CC BY
33
КОРРЕЛЯЦИЯ МЕЖДУ GLEASON SCORE И АНДРОГЕН-РЕЦЕПТОРАМИ ПРИ РАКАХ
ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Л.В. ГУНДОРОВА
Патологоанатомическое отделение Госпиталя для ветеранов войн № 2, г. Москвы.
109472 Москва. Волгоградский проспект, 168.
Н.Н. ШЕЛЯСТИНА, И.И. ВАБИЧЕНКО Кафедра патологической анатомии РУДН. 117198 Москва. Ул. Миклухо-Маклая, 8.
Медицинский факультет
В работе проведено иммуногистохимическое исследование экспрессии рецепторов к андрогенам в эпителиальных клетках аденокарцином предстательной железы человека с различной степенью дифференциров-ки.
Проводился анализ биопсий от 126 больных раком предстательной железы, из них в возрасте 50-59 лет-
4, 60-69 лет - 18, 70-79 лет - 71, 80-89 лет - 31, старше 89 лет - 1. По сравнению с неизмененными железами при аденокарциномах с суммой Gleason 2-4 отмечалось некоторое уменьшение количества секреторных клеток с положительной реакцией на рецепторы к андрогенам в ядрах. При сумме по Gleason 5-7 баллов отмечалось резкое уменьшение количества ядер секреторных клеток с положительной реакцией. При иммуногисто-химическом исследовании материала с суммой по Gleason 8-10 баллов в ядрах секреторных клеток рецепторы к андрогенам практически не выявлялись.
Таким образом, по мере увеличения суммы баллов по Gleason в ядрах опухолевых клеток происходит постепенное уменьшение концентрации рецепторов к андрогенам.
Рак предстательной железы занимает 2-е место в мире среди онкологических заболеваний, и 1-е -у мужчин старше 75 лет [3]. На развитие рака простаты влияют многие факторы; при этом доминирующая роль принадлежит повышению уровня тестостерона в крови. Этот гормон оказывает влияние как на развитие предстательной железы в норме, так и на формирование патологических процессов.
Андрогены определяют дифференцирование клеточной популяции желез простаты [2]. Посредником ответа клеток на действие гормонов являются андрогеновые рецепторы, которые располагаются в ядрах клеток секреторного эпителия железы. Изучение рецепторного взаимодействия важно для понимания механизмов действия андрогенов на ткани-мишени и определения природной чувствительности к гормональному воздействию. Таким образом, определение наличия или отсутствия андроген-рецепторов является актуальным при лечении злокачественных опухолей предстательной железы. При этом могут выделяться андроген-независимые опухоли или опухоли, которые потеряли чувствительность к ранее применяемой гормональной терапии [4, 5].
Цель нашей работы заключалась в количественном определении андрогенрецепторов в различных по строению опухолях предстательной железы человека в зависимости от степени их дифференцированности.
Исследование проводилось на базе урологического отделении Госпиталя для ветеранов войн № 2 г. Москвы. Обработка образцов осуществлялась по стандартной гистологической методике с последующим иммуногистохимическим исследованием. Ценность метода иммуногистохимии заключается в возможности качественно и количественно оценить результаты морфометрическим методом с учетом локализации маркера на клеточном и тканевом уровнях.
Проводился анализ операционного и архивного материала биоптатов предстательной железы за 1998-2000 год от 126 больных раком предстательной железы, из них в возрасте 50-59 лет - 4 человека, 60-69 лет - 18 человек, 70-79 лет - 71 человек, 80-89 лет - 31 человек, старше 89 лет - 1 человек. Гистологический материал был получен в 96 случаях методом трансректальной мультифокальной биопсии, у 30 больных - методом трансуретральной электрорезекции предстательной железы. Биопсии окрашивали гематоксилин-эозином. После гистологической верификации опухоли проводили иммуногистохимическое исследование на наличие или отсутствие андрогеновых рецепторов
стандартными методиками [1]. Контролем служили 10 образцов ткани предстательной железы без патологических процессов, взятых у мужчин в возрасте 18-50 лет.
Для иммуногистохимических исследований из парафиновых блоков резали срезы толщиной 4 мкм и помещали на стекла, покрытые поли-Ь-лизином или обработанные раствором яичного альбумина.
Выявление тканевых антигенов проводили авидин-биотиновым методом, в котором биотинилированные вторичные антитела реагируют с соответствующими молекулами пероксидазо-конъюгированного стрептовидина. Метод обладает высокой чувствительностью и позволяет визуально обнаружить места расположения определяемых антигенов. При постановке иммуногистохимической реакции использовали универсальный DAKO LSAB+kit, пероксидазный (DAKO CORPORAI-TION USA). В качестве первичных иммунных сывороток использовали мышиные моноклональные антитела к андрогеновому рецептору (DAKO CORPORAITION, USA);
Контрольные срезы обрабатывали не иммунной мышиной сывороткой (DAKO CORPORAITION, USA).
