Научная статья на тему 'Культивирование вакцинных штаммов сальмонелл с использованием питательных'

Культивирование вакцинных штаммов сальмонелл с использованием питательных Текст научной статьи по специальности «Агробиотехнологии»

CC BY
554
99
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
САЛЬМОНЕЛЛЫ / ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА / ФЕРМЕНТЕР / ТЕХНОЛОГИЯ / УПРАВЛЯЕМОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ / ВАКЦИНА / SALMONELLA CULTURE MEDIA / FERMENTATION EQUIPMENT / TECHNOLOGY / CONTROLLED CULTIVATION / THE VACCINE

Аннотация научной статьи по агробиотехнологии, автор научной работы — Меньшенин В. В., Школьников Е. Э., Раевский А. А., Анисимова Л. В., Коротеева Л. А.

Проведенные исследования позволили оптимизировать процесс культивирования сальмонелл в биореакторе. Гидролизаты из ферментных элементов крови полноценный заменитель классических питательных сред.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по агробиотехнологии , автор научной работы — Меньшенин В. В., Школьников Е. Э., Раевский А. А., Анисимова Л. В., Коротеева Л. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE CULTIVATION OF VACCINE STRAINS OF SALMONELLA WITH THE USE OF CULTURE MEDIA FROM NON-TRADITIONAL SOURCES OF RAW MATERIALS

Our researches have allowed to optimize the process of cultivation of Salmonella in the bioreactor. Hydrolysates from enzymatic elements of blood are a valid replacement for traditional culture media

Текст научной работы на тему «Культивирование вакцинных штаммов сальмонелл с использованием питательных»

Таблица 3. Эффективность реализации ягнят на мясо

Показатель Ж ив ая масса, кг

20,10 I 30,41 35,24

Убойная масса, кг 8,75 13,39 16,22

Стоимость мяса, руб. 1050 1606,8 1946,4

Затраты на содержание, руб. 690 900 1100

Прибыль, руб. 360 706,8 846,4

Рентабельность, % 52,17 78,53 76,94

менно повышалось количество жировых отложении в мышечной ткани.

Следует отметить, что в целом производство баранины было экономически эффективным во всех ва-

риантах опыта. При убое по достижению живой массы 20 кг прибыль составила 360 руб./гол., рентабельность - 52,17 %, 30 кг - 706,8 руб./гол. и 78,53 %, 35 кг

- 846,4 руб./гол. и 76,94 %.

Выводы. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют, что сверхремонтный молодняк куйбышевской породы овец при реализации на мясо целесообразно выращивать до живой массы 30 кг При этом масса охлажденной туши составляет 12,94 кг внутреннего жира - 0,45 кг, убойный выход - 44 %, коэффициент мясности - 2,92, доля отрубов I сорта - 92,1 %, прибыль

- 706,8 руб./гол., рентабельность - 78,53 %.

Литература.

1. Фисинин В.И., Калашников В.В., Багиров В.А. Научное обеспечение развития животноводства России в 2008-2012 гг. // Достижения науки и техники АПК. - 2008. - №10. - С. 3-6

2. Абонеев В.В. Стратегия развития овцеводства в Российской Федерации. // Достижения науки и техники АПК. -2008. - №10. - С. 37-39

3. Межпородное скрещивание как основа создания новых генотипов овец интенсивного мясного направления продуктивности / Зарытовский В.С., Трухачев В.И., Ульянов А.Н., Куликова А.Я. - Ставрополь: «Агрус», 2005. - 75 с.

4. Лушников В.П., Шарлапаев Б.Н. Резервы производства баранины в Поволжье /. - Саратов: Приволжское книжное изд-во, 2001. - 26 с.

5. Ульянов А.Н. Племенная работа в полутонкорунном мясошерстном овцеводстве. - М.: Россельхозиздат, 1985. - 208 с.

EFFICIENCY OF USE OF SHEEP OF KUIBYSHEV BREED FOR LAMB MANUFACTURE

A.V. Molchanov

Summary. In article results of definition of optimum weight standards for slaughter on meat of young animals of sheep are stated. For carrying out scientifically - economic experience used young rams of Kuibyshev meat-wool breeds by pedigree loud-speaker Joint-Stock Company “Zorinsky” of Marksovsky area of the Saratov region. The best indicators have been received at slaughter of animals with live weight 30 kg.

