CC BY
20
Литература
1. Брискин Б. С., С мл ко к Г.М., Бородин Л.С., Марчснков А.. Обтурационная непроходимость при раке оболочной кишки !! Хирургия. - 1999. - №5. - С.37-40.
2. Гельфанд Б.Р.. Гологорский В.А.. Ьуриевич С.З. и др. Селективная декоптами нация и детоксикаиня желудочно-кишечного тракта в неотложной абдоминальной хирургии и интенсивной терапии U Вестник интенсивной терапии. - 1995. - №1. - С.8-11.
3. Гринев М.В., Кулибаба Д.М., Новожилов В.Н. Клинические аспекты токсико-септического шока при перитоните // Вестник хирургии. - 1995. - №1. - С.7-11.
4. Гусев В.И. Варианты прецичи о иного шва при операциях на толстой кишке // Хирургия. - 1995. -
Ж5.-С.52-57..
5. Егоров В.И. Механические методы оценки заживления желудочно-кишечных соединений // Анналы хирургии. - 20G1. -№3. -С.25-28.
6. Неригудов С.И. Роль эндогенной кишечной микрофлоры в патогенезе разлитого перитонита:
Авторсф.'дис. ... канд. мед. наук;-Л., 1992. -20с.
УДК 616.36-002-089
ЛИЗОЦИМРЕГУЛИРУЮЩАЯ ФУНКЦИЯ ПЕЧЕНИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И ЧАСТИЧНОЙ ГЕПАТЭКТОМИИ
П.Н.Савилов, С.Я.Дъячкова
Воронежская государственная медицинская академия
В жепернменте на животных установлена способность печени здорового организма обогащать лшоцимом протекающую через неё кровь. При хроническом гепатите н после частичной генаокгомнц выявлено снижение лнзоцим-обогащающей функции печени. Применение частичной геиаюктомии на фоне хронического генагига усиливало ингибмрующее влияние генагогокенна на способность печени обогащать лщоцнмом протекающую через нес кровь.
В настоящее время частичная гепагжтомия является не только радикальным средством в лечении очаговых заболеваний печени [4], но и применяется в качестве стимулятора обратимости склеротических процессов в печени при сё хроническом диффузном поражении |6|. lice это требует глубокого и летального изучения влияния операционной агрессии на состояние функционально-метаболических систем как самой печени.так и организма у целом.
Исследованиями установлено, что резекция печени, как и длительное действие на организм геиатотоксина, вызывает снижение бактерицидной активности артериальной крови по отношению к иатогеиным штаммам Грам(+) и Грам(-) микрофлоры [8. 9J. В спою очередь, бактерииидноеть крови представляет собой совокупность гуморальных факторов естественной резистентности организма, направленных на уничтожение- микробов и их токсинов. К ним относятся система комплемента, нормальные антитела, ß-лизины. лизоцим и др. [2]. Бактерицидное действие лизоцима основано иа его способности, как фермента, разрушать муреин, входящий в клеточную оболочку бактерий, что приводит к их разрушению или опсоннзации с последующим захватом фагоцитами [], 2]. Считается, что в крови основным источником лизоцима плазмы являются гранулоциты [2]. Между тем способность печени регулировать содержание и активность лизоцима в протекающей через неё крови в норме и при патологии не исследована.
Целью настоящей работы явилось изучение активности лизоцима в протекающей через печень крови при хроническом гепатите и частичной гепатэктомии.
Методика исследования. Опыты проведены на беспородных белых крысах обоего пола массой 180-230 г. Хронический гепатит воспроизводили путем введения тетрахлорметана (ССЦ, 0,1 мл 50% раствор на оливковом масле / 100 г. массы тела, подкожно, через сутки в течение 65 суток с двумя двухнедельными перерывами между 6 и 7, 13 и 14 инъекциями). Частичную гепатэктомию (ЧГЭ) проводили путём удаления электроножем части левой доли печени, что составляло 15-20% от массы органа. У животных с хроническим ССЦ-гепатитом ЧГЭ осуществляли на 65-е сутки введения токсина сразу после последней инъекции.
Животные были разделены на 5 серий опытов:
□ 1-я серия - здоровые (и нтактные) животные;
□ 2-я серия - животные, исследованные на 65-е сутки введения ССЦ;
□ 3-я серия - животные с хроническим ССЦ-гепатитом, исследованные на 3-й сутки после отмены гепатотоксина и лапаротомии;
□ 4-я серия - животные с хррнческим гепатитом, исследованные на 3-й сутки после ЧГЭ;
□ 5-я серия - здоровые животные, исследованные на 3-й сутки после ЧГЭ. Объектом исследования служила кровь, которую забирали стерильными
инсулиновыми шприцами из аорты и воротной вены под микроскопом «МБС-1». Получение опекающей от печени венозной крови in situ проводили по разработанной нами (Савилов 11.Н.) оригинальной методике (know how). Последовательность забора крови была следующая: печёночные вены - воротная вена - аорта. Резекцию печени, забор крови и забой животных осуществляли под эфирным наркозом. Активность лизоцима в крови определяли чашечным способом с культурой Micrococcus lisodeticus [3]. Результаты обработаны статистически. с учётом параметрического критерия Стыодента.
