CC BY
6head. the Department of surgical diseases FPC and PP state budgetary educational institution of higher professional education Ural state medical University, Ekaterinburg; Elena Yurievna Meshcheryakova - candidate of medical sciences, senior researcher at the Central research laboratory of the state budgetary educational institution of higher professional education Ural state medical University, Ekaterinburg
КОНТАКТНОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ МОНОПОЛЯРНОЙ, АРГОНОВОЙ КОАГУЛЯЦИИ И ПЕРГИДРОЛЯ НА ПАРЕНХИМУ ПЕЧЕНИ КРЫС (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ II)
Амонов Ш. Ш., Прудков М. И., Мещерякова Е. Ю.
Республиканский научный центр сердечно-сосудистой хирургии, г. Душанбе Уральский государственный медицинский университет, г. Екатеринбург
Введение. Эхинококкоз - эндемическое паразитарное заболевание, частота инвазии печени при котором составляет от 44,2 до 84,2% [1, 9, 3]. Медикаментозные средства лечения пока недостаточно эффективны, а прогрессирование паразитарной инвазии сопровождается развитием осложнений в 22-53% наблюдений [5, 4], способных приводить к смерти пациента [7, 6].
Эхинококкэктомия представляет собой намного более щадящий и менее рискованный подход к лечению эхинококкоза печени [6]. Степень радикализма подобных вмешательств определяется риском интраоперационной диссеминации зародышевых элементов паразита при вскрытии кисты, полноценностью их удаления из ее просвета, качеством антипаразитарной обработки.
Выбор способа антипаразитарной обратотки внутренней поверхности остаточной фиброзной капсулы продолжает оставаться предметом обсуждения. Для этих целей предлагается использовать гипертонический раствор, глицерин, спирт, электрокоагуляцию в режиме «спрей», аргон-усиленную электрокаогуляцию, криовоздействие [2, 10], расфокусированный луч лазера [9]. Все эти методы достаточно эффективны, но не лишены недостатков. Их трудно регулировать по глубине деструкции, что может привести к повреждению протоков и сосудов. Труднодоступность кист некоторых локализаций, наличие изгибов и карманов снижает полноценность обработки фиброзной капсулы.
Целью экспериментального исследования было изучение стандартных воздействия (аргоновой и монополярной коагуляции, пергидроль) на паренхиму печени прилежащие протоки, сосуды, которые применяют для обработки остаточных полостей эхинококкоза печени.
Основные задачи главы: 1) определить параметры - время воздействия, глубина деструкции печени; 2) изучить глубину поражения печени в зоне стандартных воздействий - аргоновой и монополярной коагуляции по 2 минут и пергидроля по 5 минут; 3) оценить местные последствия контактного воздействия аргоновой и монополярной коагуляции, пергидроля на паренхиме печени.
Общая характеристика экспериментального материала. Для проведения экспериментального исследования использовали 32 белых беспородных крыс-самцов массой 200-250г. Лабораторные животные были разделены на 4 групп по времени стандартных воздействий: контрольная (I группа) и три групп с различным воздействием с целью изучение глубины поражения печени и прилегающих структур. Под эфирным наркозом при соблюдении правил асептики и антисептики проводили лапаротомию. На поверхности печени участке 3х3мм каждой экспериментальной животных в ходе одной вскрытие было произведено 4 типа контактного воздействия: II группа - аргоновая коагуляция, III группа - монополярная коагуляция по 2 минут, IV группа - пергидроль по 5 минут. Вывод лабораторных животных из эксперимента проводили сразу после окончания воздействия методом передозировки препаратов для
наркоза (Золетил и Ксилазин). Все исследования проводили в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных", утверждёнными Приказом МЗ СССР №75 от 12.08.1977г. Печень экспериментальных животных фиксировали в 10% нейтральном формалине, проводили вырезку материала, выявленные макроскопические изменения фотографировались. Далее тканевые образцы проводили по спиртам возрастающей концентрации, заливали в парафин. Для приготовления гистологических срезов использовался микротом НМ-450 MICROM. Гистологические срезы печени окрашивали гематоксилином эозином и реактивом Шиффа для оценки содержания ШИК-позитивного материала в цитоплазме гепатоцитов (гликоген). Микропрепараты исследовались на микроскопе Olympus СХ41с применением стандартных объективов при увеличении 50, 100, 200, 400. Проводилось морфометрическое исследование для определения максимальной глубины поражения ткани печени в зоне аппликации микрометрах (мкм) в группах сравнения. Измерение максимальной глубины повреждения проводили на серийных срезах печени с последующим вычислением среднего значения для каждой группы. Измерения выполнялись с помощью программы CellSens Olympus. Полученные морфометрические показатели (глубина поражения в мкм) проанализированы с помощью программного обеспечения Exсel 2007. (соисполнитель - зав. виварием ЦНИЛ, к.м.н. А.И.Исайкин, консультант морфологической части работы в.н.с. ЦНИЛ, к.м.н. Е.Ю.Мещерякова).
