CC BY
29
Since 1999 лпА&Г. Й Р " ISSN 2226-7425
Е - ISSN 2412-9437
The journalof scientific articles Журнал научных статей
?еаШ> я ¿¡¿Л Здоровье
& millennium ^ в XXI веке
£ducati01] 'образование
УДК 582.661.15:577.115.083(3)
ЛИПИДЫ СЕМЯН СОЛЯНКИ ИБЕРИЙСКОЙ (ЮЖНОЙ) (SALSOLA IBERICA (SENNEN&PAU) BOTSCH.) (S. AUSTRALIS R. BR.)
Аминова1 А.А., Ляшенко2 С.С., Юнусова3 С.Г., Денисенко2 О.Н., Юнусов3М.С.
1ФГБОУ ВО «Дагестанский государственный медицинский университет» МЗ РФ, г. Махачкала, Российская Федерация. 2Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет», г. Пятигорск, Российская Федерация. 3ФГБУН Уфимский институт химии РАН, г. Уфа, Российская Федерация.
Аннотация: Установлен состав нейтральных (НЛ), полярных липидов (ПЛ) и жирных кислот (ЖК) семян солянки иберийской (южной) семейства маревые флоры Республики Дагестан. Содержание НЛ в семенах с околоплодником составило 12.2% (от навески сырья), без околоплодника - 20.1%; содержание полярных липидов соответственно 1.7%. и 2.1%. Мажорными ненасыщенными ЖК являются а-линолевая (18:2, до 60%), олеиновая (18:0, до 32%) и у-линоленовая (у-18:3, до 8.5% в НЛ). Установлено, что околоплодник не оказывает влияния на состав ЖК липидов семян. Идентифицировали 6 классов НЛ (соответственно, % от суммы НЛ): сложные эфиры стеролов - 5.5; триацилглицериды- 82.2; свободные жирные кислоты - 2.8; диацилглицериды + стерины - 4.1; моноацилгицериды - 5.4. ПЛ разделили на гликолипиды (ГЛ) и фософоли-пиды (ФЛ). В составе фосфолипидов идентифицировали N-ацилфосфатидилэтаноламин, фосфатидилэтаноламин, фосфати-дилхолин, фосфатидилинозитол, фосфатидную кислоту; в составе липорастворимых компонентов - холестерол, кампесте-рол, стигмастерол, эргостенол, ситостерол, стигмастанол, стигмаст-7-ен-3-ол, стигмастерол и бетулин. Ключевые слова: нейтральные липиды, полярные липиды, фосфолипиды, липорастворимые компоненты, жирные кислоты, полиненасыщенные жирные кислоты, солянка иберийская (южная), семейство маревые, флора республики Дагестан
Род Salsola семейства Маревые Chenopodiaceae Vent. является известным алкалоидоносом. Еще в 1933 г. установлена структура алкалоидов сальсолина и сальсолидина, выделенных из Salsola Richteri [1]. Некоторые виды солянки широко используются в традиционной медицине, обладают успокаивающим, легким снотворным, общеукрепляющим, потогонным, мягким слабительным и противоглистным действием.
Солянка иберийская (южная) - травянистый однолетник, ареал распространения которого охватывает Европейскую часть России, Кавказ, Среднюю Азию, Монголию и Китай. В республике Дагестан произрастает в прибрежной зоне Махачкалы и Каспийска, Ки-зильюртовском и Кизлярском районах, с. Тарумовка, Самурскому лесу, около Дербента. Ранее в солянке иберийской были обнаружены углеводы, органические кислоты, сапонины, алкалоиды, флавоноиды, в семенах - жирное масло в количестве 17,5%. [2]. Нами был установлен состав и определено количественное содержание дубильных веществ, макро- и микроэлементов, аминокислот, антиоксидантов в траве солянки иберийской [3,4,5,6].
Целью настоящей работы явилось изучение липид-ного состава семян для обоснования возможности рационального комплексного использования растения. Данные по липидному составу семян солянки иберийской в литературе отсутствуют.
Результаты и обсуждение. В качестве объекта исследования использовали семена дикорастущей солянки иберийской Salsola ibérica (Sennen et Pau) Botsch. (S. australis R. Br.) флоры республики Дагестан (окрестности Каспийска, побережье Каспийского моря).
