CC BY
46
Химия растительного сырья. 2012. №4. С. 161-166.
УДК 582.539.2 : 581.192 КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ STRATIOTES ALOIDES
(HYDROCHARITACEAE) В ВОДОЕМАХ БАССЕЙНА СРЕДНЕГО ИРТЫША
© А.Н. Ефремов1, A.M. Бельгибаева1, Е.А. Алехина1, М.В. Филимонова2, Б. Ф. Свириденко2, С.П. Шалыгин1, С.Н. Русак2
10мский государственный педагогический университет, наб. Тухачевского, 14, Омск, 644099 (Россия), e-mail: stratiotes@yandex.ru
2Научно-исследовательский институт природопользования и экологии Севера Сургутского государственного университета ХМАО-Югры, ул. Энергетиков, 14, Сургут, 628412 (Россия)
Впервые для Stratiotes aloides L. в бассейне Среднего Иртыша выполнено определение компонентного состава. Установлено, что растения S. aloides характеризуются высоким содержанием золы, клетчатки, сырого протеина, витаминов В2, Е, А; в аминокислотном составе преобладают глутаминовая кислота, изолейцин, фенилаланин, валин и лейцин. Качественно показано наличие флороглюцидов и фенолгликозидов. Растения S. aloides отличаются избирательным накоплением тяжелых металлов, их содержание уменьшается в следующем ряду: Mn > Zn > Cu > Ni > Pb > Cd. У крахмала S. aloides определен ряд физико-химических свойств: температура клейстеризации, число структурных звеньев, молекулярная масса, влажность, кислотность, pH.
Ключевые слова: Stratiotes aloides L., компонентный состав, аминокислоты, витамины, тяжелые металлы, крахмал, Средний Иртыш.
Введение
Поиск новых природных источников ценных веществ, исследование качественного и количественного химического состава растений остаётся в настоящее время одной из главных задач ботанического ресурсове-дения и фитохимии. Химический состав растений определяется их систематическим и филогенетическим
— статусом; является во многом специфичным для раз-
Ефремов Андрей Николаевич - ассистент кафедры ботаники, цитологии и генетики, кандидат биологических наук, e-mail stratiotes@yandex.ru
ных систематических групп. Для семейства Ну<1го-сИап1асеае характерно наличие флавонов и фенол-
БельгибаеваАсельжанМанарбековна - менеджер сульфатов, отсутствие алкалоидов, иридоидов, флаво-
управления лицензирования и аккредитации учебно- нолов, сапонинов и сапогенинов [1, 2]. У представите-
образовательных программ лей рода Hydrocharis Ь. известны флавоноиды, а также
Алехина Елена Анатольевна - доцент кафедры химии проантоцианидины и цианидин, неизвестные у других
и методикипреподавания химии, кандидат тт , Л)Г- .
^ ^ " ^" родов. Для рода ЕЫеа М1спх. характерны органиче-педагогических наук
ские кислоты, ди- и тетратерпеноиды, флавоноиды,
Филимонова Марина Викторовна - старшии научный
сотрудник, кандидатбиологическихнаук, фенолкарбоновые кислоты, для УМШ^ Ь. - выс-
е-та11: fel1s75@mffll.ru шие алифатические спирты (эйкозанол) и стероиды
Свириденко Борис Федорович - заведующий [1-4].
лабораторией гидроморфных экосистем, профессор, Одним из наиболее обособленных в система-
докгор биологических наук, е-таП Ь^уи-^П.т тическом плане представителей семейства Иу^о-
ШалыгинСергейПетрович - доценткафедры химии сИаг11асеае является монотипный род БГагШез Ь., и методики преподавания химии, кандидат химических
наук включающии единственный современный вид - те-
о п и - лорез алоэвидный ^га1Ше8 aloides Ь., компонентный
Русак Светлана Николаевна - старшии научный * ^ '
сотрудник, доцент, кандидат биологических наук состав этого растения изучен еще весьма слабо [1, 5].
* Автор, с которы следует вести переписку.
