CC BY
36
Список литературы
1. Афанасьева А. И. Адаптация ягнят западносибирской мясной породы в связи с сезоном их рождения / А. И. Афанасьева, С. Г. Катаманов, Н. Ю. Буц // Овцы, козы, шерстяное дело. 2014. № 2. С. 9-11.
2. Граевская Н. Д. Спортивная медицина: курс лекций и практические занятия / Н. Д. Граевская [Электронный ресурс] 2004. https://sinref.ru
3. Кассиль Г. Н. Значение катехоламинов при оценке тонуса симпатоадреналовой системы и реактивности в норме и патологии / Г. Н. Кассиль // Цепные нейрогуморальные реакции и симпатоадреналовая система. Л., 1968. С. 108-112.
4. Краснов В. Н. Расстройства аффективного спектра / В. Н. Краснов М.: Практическая медицина, 2011. 432 с.
5. Мохов Б. П. Адаптация сельскохозяйственных животных и птицы / Б. П. Мохов, В. В. Егорова, З. Л. Семерханов, Т. Б. Солозобова, Л. К. Николаева. Ульяновск, 2004. 160 с.
6. Стоименов Й. А. Психиатрический энциклопедический словарь // Й. А. Стоименов, М. Й. Сто-
именова, П. Й. Коева [и др.]. К.: «МАУП», 2003. 1200 с.
7. Шайхелисламова М. В. Симпатоадреналовая система и кора надпочечников в пре- и пубертатный периоды развития человека / М. В. Шайхелисламо-ва, Ф. Г. Ситдиков, А. А. Ситдикова, Л. Ю. Кузьмина, Ф. В. Валеева // Онтогенез. 2008. Т. 39, № 2. С. 116-124.
8. Шайхелисламова М. В. Соотношение функциональной активности симпатоадреналовой системы и коры надпочечников у детей с различным исходным вегетативным тонусом в сердечно-сосудистой системе / М. В. Шайхелисламова, А. А. Ситдикова // Вестник ТГГПУ 2007. №2-3. С. 9-10.
9. Kawa S. A brief historicity of the Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders: issues and implications for the future of psychiatric canon and practice / Kawa S., Giordano J. // Philos. Ethics Humanit. Med. 2012. Vol. 7. P. 2.
10. Pierre J. M. The borders of mental disorder in psychiatry and the DSM: past, present, and future / J. M. Pierre // J. Psychiatr. Pract. 2010. Vol. 16, № 6. P. 375-386.
DOI 10.24411/2074-5036-2020-10013 УДК 619: 611.068:612.014.49:57.04:579.62
Ключевые слова: цыплята, постэмбриональное развитие, кровь, слизистая трахеи, кишечная микрофлора, УЗИ
Key words: chickens, postembrional development, blood, trachea mucosa, intestinal microflora, ultrasound
Маннова М.С., Якименко Н.Н., Шумаков В.В., Клетикова Л.В.
ЛАБОРАТОРНЫЕ И ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ В ОЦЕНКЕ СТАТУСА ЦЫПЛЯТ В ПЕРВУЮ КРИТИЧЕСКУЮ ФАЗУ ПОСТЭМБРИОНАЛЬНОГО ОНТОГЕНЕЗА
LABORATORY AND INSTRUMENTAL METHODS FOR ASSESSING THE STATUS OF CHICKENS IN THE FIRST CRITICAL PHASE OF POSTEMBRIONAL ONTOGENESIS
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего образования «Ивановская государственная сельскохозяйственная академия им. Д. К. Беляева» 153012, Россия, г. Иваново, ул. Советская, дом 45
Federal State Educational Institution of Higher Education "Ivanovo State Agricultural Academy named after D. K. Belyaev"
153012, Russia, Ivanovo, st. Sovetskaya, 45
Маннова Мария Сергеевна, кандидат биологических наук, доцент. E-mail: mannova09@yandex.ru.
Mannova Maria Sergeevna, PhD of Biological Sciences, Associate Professor, E-mail: mannova09@yandex.ru. Якименко Нина Николаевна, кандидат ветеринарных наук, доцент. E-mail: ninayakimenko@rambler.ru. Yakimenko Nina Nikolaevna, PhD of Veterinary Sciences, Associate Professor, E-mail: ninayakimenko@rambler.ru. Шумаков Валерий Валерьевич, кандидат ветеринарных наук, доцент. E-mail: mannitol75@gmail.com. Shumakov Valery Valerievich, PhD of Veterinary Sciences, Associate Professor. E-mail: mannitol75@gmail.com. Клетикова Людмила Владимировна, доктор биологических наук, доцент, профессор. E-mail: doktor_xxi@mail.ru. Kletikova Lyudmila Vladimirovna, Doctor of Biological Sciences, Associate Professor, Professor. E-mail: doktor_xxi@mail.ru.
