Научная статья на тему 'Лабораторная диагностика трансмиссивных клещевых инфекций в Приморском крае'

Лабораторная диагностика трансмиссивных клещевых инфекций в Приморском крае Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
385
51
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
КЛЕЩЕВЫЕ ИНФЕКЦИИ / ИФА / ПЦР / ПРИМОРСКИЙ КРАЙ

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Лубова Валерия Александровна, Берлизова Мария Владимировна, Курловская Александрия Владимировна, Бондаренко Евгений Иванович, Леонова Галина Николаевна

На территории Приморского края функционируют природные очаги трансмиссивных клещевых инфекций, таких как клещевой энцефалит (КЭ), иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ), в том числе вызываемые Borrelia miyamotoi, клещевые риккетсиозы (КР). В настоящее время широко применяют молекулярно-генетические (ПЦР) и серологические (ИФА) методы для диагностики инфекций, передаваемых с укусом клеща. Целью работы заключалась в определении частоты инфицирования людей возбудителями трансмиссивных клещевых инфекций с помощью современных методов дифференциальной лабораторной диагностики. Методами ПЦР в режиме реального времени и ИФА исследована 1331 проба крови людей, пострадавших от укусов клещей на территории Приморского края. Выявлены специфические антитела против ВКЭ и ИКБ. Детектирована ДНК Rickettsia heilongjiangensis. Верифицированы случаи заболевания, вызванные B. miyamotoi.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Лубова Валерия Александровна, Берлизова Мария Владимировна, Курловская Александрия Владимировна, Бондаренко Евгений Иванович, Леонова Галина Николаевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Active natural foci of tick-transmitted infections such as tick-borne encephalitis (TBE), Lyme borreliosis (LB), including the causative agent of Borrelia miyamotoi infection, and tick-borne rickettsiosis (TBR) are located on the territory of Primorsky Region. Currently, widely used techniques for detecting tick-borne infections comprise molecular genetic tests (PCR) and serological methods (ELISA). The aim of the research was to determine the incidence of tick-borne infections of humans using modern methods of differential laboratory diagnosis. Using real-time PCR and ELISA we analyzed 1331 blood samples collected from patients with tick bites from the territory of Primorsky Region. Specific antibodies against TBEV and LB were detected. DNA of Rickettsia heilongjiangensis was detected. Cases of disease caused by B. miyamotoi have been verified.

Текст научной работы на тему «Лабораторная диагностика трансмиссивных клещевых инфекций в Приморском крае»

© Коллектив авторов, 2018 г doi: 10.5281/zenodo.1194870

УДК 576.895.42 (Приморский край)

В.А. Лубова1, М.В. Берлизова1, А.В. Курловская2, Е.И. Бондаренко3, Г.Н. Леонова1 лабораторная диагностика трансмиссивных клещевых инфекций в приморском крае

1 ФГБНУ «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени ПП. Сомова», Владивосток

2 ФГАОУ ВПО «Дальневосточный Федеральный университет», Владивосток

3 АО «Вектор-Бест», Новосибирск

На территории Приморского края функционируют природные очаги трансмиссивных клещевых инфекций, таких как клещевой энцефалит (КЭ), иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ), в том числе вызываемые Borrelia miyamotoi, клещевые риккетсиозы (КР). В настоящее время широко применяют молекулярно-генетические (ПИР) и серологические (ИФА) методы для диагностики инфекций, передаваемых с укусом клеща. Целью работы заключалась в определении частоты инфицирования людей возбудителями трансмиссивных клещевых инфекций с помощью современных методов дифференциальной лабораторной диагностики. Методами ПЦР в режиме реального времени и ИФА исследована 1331 проба крови людей, пострадавших от укусов клещей на территории Приморского края. Выявлены специфические антитела против ВКЭ и ИКБ. Детектирована ДНК Rickettsia heilongjiangensis. Верифицированы случаи заболевания, вызванные B. miyamotoi.

Ключевые слова: клещевые инфекции, ИФА, ПЦР, Приморский край

Для цитирования: Лубова В.А., Берлизова М.В., Курловская А.В., Бондаренко Е.И., Леонова Г.Н. Лабораторная диагностика трансмиссивных клещевых инфекций в Приморском крае // Здоровье. Медицинская экология. Наука. 2018; 1(73): 13-20. doi: 10.5281/zenodo.1194870

Для корреспонденции: Лубова В.А., e-mail: valeri_priority@mail.ru

Поступила 11.12.17

V.A. Lubova1, M.V. Berlizova1, A.V. Kurlovskaya2, E.I. Bondarenko3, G.N. Leonova1 laboratory diagnosis of tick-borne diseases in primorsky region