Результаты экспериментальных исследований:
Группа I (контрольная): При гистологическом исследовании неизменённой печени крысы выявлено, что соединительно-тканная капсула печени представлена продольно ориентированными коллагеновыми волокнами, плотно прилежащими друг к другу. Гистологическая структура печени соответствует норме. Определяются печеночные дольки, по периферии которых располагаются портальные тракты. Строма портальных трактов не расширена, малоклеточная (рис.1). В центре печеночных долек расположены центральные вены обычного вида. Дольки печени состоят из гепатоцитов, которые расположены упорядоченно в виде печеночных балочек, идущих от центральной вены к периферии печеночной дольки. Гепатоциты имеют полигональную форму, эозинофильную мелкозернистую цитоплазму, округлое бледное ядро средних размеров с дисперсным хроматином. Дистрофические изменения в гепатоцитах отсутствуют. В гепатоцитах определяется ШИК-позитивный материал (рис.2).
•> А,».,'.
V '¡""'Jti^i^ •--
■ >' я -.
■ . г " "О
Ш ГС*'
Рис.1. Элементы печеночных долек соответствуют гистологической норме: 1-центральная вена; 2 - портальные тракты; 3 - гепатоциты формируют печеночные балочки. Окраска Гематоксилин-Эозин. Увеличение 50.
Группа II. Контактное воздействие на печени крыс аргоновой коагуляцией. При гистологическом исследовании капсула печени крыс очагово утолщена за счет геморрагического пропитывания (рис.1). В зоне аппликации в субкапсулярном отделе печени отмечается кистозная трансформация: структура печени резко нарушена,
имеются тонкостенные кистозные полости разных размеров, часть - с геморрагическим содержимым. Перифокально балочное строение печени нарушено, в гепатоцитах -коагуляционный некроз и некробиоз, при этом гепатоциты уменьшены в объеме, цитоплазма интенсивно оксифильная, пикноз ядер (рис.2), отмечается полнокровие синусоидов, вен; портальные тракты расширены. В глубоких отделах печени -вакуольная дистрофия гепатоцитов, вплоть до гидропической (рис.3).
Рис.2. Выявление ШИК-позитивного материала (гликоген) в гепатоцитах (стрелка). Окраска реактивом Шиффа. Увеличение 200
Рис. 1. Капсула печени утолщена за счет геморрагического пропитывания (стрелка). Окраска Гематоксилин-Эозин, увеличение 200.
Рис.2. Кистозная трансформация ткани печени в субкапсулярном отделе, геморрагическое содержимое (стрелка) в отдельных кистах. Участки коагуляционного некроза и некробиоза гепатоцитов. Окраска Гематоксилин-Эозин, увеличение 200.
V . хйс* ' 3 vQ: v,
ч •
• - . > 'I • X ' - * • ■
L .. - v 7- .Г' >-\. 4 ..iis^ - ' - ,
- - • х--: . -i' • « Чч.
■ • С «" •>. - * • * *
, •»
• ' "
2
Рис.3. Расширение портального тракта за счет отека (1) и инфильтрации портальной стромы (2), расширения междольковой вены (3). Окраска Гематоксилин-
Эозин, увеличение 100.
Группа III. Контактное воздействие на печени крыс монополярной коагуляцией. При гистологическом исследовании место воздействия капсула печени деформирована, определяются участки геморрагического пропитывания капсулы. Кистозная трансформация в субкапсулярном отделе в зоне аппликации (рис.1,2). Балочное строение печени резко нарушено. Перифокально обширные зоны коагуляционного некроза гепатоцитов, часть гепатоцитов в состоянии некробиоза (рис.1,2). При действии монополярной коагуляции также отмечаются более выраженные дистанционные изменения (изменения ткани печени вне зоны аппликации = зоны воздействия): имела место тяжелая дистрофия гепатоцитов, занимающая до 2/3 поперечного размера ткани печени на гистологическом стекле. Отмечались обширные кровоизлияния, выраженное полнокровие синусоидов (рис.3). Портальные тракты умеренно расширены в основном за счет лимфоцитарной инфильтрации портальной стромы, явления отека не выражены (рис.4). В данной группе преобладали коагуляционный некроз и выраженная дистрофия гепатоцитов. Дисциркуляторные нарушения менее выражены, чем в группе - IV (аппликация пергидроля).
