КУЛОНОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВОДЫ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СУБСТАНЦИЯХ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

2023. Vol. 25. № 3 Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-3 E-ISSN 2686-6838

—-s^e^ç-—

G)

УДК 543.551.4:543.613.2

RESEARCH ARTICLE 3. Medical sciences

Corresponding Author: Abdullina Svetlana Gennadievna -doctor of pharmaceutical Sciences, professor of the Institute of Pharmacy, Kazan State Medical University, Kazan, Russian

Federation

E-mail: svetlana.abdullina@kazangmu.ru

© Abdullina S.G., Serebriannikova E.A., Lira O.A. - 2023 | *** | Accepted: 30 03 2023

http://dx.doi.Org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-3-68-73

КУЛОНОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВОДЫ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СУБСТАНЦИЯХ

Абдуллина С.Г., Серебрянникова Е.А., Лира О.А.

ФГБОУ ВО «Казанский государственный медицинский университет», г. Казань, Российская Федерация

Аннотация. Одним из обязательных критериев проверки качества фармацевтических субстанций является контроль содержания воды. Нарушение технологического процесса изготовления субстанций или условий их хранения может привести к таким нежелательным последствиям как потеря кристаллизационной воды или отсыревание, что, в свою очередь, в зависимости от химической структуры, может вызвать такие процессы, как гидролиз, окисление, разложение фармацевтических субстанций, образование нежелательных примесей, которые могут оказывать на организм токсичное действие. В зависимости от свойств фармацевтической субстанции в нормативной документации регламентируется либо только верхний предел содержания воды, либо верхний и нижний пределы (для субстанций, содержащих в своей структуре кристаллизационную воду). Перспективным методом определения воды является кулонометрическое титрование по Фишеру, где титрантом является электрогенерированный йод, который образуется при анодном окислении йодид-ионов, содержащихся в фоновом электролите. Далее йод, окисляя серу (IV) в присутствии воды согласно реакции Фишера, восстанавливается до йодид-ионов, из которых вновь может генерироваться йод. Контролирование силы тока и времени электролиза, влияющих на количество электрогенерированного на аноде йода, позволяет рассчитать содержание воды в фармацевтической субстанции. Предварительное удаление влаги из фонового электролита и возможность определения воды только во вводимой пробе значительно повышают точность анализа. Преимуществами метода также являются отсутствие необходимости предварительной стандартизации титранта и построения градуировочных графиков, экспрессность и простота проведения эксперимента, возможность полной автоматизации. Разработана унифицированная методика определения воды кулонометрическим титрованием по Фишеру в фармацевтических субстанциях никотиновой кислоты, бендазола гидрохлорида и лизиноприла дигидрата. Относительное стандартное отклонение не превышает 2%, относительная ошибка среднего составляет 1,8%. Методики могут быть использованы в практике контрольно-аналитических лабораторий для оценки параметра «Вода» в данных фармацевтических субстанциях.

Ключевые слова: определение воды, содержание воды, гальваностатическая кулонометрия, кулонометрическое титрование по Фишеру, никотиновая кислота, бендазола гидрохлорид, лизиноприла дигидрат.

COULOMETRIC DETERMINATION OF WATER IN PHARMACEUTICAL SUBSTANCES

Abdullina S.G., Serebriannikova E.A., Lira O.A.

Kazan State Medical University, Kazan, Russian Federation

Abstract. The water content is one of the mandatory criteria for the quality ofpharmaceutical substances. Violation of the technological process for the manufacture of substances or their storage conditions can lead to undesirable outcomes: loss of crystallization water or dampness, which can cause processes such as hydrolysis, oxidation, decomposition, the formation of undesirable impurities that can have a toxic effect. The regulatory documentation regulates either only the upper limit of the water content, or the upper and lower limits (for substances containing water of crystallization in their structure), depending on the properties of the pharmaceutical substance. Coulometric Fischer titration is a promising method for the determination of water. The titrant is electrogenerated iodine, which is formed during the anodic oxidation of iodide ions contained in the anode solution. Further, iodine oxidizes sulfur (IV) in the presence of water according to the Fisher reaction and is reduced to iodide ions, from which iodine can be generated again. Measuring the current and time duration for electrolysis, on which the amount of iodine electrogenerated at the anode depends, makes it possible to calculate the water content in the pharmaceutical substance. Preliminary removal of moisture from the anolyte and the possibility of water determination only in the

