CC BY
13
характером морфофункциональных нарушений компонентов гепаторенальной системы у кошек, больных хронической почечной недостаточностью, при этом ведущим патогенетическим механизмом расстройства метаболических процессов выступает развитие оксидативного стресса вследствие активации процессов перекисного окисления липи-дов (ALT - 83,22±4,10 U/l и 85,80±5,04 U/l; AST - 33,14±2,96 U/l и 31,23±3,03 U/l; ALP -34,24±2,30 U/l и 38,61±2,97 U/l).
Заключение
Как показали проведенные исследования, диагностический алгоритм при хронической почечной недостаточности у кошек должен осуществляться с учетом коррелятивных связей между характером морфофункциональ-ных нарушений гепаторенальной системы и степенью расстройств редокс-гомеостаза, опираясь на результаты биохимических исследований крови, данные сонографической картины органов-мишеней. Только такая сочетанность диагностических критериев позволит получить более целостное представление не только о характере функциональных расстройств органов-мишеней, но и о степени метаболических изменений.
Список литературы
1. Вахрушева Т. И. Патоморфологические изменения почек у кошек / Т. И. Вахрушева // Вестник Крас-ГАУ 2019. № 11. С. 68-77.
2. Виноградова О. Ю. Методические положения по коррекции гомеостаза при хронической почечной недостаточности у кошек: учебное пособие / О. Ю. Виноградова, В. В. Анников, И. Г. Корчагина. Саратов, 2012. 15 с.
3. Войтова Л. Ю. Коррекция гиперфосфатемии у кошек с хронической почечной недостаточностью / Л. Ю. Войтова, Ю. А. Ватников // Российский ветеринарный журнал серия: Мелкие домашние и дикие животные. 2013. № 4. С. 14-16.
4. Гертман А. М. Болезни почек и органов моче-выделительной системы животных: учебное пособие / А. М. Гертман, Т. С. Самсонова. 2-е изд., испр. СПб.: Издательство «Лань», 2016. 388 с.
5. Инатуллаева Л. Б. Структурные проявления хронической почечной недостаточности у кошек на третьей стадии болезни по классификации Iris / Л. Б. Ина-туллаева, Н. И. Трошина // РБЖ. 2017. № 3. С. 22-24.
6. Кайдановская Н. А. Морфосонографические корреляты почек у кошек в норме и при патологии: диссертация / Н. А. Кайдановская. Москва, 2009. 20 с.
7. Колмыкова О. В. Морфологические основы хронической почечной недостаточности у кошек / О. В. Колмыкова, Е. П. Копенкин // Ветеринария. 2008. № 9. С. 58-59.
8. Соболев В. Е. Нефрология и урология домашней кошки / В. Е. Соболев // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. 2011. № 1. С. 35-40.
DOI 10.24412/2074-5036-2021-4-27-33 УДК 619;636.5.033;543.426;612.335.5
Ключевые слова: люминесцентная микроскопия, цыплята-бройлеры, эймериоз, вакцина, крипты, ворсины, слизистая оболочка, двенадцатиперстная кишка, тощая кишка
Key words: fluorescence microscopy, broiler chickens, eimeriosis, vaccine, crypts, villi, mucous membrane, duodenum, jejunum
*Фролова О. А., 2Афонюшкин В. Н.
ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ И ТОЩИХ КИШОК ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ ЭЙМЕРИОЗА
LUMINESCENT MICROSCOPY OF THE MUCOSA OF THE DUELOUS AND POISONAL INTESTINES OF BROILER CHICKENS AFTER VACCINATION AGAINST EIMERIOSIS
'ФГОБУ ВО «Красноярский ГАУ», 660049, Россия, г. Красноярск, пр. Мира, 90
Krasnoyarsk State Agrarian University, 660049, Russia, Krasnoyarsk, Prospect Mira, 90 2СФНЦА РАН, 630501, Новосибирская область, Новосибирский район, р. п. Краснообск
Siberian Federal Scientific Centre of Agro-Bio Technologies of the Russian Academy of Sciences, 630501, Novosibirsk region, Novosibirsk district, p. settlement Krasnoobsk
Фролова Ольга Анатольевна, аспирант кафедры анатомии, патологической анатомии и хирургии.
E-mail: kristal_o@bk.ru
Frolova Olga Anatoljevna, Post-Graduate Student Chair of Anatomy, Pathological Anatomy and Surgery.
