CC BY
14
УДК 577.152; 612.115
ЛЕЧЕБНОЕ ДЕЙСТВИЕ МАЗИ МОРИКРОЛ
Г. Н. Руденская1*, Л. В. Лютова2, М. А. Карабасова2, Г. В. Андреенко2, В. А. Исаев3, А. В. Брусов , Е. И. Баднина , А. Е. Резникова , Л. В. Агеева
(кафедра химии природных соединений химического факультета, Лаборатория фибринолиза биологического факультета Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова; Воробьевы горы, Москва 119899, Россия, e-mail: gnruden@genebee.msu. su); НПП ТРИНИТА, ЦНИИ стоматологии, ЦННИС, Московский центр детской челюстно-лицевой хирургии)
Мазь Морикрол представляет собой эмульсию, которая содержит эйконол (полиненасыщенные жирные кислоты омега-3), комплекс протеиназ с коллагенолитическим действием и ланолин. Действие Морикрола на здоровую кожу и гнойные раны у крыс было изучено с помощью гематологических методов. Клинические исследования показали положительный эффект применения Морикрола при лечении гнойных ран, ожогов, посттравматических и послеоперационных рубцов.
Фирмой «Тринита» совместно с химическим и биологическим факультетами МГУ был разработан и изучен препарат, представляющий собой комплекс протеаз из ге-патопанкреаса камчатского краба, названный Морикраза. Было показано, что Морикраза содержит эндопротеиназы (коллагеназу [1], трипсин [2], металлопротеиназу [3]) и эк-зопептидазы (карбоксипептидазу [4], аминопептидазу [5]), эффективно гидролизующие различные белки и пептиды. Препарат обладает заметной фибринолитической, тромболитической и коллагеназной активностью [3, 4, 6]. Изучение в эксперименте in vivo свойств Морикразы показало, что препарат оказывал лечебное действие на гнойные раны у крыс [7, 8]. Помимо этого in vitro было показано, что коллагенолитическая активность Морикразы проявляется в растворении рубцово-измененной ткани, гидролизе токсичных белков и пептидов, образующихся при некрозах [9].
Способ применения коллагенолитического препарата в виде раствора не может быть предложен для клинических испытаний, так как при нанесении ферментного раствора у пациентов возникают сильная боль и жжение. Поэтому мы использовали Морикразу в составе мази «Морикрол». В качестве мазевой основы использовали выделенный из тушек морских холодноводных рыб препарат «Эйконол», представляющий собой комплекс полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) семейства омега-3, (эйкозапентаеновая, докозогексаеновая) и витаминов А, Е, F и Д. [10]. Эти биологическиактивные компоненты оказывают значительное воздействие на обмен веществ, особенно на липидный обмен, гемокоагуляцию, а также на структуру и функцию биологических мембран.
Целью данной работы было изучение лечебного действия мази «Морикрол» на поврежденную кожу.
Методы и материалы
Изучение влияния мази Морикол на систему гемостаза. Опыты проводили на 20 интактных нелинейных белых крысах-самцах весом 180-200 г. Мазь наносили ежедневно на два выстриженных участка кожи спины и исследовали состояние свертывающей и фибринолитической систем крови.
Кровь брали из яремной вены с 3,8%-м цитратом натрия в соотношении 9:1. Плазму отделяли центрифугированием в течение 10 мин при 2000 об/мин. Активность системы свертывания крови определяли по следующим показателям (табл. 1): концентрации фибриногена, времени рекальцификации, тромбоэластограмме, где г -время реакции, соответствующее первой фазе свертывания, т.е. тромбино- и тромбопластино-образованию, К -отрезок времени от конца г до расхождения кривой в 20 мм. Это время образования сгустка, появление первых фибриновых нитей, Ма - максимальная амплитуда [11].
Состояние системы фибринолиза у животных определяли по следующим параметрам: времени лизиса сгустка эуглобулиновой фракции, фибринолитической активности на фибриновых пластинках, плазмину, активатору плазми-ногена, антиактиватору.
Изучение раздражающего и аллергогенного действия мази. Десяти добровольцам (7 женщин и 3 мужчин) Морикрол наносили на поверхность руки или ноги (однократно, на ночь) и втирали в течение 1,5-2 мес.
Для лечения ожогов и гнойных ран Морикрол наносили на пораженный участок один раз на ночь под марлевую повязку. На послеоперационные швы через 2 дня после операции накладывали марлевые повязки, которые пропитывали Морикролом 4-5 раз в сутки и снимали через 6-7 дней. Для консервативного лечения рубцовой тка-
* Адресат для переписки.
