CC BY
185
А.А. Куншин, профессор В.И. Циркин, Н.В. Проказова, профессор С.А. Дворянский, доцент С.И. Трухина М-ХОЛИНОМОДУЛИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА СЫВОРОТКИ КРОВИ, ЛИЗОФОСФАТИДИЛХОЛИНА И КУРИНОГО ЯИЧНОГО ЖЕЛТКА В ОПЫТАХ С ГЛАДКИМИ МЫШЦАМИ ЖЕЛУДКА КРЫСЫ
Кировская государственная медицинская академия, Киров Институт экспериментальной кардиологии РКНПК. Москва Вятский государственный гуманитарный университет
Ранее [10] нами выдвинуто предположение о наличии в крови человека системы эндогенных модуляторов хемореактивности прямого действия, избирательно повышающих эффективность активации клеточных рецепторов (эндогенные сенсибилизаторы) или, наоборот, снижающих ее (эндогенные блокаторы). В частности, используя в качестве тест-объекта продольные полоски рога матки небеременных крыс, обладающие высокой М-холинореактивностью, удалось показать [8,11], что сыворотка крови человека при определенном разведении (1:500, 1:100, 1:50) снижает стимулирующее влияние ацетилхолина (АХ), используемого в концентрации 10'6 г/мл. Эти данные позволили предположить наличие в крови эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР). Вопрос о природе и физиологической роли ЭБМХР остается открытым. Наиболее вероятным претендентом на роль основного компонента ЭБМХР является лизофосфати-дилхолин (ЛФХ), который, подобно сыворотке крови, снижает эффекты АХ в отношении сердца лягушки и кролика [6]. Известно [6,16,18,21], что ЛФХ продуцируется многими клетками организма. Он образуется из фосфатидилхолина (ФХ), являющегося основным компонентом фосфолипидов клеток человека и животных. Активируют этот процесс фосфолипаза А2 и лецигин-холестерин-ацилтрансфе-раза. В плазме крови человека и животных ЛФХ находится в свободном (в концентрации 20-80 мкМ) и связанном с альбумином и другими белками состоянии; в целом же содержание ЛФХ до-стигает 20% от суммарных фосфолипидов крови [6]. Еще в 70-80-годы в лаборатории Турпаева Т.М. в опытах на сердце лягушки и кролика при изучении способности сыворотки крови блокировать отрицательный инотропный эффект ацетилхолина (АХ) было обнаружено, что ЛФХ (но не фосфатидилхолин как его предшественник) в относительно низких концентрациях (10 мкМ) усиливает этот эффект АХ, т.е. повышает М-холинореактивность миокарда, а в высоких (100 мкМ) -подобно сыворотке крови, снижает ее [6].
Полагая, что эндогенные модуляторы хемореактивности, в том числе ЭБМХР участвуют в
регуляции деятельности всех внутренних органов, клетки которых имеют М-холинорецепторы, одна из задач нашего исследования состояла в оценке способности сыворотки крови человека проявлять М-холиноблокирующую активность в опытах с гладкими мышцами желудка крысы, физиологические свойства которых были описаны ранее [13,20]. Второй задачей исследования было изучить способность ЛФХ, а также его предшественника ФХ и куриного яичного желтка (как источника неферментативного образования ЛФХ) модулировать эффективность активации ацетилхо-лином М-холинорецепторов гладких мышц желудка крысы.