2023. Vol. 25. № 3

Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-3

E-ISSN 2686-6838

injected sample significantly increase the accuracy of the analysis. The advantages of this method are specificity, no need for preliminary standardization of the titrant and creation of calibration graphs, rapidity and simplicity of the experiment, possibility offull automation. A unified method for the determination of water by coulometric Fischer titration in substance of nicotinic acid, bendazole hydrochloride and lizinopril dihydrate has been developed. The relative standard deviation does not exceed 2%, the relative error of the mean is 1.8%. The methods can be used in the practice of analytical laboratories to assess the "Water" parameter in these pharmaceutical substances.

Keywords: water determination, water content, galvanostatic coulometry, Karl Fischer coulometric titration, nicotinic acid, bendazol, lizinopril.

Введение. Одним из обязательных критериев проверки качества фармацевтических субстанций является контроль содержания воды. Нарушение технологического процесса изготовления субстанций или условий их хранения (повышенная или пониженная влажность, температура, свет) может привести к таким нежелательным последствиям как потеря кристаллизационной воды или отсыревание, характерное для гигроскопичных субстанций, что, в свою очередь, в зависимости от химической структуры, может вызвать их гидролиз, окисление, разложение, образование

нежелательных примесей, которые могут оказывать на организм токсичное действие. В зависимости от свойств фармацевтической субстанции в нормативной документации регламентируется либо только верхний предел содержания воды, либо верхний и нижний пределы (для субстанций, содержащих в своей структуре кристаллизационную воду). Фармакопеи разных стран [1,2] рекомендуют определять содержание воды в субстанциях методами высушивания, волюмометрического и кулонометрического титрования по Фишеру. Метод высушивания прост в исполнении, но длителен. К тому же при нагревании испаряется не только влага, но и летучие примеси, остаточные органические растворители, что делает метод неселективным по отношению к воде. Следует отметить, что в методе высушивания учитывается только свободная вода. Определение кристаллизационной воды этим способом невозможно. При волюмометрическом титровании по методу Фишера определяется и свободная, и связанная (кристаллизационная) вода, которая участвует в реакции 802 + Ь + 2Н2О ^ 2Н1 + ^Оф Карл Фишер предложил проводить эту реакцию в неводном растворителе — метаноле и использовать ее для определения содержания воды [4]. Для связывания образующихся органических кислот и смещения равновесия вправо предложено использовать органическое основание - пиридин [5]. Часто пиридин заменяют на другие, менее токсичные основания, например, имидазол [6]. При смешивании

диоксида серы в пиридине и йода в метаноле образуется метилсульфитпиридиния 802 + СНзОН + ИК ^ ИЧ+Н-СНз80з—. В присутствии воды метилсульфитпиридиния окисляется йодом до метилсульфатпиридиния Н20 + 12 + ШНО^Оз- + 2Ш ^ ККНСНз804— + 2КК+НГ. Пиридин (ИК) необходим для связывания кислых продуктов реакции и создания оптимального рН среды. Вода в этой реакции не окисляется и не восстанавливается, а только служит источником ионов водорода и кислорода. Поэтому без воды эта реакция не протекает. При волюмометрическом титровании требуется стандартизация титранта. Автоматические титраторы позволяют оттитровать до 10 проб при одной загрузке фонового электролита, при этом необходимо учитывать дрейф конечной точки титрования. Перспективным методом

определения воды является кулонометрическое титрование по Фишеру, где титрантом является электрогенерированный йод, который образуется при анодном окислении йодид-ионов, содержащихся в фоновом электролите. Далее йод, окисляя серу (IV) в присутствии воды согласно реакции Фишера, восстанавливается до йодид-ионов, из которых вновь может генерироваться йод (рис. 1):

-► 2 Г - 2 ё —> 1г

Ь + RN+H-CH3SOr + НЮ 21 + RN+HCH3S03 + 2Н+ _f

Рис.1. Схема реакции Карла Фишера с электрогенерированным йодом.

