CC BY
38
ЛИМФОТОК И МОТОРИКА ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ ПРИ АЛЛОКСАНОВОМ ДИАБЕТЕ
Балхыбекова А. О., Абдрешов С.Н., Булекбаева Л.Э., Демченко Г.А. Институт физиологии человека и животных МОН РК, Алматы
В настоящее время для изучения ряда функций организма при сахарном диабете успешно используются экспериментальные модели диабета, в частности, наиболее распространенной моделью является аллоксановый диабет. С этой целью используется аллоксан, который после введения интенсивно разрушает инсулярные клетки поджелудочной железы.. При аллоксановом диабете у крыс ранее нами была установлена деструкция части адренергических нервных волокон в стенках кровеносных сосудов поджелудочной железы, в стенке грудного протока и в капсуле брыжеечных лимфатических узлов [ Балхыбеколва и др., 2006]. . Однако, состояние лимфотока и моторики лимфатических узлов при аллоксановом диабете до сих пор не изучалось. Цель работы -изучить лимфоток и спонтанную и вызванную сократительную активность лимфатических узлов при аллоксановом диабете у крыс.
Эксперименты проводились на 65 половозрелых беспородных лабораторных крысах-самцах массой тела 200-250 г, из которых были созданы две группы. Первая группа - контрольная (12 крыс). Во второй группе (53 крысы) после 3-х суточного голодания крысам однократно вводили п/к аллоксан в дозе 15 мг/100г. Через 5-30-45 дней после инъекции аллоксана у животных брали кровь из хвостовой артерии. Содержание глюкозы в крови, лимфе и моче определяли на приборе «Глюкотренд-2» с использованием тест-полосок. Через 30 дней под эфирным наркозом прижизненно были взяты пробы лимфы из кишечного лимфатического сосуда и кровь для биохимических исследований. Содержание общего белка определяли биуретовым методом, концентрацию мочевины и креатинина в плазме крови - с помощью набора препаратов фирмы «Bio-Lachema-Test», активность ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) определяли методом Райтмана-Френкеля ( Камышников, 2000). Изучали спонтанную и вызванную сократительную активность изолированных лимфатических узлов крыс
на установке, состоящей из термостатируемой камеры, механотрона 6МХ1Б и быстродействующего самописца В качестве питательного раствора для лимфатических узлов крыс использовали оксигенированный раствор Кребса при температуре 37°С.Для вызова сократительных реакций узлов использовали вазоактивные вещества: адреналин, ацетилхолин, гистамин (1х10-8-1х10-6 М), которые вводились в термостатируемую камеру с изолированным узлом.
Результаты исследований показали, что через 5 дней после введения аллоксана содержание глюкозы в крови повышалось до 13,9±2,7 моль/л при норме 5,6±1,2 моль/л. Через 30 дней оно составило 18,7±2,5 моль/л, в лимфе - 20,5 ±3,2, а в моче - 7,2±1,5 моль/л (таблица ). У крыс через 30 дней после введения аллоксана лимфоток из кишечного лимфатического протока уменьшался на 38% по сравнению с лимфотоком у контрольных крыс ( таблица). У крыс 2-ой группы в плазме крови содержание общего белка снижалось до 54,2±3,2 г/л (в контроле 68,3± 2,3 г/л), а в лимфе -от - 41,3 ± 3,5 до 32,2 ±4,2 г/л. Концентрация мочевины в плазме крови у крыс 2-й группы уменьшалась на 44%, креатинина - на 10 % от контроля. Концентрация мочевины в плазме крови у крыс 2-й группы уменьшалась на 44% , а креатинина на 10 % от данных контроляьной группы. Уровни АЛТ и ACT в плазме крови у крыс с аллоксановым диабетом повышались в 2-2,5 раза от контроля У интактных крыс были зарегистрированы спонтанные сокращения изолированных шейных и брыжеечных лимфатических узлов, представленные фазными ритмическими сокращениями. При действии вазоактивных веществ (1х10-8-1х10-6 М) на брыжеечный или шейный лимфатический узел интактных крыс наблюдались ярковыраженные сократительные реакции. Брыжеечные лимфатические узлы при действии адреналина, ацетилхолина и гистамина сокращались с увеличением амплитуды на 60 ±1,7; 42 ±1,4; 44±1,3 % (р<0,01) и частоты сокращений на 25 ±1,4; 23 ±1,2; 26 ±1,21%. (р<0,01) от исходного фона соответственно. Аналогичные сократительные реакции наблюдались в опытах при действии указанных веществ на шейные лимфатические узлы. Порог раздражения лимфатических узлов для всех вазоактивных веществ составил 10-8М.. Через 45 дней после введения аллоксана крысам и установления у них явлений развитого аллоксанового диабета регистрация сокращений выявила, что спонтанная сократительная активность брыжеечных
