Лизофосфатидиловая кислота как биомаркер рака яичника Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Новые технологии

ЛИЗОФОСФАТИДИЛОВАЯ КИСЛОТА КАК БИОМАРКЕР РАКА ЯИЧНИКА

Р.Р. Кидралиев, Л.В. Адамян, К.И. Жорданиа, В.М. Говорун,

Н.Е. Кушлинский, А.С. Кидралиева

Кафедра репродуктивной медицины и хирургии ФПДО Московского государственного медико-стоматологического университета; РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН; НИИ физико-химической медицины, Москва

LYSOPHOSPHATIDYLIC ACID AS A BIOMARKER OF OVARIAN CANCER R.R. Kidraliyev, L.V. Adamyan, K.I. Zhordania, V.M. Govorun, N.Ye. Kushlinsky, A.S. Kidraliyeva

Department of Reproductive Medicine and Surgery, Moscow State Medical Stomatological University; N.N.Blokhin Russian Cancer Research Center, Russian Academy of Medical Sciences; Research Institute of Physicochemical Medicine, Moscow

The plasma level of lysophosphatidylic acid (LPA) in patients with ovarian cancer is significantly higher than that in healthy women. The level of the fraction of 16:0-LPA in patients with this condition is significantly higher than that in both apparently healthy women and patients with borderline and benign ovarian neoplasms, or gynecological diseases of non-tumor nature.

Высокая смертность при раке яичника (РЯ) обусловлена главным образом отсутствием эффективной диагностики на ранних стадиях заболевания. Ранняя диагностика РЯ остается главной нерешенной проблемой в онкогинекологии. К сожалению, предлагаемые скрининговые программы для выявления РЯ не отвечают большинству требований ВОЗ к скринингам в онкологии. Во-первых, до настоящего времени не разрешены вопросы патогенеза заболевания. Во-вторых, предлагаемые диагностические тесты не являются строго специфичными для выявления РЯ, особенно на ранних стадиях, так как дают высокий процент ложноотрицательных результатов. В-третьих, окончательно не определена лечебная тактика при различной степени распространения опухолевого процесса, а результаты лечения РЯ остаются неудовлетворительными.

В сложившейся ситуации не прекращается поиск новых методов диагностики РЯ. Одним из наиболее перспективных направлений является использование опухолевых маркеров. Широко применяемый биомаркер СА-125 не является строго специфичным для РЯ и может быть повышен при других локализациях опухолей серозно-папиллярного строения. Уровень СА-125 редко повышен в сыворотке крови пациенток с I стадией РЯ и может быть повышен у больных с доброкачественными гинекологическими заболеваниями. Определение сывороточного СА-125 совместно с ультразвуковым скринингом более специфично, но позволяет выявлять только около половины больных с ранними стадиями РЯ. Кроме того, до сих пор практически невозможно прогнозировать вероятность и сроки возникновения рецидива заболевания. Вместе с тем прогресс в понимании биологии РЯ позволил идентифицировать многочисленные биологически активные вещества, участвующие в процессе развития злокачественной опухоли и непосредственно являющиеся продуктом этого процесса.

Лизофосфатидиловая кислота ^РА) — простой биоактивный лизофосфолипид, обладающий многочисленными функциями в различных типах клеток. LPA усиливает пролиферацию и диссеминацию злокачественных клеток яичника, а также повышает их резистентность к препаратам платины. LPA увеличивает продукцию фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и активатора плазминогена урокиназного типа (иРА), а также уровень самой LPA в злокачественных клетках яичника. Уровни LPA постоянно повышены в плазме крови и асцитической жидкости больных РЯ [1—5].

Образующаяся в результате активации тромбоцитов, фибробластов, а также других клеток LPA является нормальным компонентом сыворотки крови, где она присутствует в связанной с альбумином форме в физиологической концентрации 2—20 мкмоль/л. Возможен и внеклеточный путь образования LPA. В частности, экзогенная фосфолипаза D способна гидролизовать лизофосфатидилхолин с последующим образованием LPA, что в дальнейшем ведет к активации рецепторов LPA. Данное взаимодействие медиатора и рецептора приводит к внутриклеточному высвобождению Са2+, активации митоге-нактивируемых протеинкиназ, КЬ0-зависимому изменению цитоскелета, стимуляции пролиферации клетки [4—6]. Имеются данные о том, что сами злокачественные клетки яичника синтезируют LPA в больших количествах, в то время как нормальные клетки яичника не образуют LPA [3].