Целью работы являлось выделение всех групп нейтральных (НЛ) и полярных липидов (ПЛ): в том числе глико- (ГЛ) и фосфолипидов (ФЛ); разделение их на составляющие компоненты, идентификация и количественное определение всех классов липидов, установление состава их жирных кислот (ЖК) и липорас-творимых компонентов.
Предварительно количество липидов определяли в семенах с околоплодником и без него (семена). Нейтральные липиды извлекали гексаном, полярные -хлороформ-метанолом. Масличность семян (содержание НЛ) солянки иберийской с околоплодником составила 12.2% (от навески сырья), без околоплодника -20.1%; содержание полярных липидов соответственно 1.7%. и 2.1%. По содержанию масла в семенах (20.1%) их можно отнести к среднемасличным. Кислотное число, характеризующее степень зрелости семян, составило 5 мг КОН/г.
Для выделения жирных кислот (ЖК), определяющих в большей степени биологическую активность ли-
пидов, нейтральные, полярные липиды, ацилсодержа-щие классы НЛ подвергали гидролизу. Состав ЖК устанавливали методом ГЖХ анализа их летучих метиловых эфиров.
Для изучения влияния околоплодника, достаточно сложно отделяющегося от семян, на состав и содержание ЖК, определяли состав ЖК нейтральных и полярных липидов с околоплодником и без него (табл.1).
Таблица 1.
Состав жирных кислот нейтральных и полярных липидов Salsola ibérica (% от суммы ЖК)
НЛ ГЛ ФЛ
Кислота I* II** I II I II
Лауриновая (12:0) 0.03 - - 2.58 - -
Миристиновая (14:0) 0.38 0.54 1.87 2.63 1.86 2.17
Пентадекановая (15:0) - 0.12 1.00 2.53 0.81 0.37
Пальмитиновая (16:0) 5.59 5.99 13.16 12.24 8.54 13.20
Пальмитолеиновая (16:1) 0.85 0.98 1.68 1.75 1.27 2.03
Гексадекадиеновая (16:2) - - 7.65 2.75 3.75 4.04
Маргариновая (17:0) - 0.21 1.95 0.93 - -
Стеариновая (18:0) 1.41 1.02 3.29 3.26 2.28 1.61
Олеиновая (18:1) 25.33 21.83 30.31 16.13 32.98 11.50
а-Линолевая (а-18:2) 57.69 59.84 20.93 23.72 18.07 44.89
у-Линоленовая (у-18:3) 6.28 8.56 1.23 0.33 0.79 6.3
а-Линоленовая (а-18:3) 1.09 - 8.14 7.32 2.22 2.13
Арахиновая (20:0) 0.07 0.59 1.96 4.72 0.85 4.13
Гондоиновая (20:1) 0.33 0.1 - 4.26 0.59 -
Бегеновая (22:0) 0.49 0.12 - 7.1 - 0.43
Эруковая (22:1) 0.1 0.1 - - - -
Трикозановая (23:0) 0.1 - 0.86 - -
Лигноцериновая (24:0) 0.26 - 5.97 7.75 25.99 7.5
^Насыщенных 8.33 8.59 30.06 43.74 40.33 29.41
^Ненасыщенных 91.67 91.41 69.94 56.26 59.67 70.89
Примечание: *семена с околоплодником; ** семена без околоплодника
Как видно из приведенных данных (табл. 1), во всех липидах набор жирных кислот разнообразен и насчитывает до 18 компонентов. Основной по содержанию насыщенной кислотой является пальмитиновая (16:0), что характерно для высших растений, стеариновая (18:0) присутствует в незначительных количествах. Мажорными ненасыщенными ЖК являются: из моно-еновых - олеиновая (18:0, до 32%), из полиеновых - а-линолевая (18:2, до 60%), у-линоленовая (у-18:3, до 8.5% в НЛ) кислоты.
Составы ЖК нейтральных липидов (основная группа липидов семян) образцов I и II практически не отличаются. Суммарное содержание ненасыщенных ЖК в НЛ в обоих образцах выше 90%.
Данная закономерность не наблюдается в составе ЖК ПЛ (ГЛ и ФЛ, очень не значительны по содержанию) образцов I и II (табл.1), которые характеризуются повышенным содержанием насыщенных ЖК, особенно высокомолекулярных. Из литературных данных
известно [7], что в ЖК гликолипидов растений присутствует гексадекадиеновая кислота. Нами 16:2 кислота идентифицирована в составе ЖК ГЛ и ФЛ обоих образцов, с наибольшим содержанием в ГЛ I (7.65%).
