CC BY
10
УДК [616.211+616.216]-006.5-031.81:574.2 DOI: 10.34215/1609-1175-2022-3-63-69
И
Локализация NO-синтазы и малых апоптотических молекул в слизистой оболочке полости носа при полипозном риносинусите
Д.Г. Павлуш, Н.Ю. Матвеева
Тихоокеанский государственный медицинский университет, Владивосток, Россия
Цель: изучение локализации NO-синтазы и маркеров апоптоза в слизистой оболочке полости носа у пациентов с поли-позным риносинуситом (ПРС). Материалы и методы. Исследовали биопсийный материал полипов полости носа и участков слизистой оболочки нижних носовых раковин пациентов женского и мужского пола в возрасте 35-70 лет (n = 70, средний возраст 57,4 ± 1,52), находящихся на хирургическом лечении в оториноларингологическом отделении Владивостокской клинической больницы № 1. Основную группу составлял материал полипов, полученный от пациентов (n = 50) во время хирургических операций (полипотомия) с клинически верифицированным диагнозом «полипозный риноси-нусит» без сопутствующей патологии слизистой оболочки носа. Контроль: два варианта образцов слизистой оболочки полости носа. Первая группа (контроль I) - материал слизистой оболочки полости носа пациентов с диагнозом «искривление перегородки носа», которым была проведена риносептопластика (n = 20) без полипозной и сопутствующей воспалительной и аллергической патологии. Вторая группа (контроль II) - материал слизистой оболочки нижних носовых раковин (n = 50), полученный при хирургическом лечении основной группы пациентов. Результаты. В настоящей работе показано возрастание экспрессии маркеров nNOS/iNOS в клетках слизистой оболочки полости носа при ПРС, которое коррелирует с распределением проапоптотических факторов р53 и каспаза-3 и зависит от клинико-морфо-логического типа полипов. Заключение. Развитие ПРС сопровождается усилением экспрессии NOS и факторов апоптоза в слизистой оболочке полости носа. Особенности специфического сигнального микроокружения обеспечивают особые условия для формирования полипов различного морфологического типа. Ключевые слова: оксид азота, апоптоз, полипозный риносинусит, воспаление Поступила 04.04.22. После исправления 24.06.22. Принята к печати 30.06.22
Для цитирования: Павлуш Д.Г., Матвеева Н.Ю. Локализация NO-синтазы и малых апоптотических молекул в слизистой оболочке полости носа при полипозном риносинусите. Тихоокеанский медицинский журнал. 2022;3:63-69. doi: 10.34215/1609-1175-2022-3-63-69
Для корреспонденции: Павлуш Дмитрий Георгиевич - старший преподаватель кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии Тихоокеанского государственного медицинского университета (690002, г. Владивосток, пр-т Острякова, 2); ORCID: 0000-0003-4794-9777; e-mail: pavlush.dmitrij@yandex.ru
Localization of nitric oxide syntases and small apoptotic molecules in the nasal mucosa in polypoid rhinosinusitis
D.G. Pavlush, N.Yu. Matveeva
Pacific State Medical University, Vladivostok, Russia
Aim. To study the localization of NO synthases and apoptosis markers in the nasal mucosa in rhinosinusitis patients with nasal polyps (RNP). Methods. We studied the biopsy material of nasal cavity polyps and mucous membrane sections of the inferior turbinates of female and male patients aged 35-70 years (n = 70, mean age 57.4 ± 1.52) undergoing surgical treatment in the otorhinolaryngological department of the Vladivostok Clinical Hospital No. 1. The experimental group included polyp materials obtained via polypectomy from patients (n = 50) with a clinically verified diagnosis of nasal polyps without a concomitant pathology of the nasal mucosa. The control group included two variants of nasal mucosa samples. Group I (control I) comprised the nasal mucosa material of patients diagnosed with deviated septum who underwent rhinoseptoplasty (n = 20) without polyposis and concomitant inflammatory and allergic pathologies. Group II (control II) comprised the mucous membrane material of inferior turbinates (n = 50), which was obtained during surgical treatment of patients with a clinical diagnosis of nasal polyps. Results. It was found that nasal mucosa cells in RNP are characterized by an increased expression of nNOS/iNOS markers, which correlates with the distribution of proapoptotic factors and depends on the clinical and morphological type of polyps. Conclusions. The development of RNP is accompanied with an increased expression of NOS and apoptosis factors in the nasal mucosa. The specific signal microenvironment provides favorable conditions for the formation of polyps of various morphological types.