Этот евразиатский гидромакрофит является одним из основных эдификаторов, распространенных в водоемах по долинам крупных рек юга Западно-Сибирской равнины [5-7]. Вид является перспективными кормовым растением, богатым углеводами, белками и витаминами [3, 8, 9]. Растения S. aloides обладают высокой аллелопатической активностью, оказывают ингибирующее действие на фитопланктон и нитчатые водоросли [10, 11]. Исследования J. Conrad et al. [12] убедительно доказывают, что экстракт S. aloides ин-гибирует рост клеток нейробластомы и карциномы человека, бактериальных культур Escherichia coli, Pseudomonas putida и Enterobacter cloacae subsp. dissolvens. У S. aloides обнаружены флавоноиды (вероятно, рутина, лютеолина, хризоэриола), антоцианы (цианидин) и лейкоантоцианы (лейкоцианидин) [1, 12]. В состав S. aloides входят также два ранее неизвестных флавоноглюкоуроноида, глюкопиронозиды, холин, цис-аконитовая кислота, фенольные гликозиды а-арбутина, гликозид лютеолина [12].
Цель данного исследования - изучение компонентного состава (содержание витаминов, аминокислот, тяжелых металлов) и физико-химических свойств крахмала S. aloides из водоемов долин рек бассейна Среднего Иртыша.
Экспериментальная часть
Материал для исследования был собран в 2008-2011 гг. в пойменных водоемах бассейна Среднего Иртыша в пределах южнотаежной (К-3) и лесостепной (К-5, К-8) подзон (табл. 1). Гербарные образцы хранятся в коллекции гербария Омского государственного педагогического университета (OMSK). Для исследования компонентного состава отбор проб растений S. aloides проводили в фазу цветения - начала плодоношения/вегетации после цветения (в июле-августе). При изучении сезонной динамики пробы отбирались в течение всего года в равноинтервальные периоды на стационарном участке К-5, при необходимости отбор проб выполнялся повторно в течение нескольких лет.
Физико-химические свойства сырья S. aloides изучены в лаборатории физиологии и биохимического анализа Сибирского НИИ птицеводства РАСХН, в лаборатории комплексного мониторинга загрязнения окружающей среды НИИ природопользования и экологии Севера Сургутского государственного универ -ситета ХМАО-Югры, лаборатории физиологии и биохимии растений Омского государственного педагогического университета. Физико-химический анализ выполнен с использованием стандартных и общепринятых методов: определение фосфора фотометрическим методом [13]; определение кальция комплексонометри-ческим методом [14]; определение массовой доли сырого протеина по методу Кьельдаля [15]; определение массовой доли белка по методу Барнштейна [16]; определение жира по массе извлеченного сырого жира [17]; определение клетчатки путем удаления кислото- и щелочерастворимых веществ [18]. Проведено ионометрическое определение водородного показателя, титриметрическое определение кислотности [19]; расчетное определение молекулярной массы и числа структурных звеньев по показателю вязкости, определение температуры клейстеризации [20]. Качественное обнаружение витамина Bj выполнено с помощью диазореактива в щелочной среде, витамина D - бромхлорформной пробой [21]. Количественное определение витаминов Е (токоферолы), В2 (рибофлавин), А (ретинол и его этерифицированные формы) выполнено методом высокоэффективной жидкостной хромоторграфии [22], витамина С - титриметрией с 2,6-дихлорфенолиндофенолом [23]. Общая антиоксидантная активность отвара определена фотометрическим методом [24], в используемой методике были заменены следующие реактивы: triton X-100 на аналоговое поверхностно активное вещество синтанол ДС 10, линетол - на льняное масло. Качественное обнаружение флороглюцидов выполнено с использованием гексацианоферрата (II) калия, фенолгликозидов - с использованием сульфата железа (II) [25].
Таблица 1. Места сбора сырья Stratiotes aloides
Участок Местонахождение Местообитание
К-3, южнотаежная подзона К-5, лесостепная подзона К-8, лесостепная подзона Омская обл., Тарский район, окрестности с. Междуречье, долина р. Иртыш Омская обл., Любинский район, окрестности с. Любино-Малоросы, долина р. Иртыш Новосибирская обл., Куйбышевский район, окрестности Куйбышева, долина р. Омь Пойменная протока без названия, фитоценоз ассоциации Stratiotes aloides + Lemna trisulca Старинное озеро без названия, фитоценоз ассоциации Stratiotes aloides purum Старинное озеро без названия, фитоценоз ассоциации Stratiotes aloides + Hydrocharis morsus-ranae + Lemna trisulca
Компонентный состав Stratiotes aloides
163
Определение тяжелых металлов проведено методом атомно-абсорбционной спектрометрии [26]. Зольность определена в соответствии с ГОСТом 27494-87 [27] по ускоренной схеме.