E-mail: kristal_o@bk.ru
Афонюшкин Василий Николаевич, к. б. н., зав. сектором молекулярной биологии, e-mail: lisocim@mail.ru
Afonyushkin Vasily Nikolaevich, PhD of Biol. Sci., Head of the Sector of Molecular Biology, e-mail: lisocim@mail.ru
Аннотация. Эймериоз сельскохозяйственных птиц стал проблемой для птицеводства в первой половине XX столетия - с момента перевода отрасли на промышленную основу, когда были созданы благоприятные условия для быстрого накопления возбудителей в окружающей среде и массового интенсивного перезаражения птицы. В рамках изучения последствий совместного действия вакцин против эймериоза в одном организме в связи с существующим риском восстановления патогенности вакцинных штаммов эймерий при использовании разных вакцин в условиях одного хозяйства исследовано влияние на слизистую оболочку кишечника цыплят-бройлеров вакцин против эймериоза «Эймериавакс 4М» и препарата сравнения «Вакцина 1», и сочетанной вакцинации смесью этих вакцин («Вакцина 1» + «Эймериавакс 4М»). Сравнительные испытания применения этих вакцин показали лучшую протективность слизистой оболочки двенадцатиперстной и тощих кишок цыплят при использовании вакцины «Эймериавакс 4М»: длина ворсин в среднем статистически значимо составляла в двенадцатиперстной кишке 1514,46±91,87 мкм, что на 19,91 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе. В тощей кишке длина ворсин в среднем - 904,03±63,64 мкм, что на 32,19 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе, и на 45,06 % больше (Р=0,04), чем в группе, иммунизированной «Вакцина 1». Превышение длины ворсин в двенадцатиперстных и тощих кишках цыплят-бройлеров во всех опытных группах по сравнению с контрольной (интактной) группой свидетельствует об отсутствии неблагоприятно влияния вакцин на состояние слизистой оболочки кишечника цыплят. Комбинация вакцин «Вакцина 1» + «Эймериавакс 4М» не приводила к изменению длины ворсин кишечника в меньшую сторону, что косвенно свидетельствует об отсутствии повышения патогенности при смешивании этих вакцин в среднесрочной перспективе, за счет эффектов комплементации генов патогенности. Summary. Eimeriosis of poultry became a problem for poultry in the first half of the 20th century - from the moment the industry was transferred to an industrial basis, when favorable conditions were created for the rapid accumulation of pathogens in the environment and massive intensive re-infection of poultry. As part of the study of the effects of the combined action of vaccines against eimeriosis in one organism in connection with the existing risk of restoring the pathogenicity of vaccine strains of eimeria when using different vaccines in the same farm, the effect on the intestinal mucosa of broiler chickens of the vaccines against eimeriosis "Aymeriavax 4M" and the reference drug was studied. "Vaccine 1", and combined vaccination with a mixture of these vaccines ("Vaccine 1" + "Aymeriavax 4M"). Comparative trials of the use of these vaccines showed the best protection of the mucous membrane of the duodenum and jejunum of chickens when using the "Aymeriavax 4M" vaccine: the length of the villi on average was statistically significant in the duodenum 1514.46 ± 91.87 /m, which is 19.91 % more (P = 0.01) than in the control group. In the jejunum, the average length of villi is 904.03 ± 63.64 /m, which is 32.19 % more (P = 0.01) than in the control group, and 45.06 % more (P = 0.04) than in the group immunized with "Vaccine 1". The excess of the length of the villi in the duodenum and jejunum of broiler chickens in all experimental groups in comparison with the control (intact) group indicates the absence of an adverse effect of vaccines on the state of the intestinal mucosa of chickens. The combination of vaccines "Vaccine 1" + "Aymeriavax 4M" did not lead to a decrease in the length of intestinal villi, which indirectly indicates the absence of an increase in pathogenicity when mixing these vaccines in the medium term, due to the effects of complementation of pathogenicity genes.
Введение
Эймериоз (кокцидиоз) - протозойное заболевание, вызываемое простейшими рода Eimeria отряда Coccidia, встречается повсеместно, чаще в весенне-летний периоды, в теплых помещениях возможно зимой, и протекает остро, подостро, хронически. Птицы болеют с 10-дневного возраста и старше. Заболевание стало проблемой для птицеводства в первой половине XX столетия - с момента перевода отрасли на промышленную основу, когда были созданы благоприятные условия для быстрого накопления возбуди-
телей в окружающей среде и массового интенсивного перезаражения птицы [6].