Keywords: nitric oxide, apoptosis, nasal polyps, inflammation Received 04 April 2022. Revised 24 April 2022. Accepted 30 May 2022
For citation: Pavlush D.G., Matveeva N.Yu. Localization of nitric oxide syntases and small apoptotic molecules in the nasal mucosa in polypoid rhinosinusitis. Pacific Medical Journal. 2022;3:63-69. doi: 10.34215/1609-1175-2022-3-63-69
Corresponding author: Dmitry G. Pavlush, Senior Lecturer, Department of Histology, Embryology and Cytology, Pacific State Medical University, (2, Ostryakova Ave., Vladivostok, 690002, Russia); ORCID: 0000-0003-4794-9777; e-mail: pavlush.dmitrij@yandex.ru
© Павлуш Д.Г., Матвеева Н.Ю., 2022
Полипозный риносинусит (ПРС) характеризуется хроническим воспалением, активной пролиферацией эпителия и соединительнотканных клеток слизистой оболочки полости носа [1]. Большое значение в активации полипозного роста представляют воспалительные и аллергические факторы, нейропептиды и газообразные мессенджеры [1, 2]. Их гетерогенное и комплексное воздействие на слизистую оболочку ведет к формированию трех клинико-морфологических типов полипов: отечному с гиперплазией слизистых желез, аллергическому (эозинофильному) и фиброзному с выраженным кистообразованием и васкуляриза-цией серозно-слизистых желез в подслизистой основе [1, 3]. ПРС является мультифакторным заболеванием, часто встречается в сочетании с непереносимостью нестероидных противовоспалительных препаратов, бронхиальной астмой, муковисцидозом и синдромом Картагенера [1, 2, 4].
Известно, что ведущая регулирующая роль в патогенезе ПРС принадлежит избыточной продукции оксида азота (N0), который участвует в регуляции мукоцилиарной активности, сосудистого тонуса, оказывает выраженное провоспалительное действие [5]. Продукты метаболизма N0 также модулируют клеточный цикл, нарушение которого неизменно связывают с формированием полипов [5, 6]. Однако изменения молекулярного сигналинга и динамики обновления клеток при полипозной трансформации остаются невыясненными.
Цель настоящей работы состояла в изучении локализации N0-синтазы и маркеров апоптоза в слизистой оболочке полости носа у пациентов с ПРС.
Материал и методы
Исследовали биопсийный материал полипов полости носа и участков слизистой оболочки нижних носовых раковин пациентов женского и мужского пола в возрасте 35-70 лет (п = 70, средний возраст 57,4 ± 1,52 года), находящихся на хирургическом лечении в оториноларингологическом отделении КГБУЗ «Владивостокская клиническая больница № 1». Исследование одобрено междисциплинарным комитетом по этике ФГБОУ ВО ТГМУ Минздрава РФ (протокол № 5 от 17 января 2022 г.) и соответствует Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинский исследований с участием человека». Все пациенты дали информированное согласие на участие в исследовании.
Основную группу составлял материал полипов, полученный от пациентов (п = 50) во время хирургической операции (полипотомия) с клиническим верифицированным диагнозом «полипозный риноси-нусит» без сопутствующей воспалительной (гнойный верхнечелюстной риносинусит) и аллергической (аллергический ринит, бронхиальная астма, аспириновая триада) патологии слизистой оболочки носа.
В качестве контроля исследовались два варианта образцов слизистой оболочки полости носа. Первая группа (контроль I) - материал слизистой оболочки полости носа, полученный у пациентов с диагнозом «искривление перегородки носа», которым была проведена риносептопластика (n = 20) без полипозной и сопутствующей воспалительной и аллергической патологии. Вторая группа (контроль II) - материал слизистой оболочки нижних носовых раковин (n = 50), полученный у пациентов с клиническим диагнозом «полипозный риносинусит», составляющих основную группу.
