CC BY
71
Коррекция ЫЫАМЕ-индуцированной эндотелиальной дисфункции при использовании синтетических доноров оксида азота
Л.В.Корокина, В.Г.Граник, В.А.Макаров, В.И.Кочкаров, Ё.Б.Артюшкова, Т.Г.Покровская, М.В.Покровский, Л.И.Маяков, М.С.Брусник
Курский государственный медицинский университет, Курск
Ключевые слова: доноры оксида азота, эндотелиальная дисфункция, крысы.
Результаты современных исследований указывают, что одним из ведущих патогенетических механизмов развития сердечно-сосудистого континуума, является эндотелиальная дисфункция (ЭД). Эндотелиальная дисфункция характеризуется дисбалансом между факторами релаксации и констрикции, прокоагулянтными и антикоагулян-тными субстанциями и между провоспалительны-ми и антивоспалительными медиаторами [4,5].
Доказаны эндотелиопротективные эффекты основных групп антигипертензивных препаратов. Также следует отметить о существующих потенциальных корректорах эндотелиальной дисфункции: фуростаноловые пшкозиды из культуры клеток диоскореи, безопасные антиоксиданты, природный донор оксида азота - L-аргинин и синтетические донаторы оксида азота,
По механизму воздействия на сердечнососудистую систему нитраты относятся к прямым вазодилятаторам. В основе вазодилятирующей активности нитратов лежит их способность в результате биотрансформации высвобождать окись азота - N0, которая ассоциируется с эндотелиальным релаксирующим фактором (ЭРФ), открытым в 1980 г. [3]. В настоящее время приобретает особый интерес изучение эффектов синтетических доноров оксида. Перспективным является анализ эндотелиопротективного действия указанных субстанций для терапии сердечнососудистых заболеваний.
Целью исследования явилось изучение эндо-телиопротекшвных свойств синтетических доноров оксида азота, относящихся к группам нитро-бензофуранов (ГЯЛ 163, ГЯЛ 169), нитроиндолов (ГЯЛ247, ГЯЛ 262, ГЯЛ 279, ГЯЛ 474), карбаматов (RE1-418,RE1-419,RE1-420, ОВ113-121),амино-нитропиразол (AMS 277), пиримидофуроксан (AMS 133 НС1), которые были предоставлены Российским научным центром по антибиотикам, (РНЦА) г. Москва.
Материалы и методы. Для реализации поставленной цели было проведено моделирование дефицита оксида азота. Опыты проводились на крысах-самцах Wistar массой 200-300 г. N-нитро-Ь-аргинин метиловый эфир (L-NAME, Sigma - неселективный блокаторNO синтазы) вводился ежедневно один раз в сутки, внутрибрю-шинно, в дозе 25 мг/кг. Животным интактаой группы вводился физиологический раствор в том же объеме. Изучаемые вещества вводили ежед-
невно внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг.
На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) катетеризировали сонную артерию для регистрации показателей гемодинамики, болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряли непрерывно посредством датчика P23ID "Gould" США, АЦП L-154 и компьютерной программы “Bioshell” в исходе, а также на фоне ряда функциональных проб. Функциональные пробы: внутривенное введение ацетилхолина (АХ) (40мкг/кг) - эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) и нитропруссида натрия (НП)-эндотелийне-зависимая вазодилатация (ЭНЗВ) (30 мкг/кг) [ 1 ].
Результаты. Для оценки эндотелийзависимых реакций (ЭЗР) нами исследована функциональная проба с введением дозы 40 мкг/кг ацетилхолина (АХ) и эндотелийнезависимая реакция (ЭНЗР) оценивались посредством фармакологической пробы с введением нитропруссида (НП) в дозе 30 мкг/кг[2].
Блокада NO-синтазы с помощью ежедневного, в течение 7-суток, внутрибрюшинного введения L-N АМЕ (N-нитро-Ь-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) приводила к достоверному снижению интеграла восстановления АД после введения АХ по сравнению с интактной группой животных (табл.1). Напротив, ЭНЗР, являющаяся отражением реакции на введение НП увеличилась в 2 раза (табл.).
Для оценки степени эндотелиальной дисфункции мы рассчитывали «коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД)», являющегося отношением интеграла ЭНЗР восстановления АД в ответ на введение НП к интегралу ЭЗР восстановления АД в ответ на введение АХ.
Рассчитывался КЭД у каждого животного интактной группы, и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу КЭД в 5 раз - соответственно 1,1±0,1 у интактных и 5,4±0,6 у животных, получавших L-NAME (табл. 1).
При применении синтетических доноров оксида азота имело место снижение КЭД в диапазоне значений от 1,8±0,1 до 2,9±0,23 (табл. 1)
Сравнение показателей САД и ДАД выявили выраженное достоверное развитие артериальной гипертензии при дефиците оксида азота и ее коррекцию с помощью исследуемых субстанций
Влияние синтетических доноров оксида азота на гемодинамические показатели Таблица при моделировании Ь-ИАМЕ индуцированной дисфункции эндотелия.