Fig.1 - Karl Fischer reaction scheme with electrogenerated iodine.

Контролирование силы тока и времени электролиза, влияющих на количество электрогенерированного на аноде йода, позволяет рассчитать содержание воды в фармацевтической субстанции. Экспрессность и автоматизация измерений дают явные преимущества этому методу [7-9].

Цель настоящего исследования разработать унифицированную методику

кулонометрического определения воды в

субстанциях никотиновой кислоты, бендазола гидрохлорида и лизиноприла дигидрата.

Материалы и методы. Исследования проводили на кулонометре «Эксперт-007» («Эконикс-Эксперт», Россия). Растворителем для субстанций служила смесь растворов Аква М®- Кулон AG и карбинола в соотношении 1:1. Навеску субстанций подбирали таким образом, чтобы содержание воды в 1 г раствора было приблизительно 1 мг, подобно стандарту, по которому проверялась пригодность

кулонометрической ячейки. Взвешивание проводили на аналитических весах «HTR-220CE» («Shinko Denshi», Япония). Время кулонометрического титрования одной пробы с содержанием воды 1 мг составляло около 4 минут. Статистическую обработку данных проводили по ГФ XIV [1], используя программу Microsoft Excel.

Подготовка кулонометрической ячейки к работе. Осушительную трубку заполняли индикаторным силикагелем (ГОСТ 8984-75). Смазывали шлифы ячейки водорастворимой смазкой. В ячейку устанавливали индикаторный и генераторный платиновые электроды, осушительную трубку, порт ввода пробы с силиконовой мембраной. В анодную камеру кулонометрической ячейки помещали магнитную мешалку, наливали около 130 мл раствора Аква М®- Кулон AG («Акваметрия», Россия), затем в катодную камеру аккуратно наливали около 5 мл раствора Аква М®-Кулон СG («Акваметрия», Россия), избегая попадания раствора католита в анодную камеру, и устанавливали вспомогательный платиновый электрод. Включали кнопку «Измерение» для удаления влаги в фоновом электролите, попавшей в ячейку при ее заполнении. При смене полярности добавляли водно-карбинольную смесь 1:1 для удаления избытка йода до установления рабочего потенциала (40 мВ). Контроль герметичности

кулонометрической ячеики проводили путем измерения дрейфа, который не превышал 0,05 мг ШО/мин. Дрейф вводили в память прибора. Пригодность кулонометрической ячейки к работе проверяли по стандартному раствору HYDRANAL - Check Solution 1.00 с содержанием воды 1,00±0,03 мг ШО/г (Fluka, Германия), правильность определения воды в стандарте составляла 97,5-102,5%.

Методика кулонометрического определения воды: около 0,30 г (точная навеска) никотиновой кислоты, около 0,60 г (точная навеска) бендазола гидрохлорида или около 0,06 г (точная навеска) лизиноприла дигидрата растворяли в 5 мл растворителя. В кулонометрическую ячейку вносили 1 г приготовленного раствора шприцом путём прокалывания силиконовой мембраны, шприц взвешивали до и после ввода пробы. Перемешивали в течение 15 с. По окончании измерения содержание воды в пробе в мг выводилось на цифровой дисплей кулонометра. Параллельно проводили контрольный опыт.

Результаты и обсуждение. Согласно нормативной документации (НД), содержание воды в субстанции никотиновой кислоты должно быть не более 0,5% [1] или не более 1,0% [2], в субстанции бендазола гидрохлорида □ не более 1,5% [3], рекомендуется метод высушивания, в субстанции лизиноприла дигидрата □ не менее 8,0% и не более 9,5% [1,2], рекомендуется волюмометрическое титрование по Фишеру. Регламентирование верхнего и нижнего пределов в лизиноприла дигидрате обусловлено наличием в структуре кристаллизационной воды.

Содержание воды во вводимой пробе определяли на трех уровнях концентрации фармацевтической субстанции в диапазоне 70130% от уровня концентрации, принятого за 100% (табл. 1). Относительное стандартное отклонение (RSD) не превышает 2%.

