CC BY
33
УДК 547.963.3
ЛЕГКО ПРОНИКАЮЩИЙ ЧЕРЕЗ БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕМБРАНЫ МЫЛКИЙ АМФИФИЛЬНЫЙ ИНДУКТОР ИНТЕРФЕРОНА у -ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕПАТИТА С ЧЕЛОВЕКА
Татьяна Витальевна ЯМКОВАЯ1, Татьяна Ивановна ГЛОТОВА2, Ольга Петровна КОЛЕСНИКОВА3, Ольга Владимировна СЕМЕНОВА2, Елена Давидовна ГАВРИЛОВА3, Елена Владимировна ГОЙМАН3,
Виталий Иванович ЯМКОВОЙ4, Лев Евгеньевич ПАНИН 4
1 ООО «Виталанг»
630055, г. Новосибирск, ул. Рубиновая, 4
2 ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии 630501, Новосибирская обл., р. пос. Краснообск, а/я 8
3 ФГБУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН
630099, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14
4 ФГБУ НИИ биохимии СО РАМН 30117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
Исследована интерфероногенная активность мылкого амфифильного комплекса одноцепочечной высокополимерной РНК 8ассИаготусе&' свгвуг^чав, содержащей короткие двуспиральные участки с олеиновой кислотой (препарат Виталанг-2). Обнаружено, что данный препарат способен легко проникать через биологические мембраны и дозозависимо индуцировать в организме животных биосинтез интерферона у (№N-7). На модели вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота (ВД-БС КРС) исследована потенциальная противовирусная активность препарата Виталанг-2 в отношении гепатита С человека. Обнаружено, что данный препарат в максимально переносимой дозе 5 мг/см3 оказывает ингибирующее действие на вирус ВД-БС КРС, культивируемый в перевиваемой линии клеток коронарных сосудов теленка; уровень редукции вируса составил 1,97 ^10ТЦД50/см3. Таким образом, показано, что препарат Виталанг-2 обладает противовирусной активностью в отношении вируса ВД-БС КРС, а значит, с большой долей вероятности будет эффективен и в отношении гепатита С человека.
Ключевые слова: дрожжи, олеиновая кислота, высокополимерная РНК, интерферон у, интерфероногенная активность РНК, вирус диареи - болезни слизистых оболочек, гепатит С.
Сообщение относится к области медицины, ветеринарии и фармацевтической промышленности, в частности, к интерфероногенным противовирусным препаратам на основе дрожжевой РНК.
Известен целый ряд эффективных индукторов интерферона [3]. Однако в отечественной клинической практике для регуляции интерферо-ногенеза и лечения вирусных заболеваний, таких как гепатит С, грипп, ВИЧ-инфекции и др., при-
меняются в основном препараты на основе дву-спиральной РНК, в частности Ридостин [2].
Наиболее эффективным из используемых является липосомальный индуктор интерферона, представляющий собой водно-солевой раствор двуспиральной РНК, полученной из киллерных штаммов дрожжей, одноцепочечной высокополимерной РНК Saccharomyces cerevisiae, фосфа-тидилхолина, холестерина, альфа-токоферолаце-
Ямковая Т.В. - к.б.н., директор, e-mail: [email protected] Глотова Т.И. - д.б.н., проф., e-mail: [email protected]
Колесникова О.П. - д.б.н., зав. лабораторией экспериментальной иммунотерапии, e-mail: [email protected] Семенова О.В. - к.б.н., директор, e-mail: [email protected] Гаврилова Е.Д. - к.б.н., e-mail: [email protected] Гойман Е.В. - к.б.н., e-mail: [email protected]
Ямковой В.И. - д.б.н., проф. кафедры химии, e-mail: [email protected] \Панин Л.Е. \ - д.м.н., проф., академик РАМН, e-mail: [email protected]
тата, сахарозы и хлорида натрия [5]. Входящие в состав данного индуктора жиры образуют липо-сомы, в которые и заключена РНК. Это придает последней амфифильные свойства, защищает от действия нуклеаз и способствует проникновению ее в организм. Как следствие, липосомальный индуктор эффективно стимулирует биосинтез эндогенного интерферона. Однако он состоит из большого числа редких и дорогостоящих соединений и поэтому мало пригоден для массового производства.