М. W. S. Walston et а1. [10] выявили, что у птиц, больных эймериозом, отмечается атрофия микроворсинок эпителия кишечника. Ворсинки - это места поглощения питательных веществ из просвета кишечника, поэтому любое повреждение приводит к потере поглощения и использования питательных веществ у бройлеров. Freitas et а1. и Р. Р. Гиз-затуллин [9, 2] у больных кокцидиозом кур в тонком отделе кишечника обнаружили подо-стрый десквамативный катаральный энтерит
с разрушением микроструктуры кишечной стенки, в сохранившихся, но деформированных кишечных ворсинках - обескровленную капиллярную сеть, большинство кишечных крипт утратили регенерационный потенциал. Во многих участках кишечной стенки отмечали разрушение не только ворсинок, но и всего эпителиального монослоя крипт.
Исходя из этого целью наших исследований является изучение с помощью люминесцентной микроскопии влияния вакцинации против эймериоза разными вакцинами на микроархитектонику ворсинок и крипт слизистой оболочки двенадцатиперстной и тощих кишок цыплят-бройлеров.
Задачи исследования: изучить длину ворсин и глубину крипт двенадцатиперстной и тощих кишок цыплят, вакцинированных против эймериоза вакцинами «Эймериавакс 4М», препаратом сравнения «Вакцина 1», а также смесью этих вакцин.
Новизна исследования состоит в изучении действия сочетанной иммунизации живыми аттенуированными вакцинами против эйме-риоза на морфологию ворсин и крипт слизистой оболочки тонкого кишечника бройлеров.
В связи с тем, что существует риск восстановления патогенности вакцинных штаммов эймерий при использовании разных вакцин в условиях одного хозяйства и факт передачи генов патогенности при половом размножении эймерий не опровергнут с использованием методов полногеномного секвенирования [7], то изучение последствий совместного действия вакцин против эймериоза в одном организме является актуальным.
Материалы и методы
Объектом исследования являлись цыплята-бройлеры кросса Росс-308. Основным методом исследования слизистой оболочки двенадцатиперстной и тощих кишок выбран широкий и перспективный по своим возможностям метод люминесцентного спектрального анализа.
Для эксперимента было сформировано по принципу аналогов 4 группы цыплят: 1 группа - интактный контроль (п=15), 2 группа -опытная (п=10) вакцинирована вакциной
«Вакцина 1» 1 доза/гол; 3 группа - опытная (n=10) - вакциной «Эймериавакс 4М» (EimeriaPtyLimited, Австралия) 1 доза/гол; 4 группа - опытная (n=10) - смесью вакцин «Вакцина 1» 0,5 дозы/гол. и «Эймериавакс 4М» 0,5 дозы/гол. Цыплята опытных групп иммунизированы вакцинами per os в возрасте 14 дней.
В возрасте 35 дней цыплят декапитирова-ли, обескровливали и проводили отбор образцов поперечных фрагментов кишечника, которые фиксировали в 10 %-ном растворе нейтрального формалина. Для исследования части кишечника вынимали из формалина, вырезали фрагменты, помещали в лунки 24-луночного микропланшета, заливали дистиллированной водой, добавляли краситель пропидия йодид (PI) из расчета 5 мкл на 100 мкл дистиллированной воды. Время окрашивания 60 мин. Кишечные ворсины и крипты визуально были хорошо различимы благодаря четкой окраске клеток. Микрофотографии слизистой оболочки кишечника представлены на рис. 5, 6.
Люминесцентную микроскопию проводили с помощью микроскопа Imager D1 (Zeiss) при увеличении 40х и 100х (Zeiss), Ex/Em 546/575--640 нм (светоделитель 560 нм). Микрофотографирование слизистой оболочки проводили с помощью видеокамеры AxioCam MRm (Zeiss), совмещенной с компьютером посредством кабеля USB и программы Axio Vision (Zeiss, Германия).
Статистическую обработку полученных в ходе экспериментальных исследований данных, проводили с помощью пакета анализа программы Microsoft Office Excel [4]. Статистическую значимость различий выявляли с помощью методов вариационной и непараметрической статистики, с определением средних величин и их простых ошибок (M±m), t-критерия Стьюдента [5]. Различия считали статистически значимыми, если вероятность случайности не превышала 5 % (Р<0,05).