Было установлено, что специфические G-про-теинпарные рецепторы ^РСК^з), присутствующие на поверхности многих типов клеток, отвечают за клеточные эффекты LPA. GPCRs кодируются EDG и называются рецепторами эндотелиального диф-ференцировочного гена (EDGRs). При этом EDG2, EDG4, EDG7 являются высокочувствительными рецепторами LPA, в то время как EDG1 относится

ю

Ж

Е Н

-ЕПР.

ДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ 1-22

к низкочувствительным рецепторам. Уровни рецепторов EDG4 и EDG7 постоянно повышены в эпителиальных клетках РЯ за счет аберрантного ответа злокачественных клеток на воздействие LPA. Рецепторы EDG4 отсутствуют в нормальных эпителиальных клетках яичника, в то время как уровни EDG2, EDG3 и EDG5 в клетках нормального эпителия яичника значительно выше соответствующих уровней в злокачественных клетках яичника. EDG2 может являться негативным регуляторным рецептором LPA, индуцирующим апоптоз в злокачественных клетках яичника и противодействующим эффектам с других рецепторов LPA. Клетки РЯ не экспрессируют EDG1 мРНК, но имеют различные уровни EDG2 мРНК и часто экспрессируют EDG4 мРНК [1, 2, 5, 6].

Осуществление многочисленных эффектов LPA зависит от экспрессии новых рецепторов злокачественными клетками яичника. Таким образом, LPA имеет существенное значение для патофизиологии и исхода заболевания.

По последним данным, другие близкие к LPA лизофосфолипиды, такие как лизофосфатидилхолин и лизофосфатидилинозитол, также обнаруживаются в повышенных концентрациях в асцитической жидкости и плазме крови больных РЯ и могут являться потенциальными биомаркерами заболевания [7, 8].

Количественное определение уровней LPA в плазме крови в сочетании с другими клиническими и морфологическими показателями может иметь важное значение в диагностике РЯ, в том числе дифференциальной, позволит индивидуально подходить к выбору методов лечения этой категории пациенток, а также оценивать прогноз болезни и выявлять ранний рецидив заболевания.

Целью нашего исследования было определение содержания плазменной LPA и анализ ее содержания в зависимости от стадии заболевания, распространенности опухолевого процесса и гистологического типа новообразования. В работе был использован метод масс-спектрометрии, позволяющий одновременно выявлять и подсчитывать различные подтипы LPA. Данный метод является в несколько раз более чувствительным, чем ранее использовавшийся метод газовой хроматографии.

Материалы и методы

Проведено клиническое и лабораторное обследование 135 женщин, которые были разделены на 4 группы.

Основную группу составили 10 (14,3%) женщин с I стадией заболевания, 16 (22,9%) со II, 40 (57,1%) с III и 4 (5,7%) больных с IV стадией. У 10 женщин был рецидив РЯ. Возраст обследуемых основной группы составлял от 25 до 81 года (средний возраст 53,8 + 12,5 года).

Из фоновых заболеваний были отмечены миома матки — 12 (17,1%) больных, аднексит — 7 (10%), а также эндометриоз, киста яичника, дисфункция,

эрозия шейки матки. В большинстве наблюдений фоновых заболеваний выявлено не было.

Гистологически в 47 (67,1%) случаях была выявлена серозная аденокарцинома, в 8 (11,4%) — эндо-метриоидная аденокарцинома, в 7 (10%) — муциноз-ная аденокарцинома, в 6 (8,6%) — светлоклеточная аденокарцинома и в 2 (2,9%) — опухоль Бреннера (злокачественный вариант). Высокая степень диф-ференцировки опухоли была обнаружена в 11 (15,7%) наблюдениях, умеренная — в 21 (30%), низкая - в 38 (54,3%).

Среднее значение СА-125 в основной группе больных было равно 405,0+153,3 МЕ/мл. В 46 (65,7%) случаях СА-125 был выше порогового уровня (>35 МЕ/мл). Нужно отметить, что повышенная концентрация СА-125 была выявлена только у 2 (20%) из 10 пациенток с I стадией заболевания и у 8 (50%) из 16 со II стадией, а также у 8 (80%) из 10 больных с рецидивом РЯ.