Таблица 1

Определение воды на трёх уровнях концентрации (n=5, Р=95%)

Субстанция Содержание субстанции в пробе, % Найдено воды, % RSD,%

4,021 0,162+0,004 1,8

Никотиновая кислота 5,568 0,161+0,003 1,5

7,342 0,162+0,004 1,9

8,202 1,319+0,010 0,6

Бендазола гидрохлорид 12,081 1,320+0,011 0,7

16,059 1,325+0,015 0,9

0,042 8,24+0,09 0,9

Лизиноприла дигидрат 0,061 8,23+0,11 1,1

0,080 8,23+0,11 1,0

Table 1

Determination of water at three levels of concentration (n=5, Р=95%)

Substance The content of the substance in the sample, % Found water content, % RSD,%

4,021 0,162+0,004 1,8

Nicotinic acid 5,568 0,161+0,003 1,5

7,342 0,162+0,004 1,9

8,202 1,319+0,010 0,6

Bendazole hydrochloride 12,081 16,059 1,320+0,011 1,325+0,015 0,7 0,9

0,042 8,24+0,09 0,9

Lizinopril dihydrate 0,061 8,23+0,11 1,1

0,080 8,23+0,11 1,0

Проведено определение воды в 5 навесках на среднем уровне концентрации (табл. 2). Относительная ошибка среднего не превышает 1,8%.

Таблица 2

Метрологические характеристики методики кулономерического определения воды на уровне, принятом

за 100% (и=5, Р=95%)

Субстанция Содержание субстанции в пробе, % Найдено воды, % Метрологические характеристики

5,454 0,159 Хср=0,162 ЛХср=0,003 5=0,0023 ЯЖ=1,4% Ср=0,0010 ^=1,8%

5,688 0,160

Никотиновая кислота 5,842 0,164

5,790 0,162

5,309 0,164

11,768 11,901 12,220 11,871 1,320 1,315 1,338 1,330 ХСр=1,323

ЛХср=0,013

Бендазола гидрохлорид 5=0,0108 ЯЖ=0,8% ср=0,0048 еср=1,0%

12,060 1,312

0,060 0,061 0,058 0,059 8,306 8,254 8,168 8,284 Хср=8,23 АХср=0,09

Лизиноприла дигидрат 5=0,0728 ЯЖ=0,9% 5. ср=0,0326 £ср=1,1%

0,060 8,140

Table 2

Determination of water at an average concentration level (repeatability) (n=5, Р=95%)

Substance The content of the substance in the sample, % Found water content, % Statistical data

5,454 0,159 ХСр=0,162 АХср=0,003 S=0,0023 RSD=1,4% & Ср=0,0010 £«,= 1,8%

5,688 0,160

Nicotinic acid 5,842 0,164

5,790 0,162

5,309 0,164

11,768 11,901 12,220 11,871 1,320 1,315 1,338 1,330 ХСр=1,323 АХср=0,013

Bendazole S=0,0108

hydrochloride RSD=0,8% Sx Ср=0,0048 £Ср=1,0%

12,060 1,312

Lizinopril dihydrate 0,060 0,061 8,306 8,254 ХСр=8,23 АХСР=0,09

0,058 8,168 S=0,0728

0,059 8,284 RSD=0,9%

0,060 8,140 S, ср=0,0326

Scp=1,1%

Найденные значения воды в пробе входят в допустимый интервал, рекомендуемый НД. Как можно видеть из результатов, кулонометрическое определение воды по Фишеру можно проводить в разных по химической структуре субстанциях: кислотах (никотиновая кислота), солях (бендазола гидрохлорид - соль, образованная слабым основанием и сильной кислотой), основаниях (лизиноприла дигидрат) с разным содержанием воды, в том числе, содержащих кристаллизационную воду. Желательно подбирать концентрацию анализируемого раствора с содержанием воды, близкой к стандарту, по которому проводится определение правильности. Уменьшение концентрации может привести к сокращению времени анализа и возможному искажению результатов. Важное значение имеет и растворитель. Предложено растворять субстанции в одном из компонентов реактива Фишера - Аква М®- Кулон AG, содержащем диоксид серы (II) в смеси с карбинолом (1:1). Если йод постоянно генерируется из йодсодержащегося