Более подробно были изучены липиды семян без околоплодника. Используя колоночную хроматографию (КХ) и препаративную тонкослойную хроматографии (ПТСХ), НЛ разделяли на соответствующие классы соединений. Для получения гомогенных фракций и контроля чистоты полученных классов использовали аналитическую тонкослойную хроматографию (АТСХ). Идентификацию выделенных липидов осуществляли, как описано в [8]. Идентифицировали 6 классов НЛ (соответственно, % от суммы НЛ): сложные эфиры стеролов (СЭС) - 5.5; триацилглицериды (ТАГ) - 82.2; свободные жирные кислоты (СЖК) - 2.8; диацилглицериды + стерины - 4.1; моноацилгицериды - 5.4. Основным классом НЛ являлись ТАГ, что характерно для растительных липидов зрелых семян.
Состав жирных кислот ацилсодержащих классов НЛ семян без околоплодника представлен в таблице 2.
Таблица 2.
Состав жирных кислот ацилсодержащих классов нейтральных липидов семян Salsola ibérica (% от суммы ЖК)
Кислота СЭС ТАГ СЖК ДАГ МАГ
12:0 - 0.38 2.20 0.48 1.0
14:0 7.59 - 6.36 2.99 4.46
15:0 4.81 - 5.90 6.15 25.36
16:0 17.69 5.89 12.23 7.67 17.33
16:1 2.69 0.87 3.00 1.38 2.32
16:2 6.94 - 7.93 2.37 7.53
17:0 3.28 0.13 2.74 0.22 0.53
18:0 4.4 0.49 5.58 1.79 4.13
18:1 22.28 27.37 10.40 21.16 12.9
а-18:2 25.70 54.08 23.20 45.72 16.79
у-18:3 2.85 5.29 1.46 4.23 1.85
а-18:3 0.87 2.2 4.33 1.93 1.47
20:0 2.70 2.35 6.21 1.66 1.36
20:1 2.14 0.29 4.68 1.06 0.57
21:0 - - 1.36 0.69 -
22:0 - 0.56 - 0.15 0.51
22:1 - - 1.16 0.10 0.62
23:0 - - - 0.15 0.67
24:0 - 0.1 1.26 0.10 0.60
^Нас. 40.47 59.53 9.9 43.84 22.05 55.95
^Ненас. 90.1 56.16 77.95 44.05
Более разнообразными по компонентному набору жирных кислот (табл.2) являлись ДАГ и МАГ (до 19 компонентов). Наибольшее количество насыщенных жирных кислот присутствовало в СЭС, СЖК, МАГ (до 50% и выше). Как было показано ранее [8,9] эти классы липидов, как правило, содержат наибольшее количество насыщенных ЖК. Мажорными, как и в составе ЖК суммарных липидов (табл.1), остаются, пальмитиновая, олеиновая и линолевая кислоты. Триацилглице-риды (ТАГ) - основной класс (82.2%) нейтральных ли-пидов, по составу ЖК практически не отличается о такового суммарных НЛ (табл.1). ТАГ содержат до 90% ненасыщенных ЖК, более половины которых приходится на долю ю-6 а-линолевой кислоты, и до 8% ю-6 у-линоленовой кислоты.
Полярные липиды делили на глико- и фосфоли-пиды, количество которых составило соответственно 0.5% и 1.6%. В составе фосфолипидов удалось идентифицировать 5 компонентов: ^ ацилфосфатидилэтанолами, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилхолин, фосфатидилинозитол, фосфатидная кислота. Основным компонентом был фосфатидилхо-лин. Гликолипиды из-за незначительного содержания идентифицировать не удалось.
Липорастворимые компоненты солянки иберийской, находящиеся в растении в свободном и связанном виде (СЭС), были представлены в основном стери-
нами и имели достаточно разнообразный состав. Методом ГХ-МС в них идентифицировали: холестерол, кампестерол, стигмастерол, эргостенол, ситостерол, стигмастанол, стигмаст-7-ен-3-ол, стигмастерол и три-терпеновый спирт - бетулин. Наибольшим по содержанию был ситостерол. Коэффициент достоверности (Q) лежал в пределах 86-99.
Проведенное исследование показало, что околоплодник не оказывает влияние на состав ЖК липидов семян Salsola ibérica, только на их содержание. В основной группе липидов семян - нейтральных - суммарное содержание ненасыщенных жирных кислот моно-еновых и полиеновых выше 90%, из которых на долю эссенциальных полиеновых кислот приходится почти 70%.