ни мазь наносили на пораженный участок под марлевую повязку один раз в день. Продолжительность аппликации составляла от 1 до 3 мес. В случаях трансплантации свободной кожи лечение проводили с помощью давящих повязок, пропитанных Морикролом, который добавляли 4-5 раз в сутки ежедневно до снятия повязки.
В работе использовали: бычий фибриноген и бычий тромбин (Каунасское предприятие по производству бактерийных препаратов, Литва), активатор плазминогена из сердца свиньи (получен в лаборатории ферментативного фибринолиза, биологический факультет МГУ, Россия).
Результаты и обсуждение
Изучение влияния аппликации мази Морикрол на кожные покровы и состояние систем гемостаза и фибринолиза. Мазь Морикрол наносили на два выстриженных участка кожи спины крыс ежедневно в течение 20 дней. Состояние кожного покрова за весь период наблюдения было хорошим. В первые минуты после нанесения мази наблюдали легкое покраснение, которое быстро исчезало. Никакого раздражающего и аллергического действия, как местного, так и общего, мазь Морикрол не оказывала. Волосяной покров на выстриженном участке кожи восстанавливался быстро и ровно.
Поскольку Морикраза, входящая в состав мази Мо-рикрол, представляет собой комплекс протеолитических
Т а б л и ц а 1
Показатели свертывающей и фибринолитической систем
крови у интактных крыс после наружного применения Морикрола (смазывание участков кожи)
Показатели До смазывания (n = 10) M+m Через 20 дней после смазывания (n = 10) M+m P
свертывание
Фибриноген, мг/дл Время рекальцификации, c Тромбоэластограмма r K Ma 467,1+30,4 58,3+3,0 2,2+0,2 3,2+0,2 3,6+1,5 489,4+25,9 > 0,5 105,7+4,3 < 0,001 5,3+1,0 < 0,01 8,6+2,2 < 0,02 3,5+1,4 > 0,5
фибринолиз
Время лизиса сгустков эуглобулинов, мин 67,1+13,3 82,3+11,9 > 0,5
Фибринолитическая активность на стандартных фибриновых пластинках, мм2 124,8+18,3 106,5+13,1 > 0,5
Активатор плазминогена, мм2 120+11,1 79,6+9,2 > 0,1
Плазмин, мм2 14,9+3,9 26,9+5,3 > 0,1
Антиактиватор, % 93,9+3,09 94,9+1,8 > 0,5
ферментов, которые при нанесении на кожу могут всасываться в кровь, возникла необходимость изучения состояния свертывающей и фибринолитической активности систем крови у животных, которым апплицировали Морикрол. Ранее было показано in vitro и in vivo, что Мо-рикраза в целом и отдельные ее фракции обладают высокой удельной фибринолитической и активаторной активностью [9]. В этой серии экспериментов кровь брали перед лечением Морикролом и через 20 дней после его применения. Данные, характеризующие состояние свертывающей и фибринолитической систем крови, представлены в табл. 1 .
Как видно из результатов анализа, длительное наружное применение мази Морикрол не меняет показатели фибринолитической системы крови, но оказывает гипоко-агуляционное действие.
Изучение действия Морикрола на здоровую и трофически измененную кожу. Десяти добровольцам (7 женщин и 3 мужчин) наносили Морикрол на отдельные участки здоровой кожи. Никаких аллергизирующих и побочных эффектов не отмечено, мазь хорошо впитывалась. Пятнадцать пациентов имели гнойно-трофические язвы на ногах, у семи из них язвы были инфицированные. Уже через 7-10 дней после применения мази наблюдалось удаление некротической ткани, образование красной грануляционной ткани и начальная стадия реэпитализации. Полное заживление раны наступало через 2 мес.
Применение Морикрола для лечения ран лица и слизистой полости рта у детей. Клинические исследования проводили в госпитале Св. Владимира в отделении детской челюстно-лицевой хирургии (61 пациент). Мазь применяли для лечения больных с длительно незаживающими кожными ранами, а также после свободной и донорской пересадки кожи. Применение мази способствовало гладкому течению послеоперационного периода и приживлению трансплантантов у всех больных. При использовании Морикрола отмечали сокращение сроков эпитализации обширных ран слизистой полости рта и отсутствие грубых деформирующих рубцов при заживлении. Использование его при гнойных ранах приводило к более быстрой очистке раны и снижению рубцевания. У детей с неосложненным послеоперационным периодом применение мази в течение 2-7 сут препятствовало образованию корочек, способствовало ускорению снятия отека. Заживление происходило на 5-6-е сут. При обширных ссадинах лица, а также в случае больших донорских поверхностей Морикрол приводил к быстрой эпителизации без образования грубых рубцов. Аллергическая реакция на препарат наблюдалась только у 3 пациентов.