Статистическая обработка результатов выполнена средствами пакета 8!а^йса 6.1. Выполнялись следующие операции: описательная статистика, проверка на нормальность распределения, для оценки параметрических данных использовался ^критерий Стьюдента.
Обсуждениерезультатов
В результате проведенных исследований установлено, что общая влажность отобранного сырья & aloides в водоемах бассейна Среднего Иртыша составляет 91±7%. В воздушно-сухом веществе & aloides высоко содержание ценных питательных веществ, в значительном количестве содержатся: клетчатка -18±2%, жиры - 0,9±0,4%, сырой протеин - 14,0±0,4% и белки - 12,8±0,4%. Зольность воздушно-сухой фи-томассы & aloides оценивается в 13±2%. Содержание кальция составляет 0,8±0,1%, фосфора - 0,5±0,1% в пересчете на воздушно-сухое вещество.
Массовая доля аминокислот составляет 5,0% воздушно-сухого вещества, аминокислотный состав отличается высоким содержанием глутаминовой кислоты, изолейцина, фенилаланина, лейцина, валина (табл. 2).
Качественным путем для & aloides показано наличие витамина В1 и отсутствие витамина Б. Наиболее высоким содержанием в воздушно-сухом веществе отличаются витамин В2 - 11±2 мкг/г, витамин Е -5,9±0,9 мкг/г и витамин А - 1,3±0,2 мкг/г. Значительно и содержание витамина С - 3,8±0,8 мг/100 г сырого вещества.
Проведенная оценка общей антиоксидантной активности отвара & aloides показала, что вид обладает выраженной антиоксидантной активностью, значение данного показателя составляет 4,2±0,2%. Кроме того, проведенные качественные анализы показали наличие в растениях & aloides флороглюцидов и фе-нолгликозидов.
& aloides отличается избирательной способностью накапливать тяжелые металлы в фитомассе. В воздушно-сухом веществе исследованных образцов & aloides (участки К-8, К-5) среднегодовая концентрация свинца составляет 0,6±0,4 мг/кг, кадмия - 0,03±0,01 мг/кг, цинка - 130±50 мг/кг, никеля - 2,7±0,7 мг/кг, меди - 4,7±0,9 мг/кг, марганца - 1400±500 мг/кг. Наблюдаются сезонные изменения концентрации тяжелых металлов, максимум приходится на период подледной вегетации (осень-зима) (рис.). Статистические различия между концентрациями тяжелых металлов в разные фенофазы не достоверные. Способность к накоплению тяжелых металлов у & aloides уменьшается в следующем ряду: Мп > 2п > Си > N1 > РЬ > СА
Существенный интерес представляет & aloides как потенциальный крахмалоносный вид. Объем ежегодно возможной заготовки крахмала в водоемах долин рек бассейна Среднего Иртыша оценивается в 68±8 т [5]. Содержание крахмала в воздушно-сухой фитомассе в среднем составляет 7±1%, а во второй половине октября (начало подледной вегетации) достигает 14±2%. Крахмал & aloides в разные фенофазы характеризуется следующими физико-химическими свойствами (табл. 3).
Некоторые физико-химические свойства крахмала (водородный показатель, молекулярная масса, число структурных звеньев) у исследованных образцов (участок К-5) обнаруживают статистически значимые различия в разные фенофазы (табл. 3). Вероятно, увеличение молекулярной массы и числа структурных звеньев в фазу плодоношения - вегетации после цветения связанно с полимеризацией крахмала перед началом подледной вегетации.