Аннотация. В статье рассмотрена проблема адаптации цыплят в ходе первого критического периода постэмбрионального онтогенеза. Для реализации цели применены морфометрические, лабораторные, инструментальные, расчетные и статистические методы исследований. В результате у 5-суточных цыплят установлен средний пока-
затель живой массы, составивший 49,5±4,5 г, абсолютная и относительная масса внутренних органов показала, что наиболее интенсивно развивались органы пищеварительной системы, кишечник, желудок и печень. Морфо-метрия и УЗИ брюшной полости выявили неоднородность окраски печени, четкость ее контуров, умеренно повышенную эхогенность. Копрологическое исследование показало отсутствие в 100 % проб каловых массах форменных элементов, наличие нейтрального жира, внеклеточного крахмала, переваримой клетчатки, заселение кишечника резидентной микрофлорой. В белковом спектре крови доминирование альбуминовой фракции, высокое содержание мочевой кислоты - 942,00±65,37 мкмоль/л, интенсивный энергетический обмен, сопровождаемый высокой активностью АСТ, АЛТ и щелочной фосфатазы, соответственно, 206,5 ед/л, 21,1 ед/л и 3206,5 ед/л. Преобладание в лейкограмме лимфоцитов, содержание эритроцитов 1,97*1012/л и гемоглобина 131,0 г/л. Summary. The paper discusses the problem of chicken adaptation during the first critical period of post-embrional ontogenesis. Morphometric, laboratory, instrumental, calculation and statistical methods of research are used to realize the goal. As a result, 5-day-old chickens had an average living mass of 49,5±4,5 g, the absolute and relative weight of the internal organs showed that the organs of the digestive system, intestine, stomach and liver were most intensively developed. Morphometry and abdominal ultrasound revealed heterogeneity of liver colour, clarity of its contours, moderately increased echogenicity. Coprological study showed absence of form elements in 100 % of samples of potassium masses, presence of neutral fat, extracellular starch, digestedfiber, settlement of intestine with resident microflora. In the protein spectrum of the blood, the dominance of the albumin fraction, high uric acid content - 942,00±65,37 pmol/l, intensive energy exchange accompanied by high activity of ACT, ALT and alkaline phosphatase, respectively, 206,5 U/l, 21,1 U/l and 3206,5 U/l. Lymphocyte leukogram prevalence, erythrocyte content 1,97*1012/l and hemoglobin 131,0 g/l.
Исследование выполнено за счет средств федерального бюджета по заказу Минсельхоза России в 2020 году
Введение
Высокотехнологичной и наукоемкой отраслью АПК является птицеводство. Для развития отрасли решающее значение имеет качество получаемого молодняка в результате инкубации [9]. Первая неделя жизни цыплят является определяющей для их дальнейшего развития [8]. Отличительной особенностью цыплят после вывода служит наличие остаточного желтка, который представляет собой резерв питательных веществ и стимулирует мобилизацию ресурсов организма и определяет скорость роста [1, 6]. Тем не менее, для управления процессами развития организмов необходимо в первую очередь знать сроки, специфичность, биохимические, физиологические и поведенческие (психологические) закономерности каждого этапа развития, поскольку на каждом этапе развития химический состав, морфологические и физиологические возможности тканей, органов и систем организма иные [3]. Для успешного управления процессами роста необходимо представлять статус цыплят после вывода, особенно в первый критический период.
В ходе данной работы была проведена комплексная лабораторная и инструментальная оценка состояния 5-суточных петушков.
Материалы и методы
Исследование выполнено в 2020 г. на кафедре акушерства, хирургии и незаразных болезней животных Ивановской ГСХА.
Петушков (кросс Dekalb) после вывода помещали в брудеры с соответствующим возрасту температурно-влажностным режимом. Основу рациона составлял комбинированный корм «Солнышко» (АО «Капитал-ПРОК», Россия), поение - без ограничений.
Исследованию подвергли 5-суточных цыплят, исходя из того, что этот возраст является медианой первого критического периода в развитии цыплят [3].
Оценку живой массы и внутренних органов проводили на весах марки ВАТ-1 (Россия) и аналитических весах ViBRA HT-124CE (Япония). Массовый коэффициент (МК) рассчитывали по формуле [7]:
МК=
Масса органа (г) Масса тела (г)
х 100% (1)
Пробы фекалий для копрограммы и микробиологических исследований отбирали непосредственно из кишечника в стерильные контейнеры (FL-medical). Для оценки копрограммы использовали клинико-лабора-торные методы с применением микроскопии нативных препаратов, препаратов с реактивами Люголя и Саатгофа и мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе, в соответствии с общепринятыми методиками.