Изучение влияния Морикрола на рубцово-измененную ткань. Морикрол применяли для лечения детей с келоид-ными рубцами в комплексе с противорубцовой терапией, что приводило к более быстрому размягчению и поблед-нению рубцов. Использование мази снимало у больных
Т а б л и ц а 2
Действие Морикрола на рубцовую ткань
Рубцовая ткань Общее количество пациентов Заметный эффект Частичное улучшение Нет эффекта
Келоидные рубцы
посттравматические 27 20 4 3
послеоперационные 27 18 7 2
атрофические 15 8 7 -
такие неприятные ощущения, как зуд, жжение, боль. Наблюдался также более стойкий и длительный увлажняющий эффект.
В табл. 2 приведены результаты применения Морикрола для лечения взрослых при различных косметических операциях в ЦНИИ стоматологии МЗ РФ. Осложнений общего характера ни у одного больного не отмечалось. Мазь не вызывала никаких побочных явлений и способствовала улучшению состояния рубцовой ткани. Все пациенты отмечали уменьшение зуда, красноты и чувства стягивания. У 46 пациентов из I группы отмечалось значительное улучшение кожного покрова в области рубца. Это проявлялось в виде побледнения рубца, уменьшения ощущения стягивания в пораженной области, некоторого уплощения рубцового тяжа. При пальпации отмечалось смягчение рубца и снижение тургора кожного покрова в его области. У 18 пациентов из II группы наблюдалось лишь частичное улучшение - исчезали зуд и краснота, но размягчения ткани не наступало. Отсутствие ожидаемого
эффекта от применения Морикрола констатировали у 5 пациентов с застарелыми келоидными послеожоговыми рубцами. Возможно, при более длительном применении Морикрола результат был бы лучше.
Таким образом, показано, что Морикрол не вызывает побочных действий; при нанесении на область кожи, пораженную келоидными рубцами, Морикрол способствует снятию зуда, красноты, вызывает некоторое уплощение и размягчение рубцовой ткани, что улучшает функцию близлежащих мышц.
Вероятно, этот эффект достигается благодаря совместному действию на кожные покровы полиненасыщенных жирных кислот семейства Омега-3, которые проникают в мембраны клеток кожи, улучшая их структуру, а также благодаря коллагенолитическим свойствам Морикразы. Это особенно важно в тех случаях, когда рубцы локализуются на лице. Применение мази Морикрол открывает новые возможности в консервативном лечении келоидных рубцов различной этиологии.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Руденская Г.Н., Исаев В.А., Степанов В.М. и др. //Биохимия.
1996. 61. С. 1119.
2. Руденская Г.Н., Исаев В.А., Калебина Т.С., Степанов В.М. и др.
// Биоорган. хим. 1998. 24. С. 112.
3. Rudenskaya G.N., Isaev V.A., Shmoylov A.M. // Apply Biochem.
Biothech. (ABAB}. 2000. 84 (in press).
4. Руденская Г.Н., Купенко О.Г., Исаев В.А. и др. // Биоорган. хим.
1995. 21. С. 249.
5. Руденская Г.Н., Шмойлов А.М., Исаев В.А.и др. // Биохимия.
2000. 65. С. 23.
6. Исаев В.А., Карабасова М.А., Лютова Л.В. и др. // Вопр. мед.
хим. 1994. 40. С. 43.
7. Андреенко Г.В., Лютова Л.В., Карабасова М.А. и др. // Вопр.
мед. хим. 1994. 40. С. 46.
8. Исаев В.А., Карабасова М.А., Лютова Л.В., Руденская Г.Н. и
др. Способ лечения трофических язв. Патент РФ № 2057534.
9. Лютова Л.В., Карабасова М.А., Андреенко Г.В., Руденская Г.Н.
и др. // Вопр. мед. хим. 1998. 44. С. 292.
10. Ашмарин И.П., Исаев В.А., Самсонов М.А. Физиологические аспекты применения Эйконола и других содержащих ПНЖК-3 продуктов при заболеваниях сердечно-сосудистой системы / Методические рекомендации МГУ, биологический факультет. 1999. С. 21.
11. Методы исследования фибринолитической системы крови / Под ред. Г.В. Андреенко М., 1981.
12. Astrup T., Mullerz S. // Arch. Biochem. Biophys. 1952. 40. Р. 345.
Поступила в редакцию 20.06.00