Группы животных Фушсц. пробы САД, мм рт.ст. ДАД, мм рт. ст. Интеграл сосудистой реакции (усл.ед) КЭД
Интактиые Исходные 137,7 ±3,7 101,9 ±4,3 1,1*0,1
ЛХ 84,3 ± 4,5 38,7 ±2,8 1268,0*74,8
МП 83,0 ± 3,7 42,1 ±4,4 1375,3*93,7
Получавшие Ь-NAME (25 мг/кг) Исходные 190,3 ±6,7* 145,0 ±3,9* 5,4*0,6*
АХ 110,6 ±5,2 82,8 ± 6,6 695,3*87,6
НП 88,7 ±4,7 50,8± 4,2 3322,7±116,7
Получавшие Гял 163 (50 мг/кг) Исходные 141,5*4,5** 106,5±3,3** 2,2*0,2**
АХ 84±7,1 48,5± 1,8 941,1*102,5
НП 110,2±4,7 60,8±5,1 2072,6*280,4
Получавшие Гял 169 (50 мг/кг) Исходные 153,6,13,3** 110,8±7,8** 2,4*0,3**
АХ 100,1±6,6 48,3±2,1 1521,8± 166,3
НП 111,0*8,4 50,3*3,3 3166,5*187.5
Получавшие Гял 247 (50 мг/кг) Исходные 147,2±12,1** 116,6=8,2** 2,9*0,23**
АХ 92,4±5,3 63,0±4 997,6*99,6
НП 91,9±5 60,9±2,2 2937,4*222,5
Получавшие Гял 262 (50 мг/кг) Исходные 166,7±7,8 122,3±6,6 2,6±0,21**
АХ 89,8±3,9 54,8±2,1 1198,2*88,9
НП 88,5*5,8 45,3*3,1 3068,9*211,4
Получавшие Гял 279 (50 мг/кг) Исходные 156,3±8,9** 116,9±11,3** 1,8*0,1**
АХ 88,9±3,1 56,0±3,9 1663,0*151,5
НП 108,9±9,3 56,5±3,4 2959,7*187,5
Получавшие Яе 1 418 (50 мг/кг) Исходные 132,6*11,6** 100,2*10,2** 2,9*0,3**
АХ 80,8±2,1 42,7±5,2 1072,2±101,3
НП 80,4±7,8 39,0*3,1 3105,3*221,5
Получавшие Яе 1 419 (50 мг/кг) Исходные 103,5±5,3** 71,5*3,2** 2,6*0,18**
АХ 73,2±3,3 37,3±4,1 694,2±82,6
НП 81,0±2,3 36,2±4,6 1809*145,6
Получавшие Яе 1 420 (50 мг/кг) Исходные 148,8*10,3** 124,5*4 Л** 1,9±0,2**
ЛХ 72,3±2,5 59,8±5,9 1296,5*82,3
НП 85,8±3,8 64,3±6,1 1634,1*88,6
Получавшие ОВЛ 3 121 (50 мг/кг) Исходные 150,6±8,2** 111,4±6,4** 1,8*0,14**
АХ 89,1 ±2,1 43,3±3,2 1314,7*111,8
НП 98,0±6,7 41,0*2,7 2365,6*181,7
Получавшие АМБ 133 НС1 (50 мг/кг) Исходные 142,3±12,1** 108,4±6,6** 2,2*0,18**
АХ 84,6±7,2 45,6*3,9 1347,1*78,9
НП 88,3±6,3 44,0*4,1 3188,3*238,6
Получавшие АМБ 277 (50 мг/кг) Исходные 165,8*10,2 135,6*8,6 2,3*0,26**
АХ 74,5±4,2 46,1*2,1 1559,5*102,9
НП 84,0±5,2 51,9*2,5 3585,7*286,8
(табл.1).
Выводы. Проведенные исследования показали, что ежедневное внутрибрюшинное введение исследуемых препаратов в дозе 50 мг/кг вызывает разной степени выраженности коррекцию экспериментальной эндотелиальной дисфункции.
Все исследуемые синтетические доноры оксида азота вызывают снижение показателей АД, достоверно отличающееся от САД и ДАД животных с блокадой N0 синтазы, и приближающееся к уровню июактных животных.
Таким образом, исследуемые субстанции могут быть использованы в качестве корректоров дисфункции эндотелия. Интересным для изучения представляется сочетанное использование известных антигипертензивных препаратов в минимальных терапевтических дозировках исин-
тетических доноров оксида азота.
Литература
1. Галаган М.Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо-и эндогенных источников/ М.Е.Галаган, А.В.Широколова, А.Ф. Ванин // Вопр.мед. химии. -1991. Т.37.№1.С. 67-70.
2. Покровский М. В. Новый взгляд на коррекцию эндотелиальной дисфункции/ М.В. Покровский, В.И. Кочкаров, Т.Г. Покровская и соавт. // Российский журнал иммунологии. 2006. Т. 9. С. 60-61.
3. Furchgott R.E., Zawadzki, J.V. / Nature., 1980. -V.288.-P.373-376.
4. Jean-Batiste Michel. NO (Nitric oxide) and Cardiovascular Homeostasis 1999 Menarini International Industrie Farmaceutiche Riunite s.r.l. Paris.
5. Regulation of the cerebral circulation: role of D.D.Heistad// Physiol Rev.-1998. Vol.78(l). P. 53-97 endothelium and potassium channels/ FM. Faraci,
Correction L-NAME-of the induced endothelial dysfunction at use of synthetic donors of nitrogen oxideL.V.Korokina, V.G.Granik, V.A.Makarov, V.I.Kochkarov, E.B.Artjushkova, T.G.Pokrovskaya, M.V.Pokrovskiy, A.I.Majakov, M.Brusnik
Kursk State Medical University, Kursk Key words: donors nitrogen oxide, endothelial dysfunction, rats.
It is carried out research of effects of synthetic donors nitrogen oxide(the State centre of science on antibiotics, Moscow) at experimental endothelial dysfunction. Investigated substances cause a different degree of an expression correction of experimental deficiency nitrogen oxide. The best parameters CED have been found out in substances Gayl 279, RE 1 420 and OBR 3121 (CED it is peer 1,8; 1,9). All investigated synthetic donors nitrogen oxide cause depression of parameters of the BP, authentically differing from the systolic arterial pressure and diastolic arterial pressure animals with blockade NO sinthase, andcoming nearer to a level of intact animals.