При положительной реакции в местах нахождения антигенов выявляются преципитаты, окрашенные в коричневый цвет, срезы докрашивали гематоксилином Майера. Затем срезы обезвоживали и заливали в канадский бальзам.
При гистологическом исследовании образцов опухоли использовали классификацию аденокарцином по системе Gleason [6], суть которой состоит в выделении 5 гистологических типов опухоли с присвоением баллов от 1 до 5 по мере озлокачествления процесса. При описании препарата выделяется наиболее встречаемый тип опухоли, которому присваивается балл, и второй по значимости гистологический тип также с присвоением балла. При этом имеет место двухцифровой балльный вариант опухоли, который затем суммируется и сумма баллов по Gleason может быть от 2 до 10 баллов. В настоящем исследовании согласно этой классификации в 31 случае имела место сумма 2-4 балла, в 91 случае - сумма по Gleason равнялась 5-7 баллов, в 12 случаях - 8-10 баллов. В эту группу мы отнесли опухоли с отсутствием какой-либо дифференцировки. При иммуногистохимическом исследовании положительная реакция на андрогеновые рецепторы проявляется коричневым окрашиванием ядер секреторных клеток. В ткани простаты с нормальными железами отмечается 100% экспрессия андроген-рецепторов ядер всех секреторных клеток с равномерно выраженным окрашиванием. В базальных клетках окрашивания ядер не наблюдалось. В аденокарциномах с суммой Gleason 2-4 отмечалось уменьшение количества секреторных клеток с положительной диаминобен-зидиновой реакцией (ДАБ) в ядрах, интенсивность окрашивания становится менее однородной. При сумме по Gleason 5-7 баллов отмечалось резкое уменьшение количества ядер секреторных клеток с положительной ДАБ реакцией и неравномерное их окрашивание. При иммуногистохимическом исследовании материала с суммой по Gleason 8-10 баллов практически не отмечалось положительной иммуногистохимической реакции в ядрах анаплазированных секреторных клеток.
Таким образом, из полученных результатов исследования видно, что в неизмененной ткани предстательной железы отмечается равномерно выраженное окрашивание ядер всех секреторных клеток, что свидетельствует о наличии андрогеновых рецепторов в клетках. В зависимости от степени нарастания атипических признаков опухоли наблюдается уменьшение количества окрашенных ядер железистых клеток, причем ДАБ-реакция выражена неравномерно или отсутствует вовсе. По мере злокачественного перерождения опухоли железистые клетки теряют рецепторы к андрогенам, и, соответственно, опухоль не может быть подвергнута терапии антиандрогеновыми препаратами, что свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания.
Литература
1. Гуревич Л.Е., Исаков В. А. Использование в иммуногистохимических исследованиях метода антигенной специфичности воздействия микроволн на ткани, фиксированные формалином и заключенных в парафин. Архив патологии. 1999;61(2):49-50.
2. Кушлинский Н.Е., Бассапык Л.С., Светозеркский НЕ. Прогностическое значение определения рецепторов андрогенов при раке предстательной железы. Урология и нефрология. 1993;1:7-10.
3. Степанов В.Н., Франк Г.А., Кадыров З.Ю. и др. Современные проблемы урологии, Харьков. 1998.291-292.
4. Barak E.R. Androgen mutation of receptors in the cancer prostate. Mt. Sinai J. Med. 1996;63(5-6):403-412.
5. Cude K.J., Divon S.C., Guo Y et al. The androgen receptor : genetic considerations in the development and treatment of prostate cancer. J. Mol Med. 1999;77(5):419-426.
6. Gleason D.F., Mellinger A. et at. Prediction of prognosis for prostatic adeocarcinoma by combined histological grading and clinical stages. The Journal of Urology. 1974; 111:8-30.
CORRELATION BETWEEN GLEASON SCORE AND ANDROGEN - RECEPTORS AT PROSTATE
CANCERS
L.V. GUNDOROVA
Hospital for the Veterans of Wars №2. 168, Volgogradsky av„ 109472 Moscow, Russia N.N. SHELYASTINA, I.I. BABICHENKO
Department of Pathology RPFU. 117198 Moscow, Mikluho-Maklaya st. 8,
Medical faculty
Immunohistochemical examination was carried out to investigate the expression of receptors to androgens in epithelial cells of men’s prostate adenocarcinomas (AC) with various degree of differentiation.
The analysis of biopsies from 126 patients with prostate cancer was carried out in the age of 50-59 years - 4, 60-69 years - 18, 70-79 years - 71, 80-89 years - 31, more than 89 years - 1. In comparison with normal prostate at AC with the total Gleason score 2-4, we found decrease quantity of secretory cells with positive response to androgen receptors. At the total Gleason score 5-7 numbers of positive staining cells nuclei were sharp decreased in secretory cells.
Receptors to androgens were not revealed practically at Immunohistochemical examination of material with total Gleason score 8-10.
Thus, it was shown, that in accordance with increasing of Gleason score, the number of androgen receptors in malignant cells nuclei decreased.
