CC BY
30
УДК 616.716.1:616.315.1: 616.216-002-074/.078
ЛЕКТИНГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ВЕРХНЕЧЕЛЮСТНОЙ ПАЗУХИ БОЛЬНЫХ СТОМАТОГЕННЫМ ВЕРХНЕЧЕЛЮСТНЫМ СИНУСИТОМ
Целью работы было изучение распределения рецепторов к лектину арахиса (РКА) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи при различных формах стоматогенного верхнечелюстного синусита.
Определили распределение рецепторов к лектину арахиса в структурах слизистой оболочки верхнечелюстного синуса у 129 (100 %) пациентов с различными формами стоматогенного веохнечелюстного синусита. РБ-галактоконъюгаты выявляли путем обработки серийных срезов лектинами арахиса, конъюгированных с пероксидазой хрена. Препараты обрабатывали с применением стандартных наборов НПК «Лектинотест» г. Львов в разведении лектина 1:50 по рекомендуемой методике [9]. Визуализацию мест связывания лектина проводили в системе диаминобензидин - перекись водорода. Контроль специфичности реакции осуществляли путем исключения из схемы обработки препаратов диаминобензидина. Лектин сои (РКА), специфичен к концевым нередуцирующим остаткам Р-Б-галактозы гликополимеров. Специфичность лектинов к терминальным нередуцирующим моносахаридным остаткам гликоконъюгатов дана в соответствии с данными литературы [1]. Интенсивность окрашивания срезов лектинами оценивали условными обозначениями: «+++» - интенсивная реакция (коричневий цвет); «++» - умеренная реакция (золотисто, желто-коричневый цвет); «+» - слабая реакция (или золотисты, золотисто-желтый цвет); «-» - отсутствие реакции. Фотодокументацию осуществляли с помощью компьютерной системы анализа, состоящей из бинокулярного микроскопа Ахю1аЬ, соединенного с цифровой камерой и програмного обеспечения «Ахю^юп 4.8».
Обнаружена низкая концентрация рецепторов к лектину арахиса в структурах слизистой оболочки верхнечелюстного синуса у пациентов одонтогенной группы относительно ятрогенной. Высокая концентрация рецепторов к лектину арахиса в мерцательных, баколовидных и базальных клетках мембраны Шнайдера отмечена при формах ятрогенного верхнечелюстного синусита в основе этио-патогенеза которых лежит инфекционный компонент -инфекционно-аллергическая и лекарственная формы. В нормальных волокнах собственной пластинки РКА+ рецепторы встречаются в большом количестве при инфекционно-аллергической форме ятрогенного синусита, в участках фиброза собственной пластинки их концентрация одинакова при всех формах ятрогенного верхнечелюстного синусита.
Ключевые слова: лектингистохимия мембраны Шнайдера, ятрогенный верхнечелюстной синусит, стоматогенный верхнечелюстной синусит, лектин арахиса.
Работа является фрагментом НДР «Удосконалити методи дiагностики i л^вання ятрогенного гаймориту стоматогенного походження». 2016-2020рр. КПКВ 6561040 прикладна. Шифр АМН 090.13. № ДР 0114Ш07013
Среди околоносовых синусов первое место по поражаемости воспалительным процессом занимают верхнечелюстные пазухи. Участие верхней челюсти в формировании полости носа, полости рта, а также близкое расположение зубов определяют особенности инфекционно-воспалительных заболеваний средней зоны лица. На сегодня отмечается учащение случаев ятрогенных гайморитов - воспалительных поражений верхнечелюстной пазухи после различных, в основном, стоматологических лечебно-профилактических мероприятий, что определяет актуальность их изучения [5, 8, 14, 15]. Одним из основных механизмов развития хронического воспаления в просвете верхнечелюстного синуса - нарушение функции мерцательного эпителия слизистой оболочки, вследствие лизиса его ресничек под воздействием вызванных врачебными манипуляциями, механических, физических, химических, биологических факторов [8, 10]
Как известно, в функционирующих клетках углеводы по сравнению с другими метаболитами, включаются в обмен активнее и в больших количествах. Вследствие нарушения функции клетки, внутриклеточный метаболизм замедляется, гликоконъюгаты превращаются в гидрофильные неметаболизируемые соединения, которые накапливаются в различных тканевых структурах [12]. Одним из главных соединений обеспечивающих функцию клеток, межклеточные, клеточно-матриксные взаимодействия, регулирующие процессы пролиферации, дифференцировки и апоптоза, являются лектины и рецепторы к ним [1, 3]. Анализ литературы показывает, что самые незначительные нарушения в жизнедеятельности клеток неизбежно приводят к измению состава и характера распределения гликополимеров - рецепторов к лектинам в составе клеточных мембран и тканевых экстрацеллюлярных структурах, что служит одним из наиболее ранних и объективных признаков и морфологическим субстратом развивающейся патологии [13]. Данные о гистотопографии рецепторов к лектинам в слизистой оболочке верхнечелюстной пазухи при его воспалении, вызванном различными этиологическими факторами и патогенетическими механизмами, в литературе отсутствуют.