1 Somov Institute of Epidemiology and Microbiology, Vladivostok, Russia

2 Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia

3 AO Vector-Best, Novosibirsk, Russia

Active natural foci of tick-transmitted infections such as tick-borne encephalitis (TBE), Lyme borreliosis (LB), including the causative agent of Borrelia miyamotoi infection, and tick-borne rickettsiosis (TBR) are located on the territory of Primorsky Region. Currently, widely used techniques for detecting tick-borne infections comprise molecular genetic tests (PCR) and serological methods (ELISA). The aim of the research was to determine the incidence of tick-borne infections of humans using modern methods of differential laboratory diagnosis. Using realtime PCR and ELISA we analyzed 1331 blood samples collected from patients with tick bites from the territory of Primorsky Region. Specific antibodies against TBEV and LB were detected. DNA of Rickettsia heilongjiangensis was detected. Cases of disease caused by B. miyamotoi have been verified.

Keywords: tick-borne diseases, ELISA, PCR, Primorsky Region

For citation: Lubova V.A., Berlizova M.V, Kurlovskaya A.V, Bondarenko E.I., Leonova G.N. Laboratory diagnosis of tick-borne diseases in Primorsky Region. Health. Medical ecology. Science. 2018; 1(73): 13-20. doi: 10.5281/zenodo.1194870

For correspondence: Lubova V.A., e-mail: valeri_priority@mail.ru Conflict of interests. The authors are declaring absence of conflict of interests.

Financing. The work was carried out within the framework of the scientific project (0545-2014-0011) of the Federal Agency of Scientific Organizations.

Received 11.12.17 Accepted 24.01.18

Введение

Природно-очаговые трансмиссивные инфекции, передающиеся иксодовыми клещами, представляют собой группу заболеваний, характеризующуюся раз-

нообразностью этиологических и нозологических форм, клинических проявлений, масштабностью распространения и имеющую высокую эпидемиологическую и социальную значимость для населения [10, 26].

Наиболее распространенными на территории Приморского края являются такие трансмиссивные инфекции, как клещевой энцефалит (КЭ), ик-содовые клещевые боррелиозы (ИКБ), в том числе вызываемые Borrelia miyamotoi, а также клещевые риккетсиозы (КР) [1, 13, 15]. Природные очаги инфекций приурочены к ареалам основных переносчиков - клещей семейства Ixodidae. В Приморье встречаются такие виды, как Ixodes persulcatus, Ixodes pavlovskyi, Haemaphysalis japonica, Haemaphysalis concinna, Нaemaphysalis longicornis и Dermacentor silvarum. Таежный клещ I. persulcatus имеет наибольшую численность и является основным переносчиком возбудителей клещевых инфекций [9, 12, 17]. По данным управления Роспотребнадзора по Приморскому краю, на сегодняшний день эпидемиологическая ситуация по КЭ расценивается как благополучная, наблюдается снижение заболеваемости по сравнению с показателями по территории Российской Федерации (РФ), тогда как заболеваемость ИКБ и КР превышает среднероссийские показатели в 2,5 и 7,3 раза, соответственно [6].

В последние годы приобретают широкое применение современные методы диагностики, детектирующие возбудителей природно-очаговых заболеваний, передаваемых с укусом клеща. Так, при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) верифицируются РНК/ДНК возбудителей клещевых боррелиозов, риккетсиозов, гранулоцитарного анаплазмоза человека (ГАЧ), моноцитарного эрлихио-за человека (МЭЧ), вируса клещевого энцефалита (ВКЭ). Методом серологической диагностики - им-муноферментным анализом (ИФА) - выявляются в сыворотках крови людей антитела к возбудителям различных заболеваний [7, 18, 21, 26].

Несмотря на уже существующие алгоритмы клини-ко-лабораторной диагностики клещевых инфекций, проблема качественного выявления возбудителя и правильной постановки диагноза с целью своевременного определения схемы лечения лиц, обратившихся после укуса клеща, остается актуальной. Отдельного внимания заслуживает выявление ранее неизвестных новых возбудителей на территории Приморского края.

Цель: определить частоту инфицирования людей возбудителями трансмиссивных клещевых инфекций с помощью современных методов дифференциальной лабораторной диагностики.

Материалы и методы

Для выявления специфических маркеров возбудителей трансмиссивных клещевых инфекций был проведен скрининг 1331 пробы крови людей, пострадавших от укусов клещей на территории Приморского края. Из них 1166 образцов сывороток крови поступили от лиц, обратившихся в лабораторию после укуса клеща, и 165 проб - от пациентов с острыми лихорадочными заболеваниями неясной этиологии.