Экспериментальная часть: Физико-химические -исследования, в том числе ГЖХ анализ, выполнены на оборудовании ЦКП «Химия» УфИХ РАН.
ГЖХ анализ осуществляли на хроматографе GC-2014 Shimadzu с капиллярной колонкой Omegawax TM 250 (30,0 м*0,25 мм; Supelco), неподвижная фаза - по-лиэтиленгликоль L (0.25 мкм), температура колонки 205°С, температура испарителя 250°С, температура детектора 260°С, газ-носитель Не со скоростью подачи 30 мл/мин.
ГХ - МС осуществляли на хромато-масс-спектро-метре Agilent Technologies, включающем газовый хроматограф 7890 и масс-селективный детектор 5973N с
квадрупольным анализатором и программным обеспечением ChemStation Е 02.00. Условия анализа - энергия ионизирующих электронов 70 эВ, регистрация спектров в диапазоне массовых значений от 39 до 550 Да со скоростью 2,5 скан/сек. Разделение компонентов осуществляли с помощью капиллярной колонки длиной 30 м, диаметром 0.25 мм и привитой фазы (5% ди-метилфенилсиликона и 95% диметилсиликона) при температуре инжектора -2900С (постоянный поток) и программированном нагреве (подъеме температуры) хроматографической колонки со 160 С0 (1 мин) до 200°С со скоростью 20°/мин, далее до 300°С со скоростью 10°/мин.
Липиды из семян извлекали путем экстракции в аппарате Сокслета: НЛ - гексаном; ПЛ - хлороформ - метанолом (2:1). Известно, что системы растворителей, содержащие в своем составе спирты, кроме ПЛ, извлекают различные водорастворимые природные соединения (углеводы, аминокислоты и т.д.). Для удаления последних, извлечение обрабатывали 0,1%-ным раствором NaCl.
Аналитическую ТСХ (АТСХ) проводили на пластинках Alugram Sil G (Macherey-Nagel GmbH & Co. KG). Для анализа классов НЛ применяли хроматогра-фические системы - гексан-диэтиловый эфир: 1 (9.5:0.5); 2(9:1); 3 (8:2); 4 (7:3) [10].
Колоночную хроматографию НЛ проводили, используя чехословацкий силикагель «Chemapol» «L» 100-160 мкм, с соотношением экстракта и адсорбента 1:50 (по весу) и площадью сечения колонки к высоте слоя адсорбента 1:20. Для элюирования использовали гексан - диэтиловый эфир (0 - 100%). Вымывание классов НЛ контролировали АТСХ в системах растворителей 1 - 4. В случае необходимости фракции очищали препаративной ТСХ (ПТСХ) на стеклянных пластинах 20х20 см, с силикагелем марки MN-Kieselgel G (Macherey-Nagel GmbH & Co.KG), в системах растворителей 1 - 4. Количественное содержание классов определяли методом гравиметрии.
ПЛ делили на ГЛ и ФЛ ПТСХ в ацетоне, высушенным над K2CO3, в котором ФЛ не растворяются. Процедуру повторяли многократно (3-4 раза).
ФЛ обнаруживали реактивом Дитмера-Лестера-Васьковского [11,12]. ГЛ - а-нафтолом [11,13]. Идентификацию нейтральных и полярных липидов проводили по методике, описанной в [11,13,14].
Щелочной гидролиз ацилсодержащих фракций ли-пидов осуществляли 10% KOH в МеОН (1:10) при 80°С в течение 30 мин., сложных эфиров тритерпено-вых соединений 20% КОН в МеОН (1:10) [14]. Метиловые эфиры ЖК получали метилированием диазоме-таном.
Работа выполнена при финансовой поддержке гранта Президента РФ для ведущих научных школ №
НШ-1700.2014.3 «Химия веществ растительного происхождения, структура, свойства, биологическая активность».
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
[1] Орехов, А.П. Химия Алкалоидов. - М.: Изд-во АН СССР, 1955. - с.270.
[2] Растительные ресурсы СССР, 1. - Л.: Изд-во Наука, 1985. - с. 245.
[3] Аминова, А.А. Изучение дубильных веществ в траве солянки иберийской Salsola ibérica / А.А. Аминова, О.Н. Денисенко, С.С. Ляшенко // Молодые ученые в решении актуальных проблем науки: материалы 5 между-нар. научн.-практ. конф. - Владикавказ, 2014. - С. 4850.
