МБП=8,3 мес, при этом не имели метастазов первые 3 мес 90,1 %, 1 год - 33,1 %, а 3 года -4,3 % кошек. РМЖ собак. В группе контроля: МПЖ=7,1 мес, при этом 6 мес пережили 56 %, 1 год - 46,7 %, а 20 мес - 7,8 % собак; МБП=7,1 мес., при этом 6 месяцев прожили 55 % собак, а 1 год - 35 %. В группе эксперимента: СПЖ=11,9 мес; МПЖ=18,6 мес, при этом 6 мес пережили 82,4 %, 1 год - 62,3 %, 20 мес -41,7 %, а 3 года - 23,8 % собак; МБП=12,9 мес, при этом 6 мес не имели признаков метастазирования 83,2 %, 1 г -
56,4 %, а 3 г - 15,9 % собак.
Заключение. Проведенный анализ 100 историй болезни кошек и собак с РМЖ III ст. показал, что 3 цикла адъювантной ХТ Доксо в дозе 30 мг/м2 позволяет достоверно (р<0,05) в 2-2,5 раза увеличить общую и безметастатическую выживаемость после радикальной мастэктомии.
Т. Н. Заботина, О. В. Короткова, А. А. Борунова,
Н. Ю. Очеева, И. И. Бокин, К. И. Жорданиа,
И. В. Паниченко, В.В. Баринов, В. Ю. Сельчук,
В. В. Кузнецов, З. Г. Кадагидзе КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОФЕНОТИПА ЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Задачи исследования. Оценить взаимосвязь показателей иммунофенотипа лимфоцитов периферической крови первичных больных РЯ с клиническим течением заболевания в процессе комбинированного лечения.
Материалы и методы. Включены 35 первичных больных РЯ (ср. возраст 53,9 года). Группа сравнения: 15 практически здоровых женщин 25-58 лет. На 1 этапе выполнялась стандартная операция, экстирпация матки с придатками+удаление большого сальника.
Большинству пациенток после гистологической верификации установлена IIIC стадия заболевания, преобладал серозный вариант РЯ. ХТ по стандартной схеме ТС, 6 курсов. Многоцветное иммунофенотипирова-ние лимфоцитов проводили до хирургического лечения с использованием коммерческих наборов МКА методом ПЦ (BD Biosciences, Beckman Coulter).
Результаты. У 42,9 % первичных больных РЯ содержится исходно нормальное количество CD3+ Т-клеток (1 группа), исходно сниженное у 35,7 % (2 группа) и исходно повышенное у 21,4 % (3 группа). С помощью 4-цветного ПЦА обнаружено: несмотря на исходно нормальное соотношение линейных популяций в 1 группе больных выявлена субпопуляция CD45+CD3+ Т-клеток, коэкспрессирующая маркеры NK-клеток CD16+ и CD56+, составляющая 15,2±2,1. Уровень NKT-клеток в этой группе превышал показатели доноров и показатели больных с низким и высоким CD3 - 6,0±1,4; 5,7±3,6; 8,7±1,1 соответственно. После проведения 6 курсов ХТ оценили клинические результаты лечения по группам. Стабилизация /ЧЭ выявлен у 50 % больных 1 группы (N CD3); в 40 % случаев во 2 группе (|CD3) пациенток и у 50 % больных из 3 группы (|CD3). Прогрессирование/летальный исход наблюдали у 50 % больных с исходно нормальным уровнем CD3 и в 20 % случаев среди больных 2 группы. Ремиссия/ПЭ зафиксированы только во 2 и в 3 группах пациенток - 40 % и 50 % соответственно.
Выводы. Выявленный нами высокий уровень NKT-лимфоцитов у первичных больных РЯ коррелирует с неблагоприятным клиническим течением заболевания в процессе комбинированного лечения.