Вторую группу составили 25 больных, из которых у пяти были диагностированы пограничные серозные папиллярные цистаденомы. Также во 2-ю группу вошли 16 больных с доброкачественными новообразованиями яичника (серозная цистаденома, муцинозная цистаденома, тератома, эндометриоид-ная киста) и 4 пациентки с гинекологическими заболеваниями неопухолевой природы (воспалительные процессы придатков матки, эндометриоз). Кроме того, у 6 пациенток этой группы была также диагностирована миома матки. Возраст больных данной группы составил от 19 до 70 лет (44,7+16,6 года).

Средний уровень СА-125 в данной группе пациенток составил 144,9+94,7 МЕ/мл. Повышенная концентрация СА-125 была отмечена у 12 (48%) больных. Необходимо особо отметить повышенные уровни СА-125 у трех больных, страдающих серозными пограничными опухолями яичника, что с учетом морфологического диагноза и доброкачественного течения заболевания является ложноположительным результатом.

В 3-ю группу вошли 20 больных, которых можно разделить на две подгруппы: больные раком шейки матки (и=12; 60%) и больные раком тела матки (и=8; 40%). Средний возраст больных данной группы составил 54,2+14,9 года, средний уровень СА-125 — 56,8+27,1 МЕ/мл. Повышенная концентрация СА-125 была выявлена у 3 больных раком шейки матки и у 2 пациенток с раком тела матки.

LPA является естественным метаболитом сыворотки, высвобождающимся при хранении и активации тромбоцитарной массы после взятия крови, поэтому все пробы крови тщательно собирались в специальные пробирки с EDTA (вакутейнеры). Кровь у больных брали из локтевой вены утром натощак. Плазму получали путем центрифугирования в течение 10 мин при 2000 об/мин. При этом четко хронометрировалось время, через которое удавалось получить плазму, — 15 мин. После этого пробирки с плаз-

Новые технологии

Новые технологии

Таблица 1. Средние уровни LPA (мкмоль/л) в плазме крови больных и практически здоровых женщин

Подтип LPA РЯ (п=70) Пограничные Злокачественные Контроль

и доброкачественные гинекологические (и=20)

новообразования яичника новообразования

и гинекологические другой локализации (и=20)

заболевания неопухолевой природы (п=25)

16:0-LPA

18:0-LPA

18:1-LPA

18:2-LPA

20:4-LPA

22:6-LPA

16:0-A-LPA

18:0-A-LPA

Total LPA

1,61+0,27*

0,89+0,10**

0,37+0,12**

0,39+0,08**

0,27+0,04**

0,19+0,02**

0,14+0,03

0,11+0,02

0,50+0,15*

0,68+0,17*

0,53+0,18**

0,52+0,16**

0,39+0,10**

0,30+0,08**

0,32+0,08**

0,10+0,03

0,10+0,03

0,37+0,12*

0,74+0,22*

0,49+0,17**

0,45+0,14**

0,41+0,11**

0,35+0,09**

0,26+0,07**

0,12+0,04

0,04+0,02

0,36+0,12*

0,20+0,08

0,10+0,02

0,03+0,02

0,07+0,04

0,02+0,02

0,03+0,02

Н.д.

0,03+0,02

0,07+0,05

Примечание. Здесь и в табл. 2: * p<0,01, **p<0,05 по сравнению с контролем. Н.д. — нет данных.

мой помещали в специальный контейнер с температурой 5°С, в котором их доставляли в лабораторию биохимии НИИ физико-химической медицины, где немедленно замораживали при температуре -70°С. В работе была использована методика экстракции липидов из плазмы по Фолчу. К 0,5 мл плазмы крови добавляли 2,0 мл смеси хлороформ:метанол (2:1) и 0,1 мл 6N раствора HCl. После встряхивания в течение 1—2 мин пробы инкубировали при комнатной температуре и затем центрифугировали в течение 10 мин при 2000 об/мин. Нижнюю фазу, содержащую липиды, переносили в чистую стеклянную пробирку и упаривали после объединения со вторым хлороформным экстрактом из водной фазы при 30°C под током азота. Упаренные липиды растворяли в 50 мкл метанола и наносили 5—10 мкл на колонку Zorbax Eclypse XDB-C18 2,1 х 150 мм, 5 мкм. Хроматографию проводили в градиенте ацетонитрил/метанол 0 — 100 на хроматографе Agilent 1100, укомплектованном автосэмплером, оптическим и турбидиметрическим детектором и соединенном с масс-спектрометрическим детектором Agilent SL. Скорость потока 1 мл/мин, время хроматографии 25 мин. Получение спектров осуществляли в положительном и отрицательном режиме с напряжением на игле небулайзера 1,5 кВ и подогревом иглы до 150°C.