Исследование полученного материала проводили методом иммуноферментного анализа (ИФА) и методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Антиген ВКЭ в сыворотках крови выявляли при помощи ИФА с использованием набора «ВектоВКЭ-антиген» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск) согласно инструкции производителя. Предварительная подготовка образцов лейкоцитарной массы проводилась согласно патенту РФ 2217758 [14].

Присутствие в сыворотках крови специфических антител класса M и G против возбудителей КЭ и ИКБ выявляли с помощью наборов для ИФА - «ВектоВКЭ-IgM», «ВектоВКЭ-IgG», «ЛаймБест-IgM», «ЛаймБест-IgG» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск).

Материал на наличие ДНК/РНК возбудителей КЭ, ИКБ, ГАЧ, МЭЧ исследовали методом ПЦР-РВ с помощью набора «АмплиСенс TBEV, B. burgdorferi s.l., A. phagocytophilum, E. chaffeensis / E. muris-FL» (ЦНИИ эпидемиологии, Москва). Этиологические агенты клещевых риккетсиозов выявлялись с использованием тест-системы «РеалБест ДНК Rickettsia spp.» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск). Для определения видовой принадлежности риккет-сий был использован набор реагентов «РеалБест ДНК Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск). Детекцию ДНК B. miyamotoi проводили с использованием набора «РеалБест ДНК Borrelia miyamotoi» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск) по инструкции производителя.

Результаты и обсуждение

Исследование крови лиц, обратившихся с укусом клеща

Образцы крови были исследованы с целью выявления антител и антигена ВКЭ, антител ИКБ и генетических маркеров возбудителей КЭ, ИКБ, ГАЧ и МЭЧ.

Выявление антигена ВКЭ методом ИФА в крови лиц, пострадавших от укуса клеща, проводили при отсутствии клеща или плохой его сохранности. Согласно литературным данным, первичная вирусемия у пациентов наблюдается в сроки от нескольких часов до 1 недели с момента инфицирования, при этом максимальные показатели антигенемии приходятся на первые 96 часов [11, 19]. Нами были проанализированы 220 образцов крови людей в момент возможного развития вирусемии (24-72 часа с момента укуса). Антиген вируса КЭ был идентифицирован в 6 пробах крови, что составило 2,7%.

В эпидемический сезон 2017 г. первые случаи обращения в связи с укусом клеща регистрировались в конце марта и продолжались до конца октября. Случаи выявления антигена ВКЭ в пробах крови совпадали с сезонными показателями активности клещей в природных очагах Приморского края. Из исследованных в мае (74) и июне (68) образцов крови, положительными на выявление антигена ВКЭ оказались

2 пробы в мае и 1 проба в июне (2,7% и 2,8%, соответственно). В июле из 39 проб антиген был обнаружен в 3 случаях (7,7%). В остальные месяцы антиген ВКЭ в крови людей не выявлялся.

Известно, что в случае развития инфекционного процесса, специфические антитела (АТ) ^М против ВКЭ определяются в крови пациентов в ранние сроки и свидетельствуют об «острой» фазе заболевания [12]. Интенсивный синтез АТ ^М отмечается на 6-10 день после инфицирования, переключение на синтез IgG-антител - на 15-21 день с дальнейшим нарастанием его титров [16]. При этом напряженность и динамика иммунного ответа отличается у больных КЭ с различными формами течения инфекции и может быть связана как с генетически детерминированными свойствами вируса, так и с иммуногенетическими особенностями пациента [3, 22, 24].

Методом ИФА для определения специфических иммуноглобулинов классов М и G против ВКЭ было исследовано 400 образцов крови, полученных от лиц, обратившихся в различные сроки после укуса клеща. Инфекционный процесс с иммунологическим ответом, характеризующийся образованием специфических АТ ^М против ВКЭ, зарегистрирован в 32

случаях (8%) (табл. 1). Значения коэффициента позитивности (КП) варьировали от 1 до 7,7: для 24 проб (78,1%) величина КП не превышала 3,9, в 4 образцах (12,5%) значение КП варьировало от 4 до 6,9 и в 3 пробах (9,3%) КП составил 7 и выше. При выявлении специфических АТ класса IgG против ВКЭ, доля се-ропозитивных сывороток составила 37% (148 проб). Уровень АТ IgG в титрах 1:100-1:400 был определен в 41 образце (27,7%) сыворотки крови, в титрах 1:800-1:1600 - в 59 (39,8%) образцах, в 48 (32,4%) случаях титр АТ превышал 1:3200.

АТ против ВКЭ детектировались в течение практически всего 2017 г. Пик выявления АТ ^М приходился на июнь - 10 случаев (8,9%) и июль - 9 случаев (12,2%). В остальные месяцы случаи обнаружения АТ ^М были единичными. В феврале, марте и ноябре АТ ^М не выявлялись. Наибольшая частота выявления АТ IgG установлена в период с апреля по июнь, с пиком в июне - 35 случаев (31,3%) (рис. 1). Установленные в данный период высокие значения титров, варьирующие в пределах от 1:800 до 1:3200 в большинстве случаев, могут свидетельствовать о поствакцинальном активном иммунитете или иммунитете, приобретенном в результате перенесенного заболевания КЭ [5].