В конце прошлого и начале нынешнего столетия в медицине возрос интерес к поиску препаратов, которые могли бы использоваться для лечения гепатита С. Для этих целей в качестве модели в опытах in vitro использовали вирус вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота, проявляющий высокую степень гомологии с вирусом гепатита С человека, но, в отличие от последнего, обладающий способностью к размножению в культурах клеток (цитопа-тогенные штаммы) с проявлением выраженного цитопатического действия [10].
Целью настоящего исследования является создание с использованием доступных и недорогих компонентов и испытание на модели вируса ВД-БС КРС эффективного противовирусного средства в отношении гепатита С человека, в качестве которого предлагается использовать мылкий амфифильный комплекс одноцепочечной высокополимерной РНК Saccharomyces cerevisiae (промышленные штаммы), содержащей короткие двуспиральные участки с олеиновой кислотой при следующем соотношении компонентов: высокополимерная РНК - 50-92,5 %, олеиновая кислота - 7,5-50 %.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В работе были использованы сухие пекарские дрожжи (Saccharomyces cerevisiae, Новосибирский дрожжевой завод) с содержанием влаги ~7,4 %, олеиновая кислота (ЗАО «Купавнареак-тив», марки «ч»), NaCl (ФГУП комбината «СИБ-СОЛЬ», г. Усолье-Сибирское), 96 % этанол (ОАО «Спиртовый комбинат», г. Мариинск), NaOH и бром марки «ч» отечественного производства. Для приготовления растворов использовали дистиллированную воду.
Оптическую плотность растворов в ультрафиолетовой и видимой областях спектра измеряли в 1 см прямоугольных кварцевых кюветах на спектрофотометре СФ-26 (ЛОМО, Россия).
Выделение из пекарских дрожжей чистой высокополимерной РНК (Виталанг-1) проводили
по методу [6], лиофилизованный препарат Вита-ланг-2 получали, как описано в работе [9].
Содержание олеиновой кислоты в препарате Виталанг-2 рассчитывали по весовой экстинкции и определяли по обесцвечиванию бромной воды. В первом случае из теоретической весовой экс-тинкции вычитали весовую экстинкцию препарата Виталанг-2, полученное значение делили на теоретическую весовую экстинкцию и умножали на 100 %. Во втором случае к 4 мл водного раствора препарата Виталанг-1 с оптической плотностью 26,6 ОЕ260/мл и к 4 мл водного раствора препарата Виталанг-2 с оптической плотностью 28,6 ОЕ260/мл добавляли по 100 мкл бромной воды, растворы перемешивали, переливали в 1 см прямоугольные кварцевые кюветы, закрывали их парафильмом и измеряли в течение 4 ч оптическую плотность при 445 нм первого раствора против второго. Оптическая плотность увеличивалась и через 2 ч от начала реакции достигала плато - 0,1 ОЕ445/мл. Полученное значение делили на 145 (молярный коэффициент экстинкции бромной воды при 445 нм) и умножали на 282,18 (молекулярная масса олеиновой кислоты). Получали концентрацию олеиновой кислоты в растворе препарата Виталанг-2. Концентрацию высокополимерной РНК в этом растворе рассчитывали делением его оптической плотности при 260 нм на его весовую экстинкцию. Две концентрации суммировали, концентрацию олеиновой кислоты делили на полученную сумму и умножали на 100 %.
Для определения способности препаратов Виталанг-1 и Виталанг-2 проникать через биологические мембраны в три одинаковых стеклянных флакончика на 6 мл с завинчивающимися пробками помещали по 7 продолговатых сочных мешочков спелой пульпы плода медового помело из рода Citrus и заливали их 4,8 мл водного раствора Виталанга-1 (27,3 ОЕ260/мл), водного раствора Виталанга-2 (27,1 ОЕ260/мл) или дистиллированной воды соответственно. Через 22 ч инкубации при комнатной температуре замеряли оптическую плотность растворов в 1-м и 2-м флакончиках против 3-го. Затем растворы сливали, промывали каждый флакончик с сочными мешочками пятью порциями по 5 мл дистиллированной воды. Сочные мешочки во всех 3 флакончиках измельчали стеклянной палочкой, из полученных суспензий отбирали по 100 мкл раствора и, разбавив его в 50 раз дистиллированной водой, замеряли оптическую плотность растворов из 1-го и 2-го флакончика против 3-го.