Результаты

Во всех 4 группах сравнения определялись значения 8 подтипов LPA (16:0-LPA, 18:0-LPA, 18:1-LPA, 18:2-LPA, 20:4-LPA, 22:6-LPA,

16:0-A-LPA,18:0-A-LPA) и общий средний показатель LPA — Total LPA.

Средние значения фракций 16:0-LPA, 18:0-LPA и 18:1-LPA в трех группах сравнения были достоверно выше соответствующих показателей в группе контроля (табл. 1). При сравнении результа-

тов основной группы с данными 2-й и 3-й групп также были выявлены существенные отличия. Значения фракций 16:0^РА и 18:0^РА достоверно отличались от показателей второй и третьей групп сравнения (р<0,01 и p<0,05 соответственно). Кроме того, общие показатели LPA основной и контрольной группы достоверно различались ^<0,01). Отмечено достоверное отличие некоторых фракций LPA во 2-й и 3-й группах от показателей в группе контроля. Во всех других случаях достоверных различий выявлено не было. Необходимо отметить наиболее высокий показатель LPA для фракций 16:0^РА и 18:0^РА (1,61+0,27 и 0,89+0,10 соответственно) при РЯ. При этом при сравнении средних значений 16:0^РА и 18:0^РА при РЯ с соответствующими значениями в других группах сравнения более высокая достоверность была отмечена для фракции 16:0-LPA. Данный факт может свидетельствовать о том, что подтип 16:0^РА является наиболее чувствительной фракцией LPA при РЯ.

Средние значения всех фракций LPA, а также общее содержание LPA у больных РЯ значительно выше ^<0,01 и p<0,05) соответствующих показателей в группе контроля (табл. 2). При этом можно отметить наиболее высокие показатели 16:0^РА при всех стадиях заболевания. Подтип 16:0^РА оказался наиболее показательным среди всех фракций LPA независимо от стадии заболевания. Значение 16:0^РА выше порогового уровня

1,0 мкмоль/л считалось повышенным. Достоверных различий между группами, выделенными в зависимости от стадии РЯ, обнаружено не было.

Из 10 пациенток с I стадией РЯ 9 (90%) имели повышенный уровень 16:0^РА и 2 (20%) больные — СА-125. При этом у всех больных с I стадией заболевания, у которых СА-125 был отрицательным, 16:0^РА

ю

Ж

Е Н

репр*

ДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ 1-22

Таблица 2. Средние значения 16:0-LPA (мкмоль/л) в контроле и при РЯ с учетом стадии заболевания

Подтип LPA I стадия II стадия III стадия IV стадия Группа контроля

(п=10) (п=16) (п=40) (п=4) (п=20)

16:0^РА 1,52+0,39* 1,62+0,24* 1,47+0,16* 1,51+0,17* 0,20+0,08

18:0^РА 0,88+0,14* 0,76+0,18* 0,81+0,17* 0,83+0,07* 0,10+0,02

18:1^РА 0,26+0,06* 0,41+0,07* 0,31+0,04* 0,54+0,09* 0,03+0,02

18:2^РА 0,34+0,02* 0,42+0,04* 0,29+0,04* 0,75+0,10* 0,07+0,04

20:4^РА 0,33+0,03* 0,28+0,03* 0,27+0,05* 0,12+0,02* 0,02+0,02

22:6^РА 0,08+0,04** 0,08+0,01** 0,30+0,05** 0,11+0,02** 0,03+0,02

16:0-А^РА 0,13+0,01 0,11+0,03 0,19+0,08 0,08+0,02 Н.д.

18:0-А^РА 0,06+0,01* 0,11+0,04* 0,15+0,03* 0,09+0,06* 0,03+0,02

Общая LPA 0,45+0,05* 0,47+0,07* 0,47+0,05* 0,50+0,11* 0,07+0,05

был выше порогового уровня. Из 16 пациенток со II стадией РЯ 16:0^РА был повышен у 14 (87,5%) и только у 8 (50%) женщин был выявлен положительный СА-125. Из 44 больных с III и IV стадиями болезни СА-125 был выше нормы у 36 (81,8%), в то время как 16:0^РА был положителен у 43 (97,7%) больных.