Целью работы было изучение распределения рецепторов к лектину арахиса (РКА) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи при различных формах стоматогенного верхнечелюстного синусита.
Материал и методы исследования. Для изучения реактивности слизистой оболочки верхнечелюстного синуса у 129 пациентов с воспалительным поражением верхнечелюстного синуса, сопряженным со стоматогенной патологией, провели интрооперационный забор биологического материала. Биоптаты фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина в течение 48 часов. Обезвоживание проводили в восходящей батарее спиртов, начиная с 50 % этилового спирта, в качестве промежуточной среды использовали раствор хлороформа. Биоптаты заливали смесью парафин: воск: каучук из расчета 20:1:1. Из парафиновых блоков на ротационном микротоме изготавливали 100-150 серийных гистологических срезов толщиной 5 мкм. Для обзорной микроскопии гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином. рО-галактоконьюгаты выявляли путем обработки серийных срезов лектинами арахиса, конъюгированных с пероксидазой хрена. Препараты обрабатывали с применением стандартных наборов НПК «Лектинотест» г. Львов в разведении лектина 1:50 по рекомендуемой методике [9]. Визуализацию мест связывания лектина проводили в системе диаминобензидин - перекись водорода. Контроль специфичности реакции осуществляли путем исключения из схемы обработки препаратов диаминобензидина. Лектин сои (РКА), специфичен к концевым нередуцирующим остаткам Р-О-галактозы гликополимеров. Специфичность лектинов к терминальным нередуцирующим моносахаридным остаткам гликоконъюгатов дана в соответствии с данными [1]. Интенсивность окрашивания срезов лектинами оценивали условно: «+++» - интенсивная реакция (коричневий цвет); «++» - умеренная реакция (золотисто, желто-коричневый цвет); «+» - слабая реакция (или золотисты, золотисто-желтый цвет); «-» - отсутствие реакции.
Фотодокументацию осуществляли с помощью компьютерной системы анализа, состоящей из бинокулярного микроскопа Ахю1аЬ, цифровой видеокамеры Ахюсаш с 8 мегапиксельной матрицей, соединенной с микроскопом видеоадаптером, персонального компьютера, оборудованного платой видеозахвата, соединенного с цифровой камерой с помощью интерфейса и видеокабеля и програмного обеспечения «АхюУ^юп 4.8», позволяющего просматривать на экране монитора изображение гистологического препарата в реальном масштабе времени, выбирать необходимую область для фотографирования, получать цифровое изображение гистологического препарата, сохранить его на жестком диске персонального компьютера.
На основании данных анамнеза, особенностей клинических симптомов, все пациенты были распределены по этио-патогенетическим группам стоматогенного верхнечелюстного синусита: одонтогенная группа - 14 (10,9 %) человек, ятрогенная группа - 115 (89,1 %) человек. Пациенты с ятрогенным верхнечелюстным синуситом стоматогенного происхождения были разделены по основным формам. В группу смешанной формы ятрогенного синусита вошли 24 (20,9 %) человек, лекарственной формы - 12 (10,4 %), инфекционо-аллергической формы - 22 (19,1 %), травматической формы - 57 (49,6 %).