Критерии исключения из исследования: тяжелое иммунодефицитное состояние (ВИЧ-инфекция, заболевания крови и пр.), антрохоанальные полипы, инвертированная папиллома, злокачественные заболевания полости носа и околоносовых пазух.
Материал фиксировали в 4% растворе парафор-мальдегида на фосфатном буфере в течение 24 часов, после чего промывали 0,1-М Na-фосфатном буфере (рН 7,2) с 6-7-кратной сменой раствора и заливали в парафин по общепринятой методике. Срезы толщиной 5 мкм монтировали на предметные стекла с адгезивным покрытием, депарафинировали и инкубировали с первичными мышиными моноклональными антителами против iNOS (ЛЬсаш, ab3523, Великобритания) в разведении 1:100, nNOS (ЛЬсаш, аЬ40662, США) в разведении 1:150, p53 (ЛЬсаш аЬ28, Великобритания) в разведении 1:250 и кроличьими моноклональными антителами против caspase-3 (Thermo Fisher Scientific 700182, США) в разведении 1:50. Антитела разводили на фосфатном буфере, содержащем Тритон Х-100 и бычий сывороточный альбумин, инкубировали в течение ночи при температуре 4 °С. После промывки срезы в течение 1 ч инкубировали в растворе биотинилиро-ванных вторичных антител против иммуноглобулина кролика и мыши соответственно первичным антителам, в разведении в соответствии с инструкциями фирмы производителя (Vector ЬаЬо^опез, США). После отмывки вторичных антител препараты инкубировали в растворе авидин-пероксидазного комплекса (Vectastain ЛВС Kit, Vector LaЬoratories, США). Срезы выдерживали в 0,03% растворе диаминобензидина и 0,01% перекиси водорода на фосфатном буфере в течение 10-20 мин, затем промывали, обезвоживали и заключали в бальзам по обычным правилам. В качестве контроля из среды исключали первичные антитела, окрашивание клеток отсутствовало. Часть срезов докрашивали гематоксилином Майера.
Препараты изучали в световом микроскопе AxioScope A1 (Carl Zeiss, Германия) и фотографировали при помощи цифровой камеры AxioCam ICc3. Морфометрическую обработку полученных фотографий проводили при помощи пакета программ AxioVision 4.8.1. На микрофотографиях оценивали плотность распределения иммунопозитивных клеток слизистой оболочки носа в контрольных группах и ткани полипа. Данные измерения проводились
на срезах, докрашенных гематоксилином Майера в 10 неперекрывающихся полях зрения на каждом препарате. Определение площади иммуногистохими-ческого окрашивания проводили с использованием программы ImageJ 4.0 и Scion ImageJ после получения изображения камерой AxioCamICc3 Rev.3 (Carl Zeiss). Статистическую обработку данных проводили с помощью программ Microsoft Excel 2010 и Statistica 10. Значение исследуемых объектов отличалось от нормального распределения (критерии Шапиро - Уилка). В сравниваемых группах количественные данные представляли в виде медианы и межквартильных интервалов Med (Нкв, Вкв), где Med - медиана, Нкв - нижний квартиль, Вкв - верхний квартиль. Данные обрабатывали методом вариационной статистики с определением t-критерия достоверности по Стьюденту (p < 0,05).
Результаты исследования
В слизистой оболочке полости носа контрольной группы I выявляется экспрессия nNOS, которая распределяется преимущественно в субэпителиальной
и железистой зоне собственной пластинки слизистой оболочки. Фермент локализуется в нервных волокнах, оплетающих концевые отделы и выводные протоки желез (рис. 1 а). Эпителиоциты слизистой оболочки ^ОБ не содержат.
Характер локализации nN0S в слизистой оболочке контроля II меняется при ПРС и зависит от морфологического типа полипов. Количество nN0S-реактивных клеток здесь закономерно увеличивается во всех слоях слизистой оболочки, а плотность nN0S-позитивных нервных волокон неизменно снижается (табл.). В ткани полипов отечного типа nN0S локализуется главным образом в клетках концевых отделов желез и их выводных протоков (рис. 1 б). При полипах эозинофильного (аллергического) типа nN0S избирательно выявляется в эпителии, а в собственной пластинке маркирует эн-дотелиоциты микрососудов, выводные протоки и концевые отделы желез. При полипах фиброзного типа возрастание экспрессии nN0S определяется в отдельных железистых элементах, субэпителиальных участках соединительной ткани и микрососудах (рис. 1 в), иногда встречается на уровне базальной мембраны (табл.).