Методика исследования
Опыты проведены на 307 полосках (длиной 5-8 мм и шириной 2-3 мм), иссеченных продольно или циркулярно из фундуса, корпуса или антрума желудка крыс (п=148). В опытах использовали половозрелых самок (без учета фазы эстрального цикла). Их забой осуществляли в соответствие с “Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных” (приказ М3 СССР от 12.08.77). Регистрацию сократительной активности (СА) полосок желудка проводили по методике Циркина В.И. и соавт. [9] при 38°С, скорости перфузии раствора Кребса, равной 0,7 мл/мин, пассивной аэрации рабочей камеры и исходной нагрузке для полосок в пределах 500мг (4,9 мН), используя 6-канальный «Миоцшчнраф». Прибор собран на базе механотрона типа 6МХ1С (Россия), самопишущего прибора Н-3020 (Россия), а также шприцевого дозатора и термостата оригинальных конструкций. Во всех опытах использовали раствор Кребса (рН=7,4), содержащий (мМ): КаС1 - 136, КС1 -4,7, СаЦ-2,52, MgCl2-1,2, КН2Р04-0,6, ЫаНСО,-4,7,
СДА-11-
При оценке М-холиномодулирующих свойств сыворотки крови применяли следующую последовательность этапов: раствор Кребса -» АХ (10-6 г/мл) •-> АХ + исследуемое разведение сыворотки крови -» АХ -» раствор Кребса. При исследовании влияния ЛФХ, ФХ и ЯЖ применяли видоизмененную схему опытов: раствор Кребса -* АХ (10_6 г/мл) -» АХ + исследуемое вещество -» АХ -* раствор Кребса. В работе применяли ацетилхолина хлорид (АХ, Россия;
10'9- 10'5г/мл); атропина сульфат (Россия, 10'10- 10'7г/ мл), лизофосфатидилхолин (ЛФХ, Украина, 10'8'Ю'4 г/ мл), фосфатидилхолин (ФХ, Украина, 10 7-10 4 г/мл) и куриный яичный желток, который разводили дистиллированной водой (1:1), а затем раствором Кребса в 50, 100, 500 и 1000 раз. Была исследована сыворотка пуповинной крови 113 новорожденных. Пуповинную кровь, остающуюся после благоприятного рождения плода, получали (по 7-10 мл) в Кировском областном клиническом перинатальном центре. Сыворотку получали путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 15 минут. Ее разводили раствором Кребса в 50,100,500 и 1000 раз и исследовали в течение 6-24 часов от момента ее забора. Результаты тестирований полосок оценивали по механограммам. Изменение тонической активности полосок выражали в мН или в процентах к 1-му тестированию ацетилхолином. Результаты исследования подвергнуты статистической обработке с использованием параметрических методов; различия показателей оценивали по критериям Стьюдента или Тьюки, считая их достоверными при р<0,05 [1].
Результаты исследования и обсуждение
Показано, что продольные и циркулярные полоски всех трех регионов желудка в условиях их перфузии раствором Кребса проявляют низкий базальный тонус, на фоне которого (это более характерно для полосок корпуса и антрума) могут генерироваться низкоамплитудные фазные сокращения. Это согласуется с данными литературы, полученными в опытах с полосками из фундуса и антрума желудка крысы [13,14,20]. На циркулярных и продольных полосках фундуса, корпуса и антрума желудка АХ (10'8-10'5 г/мл) дозозависимо и обратимо повышал базальный тонус. На его фоне могли наблюдаться низкоамплитудные фазные сокращения, что особенно было характерно для полосок корпуса и антрума. Величина тонуса полосок при воздействии АХ в концентрациях 10'8,10'7,10-6 и 10-5 г/мл варьировала соответственно в пределах 0,36-0,88 мН, 0,98-1,87 мН,
1,79-4,81 мН и 2,77- 6,81 мН (табл. 1). Например, для циркулярных полосок фундуса она составила соответственно 0,3 6+0,23 мН (п=4), 1,28 ±0,18 мН (п=8), 3,06 ±0,36 мН (п=8) и 4,41±1,05 мН (п=8).