Оценку микрофлоры у петушков проводили по стандартному протоколу.
УЗИ органов брюшной полости выполняли на аппарате Сономед-500.
Мазок-отпечаток слизистой оболочки трахеи окрашивали по Романовскому-Гимзе с последующей микроскопией.
Биохимические показатели сыворотки крови оценивали на полуавтоматическом биохимическом анализаторе BioChem BA с наборами для исследований Диакон-вет; кортизол - методом ИФА. Гематологические показатели (гемоглобин, гематокрит, содержание тромбоцитов) - на автоматическом анализаторе PCE-90Ve, эритроциты и лейкоциты подсчитывали в камере Горяева. Для дифференцированного подсчета лейкоцитов готовили мазки и окрашивали их по Рома-новскому-Гимзе; интегральные индексы определили расчетным методом.
Микроскопию и подсчет клеток выполняли под микроскопом «Микромед 3Вар3-20» и видеокамеры с программным обеспечением Microscope Color Digital Camera Levenhuk C 1400 NG, объектив SP40X/0.65 и SP10X/0.25 и окуляр WF10X/22;
Полученный цифровой материал обрабатывали в операционной системе Microsoft Excel-2010.
Результаты исследования и их обсуждение
При осмотре у петушков пупочное кольцо плотно закрыто, клоака розовая, чистая, живот мягкий, подобранный. Рефлекс клевания хорошо выражен. Пятисуточные петушки отличались вариабельностью живой массы (табл. 1). Живая масса тесно коррелировала с массой внутренних органов, за исключением
массы желточного мешка и семенников. Желточный мешок втянут в брюшную полость, его относительная масса у всех петушков составила 1 % (р<0,01), содержимое желточного мешка темно-желтого цвета, сметано-образной консистенции. Масса семенников в большей степени определяется возрастом петушков и на момент исследования составила 0,03 % от массы тела.
Органом, испытывающим колоссальную нагрузку в период постэмбрионального онтогенеза у цыплят, является печень. Ее относительная масса, после массы кишечника и желудка, самая большая и составила 4,32 %. Печень состоит из двух, хорошо различимых, несколько асимметричных долей, цвет ее глинисто-охристый с розоватым оттенком (рис. 1). Неравномерная окраска печени обусловлена интенсивным разрушением эритроцитов, циркулировавших в эмбриональный период, эндогенным питанием за счет запаса желтка в желточном мешке и экзогенным питанием - потреблением комбикорма и воды [2].
При ультразвуковом исследовании область печени безболезненная. Печень визуализировалась хорошо. Размеры не увеличены. Контуры чёткие, ровные. Эхогенность умеренно повышена, структура однородная. Сосудистый рисунок слабо выражен. Желчный пузырь плохо визуализировался (рис. 2).
Копрологические исследования показали, что цвет, запах и консистенция кала
Таблица 1
Динамика живой массы и массы внутренних органов 5-суточных петушков, п=10, M±m
Показатель Абсолютная масса, г Относительная масса, %
Живая масса 49,5±4,5
Печень 2,14±0,23 4,32±0,05
Сердце 0,37±0,02 0,75±0,01
Желудок без содержимого 2,54±0,19 5,13±0,04
Кишечник без содержимого 5,34±0,08 10,79±0,02
Легкие 0,342±0,079 0,69±0,02
Почки 0,39±0,04 0,79±0,01
Трахея 0,160±0,028 0,32±0,01
Селезенка 0,070±0,019 0,14±0,01
Поджелудочная железа 0,01±0,00 0,02±0,00
Семенники 0,017±0,008 0,03±0,00
Желточный мешок 0,50±0,00 1,00±0,00
лгк
У
п |
Рис. 3. Мазок-отпечаток слизистой оболочки трахеи 5-суточных цыплят. Окраска по Романовскому-Гимзе (х100)
цыплят соответствовали виду и возрасту птицы. Диапазон рН варьировал от 6,5 до 8,5 ед. Снаружи кал покрыт небольшим количеством слизи. Во всех анализируемых пробах в незначительном количестве присутствовал нейтральный жир, внеклеточный крахмал, переваримая клетчатка, в 60 % проб выявлено умеренное количество непе-реваримой растительной клетчатки. Во всех пробах отсутствовали форменные элементы крови и клетки кишечного эпителия. Палочковидная и кокковая микрофлора определялись во всех пробах в умеренном или незначительном количестве, йодофильная микрофлора выявлялась в незначительном количестве и представлена палочковидными формами. Среди кишечной микрофлоры выявлены бифидобактерии, молочнокислые бактерии, энтерококки и Е.еоН (типичная), соответственно, 1х109 КОЕ, 1х107 КОЕ, 1х104 КОЕ и 1х106 КОЕ.