Исследование проводилось при участии доктора мед. наук. Григорьевой Е.А. - Кафедра анатомии человека, оперативной хирургии и топографической анатомии ЗГМУ.
Результаты исследования и их обсуждения. Выявлены патоморфологические признаки хронического воспаления во всех исследуемых образцах. В препаратах, полученных из верхнечелюстных пазух больных, у которых причиной гайморита стали очаги периапикальной инфекции ранее не леченных зубов верхней челюсти - одонтогенная форма стоматогенного верхнечелюстного синусита (контрольная группа), углеводные остатки рО-галактозы были обнаружены в составе внутрицитоплазматических включений всех эпителиоцитов и в составе ресничек мерцательных клеток. При этом интенсивность окрашивания в большинстве препаратов условно была оценена как умеренной (+) (табл. 1). В составе базальной мембраны слизистой оболочки отложения бензидиновой метки были также умеренные (+). Коллагеновые волокна собственной пластинки слизистой оболочки содержали лишь углеводные остатки рОгалактозы (+). Среди клеток собственной пластинки и в составе инфильтрата были определены РКА+ лимфоциты, макрофаги. РКА+ лимфоциты были расположены перивазально, вдоль базальной мембраны, преимущественно попарно. Около желез собственной пластинки выявили внутриэпителиальные РКА+ лимфоциты (рис. 1).
Рис. 1. Распределение рецепторов к лектину арахиса (РЫЛ) в Рис. 2. Распределение рецепторов к лектину арахиса (РЫЛ)
СО верхнечелюстной пазухи больных с одонтогенным в СО верхнечелюстной пазухи больных смешанной формой верхнечелюстным синуситом. Увеличение 400. ятрогенного верхнечелюстного синусита. Увеличение 400.
В просвете кист РЫЛ+ содержимое - обильное (++) - цитоплазма эпителиоцитов стенки кисты была окрашена в желто- коричневый цвет. Т.е. интенсивнее, чем цитоплазма эпителиоцитов слизистой оболочки пазухи.
Таблица 1
Распределение рецепторов к лектину арахиса (РКА) в структурах слизистой оболочки
верхнечелюстной пазухи больных одонтогенным верхнечелюстным синуситом __(контрольная группа)__
№ Структуры Интенсивность окрашивания
1. Мерцательные клетки +
2. Базальные клетки +
3. Бокаловидные клетки +/++
4. Базальная мембрана - / +
5. Волокна собственной нормальные +
6. пластинки в очаге фиброза +
В слизистой оболочке верхнечелюстной пазухи больных, у которых развитие воспаления в синусе имело место на фоне хирургической травмы - травматическая форма ятрогенного верхнечелюстного синусита стоматогенного происхождения, углеводные остатки рОгалактозы в составе внутрицитоплазматических включений мерцательных и бокаловидных клеток были обнаружены в большей степени (++). На ресничках мерцательного эпителия РЫЛ+ рецепторы также были экспрессированы. Цитоплазма базальных клеток оказалась окрашена менее интенсивно. Окраска самой базальной мембраны была неравномерной (табл. 2).
Таблица 2
Распределение рецепторов к лектину арахиса (РКА) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи больных травматической формой ятрогенного верхнечелюстного
синусита
Структуры Интенсивность окрашивания
Мерцательные клетки ++
Базальные клетки +
Бокаловидные клетки +/++
Базальная мембрана +
Волокна собственной пластинки нормальные +
в очаге фиброза ++
Из таблицы 2 видно, что при травматической форме ятрогенного синусита преобладают участки золотисто-желтого цвета (+). Лишь в очагах утолщения мембраны, плотность распределения РЫЛ+ соединений возрастало до выраженной (++). В неизмененной ткани волокна, стенки кровеносных сосудов золотистого (светло-желтого) цвета (+). В очагах фиброза они становятся золотисто-коричневыми (++). В ткани выявлены РЫЛ+лимфоциты, локализованные непосредственно под базальной мембраной, паравазально, внутриэпителиально.