Таблица 1
Тонус (мН), вызываемый АХ (10~5г/мл), и константа диссоциации для АХ (нг/мл) у продольных и циркулярных полосок желудка крысы
Регионы желудка Продольные полоски Циркулярные полоски
Тонус, мН Кд, нг/мл Тонус, мН Кд, нг/мл
п М+т п М±ш п М±ш п М+т
Фундус 6 6,81+1,70 24 710+120 4 4,41+1,05 24 635+130
Корпус 5 4,01±0,78 20 240±160ф 6 2,77+0,24 24 502+140
Антрум 6 4,65±0,74 24 615±130 5 4,01+0,96 20 915+140к
Примечание:ФК- различие с соответствующими полосками из фундуса (ф) и корпуса (к) достоверно (р>0,05) по критерию Тьюки; п- число полосок
Аналогичные данные получены другими авторами при работе с полосками желудка крысы [13,14,20]. Атропин (10'10, 10'9, 10'\ 10'7 г/мл) дозозависимо снижал реакцию полосок на АХ(10'6 г/ мл). Это согласуется с данными [34] и свидетельствует о том, что эффект АХ обусловлен активацией М-ХР, которые с учетом данных литературы [15,19], вероятнее всего, относятся к подтипу М2-ХР и М3-ХР. Константа диссоциации (Кд) дня АХ, т.е. концентрация, при которой эффект достигал 50% от максимального, у циркулярных и продольных полосок фуидуса, корпуса и антрума варьировала от 240 до 915 нг/мл (табл. 1). Наиболее высокая М-холинореактивность была у полосок корпуса (Кд - 240 и 502 нг/мл), средняя - у полосок фундуса (Кд- 635 и 710 нг/мл), а самая низкая - у полосок антрума (Кд- 615 и 915 нг/мл). Во всех регионах циркулярные полоски обладают такой же М-холинореактивностью, как и продольные, что согласуется с данными Boev К. etal. [13], полученными в опытах с полосками фундуса желудка крысы.
Таким образом, все полоски желудка, независимо от их локализации (фундус, корпус, антрум) и ориентации (слои) обладали относительно высокой М-холинореактивностью. В целом, эти результаты подтверждают известные данные литературы о том, что в условиях организма холинергические воздействия повышают САмиоцитов желудка [4]. В соответствии с концепцией о метасимпатической системе Ноздрачева А. Д. [4], можно полагать, что эти воздействия на ГМК желудка оказывают непосредственно постганглионар-ные холинергические парасимпатические нейроны, а также холинергические нейроны энтеральной метасимпатической системы. С учетом данных литературы [8], полагаем, что стимулирующее действие АХ обусловлено активацией Gp-белка и фосфолипазы С, в результате чего из фосфатиди-линозитдифосфата образуются два посредника 1) инозитолтрифосфат, благодаря которому возрастает поток ионов Са внутрь миоцитов; 2) диацилглицерин, за счет которого снижается активность Са-насоса.
Установлено, что в опытах с продольными и циркулярными полосками фундуса, корпуса и антрума желуцка крысы 1000-, 500-, 100- и 50-кратные разведения сыворотки пуповинной крови снижали тонотропный эффект АХ (10'6 г/мл), т.е. проявляли М-холиноблокирующую активность (табл. 2).
Ее степень повышалась с уменьшением кратности разведения. Так, в опытах с циркулярными полосками фундуса (табл. 2) АХ-вызванный тонус снижался соответственно до 64,69%, 60,85%, 19,38% и 5,41% от его первоначального. На полосках из разных регионов и слоев желудка АХ-вызванный тонус под влиянием разведения 1:50 снижался до 5,41% - 39,06% от первоначального, что сопоставимо с М-холиноблоки-рующим эффектом атропина, используемого в концентрациях 10‘8-10'7 г/мл.
Показано (табл. 2), что на продольных и циркулярных полосках фундуса сыворотка пуповинной крови
достоверно (р<0,05, по критерию Тьюки) проявляла М-холиноблокирующую активность в разведениях 1:1000, 1:500,1:100 и 1:50, на продольных полосках корпуса и антрума - в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50, а на циркулярных полосках этих регионов - в разведениях 1:100 и 1:50. Это означает, что чувствительность полосок желудка к сыворотке крови как источнику ЭБМХР зависит от их локализации - она максимальна у продольных и циркулярных полосок фундуса, обладающих, как отмечено выше, средним уровнем М-холинореактивности, и минимальна - у циркулярных полосок корпуса и антрума, имеющих соответственно высокую и низкую М-холинореактивность. Эти данные позволяют считать, что чувствительность к ЭБМХР одной и той же популяции клеток-мишеней может зависеть от наличия определенного подтипа М-ХР. Косвенно об этом свидетельствуют данные Напаек С, Pfeiffer А. [15], согласно которым в антруме свиньи преобладают М3-ХР, а в корпусе М,-ХР.