ч
__4
Рис.1. Кистозная трансформация (1) в субкапсулярном отделе в зоне аппликации, коагуляционный некроз (2) и некробиоз (3) гепатоцитов. Окраска Гематоксилин-Эозин, увеличение 100.
3
2
г <
ЧУ!
<л я
■ч V ч, .х
Лч.:,., -
.4 <. ■
-г
. • * • . -Л' - / . / . ,
- ' " ' * 1
{ •*
.'.•Л • ЯНК^Ш::
Рис.2. Кистозная трансформация субкапсулярном отделе в зоне аппликации, кистозных полостях - геморрагическое содержимое (1), трифокально - коагуляцыонный некроз (2) и некробиоз (3) гепатоцитов. Окраска Гематоксилин-Эозин, увеличение 100
Рис.3. Очаговое кровоизлияние в субкапсулярном отделе (стрелка), дистрофия гепатоцитов. Окраска Гематоксилин-Эозин, увеличение 400.
Рис.4. Портальный тракт незначительно расширен за счет лимфоцитарной инфильтрации портальной стромы (стрелка). Окраска Гематоксилин-Эозин,
увеличение 200.
Группа IV. Контактное воздействие на печени крыс 33% пергидролем. При гистологическом исследовании капсула печени не утолщена. В субкапсулярном отделе определяется кистозная трансформация, при этом кистозные полости по размеру, геморрагическое содержимое отсутствует, стенки кист толще, чем в группе,
284
подвергшихся воздействию монополярной коагуляции (группа II); перифокально зона кистозной трансформации окружена гепатоцитами, находящийся в состояние некробиоза (рис.1). Глубже определяются фокальные очаги коагуляционного некроза и дистрофические изменения в гепатоцитах (рис.2). Полнокровие синусоидов умеренно выраженное. Портальные тракты расширены незначительно, в основном за счет инфильтрации портальной стромы.
Рис.1. Кистозная трансформация (1) в субкапсулярном отделе, некробиоз (2) гепатоцитов. Участки кровоизлияния в ткань печены (3). Окраска Гематоксилин-Эозин,
увеличение 100
Рис.2. Участок коагуляционного некроза гепатоцитов (стрелка), окружающие гепатоциты в состоянии некробиоза (уменьшены в размерах, с ярко оксифильной цитоплазмой, пикнотичными ядрами). Окраска Гематоксилин-Эозин, увеличение 200
Для объективизации полученных при гистологическом исследовании результатов и для сравнения эффектов разных воздействий было проведено морфометрическое исследование. Измеряли глубину повреждения ткани печени, начиная измерение с геморрагического пропитывания капсулы, зоны некроза и некробиоза гепатоцитов, тяжелых дисциркуляторных нарушений. Результаты морфометрического исследования приведены в таблице №1.
Таблица № 1.
Морфометрия глубины поражения печеночной ткани при различном контактном
воздействий (М±т), мкм
Группы Группа I Группа II Группа III Группа IV
(по времени воздействия) норма аргон.коаг. монопол. 33% пергидр.
2 минут коаг. 2минут 5минут
Глубина повреждения ткани 1963,56 13518,16 5628,28 4522,19
печени, (микрометр) 1858,01 11512,20 6316,81 3851,9
1775,04 9510,78 7353,70 3605,17
1831,42 10516,10 8020,38 3497,61
10490,58 6829,17 4078,59
9624,57 7614,64 4615,47
11791,8 6031,35 5861,05
14065,12 6355,65 4841,36
9823,08 5820,03 3993,27
7835,12 5707,07 3984,24
среднее значение, мкм (М±m) 1857±85 10868±177 6567±177 4204±178
р Рш <0,01 Рып <0,01 Рыу <0,01
Выводы: При воздействии на ткань печени аргоновой (группа II), монополярной коагуляции (группа III) и при аппликации 33% пергидроля (группа IV) наблюдалась кистозная трансформация ткани печени в зоне воздействия (субкапсулярно). Глубина этих изменений была различна и наиболее выраженная при действии аргона и монополярной коагуляции 10868±177мкм, (Р:-п<0,01) и 6567±177мкм, (Рып<0,01), менее выраженные изменения ткани печени наблюдались при аппликации пергидроля 4204±178мкм (РЫу<0,01).