Результаты исследования представлены в табл.1. Активность лизоцима в оттекающей от печени крови здоровых животных (1-я серия) достоверно превышала аналогичный показатель артериальной и портальной крови. При этом у всех животных данной серии опытов отмечались отрицательная артериовенозная (АВРл) и портовенозная (ПВРл) разницы по лизоциму. Это свидетельствует о способности интактной печени обогащать лизоцимом кровь, протекающую через её мнкро.циркуляторное русло. Активность лизоцима в артериальной и портальной крови достоверно не различались, однако артериопортальная разница (АПРл) по лизоциму у 70% животных 1-й серии была положительной. Это указывает как на' задержку лизоцима тканями желудочно-кишечного тракта, так и на его секрецию в полость кишечника.
На 65-е сутки введения ССЦ (2-я серия) обнаружено снижение активности лизоцима в артериальной, портальной и оттекающей от печени крови соответственно на 28%. 17% и 18%. При этом у 30% животных данной серии АВРл оставалась отрицательной, но снижалась в 3 раза по сравнению с нормой; у 40% она была положительной, а у 30% -' равной «0». Становилась положительной ПВРл у 40% животных исследуемой серии, у другой части животных (40%) она равнялась «0». Равной «0» становилась АПРл у 60% животных исследуемой серии. Следовательно, длительное действие гепатотоксина на организм не только снижает лизоцимобогащающую функцию печени, но и понижает активность лизоцима в самой крови.
Па 3-й сутки после отмены токсина и контрольной лапаротомии (3-я серия) отмечалось снижение (на 14%), по сравнению с 2-й серией, активности лизоцима только в кропи воротной вены, в результате чего она становилась на 28% ниже нормы.
В артериальной и оттекающей от печени крови она оставалась сниженной соответственно на 24% и 61%. Снижение активности лизоцима в крови воротной вены приводило к тому, что она становилась достоверно ниже (на 10%), чем в артериальной крови, хотя АПРл у 60% животных оставалась равной «0». Одновременно с этим АВРл становилась положительной у 88% животных, тогда как ПВРл - у 66%. Следовательно, отмена токсина не только не восстанавливает лизоцимобогащающую функцию печени, но и усиливает потребление лизоцима органами желудочно-кишечного тракта и гепатоцитами.
Таблица 1. Активность лизоцима (усл.ед.) в артериальной, портальной и
оттекающей от печени крови при хроническом гепатите и частичной гепатэктомии (М*т)
Кровь Серия опытов (в скобках - количество экспериментальных животных)
1 (п=10) 2(п=10) з (п-9) 4 (п=10) 5 (п-10)
Арт. 1,56±0,14 1,13*0,02* 1,15*0,02* 1,01±0,06'*Ф 1,24*0,1
П.В. 1,44±0,09 1,19*0,06* 1,03*0,01 1,04*0,02*« 1,48*0,11
КОП 2,85*0,42 а ▼ 1,24*0,08* 1,11 ±0,03* 1,01*0,003*4 1,56*0,17*
АВРл -1,02*0,27 -0,3*0,1 30% 0,9±0,0140% «0»-зо% 0,15±0,02 88% «0» - 100% -0,96*0,11 40% «0» - 60%
ПВРл -1,57*0,44 0,21 ±0,1 40% «0» - 40% 0,14±0,03 66% «0» - 80% 0,43*0,04 40% -0,52*0,15 35%
АПРл 0,44*0,05 «0» - 60% «0» - 66% «0» - 80% -0,82*0,03
Обозначения: Арт. - артерия; П.В. -портальная вена; КОП - венозная кровь, оттекающая от печени; АВРл, ПВРл, АПРл - соответственно артериовенозная, портовенозная и артериопортальная разница пй лиэоциму; А - достоверность различий (р0,05) по сравнению с артериальной кровью в данной серии опыто.в; ▼ - достоверность различим (р<(),05) по сравнению с кровью воротной вены в данной серии опытов; * - достоверность различий (р<0,05) по сравнению с нормой; • - достоверность различий (р<0,05) по сравнению с 2-й серией опытов; ♦ - достоверность различий (р<0,05) по сравнению с 3-й серией опытов.
Па 3-й сутки после ЧГЭ у животных с хроническим ССЦ-гепатитом (4-я серия) обнаружено спйжение (на 10%) активности лизоцима в оттекающей от печени крови по сравнению с 3-й серией опытов. В результате этого она становилась на 65% ниже нормы. В артериальной и портальной крови активность лизоцима была снижена по сравнению с нормой соответственно па 35% и 28%. При этом практически у всех животных исследуемой серии АВРл. ПВРл и АПРл становились равными «0». Следовательно, ЧГЭ на фоне хронического гепатита, усиливая ингибирующее влияние длительного действия гепатотоксина на лизоцимобогащаующую функцию печени, приводила к полному подавлению активности фермента в плазме крови.