Рис. 1. Иммунолокализация nN0S в слизистой оболочке полости носа в контроле и при полипозном риносинусите. а - ЫС-ергические волокна, оплетающие концевые отделы и выводные протоки желез (стрелки) (контроль I); б - локализация пЫС8 в клетках концевых отделов и выводных протоков желез (стрелки) слизистой оболочки при ПРС отечного типа (контроль II); в - распределение пЫС8 в клетках концевых отделов и выводных протоков желез (стрелки) глубокого слоя собственной пластинки слизистой оболочки при ПРС фиброзного типа (контроль II); г - многочисленные пЫС8-иммунореактивные клетки выводных протоков желез (стрелки) в ткани полипа фиброзного типа. Докрашено гематоксилином Майера. Масштаб: а, в - 50 мкм, б, г - 100 мкм.
Таблица
Плотность распределения иммунопозитивных клеток собственной пластинки слизистой оболочки в различных
морфологических типах ПРС (Med, Нкв, Вкв, в 0,1 мм2)
Маркер Контроль I n = 20 Отечный тип n = 32 Эозинофильный (аллергический) тип n = 12 Фиброзный тип n = 6
ткань полипа слизистая оболочка н/н раковин контроль II ткань полипа слизистая оболочка н/н раковин контроль II ткань полипа слизистая оболочка н/н раковин контроль II
nNOS 2,31 (2,11; 2,43) 4,64 (3,49; 5,29) 3,71 (2,58; 5,25) 4,06 (3,74; 4,4) 5,67 (3,6; 5,82) 5,8 (4,58; 6,3) 4,79 (1,8; 7,77)
iNOS 1,08 (1,06; 2,18) 6,03 (5,58; 9,06) 4,46 (1,25; 8,82) 7,23 (5,38; 8,32) 3,26 (1,86; 4,67) 4,9 (4,67; 8,83) 2,32 (2,12; 3,0)
р53 3,1 (3,07; 5,3) 10,8 (10,5; 18,68) 5,15 (3,52; 6,65) 12,3 (11,8; 18,2) 5,6 (3,7; 6,32) 9,3 (8,8; 10,8) 4,0 (3,12; 4,5)
Каспаза-3 2,01 (1,32; 2,42) 7,63 (5,7; 10,6) 3,3 (1,22; 7,2) 9,6 (6,7; 12,06) 3,8 (2,38; 6,32) 6,2 (5,8; 10,5) 3,08 (2,03; 5,12)
Результаты представлены в виде Med (Нкв, Вкв), где Med - медиана, Нкв - нижний квартиль, Вкв - верхний квартиль. Статистически значимые отличия от группы контроля (p < 0,05)
Для ткани полипов характерно преимущественное субэпителиальное распределение пЫОБ-иммунореактивных структур, где выявляются нервные волокна и фибробластоподобные клетки. При отечном и эозинофильном (аллергическом) типах полипов пЫОБ-позитивные клетки и волокна обнаруживаются по ходу кровеносных сосудов. В полипах фиброзного типа пЫОБ маркирует эпителиоциты желез, небольшую популяцию мононуклеарных клеток и единичные нервные волокна (рис. 1 г).
В слизистой оболочке полости носа у пациентов из группы контроля I экспрессия 1ЫОБ резко снижена. Здесь 1ЫОБ преимущественно локализуется в апикальной части эпителиоцитов выводных протоков желез (рис. 2 а). Активность 1ЫОБ в слизистой оболочке контроля II значительно нарастает в первую очередь за счет экспрессии фермента в стенке кровеносных сосудов и железистых эпителиоцитах.