Таблица 1 -Лимфоток и содержание глюкозы в крови, лимфе и моче у крыс в норме и у крыс с аллоксановым диабетом
Название показателей Сроки до и после введения аллоксана
До введения Через 5 дней Через 30 дней
Глюкоза, моль/лв крови 5,6 ± 1,2 13,9±2,7%** 18,7 ± 2,5**
в лимфе 6,1± 1,5 - 20,5 ± 3,2**
в моче следы или 0 - 7,2 ± 1,5
Лимфоток, мл/час - 0,32±0,04 - 0, 20 ±0,02**
Примечания: * -достоверно по сравнению с контролем, р<0,05,* -р<0,01**
и шейных лимфатических узлов была значительно угнетена (частота сокращений - 2 ±0,1 сокр./мин, амплитуда 3,0 ±0,1 мг). Она была обнаружена в брыжеечных узлах в 50%, в шейных - в 70%.опытов. В 25% опытов на механограмме лимфатических узлов исчезала спонтанная ритмическая активность и появлялись медленные тонические волны У крыс с аллоксановым диабетом реакции брыжеечных лимфатических узлов при действии адреналина были выявлены в 46% опытов, из них в 26% случаев были обнаружены сокращения с увеличением амплитуды на 40 ±2,7 % и в 20%- расслабление узлов. Ацетилхолин и гистамин в 35-40 % опытов вызывали сократительные реакции узлов с уменьшением частоты и амплитуды сокращений. Однако, в половине случаев наблюдалось расслабление узлов при действии гистамина. При действии вазоактивных веществ на гладкомышечные клетки шейных лимфатических узлов у крыс с аллоксановым диабетом отмечено снижение величины сократительных реакций на 30% по сравнению с их реакцией у интактных крыс. Порог раздражения при диабете у крыс повысился до 10-7М -10-6М.
Как видно из представленных данных, при аллоксановом диабете у крыс снижается лимфоток из кишечного лимфатического сосуда и угнетается спонтанная сократительная активность изолированных лимфатических узлов. Следовательно, угнетается транспортная функция лимфатической системы. Уменьшение содержания общего белка в плазме крови и лимфе, которые мы наблюдали при аллооксановом диабете, вероятно, обязаны нарушению функции печени, приводящее к снижению синтеза белка. Сдвиги в содержании азотсодержащих продуктов обмена в сторону уменьшения также свидетельствуют о снижении синтеза этих веществ в печени при аллоксановом диабете. Резкое повышение уровня ферментов АЛТ и АСТ в плазме крови при диабете указывает на нарушение функции печени. Последние свидетельствуют о повышении процессов цитолиза клеток. Считают, что аллоксановый диабет у крыс является одним из классических примеров свободнорадикальной патологии. Согласно полученным данным,, развитие аллоксанового диабета у крыс, наряду с гипергликемией и глюкозурией, приводит к повышению содержания глюкозы в лимфе, уровень которого превышает ее уровень в крови и прямо коррелирует с уровнем гипергликемии. Следовательно, при аллоксановом диабете наблюдается нарушение углеводного и белкового обмена, что проявляется в плазме крови и лимфе. При аллоксановом диабете угнетается моторная функция лимфатических узлов и снижается чувствительность рецепторов узлов на действие вазоактивных веществ, что, вероятно, связано с нарушением углеводного обмена и окислительным стрессом, которым сопровождается развитие сахарного диабета и отрицательно отражается на деятельности клеточных мембран, в том числе, негативно отражается на состоянии мембраны гладкомышечного аппарата лимфатических узлов и их транспортной функции, что может усугубить течение диабета.