Известно, что слизистая оболочка ротоглотки и трахеи составляют первую линию защиты организма цыплят при встрече с
микроорганизмами [10]. В данном случае у 5-суточных цыплят на слизистой оболочке трахеи выявлены эпителиоциты, мононукле-арные клетки/макрофаги (рис. 3), адсорбирующих и фагоцитирующих клеток не обнаружено.
При исследовании белкового обмена в сыворотке крови преобладающей фракцией был альбумин, выполняющий, главным образом, транспортные функции и поддерживающий коллоидно-осмотическое давление крови, что для цыплят в раннем постэмбриональном периоде развития является очень важным показателем [11, 12], в соответствии с этим был выше и белковый коэффициент (табл. 2). Содержание мочевой кислоты у 5-суточных петушков больше, чем у взрослых птиц, что является показателем интенсивного белкового обмена [4]. Высокая скорость метаболических процессов потенцирует энергетический обмен, о чем свидетельствовало содержание глюкозы, холестерола и триглицеридов.
Минеральные компоненты входят в опорные ткани, а также в соединения, богатые
Таблица 2
Биохимические показатели крови у 5-суточных петушков, n=10, M±m
Показатель Результат Показатель Результат
Общий белок, г/л 47,20±0,13 Общий кальций, ммоль/л 2,87±0,03
Альбумин, г/л 26,70±0,07 Неорганический фосфор, ммоль/л 2,33±0,10
Глобулины, г/л 20,50±0,60 Магний, ммоль/л 1,23±0,04
Белковый коэффициент 1,30±0,00 АЛТ, ед/л 21,10±3,37
Глюкоза, ммоль/л 16,90±0,51 АСТ, ед/л 206,50±2,08
Холестерол, ммоль/л 5,07±0,04 Щелочная фосфатаза, ед/л 3206,50±15,09
Триглицериды, ммоль/л 2,03±0,04 Мочевая кислота, мкмоль/л 942,00±65,37
энергией, и обеспечивают скорость роста цыплят. Кальций-фосфорное соотношение (1:1,23), уровень магния в сыворотке крови свидетельствовали о том, что у кур, и, в частности, у молодняка процессы поступления и выведения минеральных веществ не уравновешены между собой из-за высокой скорости обмена веществ [5]. Высокий темп роста петушков подтвержден скоростью превращения поступающих питательных веществ, которую отражает активность энзимов, и подчеркивает нагрузку, испытываемую внутренними органами и организмом в целом в период ранней постэмбриональной адаптации. В частности, содержание трансаминаз -аспартат- и аланинаминотрансферазы (АСТ и АЛТ) составило 206,50 ед/л и 21,10 ед/л, щелочной фосфатазы 3206,50 ед/л.
Адаптационный синдром у цыплят сопровождался концентрацией кортизола, равной 0,5 нмоль/л.
Клинико-гематологическим исследованием установлено содержание гемоглобина 131,0 г/л, эритроцитов - 1,97*1012/л, гема-токритной величины - 25,8%. В результате расчета интегральные индексы МСУ, МСН и МСНС, соответственно, составили 130,9±1,1 фл, 66,6±1,7 пг и 512±12,2 г/л.
Концентрация тромбоцитов в крови достигла 18,3*109/л, лейкоцитов 13,6*109/л, среди которых преобладали лимфоциты (51,6%), концентрация гетерофилов, моноцитов и эозинфилов, соответственно, 45,7; 2,0% и 0,7% (р<0,05).
Заключение
Проанализировав массив данных морфо-метрических и лабораторных показателей,
ультразвукового исследования, можем заключить, что:
• 5-суточные петушки кросса Dekalb имеют среднюю живую массу 49,5 г,
• наиболее высокий процент составляет масса кишечника, желудка и печени, последняя имеет однородную структуру, ровные и четкие контуры, хорошо визуализируется, но сосудистый рисунок слабо выражен, неоднородность окраски органа обусловлена интенсивным разрушением эритроцитов и комбинированным питанием;
• масса желточного мешка составляет 0,5 г;
• каловые массы покрывает незначительное количество слизи, присутствуют нейтральный жир, внеклеточный крахмал, переваримая клетчатка, реже непереваримая, отсутствуют клетки крови и кишечного эпителия, имеется незначительное количество микрофлоры, представленной палочками и кокками, немногочисленное количество йо-дофильной микрофлоры представлено палочковидными формами;
• кишечник заселен резидентами - би-фидо- и лактобактериями, энтерококками и типичной кишечной палочкой;
• на слизистой оболочке трахеи присутствуют эпителиоциты, мононуклеарные клетки/макрофаги;
• содержание общего белка 47,2 г/л, с преобладанием альбуминовой фракции;
• концентрация кортизола 0,5 нмоль/л;
• характерен высокий уровень энергетического обмена, подтвержденный энзимати-ческой активностью;
• гематологические показатели типичны для кур раннего постэмбрионального развития.