Таблица 2. Аминокислотный состав Stratiotes aloides
Компонент Содержание в воздушно-сухом веществе, % Компонент Содержание в воздушно-сухом веществе, %
Аспарагиновая кислота 0,40±0,10 Тирозин 0,16±0,04
Глутаминовая кислота 0,46±0,09 Валин 0,56±0,09
Серии 0,12±0,03 Фенилаланин 0,50±0,10
Гистидин 0,18±0,04 Изолейцин 0,45±0,09
Глицин 0,19±0,04 Лейцин 0,60±0,10
Треонин 0,11±0,02 Лизин 0,20±0,05
Аргинин 0,38±0,09 Цистин 0,17±0,04
Алании 0,32±0,08 Триптофан 0,10±0,02
Метионин 0,10±0,02 Всего аминокислот 5,0
Il- - Щ
--■- -II
ik--_ __ __ " ' —♦-- ___X
X---- ---X-
зима весна лето осень -а-рь —х— Сс1 —Ш—1п N1 Си ---Мп
Содержание тяжелых металлов в фитомассе 81ха1ю1е8 а1о1ёеБ по сезонам года: 0Х - сезон года, 0У -содержание тяжелых металлов, мг/кг; логарифмическая шкала
Таблица 3. Изменения физико-химических свойств крахмала Stratiotes aloides в разные фенофазы
Показатель Цветение Плодоношение / вегетация после цветения
^Водородный показатель, единицы рН 6,1±0,6 7,2±0,5
Кислотность, моль/л 0,0026±0,0001 0,0025±0,0001
Влажность, % 11±2 11±1
Температура клейстеризации, °С 69±3 72±1
^Молекулярная масса, а.е.м. 2,4х106 5,1х106
*Число звеньев, единиц 1,4х104 2,1х104
Примечание: * величины со статистически значимыми различиями.
Выводы
Компонентный состав фитомассы а1о1с1е8 отличается высоким содержанием в воздушно-сухом веществе клетчатки (18±2%), жиров (0,9±0,4%), сырого протеина (14,0±0,4%) и золы (13±2%). Массовая доля аминокислот составляет 5,0% воздушно-сухого вещества. В аминокислотном составе преобладают глутаминовая кислота, изолейцин, фенилаланин, лейцин, валин. Воздушно-сухое вещество аШс1ез отличается высоким содержанием витамина В2 (11±2 мкг/г), Е (5,9±0,9 мкг/г), А (1,3±0,2 мкг/г). Витамин С содержится в количестве 3,8±0,8 мг/100 г сырого вещества.
Отвар & аШс1ез обладает выраженной антиоксидантной активностью, значение данного показателя составляет 4,2±0,2%. Кроме того, качественно показано наличие в растениях aloides флороглюцидов и фенолгликозидов.
При сравнении тяжелых металлов среднегодовая концентрация в воздушно-сухом веществе макси-мальна у марганца - 1400±500 мг/кг, минимальна у кадмия - 0,03±0,01 мг/кг. Концентрация тяжелых металлов в растениях aloides уменьшается в ряду Мп > 2п > Си > N1 > РЬ > Сё. Наблюдается сезонное изменение концентрации тяжелых металлов, максимум приходится на осень и зиму.
aloides является перспективным крахмалоносным растением, содержание крахмала в сухом веществе в фазу плодоношения/вегетации после цветения достигает 14±2%. Некоторые физико-химические свойства крахмала (водородный показатель, молекулярная масса, число структурных звеньев) обнаруживают различия в разные фенофазы.
Список литературы
1. Angiosperm Phylogeny Website. - Version 9, June 2008. [Electronic resourse]. URL: http://www.mobot.org/MOBOT/ research/APweb/ (дата обращения: июнь 2011).
2. Тюлин С.Я., Фокина Г. А. Сем. Hydrocharitaceae - Водокрасовые // Растительные ресурсы России и сопредельных государств: Цветковые растения, их химический состав, использование: Семейства Butomaceae - Typhaceae. СПб., 1994. С. 9-11.
3. Cook C. D. K., Urmi-König K. A revision of the genus Stratiotes (Hydrocharitaceae) // Aquatic Botany. 1983. Vol. 16. Pp. 213-249.
4. Watson L., Dallwitz M. J. Hydrocharitaceae Juss. The families of flowering plants: descriptions, illustrations, identification, and information retrieval. Ver. 10.04.2008. [Electronic resourse]. URL: http://delta-intkey.com/ an-gio/www/hydrocha.htm/ (дата обращения: 2011).
Компонентный состав Stratiotes aloides
1б5
5. Ефремов А.Н. Телорез алоэвидный Stratiotes aloides L. (Hydrocharitaceae) в южной части Западно-Сибирской равнины (анатомо-морфологические особенности, ценотическое значение, продуктивность): автореф. дис. ... канд. биол. наук. Томск, 2010. 23 с.
6. Свириденко Б.Ф. Флора и растительность водоемов Северного Казахстана. Омск, 2000. 19б с.
