CC BY
85
Химия растительного сырья. 2012. №4. С. 125-129.
УДК [615.23+615.322]: 543.544
КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ И ЭФИРНОГО МАСЛА РАСТИТЕЛЬНОГО СБОРА «БРОНХОФИТ»
© В.М. Мирович1, Т.А. Коненкина2, Г.М. Федосеева1, О.Г. Карнаухова1
1 Иркутский государственный медицинский университет, ул. Красного Восстания, 1, Иркутск, 664003 (Россия), e-mail: mirko02@yandex.ru 2Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН, ул. Лермонтова, 132, Иркутск, 664054 (Россия), e-mail: grup@sifibr.irk.ru
Проведено исследование компонентного состава фенольных соединений и эфирного масла растительного сбора «Бронхофит». Методом ВЭЖХ в спиртовых извлечениях сбора идентифицировано 16 фенольных соединений, основные из которых флавоноиды: рутин, лютеолин, лютеолин-7-глюкуронид и галловая кислота. В составе эфирного масла хромато-масс-спектрометрическим методом идентифицировано 55 компонентов, основные из которых p-цимен, кар-вакрол, у-терпинен.
Ключевые слова: сбор «Бронхофит», фенольные соединения, эфирное масло, высокоэффективная жидкостная хроматография, хромато-масс-спектроскопический метод.
Введение
Среди заболеваний органов дыхания распространены и наиболее часто встречаются бронхиты, а так же пневмонии вирусной или бактериальной этиологии. Терапия заключается в назначении жаропонижающих, болеутоляющих и антибактериальных средств, применении лекарственных трав и сборов антимикробного, отхаркивающего действия [1]. На основе изучения сведений об этиологии и патогенезе заболеваний органов дыхания, составе биологически активных веществ растений, опыте их использования в официальной и традиционной медицине нами разработана рецептура грудного сбора «Бронхофит». В состав сбора включены растения отхаркивающего, противовоспалительного, антимикробного действия, отличающиеся по химическому составу и имеющие особенности фармакологического действия, что позволяет достичь в полной мере ожидаемого фармакологического эффекта [2, 3].
При повышенном кашлевом рефлексе и бронхиальной абструкции используют душицу (Origanum vulgare L.) и чабрец (Thymus serpillum L.) сем. губоцветные (Lamiaceae). Эти растения содержат эфирное масло, в котором содержатся тимол и карвакрол, флавоноиды, дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты,
урсоловая и олеаноловая кислоты [1, 4-7]. Оказывают бронхорасширяющее действие, усиливают секрецию бронхиальных желез и разжижают мокроту растения, содержащие слизи, поэтому в состав сбора введены листья подорожника. Подорожник большой (Plantago major L.) сем. подорожниковые (Plantaginaceae) содержит комплекс водорастворимых полисахаридов до 10%; органические кислоты - щавелевую, винную, лимонную, яблочную и др. Суммарное содержание органических кислот составляет 10-12%. Из фенол-карбоновых кислот содержатся сиреневая, феруловая, салициловая, кофейная, хлорегеновая, из флавоноид-
* Автор, с которым следует вести переписку,
Мирович Вера Михайловна - старший преподаватель кафедры фармакогнозии и ботаники, доктор фармацевтических наук, e-mail: mirko02@yandex.ru Коненкина Татьяна Александровна - научный сотрудник лаборатории физических методов исследования, тел.: (3952) 42-58-92, e-mail: grup@sifibr.irk.ru
Федосеева Галина Михаиловна - заведующая кафедрой фармакогнозии и ботаники, доктор фармацевтических наук, профессор, тел. (3952) 24-38-25, e-mail: administrator@ismu.baikal.ru Карнаухова Ольга Геннадьевна - доцент кафедры микробиологии, кандидат медицинских наук, тел. (3952) 24-38-25, e-mail: administrator@ismu,baikal,ru
ных соединений байкалеин, байкалин, скутелляреин, гиспидулин, лютео лин-7-глюкозид, лютеолин-7-диглюкозид. Из других биологически активных веществ в подорожнике большом содержится каротин; витамин К; аскорбиновая кислота; дубильные вещества; иридоидный гликозид аукубин [7, 9].