Для определения способности препарата Ви-таланг-2 индуцировать биосинтез эндогенного IFN-y использовали самцов мышей, гибридов
CBF1 8-10-недельного возраста, полученных из экспериментально-биологической клиники лабораторных животных СО РАМН (г. Новосибирск). Животных содержали в виварии в одинаковых условиях: в стандартных пластиковых клетках с мелкой древесной стружкой на стандартном рационе, в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей [1]. Виталанг-2 растворяли в среде RPMI 1640, встряхивая в течение 30 мин, и вводили мышам в различных дозах (1, 5 и 10 мг/кг) однократно внутримышечно в объеме 0,1 мл. Забор крови на сыворотку производили через 3, 6, 9, 12, 24 и 48 ч. Ридостин (положительный контроль) растворяли и вводили аналогично в терапевтической дозе 0,07 мг/кг. Концентрацию IFN-y в сыворотке крови мышей определяли согласно рекомендациям производителя соответствующего теста (mouse IFN-y ELISA Set, BD Biosciences, США). Из серии одинаковых (n = 5) экспериментов рассчитывали средние арифметические значения (M) и ошибку среднего (m), результаты представлены в виде M ± m.
Тест-вирус
В работе использовали Российский референтный цитопатогенный штамм ВК-1 вируса ВД-БС КРС. Характеристики штамма ВК-1 даны в табл. 1. Активность тест-вирусной суспензии для модельных опытов составляла не менее 6,5 ^10ТЦД50/смз (десятичный логарифм дозы, вызывающей 50%-е поражение клеток) для вируса ВД-БС КРС.
Культура клеток
Культивирование и титрование вируса ВД-БС КРС проводили в перевиваемой линии культуры клеток коронарных сосудов теленка (КСТ), которые выращивали во флаконах для клеточных культур (Nunc, Дания) в среде Игла МЕМ (производство ФГУП «Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН») с добавлением 5-10 % эмбриональной сыворотки крови теленка
(НуС1опе, США, лот № ASA28574), тестированной на наличие вируса ВД-БС КРС и антител к нему. При выращивании культур клеток использовали 0,25 % раствор трипсина, 0,01 % раствор химотрипсина в 0,02 % растворе Версена (производство ФГУП «Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. МП. Чумакова» РАМН).
Определение стерильности трех серий препарата Виталанг-2 проводили в соответствии с ГОСТ 28085-89 Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности.
Наработка вирусной суспензии и определение биоконцентрации вируса ВД-БС КРС. Проводили 5 последовательных пассажей вируса в перевиваемой культуре клеток КСТ. Для этого во флакон объемом 25 см3 с сформированным монослоем культуры клеток вносили 0,5 см3 содержащей вирус суспензии после предварительного удаления из флакона питательной среды. После 1 ч контакта вируса с культурой клеток во флакон добавляли 20 мл питательной среды Игла МЕМ. Зараженные флаконы инкубировали при температуре 37 ± 0,5 °С с ежедневным просмотром состояния монослоя для выявления ци-тодеструктивных изменений действия вируса. После выявления таких изменений в более чем 85 % клеток флаконы помещали в морозильную камеру при -20 °С и однократно оттаивали, после чего проводили последующий пассаж вируса в перевиваемой культуре клеток. Для определения биоконцентрации вируса ВД-БС КРС выполняли титрование вируссодержащей суспензии в 96-лу-ночных культуральных планшетах с использованием двухсуточного монослоя клеток КСТ. Предварительно готовили 10-кратные разведения вируссодержащей суспензии на питательной среде Игла МЕМ от 10-1 до 10-7 . Из каждого разведения вируса по 100 мкл вносили в четыре параллельных ряда по 7 лунок 96-луночного планшета. Инфицированные клетки инкубировали в течение 3-5 суток. Титр вируса оценивали в 1§ ТЦД 3, рассчитывая по методу Рида и Менча [4].
