Локализация рецептора VEGFR1 в опухолевых клетках человека Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



108 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

фективного и доступного для практического применения рону первых. Ключевым белком, стимулирующим образо-метода, а при его неэффективности необходимо допол- вание кровеносных сосудов, является фактор роста нять лечение введением в серозную полость аллогенных эндотелия сосудов (VEGF), а его эффекты определяются ЛАК-клеток. взаимодействием с соответствующим рецептором. Наиболее противоречива информация о VEGFR1: до сих пор А.С. Тихомиров1-2, Л.Г. Деженкова1, А.Е. Щекотихин12 точно не установлена ни его функция, ни клеточная лока-ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА лизация. Различные изоформы этого рецептора могут про-АНТРАФУРАНКАРБОКСАМИДОВ, являть противоположные свойства. Полноразмерный мем-СОДЕРЖАЩИХ CF3-ГРУППУ В ПОЛОЖЕНИИ 2 браносвязанный mVEGFRl способствует правильному ФГБНУ«НИИНА им. Г.Ф. Гаузе», Москва; созреванию кровеносных сосудов в эмбриогенезе, а рас-2ФГБОУВПО «РХТУ им. Д.И. Менделеева», Москва творимый sVEGFRl подавляет ангиогенез. Помимо «сосу-Введение. Антрафурандион-3-карбоксамиды высоко- дистых» функций, VEGFR1 экспрессируется многими активны в отношении ряда культур опухолевых клеток, опухолевыми клетками и ответственен за их выживание, в том числе резистентных, a наиболее активное производное миграцию, инвазию и метастазирование. Установление ЛХТА-2034 (Щекотихин А. Е. и др. Патент РФ № 2554939, точной локализации VEGFR1 в опухолевых клетках позво-2015) прошло доклинические исследования и рекомендо- лит в будущем рассматривать его как перспективную ми-вано для проведения I стадии клинических испытаний. шень в терапии злокачественных новообразований. Цель исследования — синтез аналогов антрафурандио- Цель исследования — выявить и установить локализа-на ЛХТА-2034 и исследование влияния трифторметильно- цию белка VEGFR1 в опухолевых клетках. го заместителя в положении 2 на способность новых со- Материалы и методы. В работе использованы линии единений блокировать рост опухолевых клеток и работу опухолевых клеток человека различного гистогенеза: A431, топоизомеразы 1. A549, Sn12c. Ведение культур осуществляли по стандарт-Материалы и методы. ЛХТА-2251 — новый аналог пре- ной методике. Оценку уровня экспрессии гена VEGFR1 парата ЛХТА-2034, содержащий CFj-группу в положении проводили методом полимеразной цепной реакции 2 гетероцикла, получен конденсацией 4,11-дигидрокси-5,10- с обратной транскрипцией. Наличие белка в целых клетках диоксо-2-трифторметилантра[2,3-6]фуран-3-карбоновой регистрировали с помощью иммуноцитохимического (ИЦХ) кислоты [Тихомиров А. С. и др. Химия гетероциклических исследования и непрямой реакции иммунофлуоресценции соединений 2014; (2):298] и циклического диамина. Анти- (РИФ) с последующим анализом на проточном цитофлу-пролиферативную активность веществ определяли в МТТ- ориметре. Вклад ядерной локализации VEGFR1 оценива-тесте на опухолевых клетках меланомы B16, миелоидного ли разработанным методом РИФ с экстрагированными лейкоза человека К562 и карциномы кишечника HCT116. интактными ядрами. Влияние на активность топоизомеразы 1 (Promega, США) Результаты. Во всех трех клеточных линиях обнаруже-изучали в реакции релаксации суперскрученной плазмиды на базальная экспрессия гена VEGFR1. По данным ИЦХ-pBR322 (Fermentas, Литва). исследования также было установлено, что все перечислен-Результаты. Новый 2-CF3-антрафурандион ЛХТА-2251 ные линии содержат белок VEGFR1, причем наибольшее обладает более высокой растворимостью по сравнению количество зафиксировано в клетках A431. В связи с этим с ЛХТА-2034, однако модификация метильной группы указанная линия была выбрана для детальных исследовав CF^^^^ приводит к 5-10-кратному снижению актив- ний. РИФ с интактными клетками A431 показала практи-ности препарата ЛХТА-2251 в отношении тестируемых чески полное отсутствие VEGFR1 на цитоплазматической линий клеток. Изучение влияния веществ на работу топо- оболочке (не более 2,7 %), однако после пермеабилизации изомеразы 1 показало, что новый антрафурандион ЛХ- метанолом уровень сигнала возрос до 47,0 %. С целью ТА-2251 также уступает в способности блокировать актив- уточнения внутриклеточной локализации VEGFR1 оце-ность фермента соединению ЛХТА-2034. нивали количество белка снаружи и внутри ядра. В связи Заключение. Замена метильной группы в положении 2 с этим была разработана методика выделения интактных антрафуран-3-карбоксамидов на трифторметильную по- ядер для РИФ. Результаты экспериментов свидетельствуют вышает растворимость производных данного химического о присутствии VEGFR1 на наружной ядерной мембране класса, однако приводит к падению антипролиферативных (5,0 %), однако значительно большее количество белка свойств, что коррелирует со снижением их способности зарегистрировано внутри ядра (18,4 %). ингибировать топоизомеразу 1. Заключение. Полученные данные по выяснению лока-Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ лизации VEGFR1 позволят подбирать адекватные способы в рамках научного проекта № 16-33-00908мол_а. ингибирования его активности, что может привести к снижению злокачественного потенциала опухоли и степени ее Е.Г. Тырсина, С. И. Никулицкий, О.О. Рябая, А.Н. Иншаков васкуляризации. ЛОКАЛИЗАЦИЯ РЕЦЕПТОРА VEGFR1 В ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТКАХ ЧЕЛОВЕКА Е.Г. Тырсина, С.И. Никулицкий, А.Н. Иншаков ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва ИССЛЕДОВАНИЕ РЕЦЕПТОРА VEGFR1 Введение. Любые нарушения регуляции ангиогенеза НА ИНТАКТНЫХ ЯДРАХ приводят к тяжелым последствиям. В опухоли баланс про- ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» ангиогенных и антиангиогенных факторов сдвинут в сто- Минздрава России, Москва

№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