CC BY
26
ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВОЗДЕЙСТВИИ МАЛЫХ ДОЗ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ
Младшие научные сотрудники И. А. Грибова, Е. А. Соловьева
Из клинико-диагностической лаборатории и радиологического отделения Института гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР
В настоящее время в связи с большими успехами в области изучения обмена нуклеиновых кислот люминесцентный метод исследования нашел широкое применение в гистологии и гематологии. С помощью этого метода удалось обнаружить ранние изменения в состоянии нуклео-протеидов клеток костного мозга и периферической крови при острой лучевой болезни в эксперименте (М. Н. Мейсель и В. А. Сондак, 1955, 1956; А. Л. Поздняков, 1959; И. Г. Красных, 1959; М. Я. Ходас, 1959).
В последние годы появились сообщения о применении люминесцентного метода для диагностики хронической лучевой болезни (О. С. Сер-гель, А. А. Клименко, 1957; О. С. Сергель, Г. А. Зубовский, Л. А. Ива-ницкая, 1959; Д. Д. Кафафова, 1959). Отмечены изменения люминесцентной картины крови при введении в организм индикаторных доз радиоактивных изотопов.
Метод люминесцентной микроскопии мы применяли в целях выяснения его пригодности для ранней диагностики лучевого поражения при хроническом воздействии малых доз ионизирующей радиации на организм человека. Работа проводилась с отечественным флюорохро-мом — акридин-оранжевый.
В литературе имеются указания на влияние рН среды, степени разведения краски и времени контакта ее с кровью на характер свечения клеток (А. В. Гуткина, 1954; М. Я. Ходас, 1959). Предварительно проведенные исследования с разведением акридин-оранжевого флюорохрома 1:7000 и 1:10 000 показали значительные изменения характера свечения ядер лейкоцитов у практически здоровых лиц. Поэтому было подобрано такое разведение, при котором исключалось токсическое действие красителя на лейкоциты (1:15 000). Кровь смешивали с акридин-оранжевым в меланжере для лейкоцитов. Мы придерживались также строго определенного рН среды (6,6) и времени контакта флюорохрома с кровью (30—40 минут). Исследование проводили при увеличении микроскопа в 80 и 400 раз. В качестве источника ультрафиолетовых лучей использовали осветитель ОН-19 с ртутно-кварцевой лампой высокого давления СВД-120.
По данным М. Н. Мейселя, в норме ядра клеток после обработки акридин-оранжевым светятся ярко-зеленым, протоплазма — темно-зеленым, а гранулы в протоплазме нейтрофилов — оранжево-красным светом. Зрелые эритроциты не люминесцируют, поэтому фон препарата темный.
Предварительное изучение крови у 50 здоровых людей, никогда не имевших контакта с ионизирующим излучением, показало, что нормальная люминесцентная картина крови включает 96—100% клеток с зеленым свечением ядер. В единичные случаях ядра 2—4% клеток гран^лоцитов имели желтое свечение. Исходя из этого, мы считали признаком изменения люминесцентной картины крови появление желтого и оранжевого свечения ядра в 6э/о клеток и более.
В 1957—1959 гг. люминесцентное исследование крови было проведено у 556 человек, подвергавшихся хроническому воздействию малых доз ионизирующей радиации. Анализ производился как в условиях клиники, так и во время периодических медицинских осмотров на предприятиях.
Подавляющее большинство обследованных в процессе работы имело контакт с ионизирующим излучением, дозы которого не превышали предельно допустимого уровня. Это были работники научно-исследовательских учреждений, имевшие дело с различными радиоактивными изотопами (100 человек), и лица, работавшие на ускорителях заряженных частиц (400 человек).
Условия труда небольшой группы обследованных (56 человек) не соответствовали гигиеническим нормам. Так, у 38 работников рентгеновских кабинетов, подвергавшихся преимущественно локальному облучению, дозы превышали допустимые в 2—3 раза; 18 человек имели контакт со светосоставом постоянного действия, причем дозы радона в воздухе превышали допустимые на 1—3 порядка, а дозы внешнего у-облучения составляли 1—2 предельно допустимые дозы за рабочий день.
При люминесцентном исследовании крови у 120 человек были отмечены изменения характера свечения лейкоцитов, выражавшиеся в появлении желтого и оранжевого свечения ядер. Степень изменений была небольшая. Количество желтых и оранжевых клеток в большинстве случаев составляло 6—20% и только у отдельных лиц достигало 30%.
Необходимо отметить, что изменения свечения наблюдались только в нейтрофильных лейкоцитах; нарушений характера люминесценции лимфоцитов и эритроцитов отмечено не было.