■ВКЭ IgM ВКЭ IgG

/v<f j? / & # # #

Рис. 1. Сезонное распределение случаев выявления АТ против ВКЭ в сыворотках крови людей, пострадавших от укуса клеща

Для выяснения частоты возможного инфицирования людей возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов на стадии первичного скрининга приоритетным является серологическое исследование на наличие антител к боррелиям. При этом, специфический гуморальный иммунный ответ человека на инфекцию может быть представлен антителами к большому спектру антигенов Bоrrelia burgdorferi sensu lato и варьировать в зависимости от стадии заболевания и геновида возбудителя [23]. Согласно данным литературы, АТ класса IgM против ИКБ выявляются, начиная с 2-4 недели после инфицирования, при этом, пик продукции антител приходится на 3-6 (8-10) неделю, с последующим мед-

ленным снижением. АТ IgG появляются после 4-6 недели заболевания. [4, 8, 27, 28].

Таблица 1

Выявление антител против ВКЭ и ИКБ в сыворотках крови лиц, пострадавших от укуса клеща

Возбудитель Общее количество исследованных сывороток Серопозитивные сыворотки

IgM, абс./% IgG, абс./%

ВКЭ 400 32/8 148/37

ИКБ 777 163/20,9 74/9,5

При исследовании 777 сывороток крови на наличие специфических АТ ^М против боррелий было выяв-

лено 163 положительные пробы (20,9%). При этом минимальное значение коэффициента позитивности составило 1, максимальное - 9,3. В группу с низкими показателями КП (<2,9) было отнесено 124 образца (76%) сывороток крови, со средним КП (3-6,9) - 27 образцов (16,6%), с высоким КП (>7) - 12 образцов (7,4%). В 74 образцах сывороток крови (9,5%) выявлены IgG против ИКБ (табл. 1). Показатели величины титров 1:10-1:40 обнаружены в 47 пробах (63,5%), титры 1:80-1:160 - в 19 пробах (25,7%), высокие титры (>1:320) выявлены в 8 образцах (10,8%).

Серологическая диагностика ИКБ проводилась на протяжении всего эпидемического сезона 2017 г. Наибольшее количество сывороток крови - 573 образца (73,7%) было проанализировано с мая по август, что

соответствовало пику активности иксодовых клещей. При этом, частота выявления АТ ^М достигала максимальных значений в летние месяцы: в июне обнаружено 44 положительные пробы (23,4%), в июле - 48 (31%), в августе - 26 (24,8%). В распределении случаев обнаружения АТ IgG против ИКБ наблюдалась иная тенденция: IgG выявлялись не только в течение эпидемического сезона, но и в последующие месяцы (рис. 2). Частота обнаружения АТ IgG в период с мая по ноябрь варьировала незначительно и составляла от 7 до 12 случаев в разные месяцы. Доля выявления серопозитивных сывороток была значительно ниже в декабре (4 случая), а для периода с января по апрель характерны лишь единичные случаи обнаружения АТ IgG в исследуемых образцах.

Рис. 2. Сезонное распределение случаев выявления АТ против ИКБ в сыворотках крови людей, пострадавших от укуса клеща

В настоящее время для лабораторной экспресс-диагностики инфекций, передаваемых иксодовыми клещами, проводимой как непосредственно после присасывания клеща, так и при манифестировании инфекции, наряду с серологическими методами, применяется ПЦР. Так, показано, что диагностика ИКБ и КЭ с использованием ПЦР возможна в инкубационном периоде и на начальном этапе заболевания [16, 18, 20]. Наряду с этим, ощутимым недостатком является относительно низкая чувствительность ПЦР диагностики, особенно в отношении ИКБ. Многочисленные работы показывают, что чувствительность ПЦР при исследовании крови пациентов на ранней стадии боррелиоза в среднем составляет от 20 до 70%. [2, 21].

В 2017 г. методом ПЦР-РВ с целью выявления возбудителей КЭ, ИКБ, ГАЧ, МЭЧ было проанализировано 32 сыворотки крови, взятые в ранние сроки у лиц, обратившихся в лабораторию после укуса клеща. Ни в одном образце РНК/ДНК возбудителей инфекций выявлено не было.

Результаты исследования крови пациентов с подозрением на клещевые инфекции

На выявление антигена ВКЭ было исследовано 15 образцов крови, поступивших из клинических боль-

ниц края, в период с мая по август. Антиген ВКЭ выявлен лишь в одной пробе в июне.