Key words: young animals of Kuibyshev breed, Slaughter on meat, optimum weight standards, young rams, profitability.

УДК 619:579.842.14.57.082.26.

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ САЛЬМОНЕЛЛ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ИЗ НЕТРАДИЦИОННЫХ ИСТОЧНИКОВ СЫРЬЯ

В.В. МЕНЬШЕНИН, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник

Е.Э.ШКОЛЬНИКОВ, кандидат ветеринарных наук, зав. отделом

А.А.РАЕВСКИЙ, кандидат биологических наук, зам. директора

Л.В.АНИСИМОВА, кандидат биологических наук, зав. лабораторией

Л.А.КОРОТЕЕВА, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник

ВНИТИ биологической промышленности E-mail: vnitibp@mail.ru

Резюме. Проведенные исследования позволили оптимизировать процесс культивирования сальмонелл в биореакторе. Гидролизаты из ферментных элементов крови - полноценный заменитель классических питательных сред.

Ключевые слова: сальмонеллы, питательная среда, ферментер, технология, управляемое культивирование, вакцина.

Достижения науки и техники АПК, №08-2010 _

Внимание исследователей в медицине и ветеринарии постоянно направлено на изыскание более дешевых и доступных источников протеина для приготовления бактериологических питательных сред и их основ. Для этого используют растительные белки, отходы рыбной промышленности, белки молока, продукты переработки куриных эмбрионов и др.

Одновременно проводятся исследования по усовершенствованию технологии культивирования вакцинных штаммов бактерий для получения баккуль-тур, используемых в дальнейшем при производстве вакцинных и диагностических препаратов.

Цель наших исследований - отработка рецептуры питательных сред с использованием в качестве основы перевара из форменных элементов крови (отход сывороточного производства); разработка режима управляемого культивирования вакцинных штаммов сальмонелл.

Условия, материалы и методы. Для выращивания сальмонелл использовали лабораторные ферментеры АНКУМ-2М, вместимостью 0,01 м3, оснащенные системами автоматического контроля и

------------------------------------------- 65

регулирования основных параметров культивирования (температуры, рН, еН, рО2).

В процессе культивирования изучали морфологию сальмонелл в окрашенных по Граму мазках, накопление биомассы - по оптической плотности на КФК-2 при длине волны 540 нм и с использованием блока оптической плотности (БОП-5) аппаратуры АНКУМ-2М, жизнеспособность культуры - методом последовательных десятичных разведений на чашках Петри, культуральнобиохимические свойства - по способности роста на МПА, МПБ, средах Гисса.

Динамику роста при культивировании бактерий (максимальная удельная скорость и длительность фаз роста) рассчитывали графическим методом.

В качестве тест-культуры использовали вакцинный штамм Salmonella cholerae suis № 370.

Основа экспериментальной питательной среды

- гидролизат форменных элементов крови с содержанием аминного азота 700...900 мг%. В состав первого варианта питательной среды входит разведенный в 3-4 раза гидролизат (до концентрации аминного азота 150.180 мг%), глюкоза (1 %), од-нозамещенный фосфорнокислый калий (1,0 г/л); двузамещенный фосфорнокислый натрий безводный (8,5 г/л); сернокислый аммоний (1,0 г/л); лимоннокислое железо (50 мг/л); сернокислый магний (100 мг/л); лимоннокислый натрий (100 мг/л). Второй вариант опытной среды отличался отсутствием солей натрия. Основа контрольной среды -мясной перевар по Хоттингеру, разведенный водой до 160.200 мг% аминного азота. Кроме того, в его состав входит пептон (0,5 %) и NaCl (0,5 %).

Засев проводили из расчета 100 млн м.к./см3 питательной среды. Засевные культуры использовали из расплодки в экспоненциальной и стационарной фазах роста.

Результаты и обсуждения. Анализ процесса культивирования сальмонелл по существующим технологиям позволил сделать заключение о нео-птимальности ряда их параметров (рН, еН, рО2 и др.). При этом накопление сальмонелл штамма № 370 составило 9,09 млрд м.к./см3, а концентрация живых клеток - 5,62 млрд м.к./см3.