В слизистой оболочке верхнечелюстной пазухи больных с наличием инородного тела в просвете синуса - смешанная форма ятрогенного верхнечелюстного синусита, РЫЛ+ рецепторы в составе внутрицитоплазматических включений мерцательных эпителиоцитов были
экспрессированы интенсивнее (++), в сравнении с бокаловидными, базальными и вставочными клетками (+) (табл. 3).
Таблица 3
Распределение рецепторов к лектину арахиса (PNA) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи больных смешанной формой ятрогенного верхнечелюстного _синусита_
№ п.п. Структуры Интенсивность окрашивания
1. Мерцательные клетки ++
2. Базальные клетки +
3. Бокаловидные клетки +
4. Базальная мембрана +
5. Волокна собственной пластинки нормальные +
6. в очаге фиброза ++
Из таблицы 3 следует, что реснички и апикальные отделы цитоплазмы мерцательных эпителиоцитов окрашены интенсивно - в золотисто-коричневый цвет (++) (рис. 2), базальная мембрана, волокна и стенки кровеносных сосудов собственной пластинки были равномерно золотисто-желтого (+) цвета. В очагах фиброза волокна были окрашены интенсивнее (+). Среди клеток инфильтрата встречали РКЛ+ лимфоциты, макрофаги. Выявлены внутриэпителиальные РКЛ+ лимфоциты.
В слизистой оболочке верхнечелюстной пазухи больных, у которых отмечено распространение в синус периапикальной инфекции ранее леченных зубов верхней челюсти -инфекционно-аллергической формой ятрогенного верхнечелюстного синусита, в отличие от одонтогенной формы стоматогенного синусита (контроль), апикальные отделы цитоплазмы эпителиоцитов были окрашены очень интенсивно в темно-коричневый цвет (+++) (табл. 4).
Таблица 4
Распределение рецепторов к лектину арахиса (PNA) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи больных инфекционно-аллергической формой ятрогенного _верхнечелюстного синусита_
Структуры Интенсивность окрашивания
Мерцательные клетки +++
Базальные клетки +/++
Бокаловидные клетки ++/+
Базальная мембрана - / +
Волокна собственной пластинки нормальные ++
в очаге фиброза ++
Углеводные остатки рБгалактозы также были выявлены в составе внутрицитоплазматических включений всех эпителиоцитов. Базальная мембрана была плохо выражена, окрашена неравномерно: от бледно-желтого до золотистого цвета (рис. 3). Цитоплазма базальных и бокаловидных клеток также были окрашены мозаично от желтого до золотисто-коричневого цвета (табл. 4). Определили разрастания PNA+ волокон между железами собственной пластинки. В очагах фиброза волокна, в отличие от неизмененной ткани, обнаружили накопление бензидиновой метки (++). PNA+ рецепторы были отмечены и в цитоплазме эпителиоцитов желез (+), в содержимом желез (++/+). В инфильтрате, непосредственно под эпителиальной выстилкой слизистой оболочки, внутриэпителиально и паравазально обнаружили PNA+лимфоциты.
Углеводные остатки pD-галактозы были обнаружены в составе внутрицитоплазматических включений всех эпителиоцитов слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи больных, у которых стоматогенный верхнечелюстной синусит протекал на фоне хронического приема лекарственных препаратов - лекарственная (медикаментозная) форма ятрогенного верхнечелюстного синусита стоматогенного происхождения (табл. 5).
Однако только в мерцательных и базальных клетках их содержание было выше, чем в контроле (табл. 5). Базальная мембрана в неизмененных участках была окрашена в золотистый цвет (+), в очагах фиброза - окрашена интенсивнее (++). Выявлены PNA+ лимфоциты, локализованные перивазально и внутриэпителиально. Стенка кровеносных сосудов утолщена и окрашена интенсивнее, чем в контроле (++).
Таким образом, полученные результаты указывают на различия в концентрации рецепторов к лектину арахиса (PNA) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстного синуса при различных формах стоматогенного синусита.