Таблица 1
Характеристика тест-штамма ВК-1 вируса ВД-БС КРС
Характеристика штамма Откуда получен Метод титрования Накопление вируса Титрование вируса (определение инфекционной активности)
Штамм ВК-1 вируса ВД-БС КРС Семейство: Flavшridae. Выделен в 1972 г. от больного теленка Музей ГНУ ВИЭВ им. Я.Р. Коваленко Определение ТЦД50/см3 Перевиваемая культура клеток коронарных сосудов плода коровы (КСТ) Культура клеток КСТ
Определение токсичности трех серий препарата Виталанг-2 in vitro проводили в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [7] с предварительным приготовлением десятикратных разведений препарата (от 10-1 до 10-7) в культуральной питательной среде и внесением их в культуры клеток, достигших монослоя (по 4 повтора на каждое разведение). Контакт разведений препарата с клетками осуществляли в течение 72 ч с ежедневной микроскопией для определения цитодеструктивного действия, которое отмечали по 4-крестовой системе по методу Финтера, где 100%-я деструкция клеток обозначается 4+, 25%-я - как 1+. Минимальная концентрация препарата, вызывающая цитотоксический эффект на 50 % (++), рассматривалась как цитопатогенная доза (ТЦД50).
На основании полученных данных при определении токсичности препарата определяли максимально переносимую концентрацию препарата (МПК), которую вычисляли по формуле: МПК =
ТЦД50/4.
Определение противовирусной активности препарата Виталанг-2 in vitro проводили методом титрования проб, собранных через 24 часа после заражения вирусом чувствительной к нему культуры клеток, выращенных в плоскодонных культуральных 96-луночных планшетах. В опытах использовали препарат в максимально переносимой концентрации 5 мг/см3.
Для определения лечебной активности препарат Виталанг-2 вносили в монослой используемой культуры клеток КСТ через 1 ч после контакта с тест-вирусом ВК-1 в дозе, вызывающей 100%-е поражение клеток. В качестве контроля использовали клетки, не обработанные препаратом.
Для определения профилактической активности препарат вносили в монослой используемой культуры клеток КСТ за 1 ч до внесения тест-вируса ВК-1 в той же дозе, что при определении лечебной активности препарата. В качестве контроля использовали клетки, не обработанные препаратом.
Для определения вирулицидной активности препарат вносили в монослой используемой культуры клеток КСТ одновременно с тест-вирусом ВК-1. В качестве контроля использовали клетки, зараженные только тест-вирусом.
Оценку противовирусной активности препарата Виталанг-2 в отношении вируса ВД-БС КРС проводили по степени ингибирования размножения (редукции) тест-вируса. Для расчета вирусной редукции использовали формулу: R =
= О^А) - (^юАп), гДе Ао - ТИТР вируса/мл в исходном образце, Ап - титр вируса/мл в образце после обработки.
Препаратом, обладающим выраженным антивирусным эффектом, считали соединение, подавляющее размножение вируса в культуре клеток на 1,7-2,0 [8].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Использованный в работе препарат Вита-ланг-1 (чистая гидрофильная высокополимерная дрожжевая РНК) с теоретической весовой экс-тинкцией 20,0 ОЕ260/мг хорошо растворяется в воде (30 мг препарата растворяется в 1 мл воды при комнатной температуре в течение нескольких секунд).
Препарат Виталанг-2 (амфифильный комплекс высокополимерной дрожжевой РНК с олеиновой кислотой) с весовой экстинкцией 17,8 Е260/мг растворяется в воде удовлетворительно (30 мг препарата растворяется в 1 мл воды при комнатной температуре только через 30-60 мин при периодическом встряхивании), водный раствор мылкий, нерастворенные крупинки скользкие.
Содержание олеиновой кислоты в препарате Виталанг-2, рассчитанное по весовой экстинк-ции и определенное по обесцвечиванию бромной воды, составило 11,0 и 10,8 % соответственно.