Таким образом, сыворотки крови новорожденных проявляет М-холиноблокирующую активность по отношению к гладким мышцам желудка. Подобную активность сыворотка крови проявляет в отношении гладких мышц матки крысы [8,11], трахеи коровы [8], а также сердца лягушки и кролика [6,12]. Скорее всего, эта активность обусловлена наличием в сыворотке крови ЭБМХР. Это означает, что 1) гладкие мышцы желудка крысы, независимо от их локализации, восприимчивы к действию ЭБМХР, т.е. их активность может регулироваться под влиянием этого фактора; 2) эти мышцы можно использовать как тест-объект для идентификации ЭБМХР и для оценки его содержания в жидких средах организма человека и животных.
При исследовании влияния ЛФХ на М-холинореактивность гладких мышц желудка установлено (рис. Б, табл. 3), что в концентрациях 10'8и 10'7 г/мл он не влиял на тонотропный эффект АХ (10 б г/мл), в концентрации 10‘6 г/мл ЛФХ проявлял М-холиносенсибилизирующую активность, т.е. обратимо усиливал этот эффект АХ, а в концентрациях 10’5 г/мл и 10’4 г/мл обратимо снижал АХ-вызванный тонус.
Это снижение особенно было выражено не в момент воздействия ЛФХ, а после его удаления из среды. Таким образом, в концентрациях 10'5 и 10 4 г/мл ЛФХ проявлял М-холиноблокирующую активность, для которой, однако, характерен относительно большой (10-15 минут) латентный период.
В целом результаты исследования позволяют заключить, что в относительно низких концентрациях (10'6 г/мл) ЛФХ может повышать М-холинореактивность клеток, т.е. выполнять функцию эндогенного сенсибилизатора М-ХР, или ЭСМХР, о наличии которого в сыворотке крови и ликворе человека сообщено в наших работах [7,8], а в высоких концентрациях (10 5 и, особенно, 10-4 г/мл), ЛФХ может снижать М-холинореактивность клеток, т.е. выполнять функцию ЭБМХР. Предположение о двойственной функции ЛФХ раннее уже было высказано нами [7,8].
Таблица 2
Величина тонуса полосок желудка крысы, вызванного ацетилхолином (10~6 г/мл), при действии четырех разведений сыворотки пуповинной крови новорожденных (в % от первоначальной)________________________________
Полоски сыворотка 1:1000 сыворотка 1:500 сыворотка 1:100 сыворотка 1:50
п М±т п М±т п М±т п М±ш
Фундус продольные 10 71.30*9,49* 11 61,73±7,84* 10 38,30±7,бГ 11 18,09±5,66*
циркулярные 13 64,69±4,83* 13 60,85±3,42* 13 19,38+6,65* 12 5,41±3,09*
Корпус продольные 10 94,50±7,83 13 88,50±3,70* 13 58,38+6,32* И 33,45±8,38*
циркулярные 9 100,80±12,11 12 92,33±8,31 11 52,27±4,31* 10 39,06±8,06*
Антрум 1 . продольные 13 90,23± 10,43 14 66,38±9,49* 14 20,50±6,63* 12 4,58±3,10*
циркулярные 10 114,0±8,04 10 86,40±5,98 11 51,0±8,37*# 10 23,20±4,43**
Примечание: * - различие с первоначальной величиной тонуса достоверно (р<0,05) по критерию Тьюки.