органического соединения, то второй компонент реакции будет поступать извне с пробой. Это позволяет проводить многократные измерения (до 100-150 проб) при одной загрузке фонового электролита, что значительно уменьшает стоимость анализа. Предварительное удаление влаги из фонового электролита и возможность

определения воды только во вводимой пробе значительно повышают точность анализа. Единый подход к выбору растворителя и оптимальной навески позволяет унифицировать методики кулонометрического определения воды в фармацевтических субстанциях как с низким (до 0,5%), так и высоким (8,0-9,5%) её содержанием. Преимуществами метода также являются отсутствие необходимости

предварительной стандартизации титранта и построения градуировочных графиков, экспрессность и простота проведения эксперимента, возможность полной

автоматизации. К недостаткам метода можно отнести возможное взаимодействие

фармацевтической субстанции с компонентами реактива Фишера и ограничение её растворимости.

Выводы. Таким образом, разработана унифицированная методика определения воды кулонометрическим титрованием по Фишеру в фармацевтических субстанциях никотиновой кислоты, бендазола гидрохлорида и лизиноприла дигидрата. Относительное стандартное отклонение не превышает 2%, относительная ошибка среднего составляет 1,8%. Методики могут быть использованы в практике контрольно-аналитических лабораторий для оценки параметра «Вода» в данных фармацевтических субстанциях.

REFERENCES

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК

[1]. State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIV edition. [Internet]/ http://www.femb.ru/femb/pharmacopea.php (cited 11.02.23).

[2]. European Directorate for the Quality of Medicine & HealthCare . European Pharmacopoeia 10.0. [Internet] / https://pheur.edqm.eu/subhome/10-0 (cited 15.12.2022).

[3]. Draft monograph 42-2718-96. Bendazole hydrochloride. [Internet]/ https://static-0.minzdrav.gov.ru/system/attachments/ attaches/000/038/225/original/%D0%9F%Dl%80°0 D0%BE%D0%B5%D0%BA% D1°Ö82_% D0%A4%D0%Al_%D0%91%D0%B5%D0°oBD°oD0°oB 4%D0%B0%D0%B7%D0%BE%D0%BB° ÖD0° ÖB0_° ÖD0 %B3%D0%B8%D0%B4%Dl%80%D0%BEoÖDl°ö85°ÖD 0%BB%D0%BE%D1%80%D0° ÖB8° ÖD0° ÖB4.docx? 1526 646315 (cited 11.02.23).

[4]. Fisher, K. Neues Verfahren zur massanalytischen Bestimmungen des Wasser-gehaltes von Flüssigkeiten und festen Körpern / K. Fisher // Angew. Chem. - 1935. -Vol.48. - P. 394-396.

[5]. Verhoef J.C., Barendrecht, E. Mechanizm and reaction rate of the Karl Fischer titration reaction. Partl.Potenciometric

[1]

[2]

[3]

Еосударственная фармакопея РФ XIV изд. [Электронный ресурс]/ http://www.femb.ru/femb/pharmacopea.php (дата обращения: 11.02.23).

European Directorate for the Quality of Medicine & HealthCare. European Pharmacopoeia 10.0. [Электронный ресурс] / https://pheur.edqm.eu/subhome/10-0 (дата обращения 15.12.2022).

Проект ФС 42-2718-96. Бендазола гидрохлорид. [Электронный pecypc]/https://static-

0.minzdrav.gov.ru/system/attachments/attaches/000/038/225/ original/%D0%9F%Dl%80%D00ÖBE°ÖD00ÖB5° ÖD0° ÖBA° ö D1 % 82_° ÖD0° ÖA4° ÖD0° ÖA1 ÖD0° 0910 ÖD0° ÖB5° ÖD0° ÖBD %D0%B4%D0%B0%D0%B7oÖD0°ÖBEoÖD0° ÖBB° ÖD0° ÖB 0JÖD0%B3%D0%B8%D0%B4%D1%80%D0%BE%D1% 85%D0%BB%D0%BE%D1%80%D0° ÖB8° ÖD0° ÖB4.docx? 1 526646315 (дата обращения: 11.02.23). Fisher, К. Neues Verfahren zur massanalytischen Bestimmungen des Wasser-gehaltes von Flüssigkeiten und festen Körpern / K. Fisher // Angew. Chem. - 1935. - Vol.48. - P. 394-396.