При анализе данных удалось выявить определенную зависимость частоты и глубины изменений люминесценции клеток крови от дозы облучения. Так, у лиц, работавших без превышения допустимых доз облучения (1-я группа), нарушения люминесценции были отмечены у 90 человек из 500 (18%), в то время как у работавших в неблагоприятных условиях (2-я группа) характер свечения клеток оказался измененным у 30 из 56 (58,5%).
Зависимости изменений люминесценции от стажа работы в условиях облучения отмечено не было. Несколько больший процент случаев с нарушенным свечением ядер клеток в группе лиц со стажем работы до 5 лет не является статистически достоверным.
Большой интерес представляет вопрос о чувствительности метода люминесцентной микроскопии по сравнению с обычным морфологическим анализом периферической крови при хроническом воздействии малых доз радиации. В таблице приведены данные, касающиеся частоты изменений таких показателей периферической крови, как количество лейкоцитов, тромбоцитов, а также люминесценции клеток у обследованных лиц. Из таблицы видно, что нарушение свечения клеток встречалось примерно в таком проценте случаев, как и количественные изменения некоторых показателей периферической крови. При сопоставлении изменений люминесценции с количеством лейкоцитов установлено, что и при лейкопении, и при нормальном количестве лейкоцитов частота сдвигов в характере свечения ядер оставалась одинаковой.
Частота изменений морфологического состава крови и люминесцентной картины у лиц,
подвергающихся хроническому воздействию радиации
Характер изменений картины крови 1-я группа (500 человек) « 2-я группа (56 человек)
Лейкопения (ниже 5 000) ...... Тромбоиитопения (190—150 тыс.) . . Ретикулоцитоз (12—20%)..... 90 человек (18%) 78 » (15,6%) 99 » (19,8%) 98 » (19,6%) 30 человек (53,5%) 28 » (50%) 18 » (32,1%) 21 » (37,5%)
На основании полученных данных у нас в отличие от некоторых авторов (О. С. Сергель, А. А. Клименко) не сложилось впечатления о чрезвычайной чувствительности метода люминесцентной микроскопии для обнаружения ранних признаков хронического лучевого поражения. Изменения люминесценции в значительном проценте случаев (53,5) были отмечены у лиц, работавших в неблагоприятных санитарно-гигиенических условиях, у которых часто обнаруживались другие признаки лучевого воздействия — изменения периферической крови, нарушения со стороны нервной системы и внутренних органов.
В тех случаях, когда дозы не превышали допустимых уровней и клинически не удавалось отметить никаких отклонений или выявлялись лишь незначительные функциональные сдвиги, изменения люминесцентной картины крови наблюдались у небольшого числа обследованных (18%).
Для выяснения специфичности изменений люминесценции было проведено наблюдение над 30 больными с хронической бензольной интоксикацией легкой и средней степени. Уряда больных (12 человек — 40°/о) были отмечены изменения свечения ядер, нейтрофилов, аналогичные наблюдавшимся при воздействии ионизирующей радиации. Таким образом, изменения люминесценции клеток крови нельзя считать характерными только для лучевого поражения; они могут встречаться и при других воздействиях.
Выводы
1. У лиц, подвергающихся хроническому воздействию малых доз ионизирующей радиации, в ряде случаев наблюдается изменение люминесцентной картины крови, что выражается в появлении клеток с желтым и оранжевым свечением ядер.
2. Отмечена зависимость между частотой изменения свечения клеток и дозой облучения: у лиц, работавших в условиях превышения допустимых уровней, изменения люминесценции встречаются чаще, чем у лиц, условия труда которых соответствуют санитарно-гигиеническим нормам. -
3. Люминесцентная микроскопия может служить вспомогательным методом ранней диагностики хронических лучевых поражений наряду с другими морфологическими методами исследования периферической крови.
ЛИТЕРАТУРА
Г утки на А. В. Люми'несцентно-цитологическое исследование слизистой оболочки глотки и гортани в норме и при некоторых патологических процессах. Дисс. канд. М., 1954. — К а ф а нов а Д. Д. Пробл. гематол., 1959, № 8, стр. 21. —Красных И. Г. Мед. радиол., 1959, № 3, стр. 49. — Мей сель М. Н., Сондак В. А. Биофизика, 1956,' в. 3, стр. 262. — О н и же Докл. АН СССР, 1955, т. 105, № 6, стр. 1221. — Поздняков А. Д. Арх. пат., 1959, в. 6, стр. 39. — Сергель О. С., Клименко А. А. Вестн. рентгенол., 1957, № 5, стр. 76.— Сергель О. С., Зубовский Г. А. и Иваницкая Л. А. Там же, 1959, № 1, стр. 59.—Ход ас М. Я Мед. радиол., 1959, № 3, стр. 44.
Поступила 22/11 1962 г.
Ъ Я Ъ