В основной группе из 70 больных уровень 16:0-LPA был выше порогового (>1 мкмоль/л) у 66 (94,3%) женщин, тогда как уровень СА-125 был выше нормы (>35 МЕ/мл) у 46 (65,7%) больных РЯ. Необходимо учесть, что маркер СА-125 ассоциирован в основном с серозной формой РЯ и при других морфологических формах (муцинозная, эндометриоидная, светлоклеточная) даже при запущенных стадиях повышается не более чем у 30—40% больных.

Среднее содержание всех подтипов LPA при рецидивах заболевания было высоким и достоверно не

Таблица 3.

отличалось от соответствующих показателей при различных стадиях РЯ.

Следует отметить высокое содержание подтипа 16:0^РА и при рецидивах заболевания [9]. Из 10 больных с рецидивом РЯ у 8 (80%) отмечалось повышение уровня 16:0^РА выше порогового. В то же время повышение концентрации СА-125 наблюдалось также у 8 (80%) больных. Необходимо подчеркнуть установленный нами важный факт, что у больных с отрицательными показателями одного из маркеров другой показатель был выше нормы. Таким образом, в нашем исследовании у всех 10 (100%) больных с рецидивом заболевания были повышены либо оба, либо один из маркеров, что свидетельствовало о возврате заболевания.

Уровни фракций 16:0^РА и 18:0^РА отличались от соответствующих значений в группах сравне-

Среднее содержание подтипов LPA (мкмоль/л) при РЯ, пограничных и доброкачественных новообразованиях яичника и гинекологических заболеваниях неопухолевой природы

Подтип LPA Пограничные Доброкачественные Гинекологические РЯ (п=70)

опухоли яичника (п=5) новообразования заболевания

яичника (п=16) неопухолевой

природы (п=4)

16:0^РА 0,79+0,15* 0,74+0,14* 0,52+0,06* 1,61+0,27

18:0^РА 0,58+0,13* 0,51+0,15* 0,65+0,03* 0,89+0,10

18:1^РА 0,52+0,14 0,54+0,14 0,18+0,07 0,37+0,12

18:2^РА 0,32+0,13 0,41+0,12 0,41+0,13 0,39+0,08

20:4^РА 0,25+0,12 0,29+0,11 0,24+0,12 0,27+0,04

22:6^РА 0,29+0,14 0,34+0,13 0,06+0,02 0,19+0,02

16:0-А^РА 0,08+0,02 0,14+0,03 0,15+0,03 0,14+0,03

18:0-А^РА 0,06+0,02 0,12+0,04 0,04+0,01 0,11+0,02

Общая LPA 0,36+0,05 0,39+0,03 0,28+0,02 0,50+0,15

Примечание. * p<0,05 по сравнению с РЯ.

Новые технологии

Новые технологии

ния с достоверностью p<0,05 (табл. 3). Для остальных подтипов LPA и общей LPA достоверных отличий выявлено не было. Нужно отметить наибольшую чувствительность первых двух фракций — 16:0^РА, 18:0^РА, уровень которых был наивысшим во 2-й группе. Средние значения фракций LPA в данной группе больных были несколько выше соответствующих показателей в группе контроля.

Уровни 16:0^РА были повышены у 1 (20%) из 5 больных с пограничными опухолями яичника, у 2 (12,5%) из 16 пациенток с доброкачественными новообразованиями яичника и не были повышены ни у одной из четырех больных гинекологическими заболеваниями неопухолевой природы. Уровни фракций 16:0^РА и 18:0^РА достоверно превышали соответствующие значения в группах сравнения ф<0,05). Для остальных подтипов LPA, включая общую LPA, достоверных различий выявлено не было. Нужно отметить наибольшую чувствительность первых двух фракций — 16:0^РА и 18:0^РА, содержание которых было наивысшим значением во 2-й группе. Средние значения фракций LPA в данной группе больных были несколько выше соответствующих показателей в группе контроля.

Всего в группе пациенток с пограничными и доброкачественными новообразованиями яичника и гинекологическими заболеваниями неопухолевой природы повышенный уровень СА-125 был отмечен у 12 (48%) из 25 больных. Повышенная концентрация 16:0^РА была выявлена у 3 (12%) женщин данной группы. При этом ни у одной больной гинекологическими заболеваниями неопухолевой природы уровень 16:0^РА не был выше порогового [9].