Список литературы:
1. Бессарабов Б. Ф. Инкубация яиц с основами эмбриологии сельскохозяйственной птицы. / Б. Ф. Бессарабов. М.: Колосс, 2006. - 240 с.
2. Гарькун В. И. Анатомо-морфологическая характеристика печени уток пекинской породы /
B. И. Гарькун, Л. В. Клетикова, В. В. Пронин // Иппология и ветеринария. 2019. №2. С. 17-22.
3. Зайцева Е. В. Критические периоды онтогенеза цыплят-бройлеров кросса <^0$$-308» / Е. В. Зайцева, Л. П. Тельцов, А. Л. Харлан, Н. Н. Крикливый, Н. А. Щеглов // Вестник Брянского ГАУ 2013. № 4.
C. 90-96.
4. Котлярова О. С. Характеристика иммуноморфо-логических и биохимических показателей бройлеров в онтогенезе в условиях промышленного птицеводства Западной Сибири: автореф. дис... канд. биол. наук. / О. С. Котлярова. Новосибирск, 2013. 22 с.
5. Пономарев В. А. Клинические и биохимические показатели крови птиц / В. А. Пономарев, В. В. Пронин, Л. В. Клетикова, Л. В. Маловичко, Н. Н. Якименко. Иваново: ПресСто, 2014. 288 с.
6. Сулейманов Ф. И. Онтогенез куриного эмбриона и его связь с морфологическими и биохимическими показателями роста и развития / Ф. И. Сулейманов,
С. А. Ширяев, Т. Н. Иванова // Наука о проблемах инновационного развития АПК: материалы междунар. науч.-практ. конф. Великие Луки, 2010. С. 64-66.
7. Физиологические, биохимические и биометрические показатели нормы экспериментальных животных: Справочник / Под ред. д. м. н., профессора В. Г. Макарова, д. м. н. М. Н. Макаровой. СПб.: ЛЕМА, 2013. 116 с.
8. Фисинин В. Первые дни жизни: от защиты от стрессов к эффективной адаптации / В. Фисинин, П. Сурай // Птицеводство. 2012. № 2. С. 11-15.
9. Фисинин В. И. Стратегические тенденции развития мирового и отечественного птицеводства /
B. И. Фисинин // Птица и птицепродукты. 2004. № 2.
C. 7-10.
10. Якименко Н. Н. Иммунный статус и местная защита дыхательных путей у цыплят и ремонтного молодняка кур при мочекислом диатезе: автореф. дис... канд. вет. наук. / Н. Н. Якименко. Иваново, 2004. 18 с.
11. Ярец Ю. И. Специфические белки: практическое пособие для врачей: в 2 частях. Часть I. Лабораторные тесты исследования специфических белков. / Ю. И. Ярец. Гомель, 2015. 64 с.
Handbook of Metalloproteins. Bertini, I., Sigel, A., Sigel, H., eds. Marcel Dekker. N.-Y.: Basel, 2001. 1182 p.
Объективная проверка слуха у животных. BAER-тест
С 2018 года ЧОУ ДПО «Институт Ветеринарной Биологии» проводит обучающий курс по объективной проверке слуха у животных (BAER-тест) у собак, кошек и других видов животных. В теоретической части занятий слушатели знакомятся с теорией процесса регистрации вызванных слуховых потенциалов и основами нейрофизиологии. За время практических занятий каждый курсант обучается самостоятельно проводить осмотр животного перед проведением BAER-теста, проверять племенные документы (для выписки сертификата допуска в разведение), непосредственно выполнять BAER-тест, фиксировать данные тестирования, интерпретировать данные тестирования, выписывать экспертное заключение о результатах BAER-теста. По окончании курса слушатели получают СЕРТИФИКАТ СПЕЦИАЛИСТА по проведению BAER-теста.
Подробнее: http://invetbio.spb.ru/seminar_baer.htm
Записаться на курс, приобрести прибор для проверки слуха у животных: ivb-info@mail.ru
