CC BY
30
УДК 616-036
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-9-37-41
КРИСТАЛОГРАФИЯ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ, КАК ОСНОВА РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОЙ БРОНХОЛЁГОЧНОЙ ПАТОЛОГИИ У ДЕТЕЙ
Жирнов В.А., Владимирова Ю.В.
ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет», г. Самара, Российская Федерация
Аннотация. Высокие показатели заболеваемости детей от респираторной патологии определяют необходимость поиска научно обоснованных мер по оптимизации диагностики, лечения и профилактики заболеваний системы органов дыхания. Последнее время особую ценность приобретают неинвазивные методы диагностики. Активно изучаются биологические жидкости организма при помощи кристаллографических методов, основывающихся на качественном и количественном изучении кристаллограмм биосубстратов. Сущность кристаллографического метода -анализ морфологии кристаллов, формирующихся в процессе дегидратации биологических жидкостей организма [1]. Данные подходы нашли применение при диагностике широкого спектра заболеваний. Это свидетельствует, что кристаллография слюны достаточно объективно отражает функциональное состояние организма как при физических нагрузках, так и при заболеваниях различной этиологии [2].
Цель нашей работы заключалась в исследовании особенности кристаллограмм конденсата выдыхаемого воздуха и ротовой жидкости у больных с острой и обострением хронической бронхолегочной патологии.
В статье представлены особенности кристаллограмм конденсата выдыхаемого воздуха и ротовой жидкости у больных с острой и обострением хронической бронхолегоч-ной патологии, отражающие функциональное состояние организма.
По результатам сравнительного анализа наиболее эффективным и достоверным кристаллографическим методом ранней диагностики хронической бронхолегочной патологии признана - кристаллография нативного КВВ. Ключевые слова: кристаллография, дети, бронхолёгочная патология, ротовая жидкость, конденсат выдыхаемого воздуха.
CRYSTALLOGRAPHY OF ORAL FLUID AS A BASIS FOR EARLY DIAGNOSIS OF CHRONIC BRONCHOPULMONARY PATHOLOGY IN
CHILDREN
Zhirnov V.A., Vladimirova Y.V.
Samara state medical university, Samara, Russian Federation
Annotation. High rates ofmorbidity of children from respiratory diseases determine the need to search for evidence-based measures to optimize the diagnosis, treatment and prevention of diseases of the respiratory system. Recently, non-invasive diagnostic methods have become particularly valuable. Biological fluids of an organism are actively studied by means of crystallo-graphic methods based on qualitative and quantitative study of crystallograms of biosubstrates. The essence of the crystallo-graphic method is the analysis of the morphology of crystals formed in the process of dehydration of biological fluids of the body [1]. These approaches have been used in the diagnosis of a wide range of diseases. This shows that cristallografia of saliva is sufficient to objectively reflect the functional state of the organism as during exercise and in diseases of different etiology [2].
The aim of our work was to study the features of crystallograms of exhaled air condensate and oral fluid in patients with acute and exacerbation of chronic bronchopulmonary pathology. The article presents the features of the crystallograms of the exhaled air condensate and oral fluid in patients with acute and exacerbation of chronic bronchopulmonary pathology, reflecting the functional state of the body.
According to the results of comparative analysis, the most effective and reliable crystallographic method of early diagnosis of chronic bronchopulmonary pathology is the crystallography of native kvv.
Key words: crystallography, children, bronchopulmonary pathology, oral liquid, exhaled air condensate.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
[1] Аналитические подходы к изучению показателей метаболизма в ротовой жидкости: Учебное пособие/ под ред. Ф.Н. Гильмияровой. - Москва: Издательство «Известия», 2006. - 312 с.
REFERENCES
[1] Analytical approaches to the study of metabolism in the oral fluid: textbook / ed. Gilmiyarova. - Moscow: Izvestia Publishing House, 2006. - 312 p.
---■—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
~ 37 ~
2 Владимирова Ю.В. Эффективность впервые назначенной базисной терапии у детей с бронхиальной астмой в г. самара. В сборнике: IX Всероссийская итоговая студенческая научная конференция 83 "Студенческая наука и медицина XXI века: традиции, инновации и приоритеты", посвященная 85-летию Клиник СамГМУ сборник материалов. ГБОУ ВПО "Самарский государственный медицинский университет". 2015. С. 54.