При определении способности препаратов Виталанг-1 и Виталанг-2 проникать через биологические мембраны на модели сочных мешочков спелой пульпы плода медового помело результаты первого измерения оптической плотности
составили 26,4 и 22,9 ОЕ„7мл соответственно,
260
т.е. клетки поглотили Виталанг-2 в 4,7 раза больше, чем Виталанг-1 ((27,3 - 26,4)/(27,1 - 22,9)). Оптическая плотность разведенных в 50 раз растворов суспензий сочных мешочков при втором измерении составила для Виталанга-1 0,065 ОЕ260/мл, для Виталанга-2 - 0,318 ОЕ260/мл. Это означает, что Виталанг-2 проникает через биологические мембраны минимум в 4,9 раза эффективнее Виталанга-1 (0,318/0,065).
Результаты определения содержания №N-7 в сыворотке крови мышей в разные сроки после введения им Виталанга-2 в дозе 1,0 ± 0,1 мг/кг и Ридостина в дозе 0,070 ± 0,007 мг/кг представлены в табл. 2, из которой видно, что разброс значений от средней величины как для Виталанга-2, так и для Ридостина весьма значительный. Поэтому с определенной долей вероятности можно констатировать только то, что Виталанг-2 в терапевтической дозе 1 мг/кг стимулирует продукцию 1КК-у, сравнимую с таковой для Ридостина.
Таблица 2
Изменение содержания 1КЫ-у в сыворотке крови мышей после внутримышечного введения Ридостина или Виталанга-2
Время, прошедшее после введения индуктора IFN-y, ч Содержание IFN-y, пг/мл
Ридостин (n = 5) Виталанг-2 (n = 5)
3 348 ± 194 599 ± 280
6 273 ±148 67 ± 49
9 920 ± 420 252±145
12 618±289 592 ± 276
24 330 ± 195 182 ± 117
48 773 ± 346 1030±415
Таблица 3
Определение уровня редукции вируса ВД-БС КРС после действия препарата Виталанг-2
Наименование противовирусного действия Титр вируса в образце Уровень редукции, R
исходно (lg10A0) после обработки препаратом (lg10An)
Профилактическое 5,08 4,42 0,66
Вирулицидное 5,67 4,33 1,34
Лечебное 5,34 3,37 1,97
Содержание IFN-y в сыворотке крови мышей через 9 ч после введения Виталанга-2 в дозах 1, 5 и 10 мг/кг составило соответственно 252 ± 145, 1252 ± 376 и 1430 ± 286 пг/мл (в контроле 71 ± 46 пг/мл). Видно, что Виталанг-2 на сроке 9 ч после введения классически (кривая с выходом на плато в точке 5 мг/кг) дозозависимо стимулирует продукцию IFN-y.
В результате проведенных нами исследований было установлено, что все три тестированные в настоящей работе серии препарата Виталанг-2, полученного по методу [9], являются стерильными и могут быть использованы для проведения дальнейших исследований в условиях in vitro без дополнительной ультрафильтрации.
Концентрация вирусной суспензии штамма ВК-1 вируса ВД-БС КРС составила 6,5 ± 0,012
lg 10ТЦД50/мд.
Все три тестированные нами серии препарата Виталанг-2 не отличались друг от друга по токсичности для перевиваемой культуры клеток КСТ. Максимальная нетоксичная концентрация препарата составила 20 мг/см3, максимальная переносимая концентрация - 5 мг/см3.
Результаты определения лечебной, профилактической и вирулицидной активности препарата Виталанг-2 представлены в табл. 3. Полученные данные свидетельствуют о том, что препарат Виталанг-2 в максимально переносимой дозе оказывает лечебное действие на вирус
ВД-БС КРС. Уровень редукции вируса составил
1,97 ^тцд^з.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В настоящей работе впервые экспериментально показано, что мылкая амфифильная одноцепо-чечная высокополимерная РНК Saccharomyces cerevisiae, содержащая короткие двуспиральные участки, содержит в своем составе олеиновую кислоту, легко проникает через биологические мембраны и дозозависимо индуцирует в организме животных биосинтез 1КК-у. Именно этими свойствами обусловлена, вероятно, ее высокая противовирусная активность в отношении вируса ВД-БС КРС и потенциальная эффективность в отношении гепатита С человека.
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации (ГК № 16.512.11.2018 от 11.02.2011).
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Европейская конвенция по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях. Страсбург, 1986.
2. Ершов Ф.И. Антивирусные препараты. М.: Медицина, 1998. 147-151.