# - различие с продольными полосками достоверно (р<0,05) по критерию Стьюдента.
Таблица 3
Величина тонуса циркулярных полосок фундуса желудка крысы, вызванного ацетилхолином в концентрации 10'6 г/мл (в % от первоначальной) при действии лизофосфатидилхолина (ЛФХ), фосфатидшхолина (ФХ) и куриного яичного желтка
Вещества Концентрации ЛФХ и ФХ (г/мл)
10'® 10*' 10'6 Ю'5 10'4
ЛФХ 112,58±10,28 (п=6) 108,14±9,92 (п=7) 122,80±5,83* (п= 10) 92,07±8,46 (п= 13) 77,90±10,14’ Сп= 11)
ФХ 96,62+2,92 (п= 8) 113,11±5,48* (п=8) 110,88±7,24 (п=9) 96,66±9,17 (п= 8)
Яичный желток Разведения ЯЖ
1:1000 (п= 9) 1:500 (п= 9) 1:100 (п= 10) 1:50(п=10) -
97,30±7,05 67,89±4,96* 45,50±8,94' 17,70±5,71* -
Примечание: * - различие с первоначальной величиной АХ-вызванного тонуса достоверно (р0,05) по
критерию Тьюки.«-»- исследования не проводились.
Фосфатидилхолин в концентрациях 10'7, 10-5 и 10“* г/мл не проявлял М-холиномодулирующую активность, а в концентрации 10-6 г/мл усиливал положительный тонотропный эффект АХ (10 6 г/мл), т.е. проявлял М-холиносенсибилизирующую активность (рис.В, табл. 3). Это означает, что ФХ в низких концентрациях (10"6 г/мл), также как и ЛФХ, может быть компонентом ЭСМХР.
Куриный яичный желток (ЯЖ) в разведении 1:1 ООО не влиял на АХ-вызванный тонус циркулярных полосок фундуса желудка, а в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50 дозозависимо и обратимо снижал его (рис. А, табл. 3), т.е. подобно ЛФХ, проявлял М-холиноблокирующую активность. Эти результаты коррелируют с данными, полученными в нашей лаборатории в опытах с продольными полосками рога матки крысы [3,8], согласно которым водный раствор ЯЖ в разведениях 1:500, 1:100 и 1:50 дозозависимо снижал стимулирующий эффект АХ. Наиболее вероятно, что М-холиноблокирующая активность ЯЖ, которая наблюдается в отношении и миоцитов матки, и
миоцитов желудка, обусловлена наличием в нем ЛФХ. Как известно [6], ЯЖ богат фосфатидилхолином, из которого в результате неферментативного гидролиза образуется ЛФХ. Таким образом, результаты экспериментов с ЯЖ подтверждают наше предположение о М-холиноблокирующей активности ЛФХ и том, что его, действительно, можно рассматривать в качестве компонента ЭБМХР. С другой стороны, результаты опытов с ЯЖ указывают на то, что характер питания человека может влиять на интенсивность проявления М-холиномодулирующей активности крови.
В целом результаты наших исследований согласуются с данными литературы [6] о способности ЛФХ проявлять М-холиноблокирующую активность. В то же время, имеется основание считать, что эта способность ЛФХ неспецифична. Действительно, в литературе отмечено, что ЛФХ снижает эффективность воздействия на клетки-мишени не только АХ, но и других БАВ. В частности, ЛФХ снижает эффективность таких эндотелийзависимых вазодилататров как тромбин
и серотонин [17], а также уменьшает положительное инотропное влияние адреналина на миокард лягушки и крысы [5] и его вазоконстрикторное влияние на почечную артерии коровы [2]. Общеизвестно [8], что рецепторы этих веществ, как и М-холинорецепторы относятся к семейству рецепторов, сопряженных с О-белком. Все это позволяет предположить, что механизм блокирующего (в том числе и М-холиноблоки-рующего) действия ЛФХ связан с разобщением под его влиянием передачи сигнала от рецепторов к С-белку. Очевидно, что такая уникальная способность ЛФХ «изолировать» клетки от внешней сигнализации демонстрирует огромную роль, которую эта молекула может играть в норме и при патологии, тем более, что продукция ЛФХ, как известно [6,16,18,21], может существенно изменяться под влиянием многих
%
100
80
60
40
А
*<
!