Таблица 5
Распределение рецепторов к лектину арахиса (PNA) в структурах слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи больных лекарственной формой ятрогенного верхнечелюстного _синусита _
Структуры Интенсивность окрашивания
Мерцательные клетки ++
Базальные клетки ++/+
Бокаловидные клетки +
Базальная мембрана +
Волокна собственной пластинки нормальные +
в очаге фиброза ++
Наивысшая концентрация РКА+ рецепторов в мерцательных и баколовидных клетках были выявлены при инфекционно-аллергической форме - «+++» и «++» соответственно. Наименьший показатель накопления данных рецепторов в мерцательных клетках обнаружили при одонтогенном верхнечелюстном синусите (+), что может указывать на более высокую функциональную активность эпителия в синусах пациентов контрольной группы. Возможно, сравнительно ранее клиническое проявление данной формы стоматогенного синусита относительно ятрогенных форм одно из причин менее глубоких повреждений эпителиального покрова, чем при ятрогенных формах (рис. 3).
^ ^ > ^ ^ оР*
^ Ж .«Г
Рис. 3. Распределение рецепторов к лектину арахиса (РКА) в СО верхнечелюстной пазухи больных инфекционно-аллергической формой ятрогенного верхнечелюстного синусита. Ув. 400.
Рис. 4. Диаграмма распределения РКА+ -рецепторов при различных формах стоматогенного синусита.
Степень насыщенности красителем базальных клеток мембраны Шнайдера при травматической и смешанной формах ятрогенного синусита соответствовала показателю контрольной группы (рис. 4). Наивысшую интенсивность экспрессии РКА+ -рецепторов в базальных клетках оказалось при лекарственной форме ятрогенного синусита, характеризующегося долгим и бессимптомным течением. В бокаловидных клетках интенсивность концентрации рецепторов при смешанной и лекарственной формах ятрогенного синусита была ниже чем, в контрольной группе.
Нарушение активности клеток, выделяющих слизь по показателям РКА - рецепторов, как и функции мерцательного эпителия, оказалось в группе инфекционно-аллергического ятрогенного синусита. В базальной мембране выявили одинаковую насыщенность РКА+ рецепторов при травматической, смешанной и лекарственной формах ятрогенного синусита. Ниже показатели были в образцах контрольной (одонтогенный синусит) и инфекционно-аллергической группы -общим в этио-патогенезе данных форм синусита является наличие причинного зуба с очагом хронической периапикальной инфекции.
Как видно из рисунка 3 в участках фиброза собственной пластинки при ятрогенных формах синусита интенсивность окрашивания рецепторов была одинаковой. минимальный показатель отмечен в контрольной группе.
1. Условные показатели указывают на низкую концентрацию рецепторов к лектину арахиса в структурах слизистой оболочки верхнечелюстного синуса у пациентов одонтогенной группы относительно ятрогенной.
2. По распределению рецепторов к лектину арахиса нарушение функции мерцательных, и баколовидных и базальных клетках мембраны Шнайдера более выражено при формах ятрогенного верхнечелюстного синусита в основе этио-патогенеза которых лежит инфекционный компонент - инфекционно-аллергическая и лекарственная формы.
3. Рецепторы к лектину арахиса в нормальных волокнах собственной пластинки встречаются в большом количестве при инфекционно-аллергической форме ятрогенного синусита. В участках фиброза собственной пластинки концентрация РЫЛ+ рецепторов одинаково при всех формах ятрогенного верхнечелюстного синусита.
- 2005. - 554 s.
Bondar, V.V. Klimontov // Problemyi
E.A.
1. Antonyuk V. O. Lektini ta yih sirovinni dzherela / V. O. Antonyuk // - Lviv: «Kvart»,
2. Bondar I. A. Izmeneniya metabolizma kollagena pri diabeticheskoy nefropatii. / I.A. endokrinologii. - 2005. - T. 51, No. 2. - S. 23-28.
3. Voloshin N. A. Lektinyi zhivotnogo i rastitelnogo proishozhdeniya: rol v protsessah morfogeneza / N.A Voloshin, Grigoreva // Zhurnal AMN Ukrayini. - 2005. - T. 11, No. 2. - S. 223-237.