В образцах ткани полипов отечного типа 1ЫОБ локализуется в реснитчатых и бокаловидных эпители-оцитах и в клетках субэпителиального слоя. В железистой зоне собственной пластинки данный маркер присутствует в эндотелиоцитах микрососудов и умеренно маркирует соединительнотканные клетки (рис. 2 б). В полипе эозинофильного (аллергического) типа 1ЫОБ маркирует лишь небольшую группу эпителиоцитов железистой зоны, но активно маркирует обширную популяцию клеток воспалительных инфильтратов. В полипах фиброзного типа фермент выявляется в клетках субэпителиальной зоны, стенке крупных кровеносных сосудов и железистых эпителиоцитах.
Во всех слоях слизистой оболочки полости носа группы контроля I мы обнаружили небольшое количество р53- и каспаза-3-реактивных клеток. В группе контроля II р53 и каспаза-3 выявлялись преимущественно в клетках воспалительных инфильтратов (табл.).
Рис. 2. Локализация в слизистой оболочке полости носа и ткани полипа. а - редкие гЫО8-иммунореактивные эпителиоциты концевых отделов желез собственной пластинки слизистой оболочки (стрелка) при ПРС отечного типа (контроль II); б - в ткани полипа отечного типа количество 1ЫО8-позитивных эпителиоцитов концевых отделов и выводных протоков желез (стрелки) увеличивается. Докрашено гематоксилином Майера. Масштаб: а - 50 мкм, б - 30 мкм.
67
Маркеры апоптоза при ПРС выявляются во всех слоях слизистой оболочки и в очагах воспалительных инфильтратов. В полипах всех исследованных типов отмечается высокая экспрессия р53 и умеренная позитивная реакция на каспазу-3 (рис. 3 а, в). Иммунореактивные клетки, как правило, располагаются под базальной мембраной, вокруг сосудов или диффузно в рыхлой соединительной ткани. В собственной пластинке слизистой оболочки определяется заметное увеличение р53-иммунопозитивных клеток (табл.).
В ткани полипов фиброзного типа выявляются участки с редкими скоплениями каспаза-3-реактив-ных фибробластов. Кроме того, в глубоких слоях собственной пластинки и под эпителием располагаются очаговые или диффузные полиморфно-клеточные инфильтраты с умеренной иммуноре-активностью на каспазу-3 (рис. 3 г). Распределение
р53 преобладает в клетках субэпителиального слоя (рис. 3 б). (табл.)
Обсуждение полученных данных
В настоящей работе показано возрастание экспрессии nN0S/iN0S в клетках слизистой оболочки полости носа при ПРС, которое коррелирует с распределением проапоптотических факторов и зависит от клинико-морфологического типа полипов.
Значение апоптоза в развитии хронических воспалительных заболеваний подтверждено в ряде исследований [7-9]. Хорошо известны морфологические критерии апоптоза и сложные каскады молекулярных реакций, запускающих и стабилизирующих программированную гибель клеток [10-12]. Апоптоз инициируют более 30 факторов, однако его эффекторную стадию запускают каспаза-3 и факторы транскрипции
4%. я
'Si
Л г
•
\
V 1f
'Л Л> >
% .«
V
-v-Ч
: У
--
• # • »J
e я
Рис.3. Распределение маркеров апоптоза в слизистой оболочке полости носа в контроле и при полипозном риносинусите.
а - локализацияр53 в клетках воспалительного инфильтрата (стрелки) в собственной пластинке слизистой оболочки при ПРС отечного типа (контроль II); б - р53-иммунопозитивные клетки воспалительного инфильтрата (стрелки) в ткани полипа эозинофильного (аллергического) типа; в - каспаза-3-реактивные эпителиоциты и клетки воспалительного инфильтрата (стрелки) в ткани полипа отечного типа; г - иммунолокализация каспазы-3 в клетках воспалительного инфильтрата субэпителиальной зоны (стрелки) в ткани полипа эозинофильного (аллергического) типа. Докрашено гематоксилином Майера в, г. Масштаб: а, б - 100 мкм, в, г - 50 мкм.
а
р53 и р21. Баланс этих молекул контролируют пептиды, блокирующие наступление апоптоза, где Bcl-2 и MDM2 принадлежит основная регулирующая роль [13, 14].