[3] Жирнов В.А., Владимирова Ю.В. Эффективность проведения третичной профилактики у детей с бронхиальной астмой
[4] В сборнике: Развитие системы комплексной реабилитации инвалидов, службы ранней помощи детям с ограниченными возможностями здоровья, в том числе детям-инвалидам, и социального сопровождения их семей сборник материалов межрегиональной конференции. 2017. С. 114-118.
[5] Владимирова Ю.В., Жирнов В.А. Ведение детей с бронхиальной астмой в период ремиссии Оренбургский медицинский вестник. 2017. Т. V. № Б3 (19). С. 48-49.
[6] Бронхиальная астма (руководство для врачей)/под. ред. Л. С. Намазовой- Барановой. - Москва: Педи-атрЪ, 2015.- 64 с.
[2] Vladimirova Y. V. First appointed to the effectiveness of basic therapy in children with bronchial asthma in samara. In the collection: IX all-Russian final student scientific conference 83 "Student science and medicine of the XXI century: traditions, innovations and priorities", dedicated to the 85th anniversary of Sammu Clinics collection of materials. Sbee HPE "Samara state medical University". 2015. P. 54.
[3] Zhirnov V. A., Vladimirov Yu. V. Effectiveness of the tertiary prevention in children with bronchial asthma In the collection: the Development of a system of integrated rehabilitation of persons with disabilities, early care services for children with disabilities, including children with disabilities, and social support of their families collection of materials of the interregional conference. 2017. P. 114118.
[4] Vladimirova Y. V., Zhirnov V. A. The management of children with bronchial asthma in remission Orenburg medical Bulletin. 2017. T.V. No.S3(19).P. 48-49.
[5] Bronchial asthma (guide for physicians)/ed. edited by L.S. Namazova - Baranova. - Moscow:Pediatrician, 2015.- 64 p.
Кристаллографическое исследование конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) и нестимулированной смешанной слюны (ротовой жидкости) проведено всего у 366 детей в возрасте 6-15 лет, в том числе 166 детей на 3 этапе исследования (35 из подгруппы «БА», 37 из подгруппы «ХБ», 34 из подгруппы «ОРБ» и 60 из контрольной группы) и 200 детей на этапе оценки эффективности предлагаемой методики ранней диагностики ХБЛП. Исследование проводилось по методикам Л.А. Мороз и соавт. (1981), В.Н. Шабалина и С.Н. Шатохиной (2001) в модификации И.В. Постниковой (2003). КВВ собирали с помощью охлаждаемой изогнутой V-образно стеклянной трубки (высота трубки -60 мм, диаметр трубки - 6 мм) в течение 5 минут. Ротовую жидкость (РЖ) собирали в стандартные лабораторные пробирки. Сбор материалов проводился в одинаковых условиях, в одно и то же время дня для исключения возможного влияния на результат суточных биоритмов, не менее через 3 часа после завтрака, после 3-кратного полоскания полости рта теплой кипяченой водой. У детей с бронхолегочной патологией материалы собирали 2 раза: в период обострения и в межпри-ступный период (у детей с ОРБ - между рецидивами).
Предварительная обработка полученного материала осуществлялась следующим образом. В пробирках для центрифугирования с помощью полуавтоматической дозирующей пипетки (ПДП) на 1000 мл к 0,1 мл дистиллированной воды добавляли 0,1 мл исследуемой РЖ и 0,2 мл 10%-й трихлоруксусной кислоты. Содержимое пробирок перемешивали путем
интенсивного встряхивания, центрифугировали 5 минут при 3000 оборотов в минуту. Затем забирали 3 мл надосадочной жидкости (так, чтобы наконечник ПДП не касался белкового сгустка), которые помещали в ячейку микрокамеры для дальнейшей работы. Предварительная обработка КВВ не требовалась. Таким образом, из материалов каждого ребенка готовилось 4 препарата: 2 - из КВВ и 2 - из РЖ. Образцы высушивали в одинаковых условиях при температуре 18-22°С и относительной влажности воздуха 65-70% в закрытом непроветриваемом помещении методом открытой капли в течение 24 часов. Исследование кристаллической структуры дегидратированных капель (фаций) проводилось с использованием светового оптического микроскопа «БикЗаг» (Польша), объектив 4*, оснащенного черно-белой видеокамерой. Сигнал с видеокамеры передавался на монитор видеоконтрольного устройства и на плату ввода изображений. Выбранные участки изображений (краевые и центральные) фотографировались, передавались в компьютер для обработки и анализа. Анализ изображений осуществлялся при стандартном увеличении реальных препаратов в 56 раз.