На наличие специфических АТ против ВКЭ было исследовано 70 образцов крови. Серопо-зитивные сыворотки на АТ ^М и IgG против вируса КЭ были выявлены в 4 (5,7%) и 24 (34,3%) случаях, соответственно (табл. 2). Минимальное значение КП для ^М составило 1,4. В 3 случаях КП достигал высоких значений и варьировал от 7,2 до 8,4. Минимальное значение уровня концентрации IgG (1:100-1:400) было определено в 11 пробах (45,8%), максимальное (>1:3200) - в 5 пробах (20,8%), средний уровень (1:800-1:1600) выявлен в 8 (33,3%) случаях.

Таблица 2

Выявление антител против ВКЭ и ИКБ в сыворотках крови, поступивших из клинических больниц Приморского края

Возбудитель Общее количество исследованных сывороток Серопозитивные сыворотки

1дМ, абс./% ДО, абс./%

ВКЭ 70 4/5,7 24/34,3

ИКБ 104 27/26 14/13,5

Случаи выявления АТ ^М против ВКЭ распределялись следующим образом: в июне - 2 случая (9,1%), в июле - 1 случай (5,9%), в августе - 1 (7,7%). Наибольшее количество случаев опреде-

£

ления АТ IgG приходилось на июнь - 7 (31,8%), июль - 7 (41,2%) и август - 5 (38,5%). В остальные месяцы случаи выявления АТ IgG были единичными (рис. 3).

■ВКЭ IgM ВКЭ IgG

у

С'

^ ^ -Г

Рис. 3. Сезонное распределение случаев выявления АТ против ВКЭ в сыворотках крови, поступивших из клинических больниц края

АТ класса М против возбудителей ИКБ из 104 исследованных образцов сывороток крови были выявлены в 27 случаях (табл. 2). При этом низкие показатели значения КП (1-2,9) установлены для 11 образцов (40,7%), средние значения (3-6,9) - для 10 (37%), высокие значения (>7) - для 5 образцов (18,5%). АТ IgG определены в 14 пробах сывороток крови. Титры 1:10-1:20 детектированы в 8 пробах (57,1%), титры 1:40-1:80 - в 5 (35,7%), титры 1:320 и выше - в 1 пробе (7,1%).

14 п

Сезонное распределение случаев выявления АТ против возбудителей ИКБ было похоже на динамику показателей ^М и IgG против ВКЭ с максимальным количеством серопозитивных проб в июне - 50% (13 случаев), в июле - 20,8% (5) и в августе - 20% (3). Однако, в единичных случаях АТ ^М против ИКБ выявлялись практически в течение всего года. АТ IgG были определены в 2 исследованных образцах в мае (16,7%), в 5 пробах (19,2%) - в июне, в 4-х (16,7%) - в июле, в 2 (13,3%) -в августе и в 1 пробе (25%) - в декабре (рис. 4).

о

3

ИКБ IgM ИКБ IgG

Рис. 4. Сезонное распределение случаев выявления АТ против возбудителей ИКБ в сыворотках крови,

поступивших из клинических больниц края

Методом ПЦР-РВ на наличие ДНК риккетсий и (сыворотки, лейкоцитарные фракции) и ликвора паци-B. miyamotoi было проанализировано 146 проб крови ентов, госпитализированных в стационары клиниче-

ских больниц Приморского края. В анамнезе всех пациентов отмечен факт присасывания клеща, при этом у большинства наблюдались симптомы острых лихорадочных состояний неясной этиологии. Для 54 больных был поставлен диагноз «клещевой риккетсиоз». По результатам проведенного анализа в 7 образцах (5 сывороток крови и 2 лейкоцитарные фракции) была детектирована ДНК риккетсий (4,8%). Исследование видовой принадлежности выявленных возбудителей, показало наличие ДНК R. heilongjiangensis в 4 случаях, ДНК Rickettsia sibirica не идентифицирована. Выявление R. heilongjiangensis позволяет говорить о возможности возникновения случаев дальневосточного клещевого риккетсиоза, вызываемого этим патогеном. Несмотря на то, что клинические проявления таких случаев позволяют предварительно диагностировать риккетсиозную инфекцию, комплексные специфические лабораторные методы необходимы для подтверждения окончательного диагноза. Идентификации этиологии возбудителей риккетсиозов также представляется важной для выявления заболеваний, вызываемых риккетсиями, как известными, так и ранее не выявляемыми на территории Приморского края.

