CC BY
37
Коррекция эндотелиальной дисфункции с использованием фитоэстрогенов из культуры клеток растения Оювсогеа ОеНоМеа
М.В.Корокин, Л.М.Носов, Т.Г.Покровская, Ё.Б.Артюшкова, М.В.Покровский, В.И.Кочкаров
Курский государственный медицинский университет, Курск
Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция, фитоэстрогены, овариэктомия, гипоэстрогенное состояние.
Взаимосвязь между менопаузой и риском заболеваний сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССС) была изучена во многих исследованиях, большинство из которых обнаружили рост встречаемости данной патологам после менопаузы [2,
4].
Прогрессирующая утрата гормональной активности обусловливает формирование нарушений липидного спектра, которые несомненно влияют на увеличение риска развития заболеваний ССС. Наряду с изменениями липидного профиля в периоде менопаузы происходят изменения в сосудах: снижается продукция простациклина, увеличивается уровень эндотелеина, снижается эндотелиально зависимая вазодилатация [3].
Целью настоящего исследования явилось изучение эндотелиотропных эффектов фигоэстро-генов из культуры клеток растения Оювсогеа Веко1(1еа (Институт физиологии растений РАН, г. Москва) при моделировании гипоэстроген-индуцированной экспериментальной эндотелиаль-нойдисфункции.
Материалы и методы. Моделирование гипоэс-троген-индуцированной эндотелиальной дисфункции проводились на самках крыс \Vistar массой 200-300 г. Для моделирования данной патологии крыс наркотизировали этаминалом натрия (50 мг/кг) и проводили билатеральную овариэктомию (п=10 животных, группа «Контроль»). Животным интакгной группы производилась ложная операция
Динамика показателей АД у крыс при моделировании дисфункции Таблица 1 эндотелия и ее коррекции с использованием диоскореи
Группы животных Фармакологич еская проба САД, мм рт.ст. ДАД, ммрт. ст. СрАД, мм. рт. ст.
Интактные Исходные 128,1 ±6,0 95,7 ±4 106,5 ±4,6
АХ 83,9 ±4,8 41,9 ±2,2 55,8 ±2,2
НП 91,0 ±4,6 48,5 ± 2,9 62,7 ±3,2
Получавшие в течении 6 недель 0,9% р-р ЫаС! (контроль) Исходные 160,0 ±6,2 124,9 ±5,5 136,6 ± 5,6
АХ 91,8 ±8,0 57,3 ±7,1 68,8± 7,3
НП 87,4 ±7,5 57,8± 6,6 67,7 ±6,1
Получавшие в течении 6 недель диоскорею (1мг/кг) исход 144,5±5,9 114,9*5,4 124,8±5
АХ 68,1±2,5 41,9±2,7 50,6±2
НП 90,0±4,3 62,5±4,8 71,7±6,8
без удаления яичников (n= 10 животных).
Диоскорею вводили внутрибрюшинно в дозе 1 мг/кг в течении 6 недель, начиная с дня, следующего за днем проведения операции. Интактным животным и животным контрольной группы вводили внутрибрюшинно 0,9% NaCl в том же объеме. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряли у крыс с помощью датчика Р23Ю "Gould" США, АЦП L-154 и компьютерной программы “Bioshell” в исхо-
де, а также на фоне ряда функциональных проб.
Результаты. Для оценки эффективности эндо-телийзависимых реакций (ЭЗР) нами исследована функциональная проба с введением дозы 40 мюг/кг ацетилхолина (АХ). Внутривенное введение аце-тилхолина в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 83,9 ± 4,8 мм рт.ст., для диастолического давления (ДАД) - 41,9 ±2,2 мм рт. ст. (табл. 1) при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту.
Показатели эндотелиальной дисфункции в группах крыс Таблица 2
получавших диоскорею в дозе 1 мг/кг.
Группы животных Функцио нальные пробы АСр.АД сосудистой реакции (мм рт.ст.) Время сосудистой реакции (сек.) Интеграл сосудистой реакции (усл.ед) Коэффи циент эндотел иальной дисфунк ПИИ
Интактные АХ 77,9±4,8 43,6±2,2 1673,6±132,4 0,8±0,11
НП 64,0±5 40,2±2,4 1338,1±121,1
Получавшие в течении 6 недель 0,9% р-р №С1 (контроль) АХ 57,4±4,2 33,1±4,4 1022,5±131* 2,1±0,2*
НП 89,0±6,7 52,5±1,7 2157,3±167*
Получавшие в течении 6 недель диоскорею (1 мг/кг) АХ 77,5±4,1 42,4±2,2 1501,2±189,3** 1,2 ±0,1**
НП 70,0±4 45,7±3,8 1779,6±253,2**
Примечание * - р<0,05- в сравнении с группой интактных животных, ** - р<0,05- в сравнении с группой животных получавших Ь-КАМЕ
Восстановление АД происходило в среднем за 43,6±2,2 сек. после нормализации сердечного ритма. Именно этот интеграл нами принимался как сосудистый компонент реакции на АХ и использовался для дальнейших расчётов (табл. 2).