]
факторов. О важной роли ЛФХ свидетельствует и то обстоятельство, что помимо способности модифицировать трансмембранную передачу сигнала через рецепторы, сопряженные с О-белком, ЛФХ, согласно данным литературы [18], выполняет и функцию вторичного посредника, способствуя фосфорилиро-ванию р38, транскрипционных факторов (ОЯЕВ и АТР-1) и протеиновой тирозинкиназы. Благодаря этому, ЛФХ за счет взаимодействия со специфическими (орфановыми ?) рецепторами активирует и атерогенез [16,18]. Полагаем, что дальнейшее изучение феноменологии и природы хемомодулирующих свойств ЛФХ может принести чрезвычайно важные факты, существенно расширяющие возможности клинической медицины.
1:10
1:500
1:100
1:50
%
10-7 10‘6 10'5 кг4
Рис. Величина тонуса (М±т) циркулярных полосок фундуса желудка крысы, в % к 1-му тестированию ацеттхолином (1 (У6г/мл), до (1-е тестирование, белые столбики), на фоне (серые столбики) и после (темные столбики) действия куриного яичного желтка в разведениях 1:50, 1:100, 1:500 и 1:10і (панель А), лизофосфатидипхолина (10^-10'4 г/мл, панель Б) и фосфатидилхолина (10~'~10'4, панель В).
Примечание: * - различия с 1-м тестированием достоверны, (р<0,05); * — различия- со 2-м тестированием достоверны, (р<0,05) по критерию Ньюмена-Кейлса.
Список литературы:
1. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1999. - 459 с
2. Кашин Р.Ю., Циркин В.И., Проказова Н.В. Влияние гистидина на альфа-адреноблокирующий эффект лизофосфатидилхолина в опытах с гладкими мышцами почечной артерии коровы // Успехи современного естествознания. - 2006. - № 11. - С. 48-49.
3. Кононова Т.Н. Роль эндогенных I-адрено и М-холиномодуляторов в регуляции деятельности систем организма человека. Дис... .к. б. н. Киров, 2004. -173 с.
4. Ноздрачев А.Д. (ред.) Начала физиологии. СПб.: Изд-во «Лань». 2001. -1088 с.
5. ПенкинаЮ.А., Циркин В.И., Проказова Н.В. Влияние лизофосфатидилхолина на проявление положительного инотропного эффекта адреналина в опытах с изолированным миокардом крысы // Успехи современного естествознания. -2006. - № 12. - С. 70-71.
6. Проказова Н.В., Звездина Н. Д., Суслова И.В., Коротаева А.А., Турпаев Т.М. Влияние лизофосфатидилхолина на чувствительность сердца к ацетилхолину и параметры связывания хинуклидинилбензилата с мембранами миокарда // Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова. - 1998. - Т. 84, №10.-С. 969-978.
7. Сизова Е.Н., Циркин В.И., Трухин А.Н. Наличие в крови и ликворе человека эндогенных модуляторов М-холинорецепторов // Вестник Поморского университета. Серия «Физиологические и психо-лого-педагогические науки». -2004. - Т. 6, №2. - С. 22-31.
8. Сизова Е.Н., Циркин В.И. Физиологическая характеристика эндогенных модуляторов I-адрено- и М-холинореакгивносги. Киров: Изд-во ВСЭИ, 2006. -183 с.
9. Циркин В.И., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д. с соавт. Адреномодулирующие эффекты крови, ликвора, мочи, слюны и околоплодных вод человека / / Докл. РАН.-1997.-Т. 352, № 1.-С. 124-126.
10. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сизова Е.Н. с соавт. Система эндогенной модуляции, регулирующая деятельность периферических автономных нервных структур //Докл. РАН. -2002. -Т. 383, № 5. -С. 698-701.
11. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сизова Е.Н. с соавт. Изменение содержания в крови эндогенных модуляторов I-адрено- и М-холинореактивности под влиянием физических тренировок у лиц, перенесших инфаркт миокарда // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2003. - Т. 136, №7. - С. 18-22.
12. Циркин В.И., Трухин А.Н., Сизова Е.Н. с соавт. Изменение М-холинореактивности миокарда лягушки под влиянием сыворотки пуповинной крови человека // Российиский кардиологический журнал. - 2004. №2. -С. 64-69.
13. Boev К., Kortezova N., Papasova М. Coordination between the longitudinal and circular layers of the stomach during the excitator-contractile process // Acta Physiol. Pharmacol. Bulg.- 1976.-Vol.2,№3.-P. 15-22.
14. Golenhofen K., WegnerH. Spike-free activation mechanism in smooth muscle of guinea-pig stomach // PflugersArch.-1975.- Vol. 354.-P. 29-37.
15. Hanack C., Pfeiffer A. Upper gastrointestinal porcine smooth muscle expresses M2- and M3-receptors / / Digestion. -1990. - Vol. 45, № 4. - P. 196-201.
16. Kabarowski J., Zhu K., Le L., Witte O., Xu Y. Lysophosphatidylcholine as ligand for immunoregulatory receptor G2A// Science. -2001. - Vol.293, № 5530. -P. 618-619.
17. Mivva Y, Hirata K., Kawashima S., Akita H., Yokoyama M. Lysophosphatidylcholine inhibits receptor-mediated Ca2+ mobilization in intact endothelial cells of rabbit aorta //Arteriosclerosis, Thrombosis and Vase. Biol. -1997.-Vol. 17, №8.-P. 1561-1567.
18. Rikitake Y., Hirata K., Kawashima S. et al. Signaling mechanism underlying COX-2 induction by lysophosphatidylcholine // Biochem.boiphys. res. commun.-2001.-Vol.281,№5.-P.1291-1297.
19. Wang B., Cheng F. Subtypes of muscarinic receptors and functions of intestinal smooth muscles // Zhongguo bingli shengli zazhi. - 2001. - Vol. 17, № 11. - P 1093-1096.
20. Xue L., Fukuta H., Yamamoto Y., Suzui H. Properties of junction potentials in gastric smooth muscle of the rat // Jap. J. Physiol. -1996.—Vol. 46, № 2. - P. 123-130.
21. Yamakawa T., Tanaka S., Yamakawa Y., et al. Lysophosphatidylcholine activates extracellular signal-regulated kinases 1/2 through reactive oxygen species in rat vascular smooth muscle cells //Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vase. Biol.-2002.-Vol.22,№5.-P.752-758.
Summaiy
M- CHOLINOMODULATORY
PROPERTIES OF BLOOD SERUM,
LYSOPHOSPHATHYDILCHOLINE AND THE CHICKEN EGG YOLK IN EXPERIMENTS WITH RAT STOMACH SMOOTH MUSCLES A.A.Kunshin, V.l.Tsirkin, N.V.Prokazova, SA.Dvorjanski, S.I.Truhina
The umbilical blood serum shows dose -dependent M-cholonoblockating activity in dilutions 1:1000,1:500, 1:100 and 1:50 in experiments with rat stomach smooth muscles. Lysophosphathydilcholine (LPCh) in concentration of 10‘8 and 10'7 g/ml does not influence the tonus induced by acethylcholine (Ach, 10'6 g/ml), in concentration of 106 g/ml (as well as phosphathydilcholine, 10 6 g/ml) raise it and in concentration of 10'5-10'4 g/ml (as well as the chicken egg yolk in dilutions 1:500,1:100 and 1:50) reduces it. It specifies ability of LPCh to modulate efficiency M-cholinergic influences and allows to consider it as the basic component of endogenous sensitizer of M-cholinoreceptors (ESMChR) and endogenous blockator of M-cholinoreceptors (EBMChR) accordingly at its presence in rather low (10 6 g/ml) and high (10'5-10-4 g/ml) concentration.