7. Токарь O.E. Флора, растительность и фитоиндикация водных экотопов реки Ишим и пойменных озер в пределах Тюменской области. Ишим, 200б. 208 с.
8. Гусак С. Stratiotes aloides L. - Телорез обыкновенный, Водяний р1зак, Rezan pilolisty // Макрофиты - индикаторы изменений природной среды. Киев, 1993. С. 351-354.
9. Елина Г.А. Аптека на болоте: путешествие в неизвестный мир. СПб., 1993. 322 с.
10. Эйнор Л.О. Макрофиты и экология водоема. М., 1992. 25б с.
11. Mulderij G., Mooij W.M., Smolders A.J.P., Van Donk E. Allelopathic inhibition of phytoplankton by exudates from Stratiotes aloides // Aquatic Botany. 2005. Vol. 82, N4. Pp. 284-29б.
12. Conrad J., Förster-Fromme B., Constantin, M.-A., Ondrus, V., Mika, S., Mert-Balci, F., Klaiber, I., Pfannstiel, J., Möller, W., Rösner, H., Förster-Fromme, K., Beifuss, U. Flavonoid glucuronides and a chromone from the aquatic macrophyte Stratiotes aloides // Journal of Natural Products. 2009. Vol. 72. N5. Pp. 835-840.
13. ГОСТ 2бб57-97. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Метод определения содержания фосфора. Минск, 1999. 10 с.
14. ГОСТ 2б570-95. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Метод определения кальция. Минск, 1997. 13 с.
15. ГОСТ Р 51417-99. (ИСО 5983:1997). Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение массовой доли азота и вычисление массовой доли сырого протеина. Метод Къельдаля. М., 2002. б с.
16. ГОСТ 28178-89. Дрожжи кормовые. Методы испытаний. М., 1989. 312 с.
17. ГОСТ 1349б.15-97. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания сырого жира. Минск, 2005. 12 с.
18. ГОСТ 1349б.2-91. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Метод определения сырой клетчатки. М., 1992. 53 с.
19. ГОСТ 7б98-93. Крахмал. Правила приемки и методы анализа. Минск, 2001. 42 с.
20. Практикум по коллоидной химии / под. ред. М.И. Гельфмана. СПб., 2005. 254 с.
21. Петров O.A., Пуховская С.Г. Практикум по биохимии. Иваново, 200б. б0 с.
22. Методика ВНИТИП. Оценка качества кормов, органов тканей, яиц и мясо птицы. Сергиев Посад, 200б. 114 с.
23. Ермаков А.И., Арасимович В.В. Методы биохимического исследования растений. Л., 1987. 45б с.
24. Мурашкина И.А., Зюбр Т.П. Определение общей антиоксидантной активности лекарственного сырья // Актуальные проблемы биологии, медицины и экологии. Томск, 2004. [Электронный ресурс]. URL: http://tele-conf.ru/aktualnyie-problemyi-tehnologii-i-primeneniya-bav.html (дата обращения: 2011).
25. Ладыгина Е.Я., Сафронич Л.Н., Огряшенкова В.Э. и др. Химический анализ лекарственных растений. М., 1983. 17б с.
26. РД 52.18.28б-91. Методика выполнения измерений массовой концентрации марганца, кобальта, меди, железа, кадмия, цинка, свинца и никеля в воде и водных вытяжках атомно-абсорбционным методом с электротермической атомизацией и использованием атомно-абсорбционного спектрометра МГА-915. М., 1991. 12 с.
27. ГОСТ 27494-87. Мука и отруби. Методы определения зольности. М., 2007. 4 с.
Поступило в редакцию 5 декабря 2011 г.
Поле переработки 12 марта 2012 г.
Efremov A.N.1 , Belgibaeva A.M.1, Alekhina E.A.1, Filimonova M.V.2, Sviridenko B.F.2, Shalygin S.P.1, Rusak S.N.2 COMPOSITION STRUCTURE OF STRATIOTES ALOIDES (HYDROCHARITACEAE) IN WATER BODIES OF THE MEDIUM IRTYSH BASIN
1Omsk State Pedagogical University, st. Tukhachevskogo, 14, Omsk, 644099 (Russia), e-mail: stratiotes@yandex.ru
2Scientific-Research Institute of Natural Resources and Ecology of the North Surgut State University, st. Energetikov,
14, Surgut, 628412 (Russia)
For the first time the determination of composition structure for Stratiotes aloides L. in water bodies of the Medium Irtysh basin has been executed. It has been discovered that S. aloides plants are distinct in high content per air-dry substance of shes, cellulos, crude protein, vitamin B2, E, A. Presence of phloroglucydes and phenylglycosydes in S. aloides substance has been qualitatively shown. S. aloides plants are distinct in selective accumulation of heavy metals, their content decreases in the following row: Mn > Zn > Cu > Ni > Pb > Cd. A number of specific physical and chemical properties of the starch of S. aloides has been discovered: gelatinization temperature, the number of structural links, a molecular weight, water content, a acidity, a pH-index.