[4] Аминова, А.А. Изучение состава фенольных соединений травы солянки иберийской (Salsola ibérica (Sennen&Pau) Botsch.) флоры республики Дагестан методом ВЭЖХ / А.А. Аминова, О.Н. Денисенко, С.С. Ляшенко, Л.А. Бережная // Здоровье и образование в XXI веке. - 2016. - Т. 18, № 10. - С. 109-112.
[5] Аминова, А.А. Определение антиоксидантной активности извлечений из травы солянки иберийской (южной) Salsola ibérica (Sennen et pau) Botsch. (S. australis R. BR.) / А.А. Аминова [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции, Пятигорск. - 2016. - С. 4-5.
[6] Аминова, А.А. Элементный состав травы солянки иберийской Salsola ibérica (Semen et psu) Botsch. / А.А. Аминова, О.Н. Денисенко, С.С. Ляшенко // Современная фармация: проблемы и перспективы развития: материалы V Межрегиональной науч.-практ. конф. с меж-дунар. участием 29-30 мая 2015 г. - Владикавказ, 2015.
- С.17-21.
[7] Справочник химика. http://chem21.info/page/203079093081217177018086177 228224139007021115237/
[8] Юнусова, С.Г. Липиды семян некоторых видов растений сем. Fabaceae / С.Г. Юнусова, Н.И Федоров, М.С. Юнусов, Р.Ю. Мулагулов // Химия растительного сырья. - 2015. - №3. - С. 83-89.
[9] Юнусова, С.Г. Растительные источники полиненасыщенных жирных кислот некоторых видов растений сем. Boraginaceae Juss / С.Г. Юнусова, Л.И. Хатмулина, Н.И Федоров, Н.А. Ермолаева, Е.Г. Галкин, М.С. Юну-сов // Химия природных соединений. - 2012. - С. 329333.
[10] Шталь Э. Хроматография в тонких слоях. Мир. Москва.
- 1965. - 147 с.
[11] Кейтс М. Техника липидологии. Выделение анализ и идентификация липидов пер. с англ., Мир, Москва, 1975. - С.158 - 159.
[12] Vaskovsky, V.E. Universal reagent for phospholipid analisis / V.E. Vaskovsky, E.Y. Kostetsky, I.M. Vasendin // Chromatography. - 1975. - Vol. 114. - Р. 129 - 141.
[13] Физер Л., Физер М. Реагенты для органического синтеза. Мир. Москва. - 1970. - Т. 1. - 242 с.
[14] Yunusova, S.G. Lipids of seeds Oenothera from Various Places of Ggrowth / S.G. Yunusova, M.S. Yunusov, A.R. Karimova, V.F. Mironov, S.G. Minzanova, A.I.
Konovalov, Yu.Ya. Efremov, O.N. Denisenko, E.V. Cher-nova // Chem. Nat. Compd. - 2007. - Vol. 43. - P. 525.
LIPIDS OF SALSOLA IBERICA (SENNEN&PAU) BOTSCH. (S. AUSTRALIS R. BR.) SEEDS
Aminova1 A.A., Lyashenko2 S.S., Yunusova3 S.G., Denisenko2 O.N., Yunusov3 M.S.
1Dagestan State Medical University, Makhachkala, Russian Federation. 2Piatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute, Pyatigorsk, Russian Federation. 3Ufa Institute of Chemistry of the Russian Academy of Sciences, Ufa, Russian Federation.
Annotation: The composition of non-polar (NL), polar lipids (PL) and fatty acids (FA) of Salsola iberica (Sennen&Pau) Botsch. seeds of the family Chenopodiaceae of flora of the Republic of Dagestan were investigated. The non-polar lipids yield of Salsola seed with pericarp was 12.2%, without prericarp - 20.1%, the content of the polar lipids - 1.7 and 2.0 % accordingly. The major unsaturated FA are a-linoleic (18:2, 60%), oleic (18:0 to 32%) and y-linolenic (y-18:3, to 8.5% in NL). It is established that the pericarp does not affect the part of the FA of the lipids of seeds. Identify 6 classes of NL (respectively, % of the amount of NL): esters of sterols - 5.5; triacylglyceride- 82.2; free fatty acids - 2.8; diacylglyceride + sterols - 4.1; monoacylglycerides - 5.4. PL was divided into glycolipids (GL) and phospholipids. In the composition of the phospholipids identified N-acylphosphatidylethanolamine, phosphati-dylethanolamine, phosphatidylcholine, phosphatidylinositol, phosphatidic acid; in fatty solved components - cholesterol, campes-terol, stigmasterol, ergosterol, sitosterol, stigmastanol, stigmast-7-EN-3-ol, stigmasterol and betulin.