4. Varzhapetyan S. D. Obosnovanie vyibora metodov pervichnogo obsledovaniya patsientov s yatrogennyim verhnechelyustnyim sinusitom / S.D. Varzhapetyan // Voprosyi teoreticheskoy i klinicheskoy meditsinyi. - 2015. - T.18, No. 2 (98). - S. 43-48.
5. Gulyuk A. G. Dinamika obrascheniya bolnyih, osobennosti pervichnoy diagnostiki i taktika lecheniya odontogennyih gaymoritov / A.G. Gulyuk, S.D. Varzhapetyan // Visnik stomatologiyi. - 2012. - No.2. - S. 81-89.
6. Gulyuk A. G. Obosnovanie klassifikatsii yatrogennyih verhnechelyustnyih sinusitov stomatogennogo proishozhdeniya. / A. G. Gulyuk, S. D. Varzhapetyan // Innovatsiyi v stomatologiyi. - 2015. -No. 2. - S. 27-38.
7. Zakiryanov A. R. Diabeticheskie oslozhneniya u kryis pri dlitelnyih srokah modelirovaniya saharnogo diabeta 1-go tipa. / A.R. Zakiryanov, A.M. Plahotnyiy, N.A. Onischenko [i dr.] // Patologichekaya fiziologiya i eksperimentalnaya terapiya. - 2007. - No.4. - S. 21-25.
8. Edranov S. S. Kletochno-molekulyarnyie aspektyi posttravmaticheskoy regeneratsii slizistoy obolochki okolonosovyih pazuh / S. S. Edranov // Tihookeanskiy meditsinskiy zhurnal. - 2016 - No. 2. - S. 67-71.
9. Lutsik A. D. Lektinyi v gistohimii / A.D. Lutsik, E.S. Detyuk, M.D. Lutsik // - Lvov.: Vischa shkola, -1989. - 139 s.
10. Ryazantsev S.V. Printsipyi etiopatogeneticheskoy terapii ostryih sinusitov: Metodicheskie rekomendatsii / S. V. Ryazantsev // - Sankt-Peterburg, - 2013. - 40 s;
11. Syirtsov V. K. Lektin-gistohimicheskoe issledovanie perifericheskih organov immunnoy sistemyi cheloveka v prenatalnom periode ontogeneza. / V. K. Syirtsov, E. G. Alieva, E. I. Pototskaya [i dr.] / Aktualni pitannya farmatsevtichnoyi i medichnoyi nauki ta praktiki. - 2011. - No.1 - S. 42-44.
12. Titov V.N. Insulin - gumoralnyiy faktor obespecheniya energiey biologicheskoy funktsii lokomotsii // Vestnik Rosiyskoy AMN. - 2005. - No. 2. - S. 3 - 8.
13. Ushakov A. V. Osobennosti ekspressii uglevodnyih determinant kardiomiotsitov pri infarkte miokarda i saharnom diabete / A. V. Ushakov, E. Yu. Shapovalova // Problemyi, dostizheniya i perspektivyi razvitiya medikobiologicheskih nauk i prakticheskogo zdravoohraneniya. - 2006. - T. 142, ch. 1. - S. 90-29.
14. Chibisova M. A. Diagnosticheskie vozmozhnosti primeneniya konusno - luchevoy kompyuternoy tomografii v otorinolaringologii i chelyustno-litsevoy hirurgii. / M. A Chibisova, A. L. Dudarev, A. A. Zubareva [i dr.] // Dental Magazin. El. resurs. Adres dostupa: http://dentalmagazine.ru/nauka.
15. Archontaki M. Increased frequency of rhinitis medicamentosa due to media advertising for nasal topical decongestants / M. Archontaki, E. K. Symvoulakis
16. Perecko T. Molecular targets of the natural antioxidant pterostilbene: effect on protein kinase C, caspase-3 and apoptosis in human neutrophils in vitro / T. Perecko, K. Drabikova, L. Rackova [et al.]. // Neuroendocrinol. Lett. -2010. Vol. 28. P. 34-38.