Нами получены очень интересные результаты определения уровней LPA у больных с пограничными серозными опухолями яичника: при этой патологии только у одной больной отмечалось повышение уровня 16:0^РА, в то время как концентрация СА-125 была выше нормы в 60% случаев. Несмотря на малое количество наблюдений использование метода определения 16:0^РА у данной категории больных представляется весьма перспективным и требует дальнейших исследований.

Сравнительный анализ диагностической чувствительности онкомаркеров во всех исследуемых группах показал, что чувствительность 16-0^РА при РЯ (94,3%) значительно превосходит таковую для СА-125 (65,7%). Специфичность 16:0^РА (87,7%) также была выше специфичности СА-125 (72,3%). При этом нужно учитывать, что маркер СА-125 ассоциирован в основном с серозной формой РЯ, в то время как в нашем исследовании серозная аденокарцинома была обнаружена в 47 (67,1%) наблюдениях из 70.

Чувствительность и специфичность 16:0^РА и СА-125 в группе пограничных и доброкачественных новообразований яичника и гинекологических заболеваний неопухолевой природы составили 12 и 35,5% и 48 и 52,7% соответственно. При сравнении чувствительности 16:0^РА и СА-125 при злокачественных гинекологических новообразованиях другой локализации не было выявлено существенной разницы между показателями (40 и 48,7%).

Наши данные позволяют сделать вывод, что 16:0^РА более чувствителен и специфичен, чем СА-125, при РЯ и менее специфичен при пограничных и доброкачественных новообразованиях яичника и гинекологических заболеваниях неопухолевой природы. Следовательно, сочетание данных двух методов исследования, несомненно, повысит качество диагностики РЯ.

Высокие чувствительность и специфичность масс-спектрометрии как метода определения уровня 16:0^РА в плазме крови также указывают на возможность использования 16:0^РА в качестве биомаркера как на ранних стадиях заболевания, так и при его рецидивах. Однако данный метод является дорогостоящим, и поэтому необходима разработка других, более доступных, но не менее точных, чем масс-спектрометрия, методов определения LPA.

Данное исследование показывает, что уровень фракции 16^РА в плазме крови действительно может представлять собой потенциальный биомаркер РЯ, особенно на ранних стадиях развития процесса, а также при отрицательных показателях СА-125 при рецидивах заболевания. Однако полученные нами данные требуют подтверждения в более широких клинических исследованиях.

ЛИТЕРАТУРА

1. Contos J.J., Ishii I., Chun J. Lysophosphatidic acid receptors. Mol Pharmacol 2000;58(6):1188—96.

2. Eder A.M., Sasagawa T., Mao M. et al. Constitutive and lysophosphatidic acid (LPA)-induced LPA production: role of phospholipase D and phospholipase A2. Clin Cancer Res 2000;6(6):2482-91.

3. Fang X., Gaudette D., Furui T. et al. Lysophospholipid growth factors in the initiation, progression, metastases, and management of ovarian cancer. Ann N Y Acad Sci 2000;905:188-208.

4. Fang X., Yu S., Bast R.C. et al.

Mechanisms for lysophosphatidic acid-induced cytokine production in ovarian cancer cells. J Biol Chem 2004;279(10):9653—61.

5. Fujita T., Miyamoto S., Onoyama I. et al. Expression of lysophosphatidic acid receptors and vascular endothelial growth factor mediating lysophosphatidic acid in the development of human ovarian cancer. Cancer Lett 2003;192(2):161—9.

6. Hu Y.L., Tee M.K., Goetzl E.J. et al. Lysophosphatidic acid induction of vascular endothelial growth factor expression in human ovarian cancer cells. J

Natl Cancer Inst 2001;93(10):762—8.

7. Sutphen R., Xu Y., Wilbanks G.D., Fiorica J. et al. Lysophospholipids are potential biomarkers of ovarian cancer. Cancer Epidemiol Biomarkers Prevent 2004;13(7):1185—91.

8. Xu Y., Shen Z., Wiper D.W. et al. Lysophosphatidic acid as a potential biomarker for ovarian and other gynecologic cancers. JAMA 1998;280(8):719—23.

9. Kidraliyev R., Adamyan L., Govorun V. et al. Lyzophospatic acid and ovarian cancer. Int J Gynecol Cancer 2005;15(Suppl 2):137.