Также, нами верифицированы 2 случая заболевания, вызванного B. miyamotoi, нового для Приморского края заболевания, относящегося к группе возбудителей клещевых возвратных лихорадок. Проба крови № 126р была получена от больного, находящегося в стационаре ГБУЗ ККБ № 2 (г. Владивосток) с диагнозом «аденовирусная инфекция», в анамнезе которого отмечен трехдневный лихорадочный период после укуса клеща. Методом ИФА показано наличие IgM антител (КП=4,9) против возбудителей ИКБ. При этом заболевание протекало в безэритемной форме. В дальнейшем, в лейкоцитарной фракции образца крови пациента нами была детектирована ДНК B. miyamotoi.

Образец крови № 75р был взят у больного, в анамнезе которого отмечалась лихорадка, головная боль, слабость, миалгия и артралгия. При серологическом исследовании сыворотки крови на 12-й день после укуса клеща антител к ВКЭ и боррелиям выявлено не было. ПЦР-анализ показал наличие ДНК B. miyamotoi. Клинико-лабораторные проявления боррелиоза miyamotoi существенно отличаются от эритемных форм ИКБ, но при этом сходны с другими вирусными природно-очаговыми заболеваниями. Соответственно, для эффективной верификации данной инфекции необходимо своевременное применение комплекса серологических и молекулярно-генетиче-ских методов лабораторной диагностики для выбора правильной тактики лечения. Детектирование ДНК B. miyamotoi в образцах крови пациентов свидетельствует о контакте населения с данным возбудителем, его циркуляции на территории Приморского края и о возможном участии B. miyamotoi в формировании региональной инфекционной патологии.

Заключение

На территории Приморского края установлено существование и функционирование природных очагов клещевых инфекций, определяющих высокий риск развития заболеваний у лиц, пострадавших от присасывания клеща. Наличие общих переносчиков различных патогенов обусловливает также распространенность сочетанных природных очагов, что следует учитывать при диагностике и профилактике клещевых инфекций. Выраженное сходство клинико-эпидемиологических проявлений ряда инфекций различной этиологии затрудняет их дифференциальную диагностику. Современный подход к проведению профилактических мероприятий, по нашему мнению, состоит в проведении комплекса диагностических исследований с целью обнаружения всех возможных возбудителей, переносимых клещами. Одной из перспектив повышения качества и эффективности лабораторной диагностики и, соответственно, профилактики клещевых инфекций, является использование современных молекулярно-генетических и серологических методов диагностики, важными преимуществами которых являются высокая чувствительность и специфичность. Комплексная лабораторная диагностика с использованием методов ИФА и ПЦР позволяет успешно выявлять весь спектр трансмиссивных клещевых инфекций (ВКЭ, ИКБ, МЭЧ, ГАЧ, КР) циркулирующих на территории Приморского края.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Финансирование. Работа выполнена в рамках научного проекта (0545-2014-0011) Федерального агентства научных организаций.

ЛИТЕРАТУРА

1. Абрамова Н.В., Рудаков Н.В., Пеньевская Н.А., Седых Н.Н., Кумпан Л.В., Самойленко И.Е., Решетникова Т.А., Оберт А.С. Совершенствование методов серологической диагностики в системе эпидемиологического надзора за риккетсиозами группы клещевой пятнистой лихорадки. Сибирский медицинский журнал. 2010; 1: 44-47.

2. Алексеев А.Н., Дубинина Е.В., Усков А.Н. Сравнительная эффективность различных методов определения зараженности клещей рода Ixodes спирохетами и патогенными для человека боррелиями. Экология, биоразнообразие и значение кровососу-щихчленистоногих России: Сб. науч. работ по матер. II Республ. науч. конф. В. Новгород; 2002: 4-8.

3. Билалова Г.П. Вопросы практического применения вакцины «ЭнцеВир» // СМЖ. 2009; 2:2.

4. Бондаренко А.Л., Утенкова Е.О. Природно-очаговые инфекции. К: КГМА. 2009; 65-109.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

5. Гайворонская А.Г., Галицкая М.Г., Намазова-Баранова Л.С. Этиология, клинические проявления, лечение и профилактика клещевого энцефалита. ПФ. 2013; 2.

6. Государственный доклад «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Приморском крае в 2016 году». URL: http://25.rospotrebnadzor. m/c/documentJibrary/get_file?uuid=499405fe-0f7d-4955-b259-44e2b377dd4d&groupId=10156 (дата обращения: 06.03.18).

7. Еремеева М.Е., Шпынов С.Н., Токаревич Н.К. Современные подходы к лабораторной диагностике риккетсиозов // Инфекция и иммунитет. 2014; 4(2):113-134. doi:10.15789/2220-7619-2014-2-113-134

8. Зверева Н.Н., Шакарян А.К., Сайфуллин Р.Ф., Россина А.Л., Ртищев А.Ю., Белялетдинова И.Х. Современное состояние проблемы иксодового клещевого боррелиоза (болезни Лайма) у детей // Детские инфекции. 2017; 1.