Перспективно при лечении заболеваний органов дыхания введение компонентов, воздействующих на аллергологическую реактивность и механизмы иммунобиологической защиты [10, 11]. Череда трехраздельная (Bidens tripartita L.) сем. астровые (Asteraceae) обладает антигистаминным, противовоспалительным и диуретическим действием, а также стимулирует функцию коры надпочечников. Она содержит каро-тиноиды (до 60-70 мг%), флавоноиды. Шиповник майский (Rosa majalis Herrm) сем. розоцветные (Rosaceae) является поливитаминным сырьем, содержит значительное количество аскорбиновой кислоты (от 2 до 5,5%), витамины Кь В2 и Р, флавоноиды, пектиновые вещества, органические кислоты. Настои плодов шиповника обладают общеукрепляющим, иммуномодулирующим действием [2].
Соотношение компонентов сбора было обосновано теоретически с учетом химического состава и особенностей фармакологического действия каждого компонента в оказании конечного лечебного эффек-та. Всего было составлено 4 варианта прописей сбора с различным соотношением компонентов. Исследованиями, проведенными в Центре лабораторной диагностики ИГМУ, определено, что предложенные прописи сбора обладают противовоспалительным и антимикробным действием в отношении грамположитель-ных микроорганизмов, наибольшую активность проявляет сбор, приготовленный по прописи №3: травы душицы - 30,0; травы чабреца - 20,0; листьев подорожника - 20,0; травы череды - 20,0; плодов шиповника - 10,0 [12, 13].
В задачу исследования входило изучение состава фенольных соединений и эфирного масла сбора «Бронхофит».
Экспериментальная часть
Для приготовления сбора «Бронхофит» использованы коммерческие образцы сырья, приобретенные через аптечную сеть и соответствующие по всем показателям требованиям Государственной фармакопеи XI [14].
Качественный состав фенольных соединений изучали в извлечении (1 : 10), приготовленном на 70% этиловом спирте. Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе «GILSTON» с ручным инжектором RHEODYNE 7125 USA с использованием колонки Kromasil C 18 диаметром 4,6 см, длиной 250 мм, с размером частиц 5 микрон. Подвижная фаза метанол - вода - фосфорная кислота (конц.). Разделение компонентов осуществлялось при комнатной температуре, скорость подачи элюента 0,8 мл/мин, продолжительность анализа 80 мин. Детектирование проводили с помощью УФ-детектора «GILSTON» UV/VIS модель 151 при длине волны 254 нм. Результаты обрабатывали в программе Мультихром для «Windows». Для исследования 1 мл спиртового извлечения сбора помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 15 мл 70% спирта этилового, перемешивали и доводили 70% спиртом этиловым до метки. Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения в 70% спирте этиловом: рутина, кверцетина, кемпферола, апигенина, гиперозида, геспер идина, лютеолина, лютеолин-7-глюкозида, лютео-лин-7-глюкуронида, виценина, витексина, робинина, нарингенина, дигидрокверцетина, ориентина, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, коричной кислоты, феруловой кислоты, изоферу-ловой кислоты, 4-оксикумарина, дикумарина, кумарина, эскулетина, эллаговой кислоты, катехина, эпика-техина. По 20 мкл исследуемого раствора и растворов сравнения вводили в хроматограф.