Результаты исследований
Результаты измерения длины ворсин и глубины крипт слизистой оболочки двенадцатиперстных и тощих кишок цыплят
Таблица 1
Исследование ворсин и крипт слизистых оболочек двенадцатиперстных
и тощих кишок цыплят, мкм
Длина ворсин, мкм Глубина крипт, мкм
1 группа (контрольная)
Двенадцатиперстная кишка Тощая кишка Двенадцатиперстная кишка Тощая кишка
М±т 1262,95±53,74 683,88±40,37 245,06±14,65 167,38±17,57
8 169,83 96,89 48,64 35,50
% 13,45 14,17 19,85 21,21
2 группа (опытная, «Вакцина 1»)
М±т 1424,49±55,71 623,22±91,64 272,74±31,21 206,99±18,62
8 139,53 205,27 69,90 41,70
% 9,79 32,94 25,63 20,14
1-Стьюдент к контрольной Р=0,05 Р>0,05 Р>0,05 Р>0,05
3 группа (опытная, «Эймериавакс 4М»)
М±т 1514,46±91,87 904,03±63,64 277,10±43,56 213,76±21,89
8 205,79 132,51 87,12 43,35
% 13,59 14,66 31,44 20,28
1-Стьюдент к контрольной Р=0,01 Р=0,01 Р>0,05 Р>0,05
1-Стьюдент ко 2-й группе Р>0,05 Р=0,04 Р>0,05 Р>0,05
4 группа (опытная, «Вакцина 1» + «Эймериавакс 4М»)
М±т 1597,11±120,77 878,40±87,51 283,55±79,31 188,86±18,72
8 241,53 173,26 111,83 56,39
% 15,12 19,72 39,44 29,86
1-Стьюдент к контрольной Р=0,01 Р=0,04 Р>0,05 Р>0,05
Примечание: 8 - стандартное отклонение, Су - коэффициент корреляции.
контрольной и опытных групп представлены в таблице 1.
В нашем эксперименте длина кишечных ворсин в контрольной группе в среднем составляла в двенадцатиперстной кишке 1262,95±53,74 мкм, минимальная 1038,98 мкм, максимальная 1567,40 мкм; в тощей -6 83,88±40,37 мкм; минимальная 532,19 мкм, максимальная 802,19 мкм. Глубина крипт двенадцатиперстной кишки - 245,06±14,65 мкм, тощей - 167,38±17,57 мкм. Графическое изображение длины ворсин и глубины крипт слизистой оболочки кишечника цыплят в контрольной и опытных группах изображено на Рис. 1-4.
Во 2 опытной группе, где применялся препарат сравнения «Вакцина 1», длина ворсин
в среднем составляла в двенадцатиперстной кишке 1424,49±55,71 мкм, что на 12,79 % больше (Р=0,05), чем в контрольной группе, минимальная 1203,13 мкм, максимальная 1580,26 мкм. Глубина крипт в двенадцатиперстной кишке - 272,74±31,21 мкм, что на 11,29 % больше (Р>0,05), чем в контрольной группе. В тощей кишке длина ворсин в среднем - 623,22±91,64 мкм, что на 8,87 % меньше (Р>0,05), чем в контрольной группе, минимальная 306,26 мкм, максимальная 865,30 мкм. Глубина крипт - 206,99±18,62 мкм, что на 23,66 % больше (Р>0,05), чем в контрольной группе.
В 3 опытной группе, где использовалась вакцина «Эймериавакс 4М», длина ворсин в среднем составляла в двенадцатиперстной
Длина ворсин двенадцатиперстных кишок, мкм
К Вакцина! Эймериавакс 4 М Смесь
Рис. 1. Длина ворсин слизистой оболочки двенадцатиперстных кишок цыплят в опытных и контрольной группах, мкм
Глубина крипт двенадцатиперстных кгшгок. мкм 77) 7л 277 1 283.55
245,06
|
1
к Вакцина! Эймериавак _4М Смесь
Рис. 2. Глубина крипт слизистой оболочки двенадцатиперстных кишок цыплят в опытных и контрольной группах, мкм
кишке 1514,46±91,87 мкм, что на 19,91 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе, и на 6,32 % больше (Р>0,05), чем в группе, вакцинированной «Вакцина 1»; минимальная 1300,49 мкм, максимальная 1812,65 мкм. Глубина крипт двенадцатиперстной кишки 277,10±43,56 мкм, что на 13,07 % больше (Р>0,05), чем в контрольной группе и на 1,60 % больше (Р>0,05), чем во 2-й опытной группе. В тощей кишке длина ворсин в среднем 904,03±63,64 мкм, что на 32,19 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе, и на 45,06 % больше (Р=0,04), чем в группе, иммунизированной «Вакцина 1»; минимальная 825,98 мкм, максимальная 1057,03 мкм. Глубина крипт - 213,76±21,89 мкм, что на 27,71 % больше (Р>0,05), чем в контрольной группе и на 3,27 % больше (Р>0,05), чем во 2-й группе.