3. Интерферон-2011: Сб. науч. статей / Ред. Ф.И. Ершов, А.И. Наровлянский. М., 2012. 512 с.
4. Медицинская вирусология: Руководство / Ред. Д.К. Львов. М.: Медицинское информационное агентство, 2008. 656 с.
5. Пат. 2306936 РФ. Липосомальный индуктор интерферона / В.В. Золин, А.А. Колокольцов, С.Н. Таргонский и др.; опубл. 10.08.2005.
6. Пат. 2392328 РФ. Способ получения высокополимерной РНК из дрожжей / Т.В. Ямковая, С.Н. Загребельный, Л.Е. Панин, В.И. Ямковой; опубл. 20.06.2010.
7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Ред. Р. У. Хабриев. М.: Медицина, 2005.
8. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Ред. А.Н. Миронов. М.: Медицина, 2005.
9. Ямковая Т.В., Ямковой В.И., Панин Л.Е. Выделение и анализ биологической активности высокополимерной РНК из пекарских дрожжей // Бюл. СО РАМН. 2012. (6). 60-68.
10. Buckwold V.E., Beer B.E., Donis R.O. Bovine viral diarrhea virus as a surrogate model of hepatitis C virus for the evaluation of antiviral agents // Antiviral Res. 2003. 60. (1). 1-15.
EASILY PASS THROUGH BIOLOGICAL MEMBRANES SOAPY AMPHIPHILIC INDUCER OF INTERFERON Y - THE PROMISING DRUG FOR TREATMENT OF HUMAN HEPATITIS C
Tat'yana Vital'yevna YAMKOVAYA1, Tat'yana Ivanovna GLOTOVA2, Ol'ga Petrovna KOLESNIKOVA3, Ol'ga Vladimirovna SEMENOVA2, Elena Davidovna GAVRILOVA3, Elena Vladimirovna GOIMAN3,
Vitaliy Ivanovich YAMKOVOY4, Lev Evgen'yevich PANIN
1LLC « Vitalang»
630055, Novosibirsk, Rubinovaya str., 4
2Institute of Experimental Veterinary of Siberia and the Far East, Russian Academy of Agricultural Sciences 630501, Novosibirsk region, Working village Krasnoobsk, p / 8
3Institute of Clinical Immunology of SB RAMS 630099, Novosibirsk, Yadrintsevskaya str., 14
4Institute for Biochemistry of SB RAMS 630117, Novosibirsk, Timakov str., 2
The interferon inducing activity of a soapy amphiphilic complex of a high-polymeric single-stranded RNA from Saccharomyces cerevisiae, containing short double-stranded regions with oleic acid has been studied (the Vitalang-2 drug). It was discovered that the complex is capable of crossing the biological membranes and it induces biosynthesis of IFN-y in the animal models in a dose-dependent manner. The antiviral activity of the Vitalang-2 against human hepatitis C on the model of bovine viral diarrhea-mucosal disease in cattle (BVD-MD) is investigated. It was found that the maximum tolerated drug in a dose of 5 mg/cm3 has a profound inhibitory effect on BVD-MD virus, in cultured coronary calf cell lines; virus reduction rate was 1.97 lg10TTsD50/cm3. Therefore the study demonstrated that Vitalang-2 has antiviral activity against a BVD-MD virus in cattle, and thus it can be expected that this drug will be effective against hepatitis C in human patients.
Key words: yeast, oleic acid, high-polymeric RNA, interferon-y, interferon inducing activity of RNA, virus diarrhea-mucosal disease, hepatitis C.
4
Yamkovaya T.V. - candidate of biological sciences, director, e-mail: [email protected]
Glotova T.I. - doctor of biological sciences, professor, e-mail: [email protected]
Kolesnikova O.P. - doctor of medical sciences, head of the laboratory of experimental immunotherapy,
e-mail: [email protected]
Semenova O.V. - candidate of biological sciences, director, e-mail: [email protected] Gavrilova E.D. - candidate of biological sciences, e-mail: [email protected] Goiman E.V. - candidate of biological sciences, e-mail: [email protected]
Yamkovoy V.I. - doctor of biological sciences, professor of the chair for chemistry, e-mail: [email protected] \Panin LE - doctor of medical sciences, professor, academician of RAMS, e-mail: [email protected]
