CC BY
74
УДК 634.8:632.4
Латентная
зараженность винограда бактериальным раком
В.Ф. БУРДИНСКАЯ, руководитель группы защиты растений Всероссийского НИИ виноградарства и виноделия имени Я.И. Потапенко
Н.О. АРЕСТОВА, старший научный сотрудник
Бактериальный рак распространен во всех зонах выращивания винограда, его высокая вредоносность отмечается как у нас в стране, так и за рубежом, и несмотря на применение различных мер борьбы, в том числе и фитосанитарных, отмечается его ежегодное прогрессирование [2].
Возбудитель заболевания - почвообитающая бактерия АдгоЬао1е-пит tumefaоiens, - индуцирует опу-холеобразование у широкого круга растений. Наиболее восприимчивы двудольные из семейств розоцветные, толстянковые, пасленовые.
1. Бактериальный рак винограда
сложноцветные. Практически все однодольные (кроме Liliaes и Arales) не реагируют на инокуляцию бактерией образованием опухоли.
Виды Agrobacterium на винограде представлены различными штаммами - вирулентными (A. tumefa-ciens) и авирулентными (A. radio-bacter), единственным и достоверным различием которых является способность вызывать опухоль (рис. 1). Для индукции опухоли необходимо сочетание целого ряда условий: наличие раны, вирулентного штамма A. tumefaciens, благоприятных условий внешней среды, наиболее важными из которых являются температура и влажность, время инокуляции и продолжительность воздействия бактерии.
Под влиянием различных причин вирулентность агробактерий может ослабевать, кратковременно или полностью исчезать. Кроме того,
опытным путем доказана способность передачи вирулентности от А. tumefaоiens к А. radioЬaоter в одной опухоли, вызванной смешанной инфекцией [1].
После заражения растения бактерия А. tumefaоiens может длительное время существовать в его сосудах без проявления внешних симптомов. Такое бессимптомное (латентное) сохранение в лозе при-войных и подвойных сортов создает угрозу заражения при производстве и выращивании привитых и корнесобственных саженцев. Как отмечает А.И. Талаш, заготовка лозы, пораженной бактериальным раком в латентной форме, ведет к получению в школке больных саженцев, которые после высадки на постоянное место погибают на 27-й год [5].
Изучена латентная зараженность бактериальным раком ряда сортов винограда селекции ВНИИВиВ имени Я.И. Потапенко. Наличие бактерии А. tumefaоiens в сосудистой системе бессимптомных растений винограда устанавливали по ее способности вызывать образование опухоли на индикаторах. Материалом для тестирования служила пасока исследуемых сортов. Предварительно при визуальном обследовании была отобрана группа внешне здоровых растений, не проявляющих признаков заболевания. В период весеннего сокодвижения с этих кустов провели сбор пасоки для последующего исследования на наличие возбудителя бактериального рака, используя методику И. Маленина [4]. Весеннее тестирование пасоки предпочтительнее, чем побегов, поскольку, согласно данным электронной микроскопии, концентрация бактерий в ней наивысшая [3].
После удаления 0,5 % раствором формалина поверхностной микрофлоры на побег, используя стерильные материалы и инструменты,навешивали пробирку и оставляли ее на 2 суток. Собранную пасоку ис-
пользовали для заражения трех индикаторных растений: Kalanchoe pinnatum, гороха (проростки), моркови (диски).
Молодые стебли каланхое на уровне 2 см от точки роста заражали уколом с помощью шприца с последующим нанесением в место ранения пасоки. Место укола оборачивали ватой, смоченной пасокой, и заматывали пленкой. На листьях уколы делали в главную жилку. После заражения растения изолировали во влажную камеру с повышенной влажностью и оптимальной для опухолеобразования температурой 25 °С.
У проростков гороха после достижения ими длины 2,5 см срезали верхушку, инокулировали место среза пасокой и помещали затем в термостат при 26 °С.
Диски моркови с соблюдением строгой стерильности укладывали в чашки Петри на увлажненную дистиллированной водой фильтровальную бумагу. Затем на поверхность дисков наносили несколько капель пасоки исследуемого растения, а на контрольные образцы -дистиллированную воду. В первые 7 дней после заражения чашки Петри держали в термостате при 26 °С и влажности 80 %, а затем в лаборатории при естественном освещении и комнатной температуре.
Не все тест-объекты одинаково реагировали на инокуляцию, наи-
2. Развитие опухоли на дисках моркови: а — на 14-й день после заражения;
Ь — на 30-й день
лучшим индикатором были диски моркови. Начальный процесс опухолеобразования в виде белых бугорков отмечали уже через 12-14 дней (рис. 2а). Конечный результат заражения фиксировали через 30 дней, визуально определяя наличие (+) либо отсутствие (-) опухолевых разрастаний тканей индикаторов (рис. 2Ь). У каланхое опухоли развивались только на побегах, на листьях они отсутствовали. Реакция проростков гороха на инокулирова-
ние пасокой была слабой. Только в двух случаях отмечали аномалию в виде утолщения стеблей. Рост опухоли хотя бы в одном из индикаторов свидетельствует о наличии бактерии А. 1ите1ас1епв в пасоке проверяемого растения, то есть растение является латентным носителем возбудителя заболевания.
Данный метод искусственного заражения индикаторов позволил выявить от 1,3 до 25 % растений с латентным протеканием заболевания и исключить их из дальнейшего размножения (см. таблицу).
Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 09-04-99133.
ЛИТЕРАТУРА
1. Байдербек Р. Опухоли растений. -М.: Колос, 1981, 303 с.
2. Ключникова Г.Н. Сорта винограда нового поколения, устойчивые к бактериальному раку. // Виноград и вино России, 2000, № 5, с. 25-27.
3. Леманова Н.Б. Бактериальный рак винограда и способы борьбы с заболеванием. - Кишинев: «Штиинца», 1988, 98 с.
4. Маленин И. Метод за установяване на АдгоЬаС:епит ШтеТааепв в лозовите растения. // Градин. и лозарска наука, 1974, № 11, с. 120-124.
5. ТалашА.И., ДроботК.О., Евдокимова Е.А. Методы управления патосистемами виноградных агроценозов /Новации и эффективность производственных процессов в виноградарстве и виноделии. т. I. - Краснодар, 2005, с. 277-283.
Аннотация. Проведен анализ пасоки визуально здоровых растений винограда с помощью растений-индикаторов. Выявлено присутствие возбудителя бактериального рака в сосудистой системе исследуемых растений.
Ключевые слова. Бактериальный рак, латентная зараженность, пасока, растения-индикаторы.
Abstract. The analysis of a bleeding sap of visually healthy plants of a grape with the help of plants of indicators is carried out. Presence of causal organism of an Agrobacterium tumefaciens at vascular system of researched plants is revealed.
Keywords. Agrobacterium tumefaciens, latent contamination, a bleeding sap, plants indicators.
Результаты проверки бессимптомных кустов винограда на наличие латентной инфекции
Сорт Индикаторные растения Латентно зараженные кусты (%)
каланхое проростки гороха диски моркови
Восторг + + + 7,3
Агат донской + - + 9,5
Грушевский белый - - + 4,2
Степной - - + 3,6
Степняк + + + 25
Скиф - - + 1,3
Мускат донской + - + 10,4
Розовинка + - + 12,6
+ — образование опухолей,------отсутствие опухолей.