У здоровых животных на 3-й сутки после ЧГЭ (5-я серия) активность лизоцима в артериальной и портальной крови* достоверно не отличались от нормы, тогда как в отгекающей от печени крови она снижалась на 45%. В результате этого у 60% животных АВРл становилась равной «0», Отрицательная ПВРл сохранялась только у 35% животных 5-й серии, но при этом была в 3 раза ниже нормы, у 40% она становилась положительной. Изменялась и АПРл, которая у 75% животных исследуемой серии становилась отрицательной, указывая на повышенное поступление лизоцима в портальную систему из органов желудочно-кишечного тракта. Следовательно, снижение активности лизоцима в отгекающей от печени крови здоровых животных на 3-й сутки после ЧГЭ не сопровождается изменениями активности лизоцима в артериальной и портальной крови, в отличие от животных с хроническим гепатитом.
Обсуждение. Увеличение активности лизоцима крови при её прохождении через интактную печень свидетельствует о том, что лизоцим не только образуется в печени, как это было обнаружено ранее [1], но и активно выводится в кровь. Печень, таким образом, наряду с гранулоцитами, принимает активное участие в обогащении плазмы крови лизоцимом. При этом основная роль в её обеспечении данным ферментом, вероятно, принадлежит нeйтpoфилáм. Не случайно, снижение активности лизоцима в крови, оттекающей от печени, у здоровых животных после ЧГЭ не приводило к снижению активности лизоцима в артериальной и в портальной крови.
При хроническом диффузном поражении печени имеют место не только деструкция печёночных синусоидов [7,11], но и снижение функциональной активности лейкоцитов периферической крови [5]. В этих условиях ЧГЭ, выступая в качестве дополнительного стрессового агента, усиливает негативное влияние ССЦ на лизоцимобогащающую функцию печени. На фоне угнетения функциональной активности лейкоцитов, это приводит к полному подавлению активности лизоцима в плазме крови. Исходя из этого становится понятной причина снижения бактерицидной активности крови по отношению к патогенным штаммам Грам (+) и Грам (-) организмов, наблюдающееся после резекции печени в условиях хронического гепатита [Ю].
Заключение. Печень крысы обладает способностью обогащать лизоцимом протекающую через неё кровь. Частичная гепатэктомия, в объёме 15-20% от массы органа, как и длительное действие на организм крысы гепатотоксина (СС14), приводит к снижению лизоцимобогащающей функции печени. В свою очередь, применение ЧГЭ на фоне хронического гепатита усиливает ингибирующее влияние гепатотоксина на способность печени обогащать протекающую через неё кровь лизоцимом, что приводит к полному подавлению активности лизоцима в плазме крови. У здоровых животных после частичной геиатэктомии не происходит снижения активности лизоцима в артериальной и портальной крови, несмотря на её снижение в крови, оттекающей от оперированного органа.
Литература
] Абеуев Х.Б. Влияние глюкокортикоидов на функциональную активность лейкоцитов и содержание лизоцима в органах белых крыс//Автореф. дис, ... канд. мед. наук.- Караганда, 1974.-17с.
2. Верш и гора А. Е. Основы иммунологии. - Киев: «Вы ща школа», 1980.
3. Дьячкова С.Я., Кузьмина Н.И. Способ определения лизоцима в сыворотке: Рац, предложение ВГМА, №25-46 от 4.03.02.
4. Зубахин А.А., Кутина С.Н., Маянский Д.Н. Функциональное состояние системы гемостаза на разных стадиях гепатофиброза у мышей // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 1992. - №7. -С.22-24.
5. Журавлёв В.А. Хирургия гемангиом печени // Вестн. хирургии. - 1986. - №7. - С.27-29.
6. Малышев Ю.И., Пышкин С.А. Новый способ лечебной резекции печени при циррозе и хроническом гепатите //Рак печени. -М., 1977.- С. 123-124.
7. Прохоров В.А, Мироджов Г.Е., Алексеев В.А. Влияние кислорода на пропускную способность изолированной печени крыс при токсическом гепатите // Экспериментальная патология печени: Сб. научн. Работ. - Душанбе, 1977. - Вып. 1. - С. 150-158.
8. Савилов П.Н., Кузьмина Н.И. Бактерицидность артериальной крови после краевой резекции печени в эксперименте // Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины: Мат. Всеросс. конф. мол. ученых. - Воронеж, 2000. - С. 147-148.
9. Савилов П.Н.. Кузьмина Н.И., Дьячкова С.Я. Изучение бактерицидное™ крови при хроническом тетрахлорметановом гепатите И С.-Петербургские научные чтения (2001) - СПб, 2001. - Ч. 1, -С. 148-149.
10. Савилов П.Н., Кузьмина Н.И., Дьячкова С.Я., Яконлев В.Н. Бактерицидная активность крови после частичной гепатэктомии интактной и патологически измененной печени И Вестник ВГУ. - Серия: химия, биология. - 2001.-№1. - С.47-49.
11; Muro П., Shirosava И., Kosugui I., Ito 1. Defect of sinusoidal Fs-receptors and immune complex uptake in CC14 - induced liver cirrhosis in rats H Gastroenterology. - 1980. - Vol.94, №1. - P.200-210.
Ill