Keywords: Stratiotes aloides L composition structure, amino acids, vitamins, heavy metals, starch, Medium Irtysh.
* Corresponding author.
166
A.H. EOPEMOB, A.M. BE^trHEAEBA, E.A. AnEXHHAH flP.
References
1. Angiosperm Phylogeny Website. Version 9, June 2008. URL: http://www.mobot.org/MOBOT/research/APweb/.
2. Tiulin S.Ia., Fokina G.A. Sem. Hydrocharitaceae - Vodokrasovye. Rastitel'nye resursy Rossii i sopredel'nykh gosudarstv: Tsvetkovye rasteniia, ikh khimicheskii sostav, ispol'zovanie: Semeistva Butomaceae - Typhaceae. [Sem. Hydrocharitaceae - Hydrocharitaceae. Plant Resources of Russia and neighboring countries: Flowering plants, their chemical composition, the use: Families Butomaceae - Typhaceae]. St. Petersburg, 1994, pp. 9-11 (in Russ.).
3. Cook C. D. K., Urmi-König K. Aquatic Botany, 1983, vol. 16, pp. 213-249.
4. Watson L., Dallwitz M.J. Hydrocharitaceae Juss. The families of flowering plants: descriptions, illustrations, identification, and information retrieval. Ver. 10.04.2008. URL: http://delta-intkey.com/angio/www/hydrocha.htm/.
5. Efremov A.N. Telorez aloevidnyi Stratiotes aloides L. (Hydrocharitaceae) v iuzhnoi chasti Zapadno-Sibirskoi ravniny (anatomo-morfologicheskie osobennosti, tsenoticheskoe znachenie, produktivnost'): avtoref. ... kand. biol. nauk. [Telorez aloevidny Stratiotes aloides L. (Hydrocharitaceae) in the southern part of the West Siberian Plain (anatomical and morphological features cenotic value, productivity): summary of the PhD]. Tomsk, 2010, 23 pp (in Russ.).
6. Sviridenko B.F. Flora i rastitel'nost' vodoemov Severnogo Kazakhstana. [The flora and vegetation of reservoirs in Northern Kazakhstan]. Omsk, 2000, 196 p. (in Russ.).
7. Tokar' O.E. Flora, rastitel'nost' i fitoindikatsiia vodnykh ekotopov reki Ishim i poimennykh ozer v predelakh Tiumenskoi oblasti. [Flora, vegetation and aquatic ecotopes phytoindication Ishim River and floodplain lakes within the Tyumen region]. Ishim, 2006, 208 p. (in Russ.).
8. Gusak S. Makrofity - indikatory izmenenii prirodnoi sredy. [Macrophytes - indicators of environmental change]. Kiev, 1993, pp. 351-354 (in Russ.).
9. Elina G.A. Apteka na bolote: puteshestvie v neizvestnyi mir. [Pharmacy in the swamp: a journey into the unknown world]. St. Petersburg, 1993, 322 p. (in Russ.).
10. Einor L.O. Makrofity i ekologiia vodoema. [Macrophytes and ecology of the reservoir]. Moscow, 1992, 256 p. (in Russ.).
11. Mulderij G., Mooij W.M., Smolders A.J.P., Van Donk E. Aquatic Botany, 2005, vol. 82, no. 4, pp. 284-296.
12. Conrad J., Förster-Fromme B., Constantin, M.-A., Ondrus, V., Mika, S., Mert-Balci, F., Klaiber, I., Pfannstiel, J., Möller, W., Rösner, H., Förster-Fromme, K., Beifuss, U. Journal of Natural Products, 2009, vol. 72, no. 5, pp. 835-840.