ЛЕКТШПСТОХШ1ЧНА ОЦ1НКА СЛИЗОВО1 ОБОЛОНКИ ВЕРХНЬОЩЕЛЕПНО1 ПАЗУХИ ХВОРИХ НА СТОМАТОГЕННИЙ ВЕРХНЕЩЕЛЕПНИЙ СИНУСИТ Варжапетян С. Д.
Мета дослщження: вивчення розподшу рецептов до лектитв араису (РЫЛ) в структурах слизово! оболонки верхньощелепно! пазухи при рiзних формах стоматогенного верхньощелепного синуситу. Матерiал i методи дослщження. Визначили розподш рецепторiв до лектину арахюу в структурах слизово! оболонки верхньощелепного синуса у 129 (100 %) пащент1в з рiзними формами стоматогенного верхньощелепного синуситу. рБ-галактокон'югати виявляли шляхом обробки сершних зрiзiв лектинами арахюу, кон'югованих з пероксидазою хршу. Препарати обробляли iз застосуванням стандартних наборiв «Лектшотест» м. Л^в в розведенш лектина 1:50 за рекомендованою методикою [10]. Вiзуалiзацiю мюць зв'язування лектину проводили в системi дiамiнобензiдiн - перекис водню. Контроль специфiчностi реакцй здшснювали шляхом виключення зi схеми обробки препарата дiамiнобензiдiна. Лектин со! (РЫЛ), специфiчний до юнцевих нередущрующего
LECTINHISTOCHEMICAL ASSESSMENT OF THE OF MAXILLARY SINUS MUCOSA OF PATIENTS WITH STOMATOGENIC MAXILLARYSINUSITIS Varzhapetyan S. D. Objective: to study the distribution of receptor for peanuts lectin (PNA) in the structures of the mucosa of the maxillary sinus in various forms stomatogennic maxillary sinusitis. Material and Methods. Determine the distribution of peanut lectin receptors in the mucosa of the maxillary sinus in the structures 129 (100%) patients with various forms of stomatogennic maxillary sinusitis. PD-galaktosis detected by treating serial sections peanut lectin conjugated to horseradish peroxidase. Preparations were treated using standard sets of "Lektinotest" st. Lviv in dilution 1:50 lectin recommended method [10]. Visualization of the lectin binding sites was carried out in a diaminobenzidine system - hydrogen peroxide. Control of the specificity of the reaction was carried out by excluding from drugs processing circuit diaminobenzidine. Soybean lectin (PNA), specific for the
залишкам ß-D-галактози глiкополiмерiв. Специфiчнiсть лектинiв дана вщповщно до даних лiтератури [1]. 1нтенсившсть забарвлення 3pi3iB лектинами оцшювали умовними ознаками: «+++» - iнтенсивна реакщя (коричневий колiр); «++» - помiрна реакцiя (золотисто-, жовто-коричневого кольору); «+» - слабка реакцiя (або золотистого, або золотисто-жовтого кольору); «-» -вщсутшсть реакци. Фотодокументацiю здiйснювали за допомогою комп'ютерно'1' системи аналiзу, що складаеться з бiнокулярного мiкроскопа Axiolab, сполученого з цифровою камерою i програмного забезпечення «AxioVision 4.8». Результати дослщження. Виявлена низька концентрация рецепторiв до лектинiв арахiсу в структурах слизово'1 оболонки верхньощелепного синуса у пащент!в одонтогенно! групи стоматогенного синуситу. Висока концентращя рецепторiв до лектишв арахiсу в миготливих, баколовiдних та базальних клiтинах мембрани Шнайдера вщзначена при формах ятрогенного верхньощелепного синуситу в основi етiо-патогенезу яких лежить iнфекцiйний компонент - iнфекцiйно-алергiчна i медикаментозна форми. У нормальних волокнах власно'1' платiвки PNA + рецептори зустрiчаються у великш кiлькостi при шфекцшно-алерпчно'1 формi ятрогенного синуситу, в донках фiброзу власно'1' пластинки ix концентрация однакова при всiх формах ятрогенного верхньощелепного синуситу стоматогенного походження.
Kto40bï слова: лектiнгiстоxiмiя мембрани Шнайдера, ятрогенний верхньощелепно'1' синусит, стоматогенний верхньощелепно'1' синусит, лектин арахиса.