Эндотелийнезависимая реакция (ЭНЗР) оценивались посредством фармакологической пробы с введением нитропруссида (НП) в дозе 30 мкг/кг (табл. 1). При этом интеграл (площадь над кривой восстановления) использовалась нами в дальнейших расчётах и определялась исходным уровнем артериального давления (чем выше уровень исходного артериального давления, тем больше абсолютная величина его падения, а следовательно и интеграл) и временем его восстановления (табл.2).
Через 6 недель, после проведения самкам крыс \Vistar билатеральной овариэктомии имело место достоверное снижение интеграла (реакция восстановления АД после введения АХ) до 1022,5± 131 (табл.2). Напротив, ЭНЗР, являющаяся отражением реакции на введение НП, увеличилась у животных с экспериментальной эндотелиальной дисфункции и её интеграл составил соответственно 21 57,3±167 усл.ед. (табл.2).
Такая принципиальная разница в ЭЗР и ЭНЗР реактивности животных, закономерно привело нас к необходимости выведения специального коэффициента, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции - далее «коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД)», являющегося отношением интеграла ЭНЗР восстановления АД в ответ на введение НП к интегралу ЭЗР восстановления АД в ответ на введение АХ.
Мы рассчитывали КЭД у каждого животного интактной группы, и крыс после моделирования патологии и получили следующие значения КЭД: 0,8±0,1 у интактных и 2,1±0,2 у животных, с экспериментальной дисфункцией эндотелия (табл. 1).
При коррекции гипоэстрогенного состояния ежедневным, в течении 6 недель, внутрибрюшин-ным введением диоскореи в дозе 1 мг/кг КЭД
составил 1,0±0,1
Сравнение показателей абсолютного снижения САД, ДАД, Ср.АД, времени падения, восстановления, их скоростные характеристики при проведении фармакологических проб с АХ и НП не выявили достоверных информационных различий в абсолютных значениях показателей АД между собой, что затрудняет объективную оценку вклада именно нарушения продукции оксида азота при данной экспериментальной модели эндотелиальной дисфункции (табл. 1).
Таким образом, коэффициент эндотелиальной дисфункции является наиболее информативным показателем, отражающим нарушение обмена оксида азота в условиях его экспериментального дефицита, а фуростаноловые гликозиды из культуры клеток растения Dioscorea deltoidea предотвращают развитие гипоэстроген индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте снижая показатель КЭД до уровня такового у интактных животных.
Литература
Х.ГапаганМ.Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо-и эндогенных источников / М.Е.Гапаган, А.В.Широколова, А.Ф. Ванин // Вопр. мед. химии. -1991. Т.37,№ 1.С. 67-70.
2. Abnormal endothelium-dependent vascular relaxation in patients with essential hypertension/ JA. Panza, AA. Quyyumi, JE. Brush, SE. Epstein //NEngl J Med. -1990. Vol. 323. P. 22-27.
3. Stimpel M. Hypertension after Menopause/ Stimpel М., Zanchetti A.,Walter de Gruyter // Berlin-New York.-1997.
4. The effect of antihypertensive therapy on responsiveness to local intrarterial NG-mono-methyl-L-arginine in patients with essential hypertension / D. Lyons, J. Webster, N. Benjamin // J Hypertens. -1994. Vol. 12. P. 1047-1053.
5. Role of superoxide in angiotensin Il-inducedbut not catecholamine-induced hypertension / J.B.Laursen, S.Rajagopalan, Z.Galis et al. // Circulation. -1997. Vol. 95. P. 588-593.
To the question of correction of endothelial dysfunction with use phytoestrogens from culture of
cells of plant dioscorea deltoidea
M.V.Korokin, A.M.Nosov, T.G.Pokrovskaya, E.B.Artjushkova, M.V.Pokrovskiy, V.I.Kochkarov
Kursk State Medical University, Kursk
Key words: endothelial dysfunction, phytoestrogens, ovariectomy, hypo estrogen a condition.
It is carried out research endothelioprotective actions furostanole glycosides from culture of cells of plant Dioscorea Deltoidea (Institute of physiology of a plant of the Russian Academy of Science) conditions hypoestrogen the induced experimental dysfunction of an endothelium. Phytoestrogens from culture of cells of plant Dioscorea deltoidea prevent development hypoestrogen the induced endothelial dysfunction in experiment.