Результаты исследования. В фации нативного КВВ здоровых детей в 93,3±3,22% случаев определялись четкая тонкая стенка и две зоны: периферическая (без кристаллических налетов, с единичными точечными вкраплениями) и центральная (четко очерченный неправильный овал, образованный многочисленными центрами кристаллизации) (рис. 1). В
---■—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
центральной зоне можно было выделить «волны» кристаллизации, идущие от центра.
Рис. 1. Периферическая (слева) и центральная зоны кристаллограммы нативного КВВ здоровых детей
В фации нативного КВВ детей с ОРБ в период заболевания в 91,2±4,86% образцов также определялись четкая тонкая стенка, а также периферическая и центральная зоны. Но, в сравнении с кристаллограммой здоровых детей, центральная зона была менее четкой и
имела неправильную форму, а центров кристаллизации в ней было больше (рис. 2). При тяжелом течении ОРБ в центральной зоне появлялись крестообразные центры кристаллизации.
, V-- ■
. -S V
у v* . . .,
.. Г"- ■ Г
•
' у^Ш. ■ У.
.v.. ' ; J. ■
. V- ••••/• Г- . . •
Рис. 2. Периферическая (слева) и центральная зоны кристаллограммы нативного КВВ детей с ОРБ в период заболевания
В период между рецидивами заболевания кристал-лограмма нативного КВВ у 94,1±4,04% детей с ОРБ не отличалась от аналогичной кристаллограммы здоровых детей.
Кристаллограммы нативного КВВ в стадии обострения ХБ (в 94,6±3,72% образцов) не имели визуальных отличий от кристаллограмм большинства детей с ОРБ.
В стадии ремиссии ХБ характеристики стенки и периферической зоны кристаллограммы нативного КВВ 86,5±5,62% пациентов не имели отличий от аналогичной кристаллограммы здоровых детей. Особенности имела центральная зона: отсутствие четких границ и
формы (при этом по структуре и плотности зон кристаллизации центральные зоны кристаллограмм КВВ в норме и при ХБ не различались) [3].
В 88,6±5,38% фаций нативного КВВ в период обострения легкой БА определялась четкая, утолщенная (в сравнении с нативным КВВ в норме) стенка (рис. 3). Периферическая зона не отличалась от кристаллограммы нативного КВВ здоровых. Центральная зона имела форму практически правильной окружности, в центре которой (на расстоянии около У радиуса) плотно располагались множественные мелкие точечные центры кристаллизации. Дальше от центра наблюдались тонкие крестообразные фигуры.
---■—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
Рис. 3. Периферическая (слева) и центральная зоны кристаллограммы нативного КВВ детей с БА в стадии обострения
Для 94,3±3,92% кристаллограмм нативного КВВ при легкой БА в стадии ремиссии была характерна четкая стенка (более тонкая, чем при обострении); в периферической зоне практически отсутствовали центры кристаллизации; центральная зона характеризовалась отсутствием каких-либо границ, неопределенной формой, сравнительно малым числом точечных и зернистых вкраплений, а также отсутствием «волн» кристаллизации [4].
При исследовании кристаллограмм нативной РЖ у 71,7±5,82% здоровых детей наличествовали следующие особенности фации нативной РЖ: четкая стенка, узкая периферическая зона с тесно расположенными радиальными прозрачными линейными булавовидными фигурами, «перечеркнутыми» перпендикулярными «палочками».