В 4-й опытной группе, где иммунизировали цыплят сочетанием вакцин «Вакцина 1» и «Эймериавакс 4М», длина ворсин в среднем составляла в двенадцатиперстной кишке 1597,11±120,77 мкм, что на 26,46 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе, минимальная 1341,03 мкм, максимальная 1817,96 мкм. Глубина крипт - 283,55±79,31 мкм, что
Длина ворсин тощих кишок,мкм
К Вакцина 1 Эймериавакс 4М Смесь
Рис. 3. Длина ворсин слизистой оболочки тощих кишок цыплят в опытных и контрольной группах, мкм
на 15,71 % больше (Р>0,05), чем в контрольной группе. В тощей кишке длина ворсин в среднем - 878,40±87,51 мкм, что на 28,44 % больше (Р=0,04), чем в контрольной группе, минимальная 204,47 мкм, максимальная 362,62 мкм. Глубина крипт - 188,86±18,72 мкм, что на 12,83 % больше (Р>0,05), чем в контрольной группе.
Обсуждение результатов
П. В. Хатеева с соавторами [8] в своих исследованиях установили, что в норме длина кишечных ворсин тощей кишки у цыплят может варьировать от 523 мкм до 1154 мкм, с изменчивостью данного признака от 84 мкм до 531 мкм. Исходя из этого, полученные нами данные длины ворсин тощих кишок говорят об отсутствии нарушений структуры слизистой оболочки кишечника цыплят-бройлеров на фоне применения вакцин против эймериоза.
Изменение длины кишечных ворсин возможно при метаболическом синдроме. А.С. Бобикова [1] с соавторами в опыте с мышами выяснили, что длина кишечных ворсин слизистой оболочки тонкого кишечника у мышей с метаболическим синдромом
Глубина крипт тощих кишок, мкм
Рис. 4. Глубина крипт слизистой оболочки тощих кишок цыплят в опытных и контрольной группах, мкм
Рис. 5. Микрофотография слизистой оболочки тощей кишки цыпленка-бройлера. Люминесцентная микроскопия. Окраска йодид пропидия. Увеличение 100х
Рис. 6. Микрофотография слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки цыпленка-бройлера. Люми несцентная микроскопия. Окраска йодид пропидия. Увеличение 100х
статистически значимо на 35 % больше, чем у животных контрольной группы. Длина ворсин увеличивалась в связи с увеличением диаметра кишок.
Так как эймерии поражают эпителий ворсинок кишечника, В. Ю. Коптев и др. [3] выяснили, что при применении биоти-нилированного производного окисленного декстрана (БОД) средняя длина кишечных ворсин тощей кишки цыплят достоверно больше на 37,7 % по сравнению с контролем. По мнению авторов укорачивание ворсин слизистой оболочки кишечника при эймериозе является защитной реакцией на развитие воспалительного процесса в кишечнике, для уменьшения площади поверхности всасывания.
В 1 дозе вакцины «Эймериавакс 4М» содержится: 30 ооцист E. acervulina, 80 -E. maxima, 100 - E. necatrix, 120 - E. tenella. Вакцинные ооцисты заселяют эпителиальные клетки слизистой оболочки и оказывают протективное действие в определенном отделе кишечника цыплят: E. acervulina -двенадцатиперстную кишку, E. maxima -тощую и частично может быть в двенадцатиперстной кишках. Превышение длины ворсин в двенадцатиперстных и тощих кишках цыплят бройлеров во всех опытных группах по сравнению с контрольной (интактной) группой свидетельствует об отсутствии неблагоприятного влияния вакцин на состояние слизистой оболочки кишечника цыплят.
Заключение
Сравнительные испытания применения вакцины «Эймериавакс 4М» и препарата сравнения «Вакцина 1» показали лучшую протективность слизистой оболочки двенадцатиперстной и тощих кишок цыплят при использовании вакцины «Эймериавакс 4М»: длина ворсин в среднем статистически значимо составляла в двенадцатиперстной кишке 1514,46±91,87 мкм, что на 19,91 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе. В тощей кишке длина ворсин в среднем 904,03±63,64 мкм, что на 32,19 % больше (Р=0,01), чем в контрольной группе, и на 45,06 % больше (Р=0,04), чем в группе, иммунизированной «Вакцина 1».