13. GOST 26657-97. Korma, kombikorma, kombikormovoe syr'e. Metod opredeleniia soderzhaniia fosfora. [Standard 2665797. Feed, feed, feed raw materials. Method for determination of phosphorus.]. Minsk, 1999, 10 p. (in Russ.).
14. GOST 26570-95. Korma, kombikorma, kombikormovoe syr'e. Metod opredeleniia kal'tsiia. [Standard 26570-95. Feed, feed, feed raw materials. Method for the determination of calcium]. Minsk, 1997, 13 p. (in Russ.).
15. GOST R 51417-99. (ISO 5983:1997). Korma, kombikorma, kombikormovoe syr'e. Opredelenie massovoi doli azota i vychislenie massovoi doli syrogoproteina. Metod K"el'dalia. [Standard 51417-99. (ISO 5983:1997). Feed, feed, feed raw materials. Determination of the mass fraction of nitrogen and calculation of the mass fraction of crude protein. Kjeldahl method]. Moscow, 2002, 6 p. (in Russ.).
16. GOST 28178-89. Drozhzhi kormovye. Metody ispytanii. [Standard 28178-89. Yeast. Test methods.]. Moscow, 1989, 312 p. (in Russ.).
17. GOST 13496.15-97. Korma, kombikorma, kombikormovoe syr'e. Metody opredeleniia soderzhaniia syrogo zhira [Standard 13496.15-97. Feed, feed, feed raw materials. Methods for determination of the crude oil]. Minsk, 2005, 12 p. (in Russ.).
18. GOST 13496.2-91. Korma, kombikorma, kombikormovoe syr'e. Metod opredeleniia syroi kletchatki. [Standard 13496.291. Feed, feed, feed raw materials. Method for determination of crude fiber.]. Moscow, 1992, 53 p. (in Russ.).
19. GOST 7698-93. Krakhmal. Pravila priemki i metody analiza. [Standard 7698-93. Starch. Acceptance procedures and methods of analysis]. Minsk, 2001, 42 p. (in Russ.).
20. Praktikum po kolloidnoi khimii. Pod. red. M.I. Gel'fmana. [Workshop on colloid chemistry. Ed. M.I. Helfman.]. St. Petersburg, 2005, 254 p. (in Russ.).
21. Petrov O.A., Pukhovskaia S.G. Praktikum po biokhimii. [Workshop on biochemistry]. Ivanovo, 2006, 60 p. (in Russ.).
22. Metodika VNITIP. Otsenka kachestva kormov, organov tkanei, iaits i miasoptitsy. [Technique. Evaluation of the quality of feed, tissue organs, eggs and poultry]. Sergiev Posad, 2006, 114 p. (in Russ.).
23. Ermakov A.I., Arasimovich V.V. Metody biokhimicheskogo issledovaniia rastenii. [Methods for biochemical study of plants]. Leningrad, 1987, 456 p. (in Russ.).
24. Murashkina I.A., Ziubr T.P. Aktual'nye problemy biologii, meditsiny i ekologii. [Actual problems of biology, medicine and ecology]. Tomsk, 2004. URL: http://tele-conf.ru/aktualnyie-problemyi-tehnologii-i-primeneniya-bav.html (in Russ.).
25. Ladygina E.Ia., Safronich L.N., Otriashenkova V.E. et al. Khimicheskii analiz lekarstvennykh rastenii. [Chemical analysis of medicinal plants]. Moscow, 1983, 176 p. (in Russ.).
26. RD 52.18.286-91. Metodika vypolneniia izmerenii massovoi kontsentratsii margantsa, kobal'ta, medi, zheleza, kadmiia, tsinka, svintsa i nikelia v vode i vodnykh vytiazhkakh atomno-absorbtsionnym metodom s elektrotermicheskoi atomizatsiei i ispol'zovaniem atomno-absorbtsionnogo spektrometra MGA-915. [RD 52.18.286-91. The method of measurement of the mass concentration of manganese, cobalt, copper, iron, cadmium, zinc, lead and nickel in water and aqueous extracts by atomic absorption method with electrothermal atomization and using atomic absorption spectrometer MGA-915.]. Moscow, 1991, 12 p. (in Russ.).
27. GOST 27494-87. Muka i otrubi. Metody opredeleniia zol'nosti. [Standard 27494-87. Flour and bran. Methods for determination of ash content]. Moscow, 2007, 4 p. (in Russ.).
Received December 5, 2011
Revised March 12, 2012