У 55,9±8,52% детей с ОРБ в период рецидива в кри-сталлограмме нативной РЖ стенка утратила четкость; краевая зона стала шире и была образована очень тонкими радиальными линейными фигурами, практически слившимися в одну зону кристаллизации (при использованном увеличении); центральная зона характеризовалась более тонкими (в сравнении с нормой) линейными фигурами, ставшими менее прозрачными и практически утратившими «ветви» и «булаву»; в центре зачастую отмечалось сплошное поле кристаллизации. В целом, фации РЖ при рецидиве ОРБ выглядят темными, в сравнении с нормой.
Фации нативной РЖ после полного излечения очередного рецидива ОБ в 76,5±7,27% случаев не отличались по структуре и характеру кристаллизации от проб, взятых у здоровых детей.
Фации нативной РЖ при ХБ как при обострении, так и в стадии ремиссии в большинстве своем (73,0±7,30% и 62,2±7,97% образцов соответственно) не имели выраженных и легко идентифицируемых отличий от фаций при рецидиве ОБ и фаций между рецидивами соответственно. Следовательно, кристаллография нативной РЖ не может использоваться для
дифференциальной диагностики острого и хронического неспецифического воспаления бронхов.
Фации нативной РЖ при обострении легкой БА в большинстве случаев (68,6±7,85% образцов) имели характеристики (набор, окраску, и расположение «фигур» кристаллизации), сходные с кристаллограммами при ОРБ в период рецидива и при обострении ХБ. Отличия если и имели место быть, то заключались в незначительном уплотнении фигур, и их выявление требовало значительных затрат времени.
Таким образом, исследование фаций РЖ позволяет:
- диагностировать наличие бронхолегочного воспаления, однако дифференциация острого и хронического неспецифического процесса невозможна;
- диагностировать хронический атопический воспалительный процесс в бронхах.
Выводы. Сравнительный анализ наиболее распространенных признаков кристаллограмм нативного КВВ показал, что имеются устойчивые комплексы особенностей, позволяющие дифференцировать:
- все исследуемые виды ХБЛП от нормы;
- острое рецидивирующее неспецифическое воспаление бронхов от хронического, в стадии ремиссии последнего (по форме центральной зоны кристалло-граммы и отсутствию «волн» кристаллизации);
- атопическое хроническое воспаление от острого рецидивирующего и хронического неспецифического воспаления (при обострении БА - по правильной круглой форме центральной зоны и крестообразным образованиям, в стадии ремиссии - по слабо выраженной и бесформенной кристаллизации центральной зоны).
В целом, полученные результаты говорят о меньшей информативности кристаллографического исследования фаций нативной РЖ в сравнении с фациями нативного КВВ. Это выражается как в меньших различиях фаций нативной РЖ при различной бронхолегоч-ной патологии, так и в меньшей воспроизводимости диагностических признаков патологии в препаратах разных пациентов.
---■—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
~ 40 ~
Сравнение воспроизводимости признаков здоровья и патологии показывает, что в качестве диагностического метода эффективнее использовать кристаллографию КВВ. Сравнительно низкая воспроизводимость признаков патологии в фациях РЖ и большое количество образцов, не соответствующих ни условной норме, ни имеющейся патологии, можно объяснить тем, что на состав РЖ влияют не только и даже не столько заболевания бронхов, сколько стоматологическая и гастроэнтерологическая патология, а также патология носоглотоки и индивидуальные особенности принимаемой пищи.
При этом кристаллография в настоящее время остается в основном описательным исследованием. Причинно-следственные связи между особенностями кристаллизации биологических жидкостей и патологическими состояниями в настоящее время не раскрыты.
Поэтому невозможно отсеять структурные элементы фации, обусловленные не бронхолегочной патологией, а иными заболеваниями. В то же время КВВ - это материал, источником которого служат непосредственно нижние дыхательные пути и паренхима легких [5]. Проходя через полость рта, выдыхаемый воздух, безусловно, претерпевает изменения, однако они минимальны по сравнению с ротовой жидкостью, которая постоянно находится в полости рта и изменяется под действием многочисленных экзо- и эндогенных факторов, не связанных с функционированием легких.
На основании вышесказанного наиболее эффективным и достоверным кристаллографическим методом ранней диагностики хронической бронхолегочной патологии следует признать кристаллографию нативного КВВ.
---—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