Развитие ПРС происходит на фоне повышенной выработки ключевых воспалительных факторов (IL-5, CCL11, TNF, TGF-ß) и нейропептидов (субстанция P, вазоинтестинальный полипептид, нейропептид Y). Эти факторы способны индуцировать также патологические формы апоптоза клеток слизистой оболочки полости носа [14, 15]. Однако по другим данным [9], в ткани полипов обнаруживается сверхэкспрессия противоапоптотического белка Bcl-2, который противостоит распространению апоптоза. По нашим данным, ПРС сопровождается увеличением количества р53-иммунореактивных клеток и умеренной экспрессией каспазы-3 в эпителии и собственной пластинке слизистой оболочки.
Наибольшее количество р53-иммунореактивных клеток выявляется в полипах аллергического типа. В этом случае превалируют иммунокомпетентные клетки, эозинофилы и тучные клетки. Можно полагать, что хроническое иммунное воспаление при ПРС ведет к формированию гетерогенных популяций клеток, одна из которых элиминируется через апоптоз, а другая поддерживает непрерывный полипогенез. Необходимо отметить, что в полипах фиброзного типа пролиферация и гибель клеток незначительна, что также находит подтверждение при исследовании каспазы-3 у пациентов с ПРС [3, 10, 15].
Баланс про- и антиапоптотических факторов формирует молекулярный «реостат», определяющий динамику и исход хронического иммунного воспаления [7, 10, 11]. Морфологическим эквивалентом этого баланса является установленное нами соотношение р53/кас-паза-3 в тканях полипов. Распространение программированной гибели клеток при ПРС представляет результат регуляции специфических генов, где эпигенетические воздействия остаются определяющими [3]. Потенциальный канал такого взаимодействия может представлять синтез NO.
Нами установлено значительное нарастание активности конститутивной и индуцибельной изофор-мы NOS в соединительной ткани и эпителии полипов. Повышенная выработка NO в этой ситуации повышает проницаемость сосудистой стенки, усиливает отек подслизистой основы, стимулирует миграцию воспалительных клеток и секрецию слизи в железах и бокаловидных клетках. При развитии ПРС наблюдается общая тенденция к увеличению содержания nNOS-позитивных клеточных элементов на фоне снижения активности маркера в нервных волокнах. Активность маркера обнаруживается в эндотелио-цитах кровеносных сосудов, клетках подслизистой основы и особенно выражена в субэпителиальной зоне. Ключевая роль NO при ПРС в качестве координатора местных нейроиммунных механизмов ремоделирования слизистой оболочки полости носа,
что, в свою очередь, и способствует усилению реци-дивирования ПРС.
Заключение
Развитие ПРС сопровождается усилением экспрессии NOS и факторов апоптоза в слизистой оболочке полости носа. Особенности специфического сигнального микроокружения обеспечивают особые условия для формирования полипов различного морфологического типа. Исследования разных путей регуляции апоптоза способствует всестороннему пониманию молекулярно-клеточных механизмов повреждения слизистой оболочки полости носа при ПРС и необходимы для разработки новых подходов эффективной терапии данной группы заболеваний.
Конфликт интересов: авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи. Источник финансирования: авторы заявляют о финансировании проведенного исследования из собственных средств.
Литература / References
1. Павлуш Д.Г., Павлуш Е.Н., Матвеева Н.Ю., Калиниченко С.Г., Дюйзен И.В. Хронический полипозный риносинусит: этио-патогенетические механизмы его возникновения. Медицина. 2018;6(2):69-78. [Pavlush DG, Pavlush EN, Matveeva NYu, Kalinichenko SG, Dyujzen IV. Hronicheskij polipoznyj rinosi-nusit: etiopatogeneticheskie mekhanizmy ego vozniknoveniya. Medicina. 2018;6(2):69-78. (In Russ.)] doi: 10.29234/2308-91132018-6-2-69-78
2. Козлов В.С., Савлевич Е.Л. Полипозный риносинусит. Современные подходы к изучению патогенеза, диагностике и лечению. Вестник оториноларингологии. 2015;80(4):95-9. [Kozlov VS, Savlevich EL. Polipoznyj rinosinusit. Sovremen-nye podhody k izucheniyu patogeneza, diagnostike i lecheniyu. Vestnik otorinolaringologii. 2015;80(4):95-9 (In Russ.)] doi: 10.17116/otorino201580495-99
3. Матвеева Н.Ю., Павлуш Д.Г., Калиниченко С.Г. Экспрессия про- и антиапоптотических молекул в слизистой оболочке полости носа при полипозном риносинусите. Вестник оториноларингологии. 2020;85(3):43-7. [Matveeva NYu, Pavlush DG, Kalinichenko SG. Ekspressiya pro- i antiapoptoticheskih molekul v slizistoj obolochke polosti nosa pri polipoznom rinosinusite. Vestnik otorinolaringologii. 2020;85(3):43-7 (In Russ.)] doi: 10.17116/ otorino20208503143
4. Van Drunen CM, Mjosberg JM, Segboer CL, Cornet ME, Fok-kens WJ. Role of innate immunity in the pathogenesis of chronic rhinosinusitis: progress and new avenues. Curr Allergy Asthma Rep. 2012;5(12):120-6.