Комбинация вакцин «Вакцина 1» и «Эй-мериавакс 4М» не приводила к изменению длины ворсин в меньшую сторону, что косвенно свидетельствует об отсутствии повышения патогенности при смешивании этих вакцин в среднесрочной перспективе, за счет эффектов комплементации генов пато-генности.
Список литературы
1. Бобикова А. С. Особенности структуры кишечных ворсин у мышей с метаболическим синдромом / А. С. Бобикова, Д. С. Болдырева, В. Н. Афонюш-кин [и др.] // Сибирский вестник с.-х. науки. 2017. Т. 47. № 3. С. 62-67.
2. Гиззатуллин Р. Р. Клинико-морфологическая оценка эффективности соединения «Дегельм-14» при эймериозе кур: дисс. ... канд. вет. наук. 03.02.11, 06.02.01. Казань, 2013. 196 с.
3. Коптев В. Ю. Эффективность биотинилиро-ванного производного окисленного декстрана при экспериментальном эймериозе кур / В. Ю. Коптев,
B. Н. Афонюшкин, Н. В. Давыдова [и др.] // Птицеводство. 2021. № 2. С. 50-53.
4. Лебедько Е. Я. Биометрия в MS Excel: Учебное пособие / Е. Я. Лебедько, А. М. Хохлов, Д. И. Барановский [и др.] // СПб.: Издательство «Лань», 2018.
5. Медицинская статистика. T-критерий Стьюден-та онлайн [Электронный ресурс]. / URL: http://www. medstatistic.ru/calculators/averagestudent.html (дата обращения: 09.10.2021).
6. Мишин B. C. Интегрированная система контроля кокцидиоза / B. C. Мишин, В. М. Разбицкий, Н. П. Крылова [и др.] // Птицеводство. 2004. № 8.
C. 17-21.
7. Фролова О. А. Биохимические изменения в плазме крови цыплят при сочетанной иммунизации аттенуированными вакцинами против эйме-риоза // Международный вестник ветеринарии.
2021. № 3. С. 39-45. DOI: 10.17238/issn2072-2419.2021.3.39.
8. Хатеева П. В. Анализ причин возникновения синдрома мальабсорбции цыплят-бройлеров на основе исследования особенностей слизистой тонкого отдела кишечника методом люминесцентной микроскопии / П. В. Хатеева, В. Н. Афонюшкин, Н. А. Сигарева // Материалы VI Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы сельского хозяйства горных территорий». 2017. С. 279-282.
9. Freitas F. L. Da C. Clinical and pathological aspects in broilers (Gallus gallus domesticus) infected experimentally with Eimeria acervulina / F. L. Da C. Freitas, K. De S. Almeida, A. A. Do Nascimento [et al.] // Revista Brasileira de Parasitologia Veterinaria. 2008. V. 17. №. 1. P. 16-20.
10. Walston M. W. S. Effect of infection with mixed Eimeria species on T cells and T regulatory cell properties / M. W. S. Walston, R. Shanmugasundaram, R. K. Selvaraj // J. Appl. Poult. Res. 2016. 25. P. 407-413.
^\YMIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIM
КАК ОФОРМИТЬ ПОДПИСКУ НА ЖУРНАЛ?
| А. Через подписной каталог
= Индекс в каталоге «Газеты. Журналы» Агентства «Роспечать» - 33184
| Б. Через редакцию журнала
| Банковские реквизиты для оплаты подписки
= по безналичному расчету для юридических лиц:
| ЧОУДПО «Институт Ветеринарной Биологии»
| ИНН 7802196720 КПП 781301001
Р/с 40703810400000000022 в АО «Горбанк», г. Санкт-Петербург
| К/с 30101810200000000814 БИК 044030814
| В поле «Назначение платежа» указать:
= «Предоплата за подписку на журнал «Актуальные вопросы
| ветеринарной биологии» на 2022 г. согласно инф. письму б/н
| от 03.09.18 г. НДС не облагается. Адрес подписки: ...»
= Стоимость редакционной подписки на 2022 год:
| 2400 рублей.
Адрес редакции: Санкт-Петербург, ул. Ораниенбаумская, 3-Б. Т./ф. (812) 232-55-92, т. 927-55-92. E-mail: virclin@mail.ru; www.invetbio.spb.ru