Key words: fatty acids, non-polar lipids, polar lipids, polyunsaturated fatty acids, Salsola iberica (Sennen&Pau) Botsch., family Chenopodiaceae, flora of the Republic of Dagestan
REFERENCES
[1] Orehov, A.P. Himiya alkaloidov. - M.: Izd-vo AN SSSR, 1955. - s.270.
[2] Rastitel'nie resursi SSSR, 1. - L. .: Izd-vo Nauka, 1985. -s. 245.
[3] Aminova, A.A. Izuchenie dubil'nyh veshchestv v trave sol-yanki iberijskoj Salsola iberica / A.A. Aminova, O.N. Denisenko, S.S. Lyashenko // Molodye uchenye v reshenii ak-tual'nyh problem nauki: materialy 5 mezhdunar. nauchn.-prakt. konf. - Vladikavkaz, 2014. - S. 48-50.
[4] Aminova, A.A. Izuchenie sostava fenol'nyh soedinenij travy solyanki iberijskoj (Salsola iberica (Sennen&Pau) Botsch.) flory respubliki Dagestan metodom VEHZHKH / A.A. Aminova, O.N. Denisenko, S.S. Lyashenko, L.A. Be-rezhnaya // Zdorov'e i obrazovanie v XXI veke. - 2016. -T. 18, № 10. - S. 109-112.
[5] Aminova, A.A. Opredelenie antioksidantnoy aktivnosti izvlecheniy iz travy solyanki iberijskoj (Salsola iberica (Sennen&Pau) Botsch.) / A.A. Aminova [i dr.] // Raz-rabotka, issledovanie I marketing novoy farmacevticheskoy produkcii, Pyatigorsk. - 2016. - S. 4-5.
[6] Aminova, A.A. Elementnyj sostav travy solyanki iberijskoj Salsola iberica (Semen et psu) Botsch. / A.A. Aminova, O.N. Denisenko, S.S. Lyashenko // Sovremennaya far-maciya: problemy i perspektivy razvitiya: materialy V Mezhregional'noj nauch.-prakt. konf. s mezhdunar. uchas-tiem 29-30 maya 2015 g. - Vladikavkaz, 2015. - S.17-21.
[7] Spravochnik himika. http://chem21.info/page/203079093081217177018086177 228224139007021115237/
[8] Yunusova, S.G. Lipidy semyan nekotoryh vidov rastenij sem. Fabaceae / C.G. Yunusova, N.I Fedorov, M.S. Yunusov, R.YU. Mulagulov // Himiya rastitel'nogo syr'ya.
- 2015. - №3. - S. 83-89.
[9] Yunusova, S.G. Rastitel'nye istochniki polinenasyshchen-nyh zhirnyh kislot nekotoryh vidov rastenij sem. Boragina-ceae Juss / C.G. YUnusova, L.I. Hatmulina, N.I Fedorov, N.A. Ermolaeva, E.G. Galkin, M.S. Yunusov // Himiya pri-rodnyh soedinenij. - 2012. - S. 329-333.
[10] SHtal' E.H. Hromatografiya v tonkih sloyah. Mir. Moskva.
- 1965. - 147 s.
[11] Kejts M. Tekhnika lipidologii. Vydelenie analiz i identif-ikaciya lipidov per. s angl., Mir, Moskva, 1975. - S.158 -159.
[12] Vaskovsky, V.E. Universal reagent for phospholipid analisis / V.E. Vaskovsky, E.Y. Kostetsky, I.M. Vasendin // Chromatography. - 1975. - Vol. 114. - P. 129 - 141.
[13] Fizer L., Fizer M. Reagenty dlya organicheskogo sinteza. Mir. Moskva. - 1970. - T. 1. - 242 s.
[14] Yunusova, S.G. Lipids of seeds Oenothera from Various Places of Ggrowth / S.G. Yunusova, M.S. Yunusov, A.R. Karimova, V.F. Mironov, S.G. Minzanova, A.I. Konovalov, Yu.Ya. Efremov, O.N. Denisenko, E.V. Cher-nova // Chem. Nat. Compd. - 2007. - Vol. 43. - P. 525.