В ходе исследований были выявлены значимые параметры процесса культивирования: окислительно-восстановительный потенциал (еН) в фазе приспособления; температура, концентрация глюкозы и уровень растворенного в культуральной жидкости кислорода (рО2) - в течение всего процесса.

Разработанный режим управляемого культиви-

рования сальмонелл включает в себя поддержание рН на уровне 7,6...7,8 с помощью подачи 10 %-ного раствора гидроокиси натрия; регулирование парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода (рО2) путем изменения подачи воздуха на аэрацию (из расчета 2 объема воздуха на 1 объем питательной среды) и скорости вращения мешалки (100 оборотов в минуту), а также поддержание его на уровне 20 % от насыщения кислородом воздуха; дробную подачу 40 %-ного раствора глюкозы при лимитировании роста сальмонелл источником углерода; добавку пропинола Б-400 для пеногашения.

Использование усовершенствованного управляемого глубинного процесса культивирования в контрольной питательной среде обеспечило увеличение накопления биомассы сальмонелл штамма № 370 в 3,4 раза, живых клеток - в 2,7 раза.

При культивировании сальмонелл штамма № 370 с использованием экспериментальных питательных сред по разработанному режиму самое высокое накопление (45,8 млрд м.к./см3) и наибольшая концентрация жизнеспособных клеток (26,05 млрд м.к./ см3) отмечены в оптимизированной среде вариант 1. Это произошло из-за увеличения продолжительности фазы логарифмического роста (4,77 ч) и высокой удельной скорости роста (1,23 ч-1). В среде вариант 2 общее накопление сальмонелл составило 34,35 млрд м.к./см3 при невысокой концентрации живых бактерий (5,99 млрд м.к./см3).

Все полученные культуры сальмонелл были типичными по морфологии и сохраняли свои основные культурально-биохимические свойства.

Из полученной биомассы сальмонелл были приготовлены опытные серии вакцин. Через 9 месяцев хранения отмечено незначительное снижение жизнеспособных сальмонелл штамма № 370 (84,5 %), выращенных в оптимизированной питательной среде вариант 1. Концентрация жизнеспособных клеток этого же штамма, выращенного в питательной среде вариант 2 и контрольной составила 66,7.66,8 %.

Выводы. Проведенные исследования показали, что питательная среда, приготовленная на основе гидролизата из форменных элементов крови (вариант 1), не уступает по своим свойствам среде на основе классического перевара Хоттингера. Кроме того, отработан оптимальный режим работы лабораторного ферментера АНКУМ-2М, который обеспечивает увеличение накопления биомассы сальмонелл и численности живых клеток.

Литература.

1. Галиакберова Н.И., Алимов А.М., Макеев Х.Н. Изыскание питательной среды и оптимизация условий культивирования сальмонелл //Сборник докладов Международной конференции молодых ученых «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов». - Щелково, 2001, с.103-106.

2. Клыков С.П. и др. Влияние скорости роста культур на выживаемость сальмонелл //Биотехнология. - 1996. - № 1. - с. 35-39.

3. Заерко В.И. Производство живых вакцин против сальмонеллеза животных на питательных средах из непищевого сырья. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук - М., 1996. - 18 с.

4. Равилов А.З. и др. Микробиологические среды. - Казань: ФЭН. - 1999. - 398 с.

THE CULTIVATION OF VACCINE STRAINS OF SALMONELLA WITH THE USE OF CULTURE MEDIA FROM NON-TRADITIONAL SOURCES OF RAW MATERIALS V.V. Menshenin, E.E. Shkolnikov, A.A. Rajewski, L.V. Anisimova, L.A. Koroteeva

Summary. Our researches have allowed to optimize the process of cultivation of Salmonella in the bioreactor. Hydrolysates from enzymatic elements of blood are a valid replacement for traditional culture media.

Key words: Salmonella culture media, fermentation equipment, technology, controlled cultivation, the vaccine.

66 ---------------------------------------- ___________ Достижения науки и техники АПК, №08-2010

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.