9. Зверева Т.В., Алленов А.В., Никитин А.Я. Видовые особенности контактов иксодовых клещей с человеком на юге Приморского края // Проблемы особо опасных инфекций. 2015; 4: 14-17.

10. Коренберг Э.И., Помелова В.Г., Осин Н.С. Природноочаговые инфекции, передающиеся иксо-довыми клещами. Под ред.: Гинцбурга А.Л., Злоби-на В.Н. М.: Наука; 2013; 463 с.

11. Леонова Г.Н., Майстровская О.С., Борисевич

B.Б. Антигенемия у людей, инфицированных вирусом клещевого энцефалита // Вопросы вирусологии. 1996; 6:260-263.

12. Леонова Г.Н. Клещевой энцефалит в Приморском крае: вирусологические и эколого-эпидемиологи-ческие аспекты. Владивосток: Дальнаука; 1997; 190 с.

13. Леонова Г.Н., Бондаренко Е.И., Хворостянко А.А., Курловская А.В. Изучение распространенности на юге Дальнего Востока возбудителей инфекций, передаваемых иксодовыми клещами // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2015; 1: 80.

14. Леонова Г.Н., Борисевич В.Г., Гагач Г.Ф., Си-рант И.В., Филина О.В. Способ экспресс-диагностики клещевого энцефалита. Патент на изобретение РФ 2217758 (18.10.2001) 2003.

15. Леонова Г.Н., Иванис В.А., Бондаренко Е.И., Беликов С.И., Лубова В.А. Клинические случаи, вызываемые Borrelia miyamotoi на юге Дальнего Востока. В сб.: Матер. XIII всерос. конгр. по инфекц. бол. с междун. уч. М; 2016: 162.

16. Лисак О.В., Козлова И.В., Верхозина М.М., Дорощенко Е.К., Сунцова О.В., Бадуева Л.Б., Горина М.О., Демина Т.В., Хаснатинов М.А., Шулунов

C.С., Дигас С.Э., Злобин В.И. Совершенствование

методов экстренной лабораторной диагностики трансмиссивных клещевых инфекций в условиях сочетанных природных очагов Прибайкалья // Acta Biomedica Scientifica. 2007; 3.

17. Лобзин Ю.В., Усков A.H, ^злов С.С. Лайм-боррелиоз (иксодовые клещевые боррелиозы). СПб; 2000; 156 с.

18. Ляпунов A^., Хаснатинов МА., Манзарова Э.Л., Болотова НА., Данчинова Г. A. Применение метода ПЦР в реальном времени для диагностики инфекций, передающихся иксодовыми клещами // Acta Biomedica Scientifica. 2016; 6: 112.

19. Стронин О.В. ^ма^ексное применение имму-нодиагностических методов при клещевом энцефалите: Aвтореф. дис. канд. мед. наук.; Ъомск; 1998; 28 с.

20. Tарбеев A.K. ^инто-эпидемиологические особенности Лайм-боррелиоза в Иркутской области и оценка эффективности его лабораторной диагностики: Aвтореф. канд. мед. наук.; Иркутск; 2004; 20 с.

21. Усков A.H, Байгеленов КД., Бургасова ОА., Гринче HE. Современные представления о диагностике клещевых инфекций // Сиб. мед. журн. (Иркутск); 2008; 7.

22. Фримель Х., Брок И. Основы иммунологии. М: «Мир»; 2001; 256 с.

23. Чеканова T.A., Маркелов М.Л., ^рань Л.С., Ушакова МА., Пудова E.A., Ромашкина A.C, K^-дяшкина Н.П., Манзенюк И.Н., Сажин A.H, Снар-ская E.C, Aнаньева Л.П., Шипулин ГА. Новые возможности в серологической диагностике иксо-довых клещевых боррелиозов с использованием иммуночипа // Клиническая лабораторная диагностика; 2013; 12.

24. Черницына Л.О. вещевой энцефалит: гуморальный иммунный ответ при различных формах и вариантах течения нейроинфекции // Бюллетень СО РАМН; 2008.

25. Янковская Я.Д., Чернобровкина ТЯ., ^шкин М.И. Современное состояние проблемы иксодовых клещевых боррелиозов // Aрхивъ внутренней медицины, 2015; 6.

26. Ястребов В.К, Рудаков Н.В., Шпынов С.Н. Tрансмиссивные клещевые природно-очаговые инфекции в Российской Федерации: тенденции эпидемического процесса, актуальные вопросы профилактики // Сиб. мед. журн. (Иркутск). 2012; 4: 91-93.

27. Biesiada G., Czepiel J., Lesniak M.R., Garlicki A. et al., Lyme disease: review. Arch. Med. Sci. 2012; 8; 6: 978-982.