[5]. Verhoef J.C., Barendrecht, E. Mechanizm and reaction rate of the Karl Fischer titration reaction. Partl.Potenciometric

[4]

2023. Vol. 25. № 3

Issue Doi: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-3

E-ISSN 2686-6838

Measurements// Journal of Electroanalytical Chemistry. -1976. - Vol. 71, №3-P. 305-315.

[6]. Scholz, E. Karl Fischer-Reagentien ohne Pyridin (7). Zweikomponenten-Reagentien mit Imidazol // Fresenius Z. Anal. Chem. - 1982. - №312. - P.462-464.

[7]. Abdullina, S.G., Lira, O.A., Petrova, I.K. Coulometric determination of water in medicinal preparations // Pharmacy. 2011. No. 5. S. 15-16.

[8]. Petrov, S.I. Control of the correctness of water determination in coulometric aquametry /S.I. Petrov, O.A. Zharikova // Factory laboratory: Diagnostics of materials. -2005. - V.71, No. 12. P. 3-6. '

[9]. Scholz, E. Karl-Fischer-Titration: Methoden zur Wasserbestimmung. Berlin: Shringer-Verlag. 1984. 133 p.

Measurements// Journal of Electroanalytical Chemistry. -1976. -Vol. 71, №3-P. 305-315.

[6]. Scholz, E. Karl Fischer-Reagentien ohne Pyridin (7). Zweikomponenten-Reagentien mit Imidazol // Fresenius Z. Anal. Chem. - 1982. - №312. - P.462-464.

[7]. Абдуллина С.F., Лира O.A., Петрова И.К. Кулонометрическое определение воды в лекарственных препаратах//Фармация. 2011. № 5. С. 15-16.

[8]. Петров, С.И. Контроль правильности определения воды в кулонометрической акваметрии / С.И. Петров, O.A. Жарикова // Заводская лаборатория: Диагностика материалов. □ 2005. □ Т.71,№12. □ С. 3-6.

[9]. Scholz Е. Karl-Fischer-Titration: Methoden zur Wasserbestimmung. Berlin: Shringer-Verlag. 1984. 133 p.

Author Contributions. Abdullina S.G. - review of literature, writing a text, research concept and design; Serebriannikova E.A. - collection and processing of materials, statistical data processing, Lira O.A. - collection and processing of materials, statistical data processing.

Conflict of Interest Statement. The authors declare no conflict of interest. Abdullina S.G. - SPIN ID: 5542-2519; ORCID ID: 0000-0002-4049-1903 Serebriannikova E.A. - SPIN ID: 1704-8309; ORCID ID: 0000-0002-8948-5029 Lira O.A. - SPIN ID: 8212-2368; ORCID ID: 0000-0003-4763-1478

For citation: Abdullina S.G., Serebriannikova E.A., Lira O.A. COULOMETRIC DETERMINATION OF WATER IN PHARMACEUTICAL SUBSTANCES. // Medical & pharmaceutical journal "Pulse". - 2023;25(3):68-73. http://dx.doi.org//10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-3-68-73.

Вклад авторов. Абдуллина С.Г. - обзор литературы, написание текста, концепция и дизайн исследования; Серебрянникова Е.А. - сбор и обработка материалов, статистическая обработка данных; Лира О.А. - сбор и обработка материалов, статистическая обработка данных.

Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Абдуллина С.Г. - SPIN ID: 5542-2519; ORCID ID: 0000-0002-4049-1903 Серебрянникова (Калинкина) Е.А. - SPIN ID: 1704-8309; ORCID ID: 0000-0002-8948-5029 Лира О.А. - SPIN ID: 8212-2368; ORCID ID: 0000-0003-4763-1478

Для цитирования: Абдуллина С.Г., Серебрянникова Е.А., Лира О.А. КУЛОНОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВОДЫ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СУБСТАНЦИЯХ // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". 2023;25(3):68-73. http://dx.doi.org/Z10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-3-68-73.