5. Tian P, Sun Y, Li Y, Liu X, Wan L, Li J, et al. A Global Analysis of Tandem 3'UTRs in Eosinophilic Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps. PLoS ONE 2012; 7(11):1-12. doi: 10.1371/journal. pone.0048997
6. Cho SW, Kim DY. Lessons. From Localized Chronic Rhinosinusitis With Nasal Polyps. Allergy Asthma Immunol Res. 2021;13(6):827-9. doi: 10.4168/aair.2021.13.6.827
7. Uller L, Andersson M, Greiff L, Persson CG., Erjefalt J.S. Occurrence of apoptosis, secondary necrosis, and cytolysis in eosinophilic nasal polyps. Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 2004;170(7):742-7. doi: 10.1164/rccm.200402-240oc
8. Galvao dos Anjos CP, Vasconcelos AC, Tormin Borges Cro-sara PF, Coelho dos Anjos G, Becker CG, Santos Guimaraes RE. Apoptosis in eosinophilic nasal polyps treated in vitro with
Mitomycin C. Braz. J. Otorhinolaryngol. 2012;78(3):32-7. doi: 10.1590/S1808-86942012000300007
9. Davidsson A, Anderson T, Hellquist HB. Apoptosis and phagocytosis oftissue-dwelling eosinophils in sinonasal polyps. Laryngoscope. 2000;110:111-6. doi: 10.1097/00005537-200001000-00020
10. Матвеева Н.Ю. Апоптоз: морфологические особенности и молекулярные механизмы. Тихоокеанский медицинский журнал. 2003;4:12-6. [Matveeva NYu. Apoptoz: morfologicheskie osobennosti i molekulyarnye mekhanizmy. Tihookeanskij medi-cinskij zhurnal. 2003;4:12-6. (In Russ.)]
11. Dubikov AI, Kalinichenko SG. Small molecules regulating apoptosis in the synovium in rheumatoid arthritis. Scand J. Rheumatol. 2010;39(5):368-72. doi: 10.3109/03009741003742771.
12. Henson PM, Bratton DL. Antiinflammatory effects of apoptotic cells. J. Clin. Invest. 2013;123(7):2773-4. doi: 10.1172/JCI69344
13. Küpper DS, Valera FC, Malinsky R, Milanezi CM, Silva JS, Tamashiro E, Anselmo-Lima WT. Expression of apoptosis mediators p53 and caspase 3, 7, and 9 in chronic rhinosinusitis with nasal polyposis. Am J Rhinol Allergy. 2014;28(3):187-91. doi: 10.2500/ajra.2014.28.4022
14. Cakabay T, Sayin I, Erdu O, Muhammedoglu A, Tekke NS, Kayhan FT. Role of Apoptosis in the Pathogenesis of Nasal Polyps Based Upon Galectin-3 Expression. Journal of Craniofacial Surgery 2017;28(1):280-4. doi: 10.1097/ SCS.0000000000003174
15. Frendo M, Hâkansson K, Schwer S, Ravn AT, Meteran H, Porsbjerg C, Backer V, von Buchwald C. Exhaled and nasal nitric oxide in chronic rhinosinusitis patients with nasal polyps in primary care. Rhinology. 2018;56(1):59-64. doi: 10.4193/ Rhin17.111