28. Scheld W.M., Whitley R.J., Marra CM. Infections of the Central Nervous System, 3rd ed. Philadelphia: Lippincott Williams &Wilkins. 2004; 660-690.

Сведения об авторах

Лубова Валерия Александровна - младший научный сотрудник лаборатории флавивирусных инфекций ФГБНУ «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова»

(НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова); Владивосток, ул. Сельская 1, 690087; раб. тел. 8(423)244-26-04; моб. тел. 8(999)040-71-08 е-mail: valeri_priority@mail.ru (автор корреспондент);

Берлизова Мария Владимировна - младший научный сотрудник лаборатории флавивирусных инфекций ФГБНУ «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова» (НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова); Владивосток, ул. Сельская 1, 690087; раб. тел. 8(423)244-26-04; моб. тел. 8(964) 447-83-68 е-mail: odonata_ins@mail.ru;

Курловская Александрия Владимировна - студентка ФГАОУ ВПО «Дальневосточный Федеральный университет»; Владивосток, ул. Суханова, 8, 690091; моб. тел. 8(914)070-24-28; е-mail: alexandria333@bk.ru;

Бондаренко Евгений Иванович - кандидат медицинских наук, научный сотрудник лаборатории ПЦР АО «Вектор-Бест», Новосибирск. е-mail:ebondarenko@ngs.ru;

Леонова Галина Николаевна - главный научный сотрудник лаборатории флавивирусных инфекций, доктор медицинских наук, профессор. ФГБНУ «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова» (НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова); Владивосток, ул. Сельская 1, 690087; раб. тел. 8(423) 244-07-12; е-mail:galinaleon41@gmail.com.

© Коллектив авторов, 2018 г. doi: 10.5281/zenodo.1194878

Удк 577.2:577.21+616.981.21/.958.7

Ф.Н. Шубин, Н.А. Кузнецова, А.В. Раков

особенности завозной заболеваемости населения сальмонеллезом, вызванным отдельными плазмидными типами salmonella enteritidis

НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова, г. Владивосток

Целью исследования является сравнительное изучение плазмидных характеристик популяций Salmonella Enteritidis в Приморском и Хабаровском краях для установления причин и механизмов повышения заболеваемости населения сальмонеллезом, вызванным отдельными плазмидными типами микроба. Изучена плазмидная характеристика Salmonella Enteritidis, выделенных в 2006-2013 гг. от 7057 больных, в том числе от 6120 больных в Приморском крае и от 937 - в Хабаровском крае. Определение спектра плазмид выполнено по методу Kado C.I. и Liu S.T., (1981). Сформулировано представление о синхронной заболеваемости населения сальмонеллезом, вызванным отдельными плазмидными типами Salmonella Enteritidis, в различных субъектах федерации России. Необходимость выделения такого типа заболеваемости определяется, особенностями ее профилактики. Эпидемиологический надзор за сальмонеллезом, проводимый на отдельных административных территориях, не сможет контролировать весь процесс формирования синхронной заболеваемости, необходимы дополнительные методы контроля.

Ключевые слова: сальмонеллез, Salmonella Enteritidis, плазмидный тип, заболеваемость населения, Приморский край, Хабаровский край.

Для цитирования: Шубин Ф.Н., Кузнецова Н.А., Раков А.В. Особенности завозной заболеваемости населения сальмонеллезом, вызванным отдельными плазмидными типами Salmonella Enteritidis // Здоровье. Медицинская экология. Наука. 2018; 1(73): 20-24. doi: 10.5281/zenodo.1194878

Для корреспонденции: Шубин Ф.Н., д.м.н., e-mail: shubin@inbox.ru.

Поступила 15.12.17

F N. Shubin, N.A. Kuznetsova, A.V. Rakov

specific particularities of morbidity in the far east region of russia caused by salmonella enteritidis introduced strains with specific plasmid types

Somov Institute of Epidemiology and Microbiology, Vladivostok, Russia

The aim of the study was to compare the plasmid characteristics of Salmonella Enteritidis isolated from human in the Primorsky and Khabarovsk Regions to determine the causes and mechanisms of morbidity associated with Salmonella infections caused by specific plasmid types. The plasmid analysis of Salmonella Enteritidis isolates from 7057 patients, including 6120 patients in the Primorsky Region and 937 in the Khabarovsk Region was performed in 2006-2013. The plasmid spectrum was analysed by the method of Kado C.I. and Liu S.T., (1981). The concept of synchronous morbidity among people living in different administrative territories caused by specific plasmid types of Salmonella Enteritidis was formulated. The need to identify this type of morbidity is predicated on its targeted control and prevention measures.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.