Стаття надшшла 10.01.2017 р.
non-reducing terminal residues of P-D-galactose glycopolymers. The specificity of lectins to nonreducing terminal monosaccharide residues of glycoconjugates given in accordance that in literatur [1]. The intensity of staining sections lectins were scored "+++" - an intensive response (brown); "++" - moderate reaction (gold, yellow and brown); "+" - weak reaction (or golden, golden yellow in color); "-" - no reaction. Photographic documentation was carried out with the help of computer analysis system, consisting of binocular microscope Axiolab, connected to a digital camera and software «AxioVision 4.8». Results of the study. Detected a low concentration of peanut lectin receptors in the mucosa of the maxillary sinus structures in patients odontogenic iatrogenic group. The high concentration of receptors for peanut lectin in epithelium, basal and goblet cells of Schneiders membrane noted in the maxillary sinus iatrogenic forms the basis of etiology, pathogenesis of which is an infectious component - an infectious-allergic and dosage forms. In normal lamina propria fibers PNA + receptors are found in large quantities in infectious and allergic sinusitis iatrogenic form, in the areas of fibrosis of the lamina propria, their concentration is the same in all forms of iatrogenic maxillary sinusitis.
Key words: lectinhistochemical assessment of Schneiders membrane, iatrogenic maxillary sinusitis, stomatogenic maxillary sinusitis, peanuts lectin.
Рецензент Срошенко Г.А.
УДК 612.616:616-092.4
Дослщжено цитолопчш змши в яечку та еякулят у 36 лабораторних щурiв в умовах блокади ам'явиносно! протоки та И реканалiзацii шляхом бужування. Встановлено вiрогiдне збшьшення юлькост у звивистих Ым'яних трубочках первинних i вторинних сперматоциив та сперматид, а в еякулят - покращення морфолопчних показниюв сперматозовдв та юнезисграми.
Ключов! слова: блокада ам'явиносно! протоки, бужування, сперматогенез.
Робота е фрагментом НДР «Морфофункщоналъний стан кровоносного русла i тканинних елементiв чоловiчоí статевоI залози в умовах впливу патогенних факторiв (№ державноI реестрацн - 0109и009082).
Блокада шм'явиносних проток являеться одним ¡з способ1в контрацепцл, та нерщко шсля повторного шлюбу виникае потреба у вщновленш iх прохщносп [1, 2, 3, 5].
Найбшьш вщомим в урологн { андрологп способом вщновлення прохщноси шм'явиносних проток шсля резектомн е складна операщя накладання анастомозу «к1нець в к1нець» та вазоеп1дидимостом1я, як1 е часто неусшшними в план1 реканалiзацii протоки [4, 6, 7].
У данш робоп з метою контрацепцii застосоване блокування сiм'явиносних проток шляхом лнування в яечковому вiддiлi, а iх реканалiзацiя пiсля зняття лiгатури - бужуванням.
Метою роботи було визначити характер цитолопчних змiн в яечку i еякулятi пiсля реканалiзацii сiм'явиносноi протоки шляхом ii бужування в експерименп.
Матерiал та методи дослщження. Дослiдження виконанi на 36 статевозрших лабораторних щурах-самцях. Утримання i машпуляцн з тваринами здiйснювали вiдповiдно до положення «Загальнi етичнi принципи експерименпв над тваринами», затвердженого Першим нацюнальним конгресом з бiоетики (2011р.). Комюею з питань бiоетики ДВНЗ «Прикарпатський нацiональний унiверситет iменi Василя Стефаника» порушень морально - етичних норм при проведенш науково-дослiдноi роботи не виявлено (протокол №1 вщ 08.09.2016р.).
У робоп з метою вщновлення прохiдностi лiгованоi на 30 дiб сiм'явиносноi протоки у тварин шд загальним знеболенням по середнiй лшн калитки розрiзали тканини, в рану виводили шм'явиносну протоку, знiмали лнатуру, шляхом проколу проксимально вiд знято1' лiгатури в протоку вводили мандрен дiаметром 0,18 мм i здшснювали бужування. Протоку повертали в