Таким образом, на основании полученных результатов морфологического и морфометрического исследования биоптатов печени лабораторных животных после воздействие аргоновой и монополярной коагуляцией происходит утолщение капсулы за счет геморрагического пропитывания, субкапсулярном отделе печени отмечается кистозная трансформация: структура печени резко нарушена, имеются тонкостенные кистозные полости разных размеров, часть - с геморрагическим содержимым. Перифокально балочное строение печени резко нарушено, в гепатоцитах -коагуляционный некроз и некробиоз, при этом гепатоциты уменьшены в объеме, цитоплазма интенсивно оксифильная, пикноз ядер, отмечается полнокровие синусоидов, вен; портальные тракты расширены. В данных группах преобладали коагуляционный некроз и выраженная дистрофия гепатоцитов. Также отмечаются более выраженные дистанционные изменения (изменения ткани печени вне зоны аппликации = зоны воздействия): имела место тяжелая дистрофия гепатоцитов, занимающая до 2/3 поперечного размера ткани печени на гистологическом стекле.
При гистологическом исследовании капсула печени после контактной воздействия пергидролем не утолщена. В субкапсулярном отделе определяется кистозная трансформация, при этом кистозные полости по размеру, геморрагическое содержимое отсутствует, стенки кист толще, чем в группах, подвергшихся воздействию аргоновой и монополярной коагуляции (группа II и III); перифокально зона кистозной трансформации окружена гепатоцитами, находящихся в состояние некробиоза. Глубже определяются фокальные очаги коагуляционного некроза и дистрофические изменения в гепатоцитах. Полнокровие синусоидов умеренно выраженное. Портальные тракты расширены незначительно, в основном за счет инфильтрации портальной стромы. Дисциркуляторные нарушения менее выражены, чем в группах - II и III (аппликация аргоновой и монополярной коагуляции).
При этом при 5-минутном контакте пергидроля с тканью средняя глубина
повреждения не превышает 4204±178мкм (Pi-iv<0,01), и отмечается формирование прослойки газа (вследствие проникновения кислорода в ткань), защищающей от повреждения глубжележащие слои. Следует отметить, что границы контакта перекиси водорода с тканью печени легко контролируемы вследствие окрашивания ткани в ярко-белый цвет.
Результаты проведенного исследования на животных, свидетельствующий об эффективности и безопасности использования пергидроля для контактной воздействия на ткань печени, является теоретическим обоснованием для разработки методики обработки эхинококковых кист печени в клинической практике.
Литература:
1. Агаев Р.М. Диагностика и хирургическое лечение эхинококкоза печени с поражением желчных путей / Р.М.Агаев // Хирургия. - 2002. - №9. - С.58-63.
2. Альперович Б.И., Мерзликин Н.В., Сало В.Н. Применение низких температур в лечении кист печени. // Анн.хир.гепатол.- 2004.-Т.9. №2. - С.70.
3. Ахмедов И.Г. Классификация эхинококковых кист, выявленных после хирургического лечения / И.Г.Ахмедов, А.О. Османов // Хирургия. - 2002. - №9. -С.27-30.
4. Кахаров М.А. Обоснованное удаление фиброзной капсулы при эхинококкэктомии из печени / М.А. Кахаров [и др.] // Хирургия. - 2003-. №1. - С.31-35.
5. Комилов Т.С. Особенности диагностики и пути улучшения результатов хирургического лечения эхинококкоза печени / Т.С.Комилов, И.А.Мирходжаев // Анналы хирургической гепатологии. - 2004. - Т. 9, № 2.
6. Мусаев Г.Х. Гидатидозный эхинококкоз: диагностика и комплексное лечение: автореф. дис. ... д-ра мед. Наук : 14.01.17 / Г.Х. Мусаев. - М., -2000. -35с.
7. Назыров Ф.Г. Лучевые методы исследований в диагностике и лечении гнойных осложнений эхинококкоза печени / Ф.Г. Назыров [и др.] // Анналы хирургической гепатологии. - 2001-.Т.6, №1. - С. 47-51.
8. Насиров М.Я. Хирургическое лечение осложнённого эхинококкоза печени / М.Я.Насиров, Д.М.Панахов, Г.С.Мамедханов // Анналы хирургической гепатологии. - 2001.- Т.6, №2. С. 54-56.
9. Нартфлакова М.А. Хирургия печени и желчных путей / М.А. Нартфлакова // Ростов н/Д: Феникс. -2007.- С-188-197.
10. Чиган А.В. Видеоэндоскопическая криохирургия кист печени: автореф. дис. ... канд. мед. Наук : 14.01.17 / А.В. Чиган . Томск. - 2006.- С. -23.
КОНТАКТНОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ МОНОПОЛЯРНОЙ, АРГОНОВОЙ КОАГУЛЯЦИИ И ПЕРГИДРОЛЯ НА ПАРЕНХИМУ ПЕЧЕНИ КРЫС (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ II)
Экспериментальное исследования было изучение стандартных воздействия (аргоновой и монополярной коагуляции, пергидроля) на паренхиму печени прилежащие протоки, сосуды, которые применяют для обработки остаточных полостей эхинококкоза печени. При этом при 5-минутном контакте пергидроля с тканью отмечается формирование прослойки газа (вследствие проникновения кислорода в ткань), защищающей от повреждения глубжележащие слои. Авторы отметили, что границы контакта перекиси водорода с тканью печени легко контролируемы вследствие окрашивания ткани в ярко-белый цвет.
Результаты проведенного исследования на животных, свидетельствующий об эффективности и безопасности использования пергидроля для контактной воздействия на ткань печени, является теоретическим обоснованием для разработки методики обработки эхинококковых кист печени в клинической практике.
Ключевые слова: монополярная коагуляция, аргоновая коагуляция, пергидроль, паренхима печени крыс.
CONTACT IMPACT MONOPOLAR, ARGON COAGULATION AND PERHYDROL THE LIVER PARENCHYMA OF RATS (EXPERIMENTAL PART II)
Experimental study of the standard exposure (argon and monopolar coagulation, perhydrol) in the liver parenchyma adjacent ducts, vessels that are used for the treatment of residual cavities of hepatic echinococcosis. When the 5-minute contact perhydrol with cloth marked the formation of a layer of gas (due to the penetration of oxygen into the tissue), which protects from damage more deep superficial layers. It should be noted that the boundaries of the contact of hydrogen peroxide with the tissue of the liver is easily controllable due to dyeing fabric in a bright white color. The results of animal studies showing the effectiveness and safety of the use of perhydrol for contact effects on the liver tissue, which is a theoretical basis for development of methods of processing if Echinococcus cysts of the liver in clinical practice.
Key words: Momonopolar coagulation, argon coagulation, perhydrol, the liver parenchyma of rats.
Сведения об авторах: Амонов Шухрат Шодиевич - к.м.н., врач-хирург эндохирургического отделения Республиканского научного центра сердечно-сосудистой хирургии г. Душанбе, e-mail: shuhrat.amonov@yandex.ru; Прудков Михаил Иосифович -д.м.н., профессор, зав. кафедрой хирургических болезни ФПК и ПП ГБОУ ВПО Уральского государственного медицинского университета г. Екатеринбург, e-mail: miprudkov@gmail.com; Елена Юрьевна Мещерякова - к.м.н., ведущий научный сотрудник ЦНИЛ ГБОУ ВПО Уральского государственного медицинского университета г. Екатеринбург, e-mail: katusha-ugma@rambler.ru
Information about the authors: Amonov Shukhrat Shodievich - candidate of medical sciences, surgeon endosurgical Department of the Republican scientific center for cardiovascular surgery, Dushanbe; Prudkov Michael I. - doctor of medical sciences, рrofessor, head. the Department of surgical diseases FPC and PP state budgetary educational institution of higher professional education Ural state medical University, Ekaterinburg; Elena Yurievna Meshcheryakova - candidate of medical sciences, senior researcher at the Central research laboratory of the state budgetary educational institution of higher professional education Ural state medical University, Ekaterinburg
ВЛИЯНИЕ НЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ФАКТОРОВ АЛЮМИНИЕВОГО ПРОИЗВОДСТВА НА ОРГАН ЗРЕНИЯ РАБОТАЮЩИХ
Сулейманова Ф. А., Бабаев А. Б., Махмадов Ш. К.
Таджикский государственный медицинский университет им. Абуали ибни Сино
По данным ВОЗ, около четверти болезней связаны с профессиональной деятельностью [17]. От 20 до 40 % трудопотерь обусловлено заболеваниями, прямо или косвенно связанными с неудовлетворительными условиями труда, и более 20 % среди всех, впервые признанных инвалидами, - лица в возрасте 45-50 лет, поэтому охрана здоровья трудоспособного населения приобретает особую значимость [18]. В металлургическом производстве применяется свыше ста различных технологических процессов и операций, более сорока видов связующих материалов, около трехсот различных противопригарных покрытий [9]. Несмотря на то, что на ряде предприятий произошла существенная модернизация производства, приведшая к уменьшению доли ручного труда, увеличению доли операторского труда, появлению непрерывных технологических процессов, например, непрерывного литья заготовок, ряд операций, по-прежнему, требует непосредственного контроля и участия человека. Все это