Эфирное масло получали методом дистилляции. Масло высушивали безводным сульфатом натрия и запаивали в ампулы. Химический состав масла исследовали на газовом хроматографе Agilent Technologies (6890N) с квадрупольным масс-спектрометром (MSD 5973) в качестве детектора, на кварцевой колонке HP- 5MS (30 м х 0,25 мм). В хроматограф вводили 1% метанольный раствор масел. Температура испарителя 280 °С. Начальная температура колонки 100 °С (1 мин), далее 100-230 °С (2 °С/мин.), 230 °С (1 мин). Температура интерфейса между газовым хроматографом и масс-селективным детектором - 280 °С. Температура источников ионов - 173 °С. Энергия ионизирующих электронов - 70 эв. Данные собирались со скоростью 1,2 скан./с в диапазоне 30-650 а.е.м.
Содержание компонентов вычисляли по площадям хроматографических пиков без использования корректирующих коэффициентов. Качественный анализ основан на сравнении времен удерживания и полных масс-спектров с чистыми соединениями и базой данных электронной библиотеки NIST 02.
Количественное содержание эфирно масла в сборе «Бронхофит» определяли дистилляцией (метод 2, ГФ XI) [14].
Результаты и обсуждение
В составе сбора идентифицировано 16 фенольных соединений: флавоноиды - рутин, лютеолин-7-глюкуронозид, лютеолин, нарингенин, дигидро кверцетин, кверцетин, кемпферол, апигенин; кислоты -галловая, хлорогеновая, феруловая, коричная; кумарины - дигидрокумарин, эскулетин; танин, эпикатехин (табл. 1).
Среди фенольных соединений преобладают рутин, лютеолин-7-глюкуронид, лютеолин, галловая кислота.
Количественное содержание эфирного масла в сборе «Бронхофит» составляло 0,12%. В составе эфирного масла идентифицировано 55 компонентов. Из них 40 компонентов относятся к монотерпенам и 15 - к сесквитерпенам. (табл. 2).
Таблица 1. Фенольные соединения сбора «Бронхофит»
Время удерживания, сек Проценты от общего содержания Соединение
213,1 3,86 Танин
231 1,81 Эпикатехин
241,7 10,33 Галловая кислота
295,6 2,40 Хлорогеновая кислота
334,2 1,79 Дикумарин
395,9 4,99 Эскулетин
461 2,04 Феруловая кислота
624,9 17,70 Рутин
794,1 12,85 Лютеолин-7-глюкуронозид
1171 12,02 Лютеолин
1386 2,01 Коричная кислота
1670 0,39 Нарингенин
1755 0,62 Дигидрокверцетин
2098 0,17 Кверцетин
3287 0,44 Кемпферол
3994 0,20 Апигенин
Таблица 2. Компонентный состав эфирного масла сбора «Бронхофит»
№ п/п Компоненты Содержание в эфирном масле, % № п/п Компоненты Содержание в эфирном масле,%
1 2 3 4 5 6
1 Трицикл ен 0,04 29 карвон 0,17
2 а-пинен 0,87 30 карвакрол метиловый эфир 0,23
3 камфен 1,38 31 гераниол 0,10
4 сабинен 0,18 32 линалиил ацетат 0,41
5 В-пинен 0,41 33 р-цимен-7-ол 0,13
6 октен-3-ол 0,65 34 тимол 5,28
7 3-октанон 0,17 35 1хаш-пинокарвил ацетат 0,15
8 В-мирцен 0,50 36 карвакрол 18,74
9 3-октанол 0,04 37 тимол ацетат 0,14
10 а-фелландрен 0,08 38 а-терпинил ацетат 0,53
11 а-терпинен 1,26 39 В-бурбонен 0,07
12 и-цимен 24,75 40 геранилацетат 0,05
13 лимонен 0,61 41 В-кариофиллен 0,76
14 1,8-цинеол 5,74 42 аромадендрен 0,07
15 у-терпинен 10,01 43 а-кариофиллен 0,05
16 га^акс-сабиненгидрат 0,21 44 у-мууролен 0,08
17 терпинолен 0,51 45 гермакрен Б 0,20
18 линолоол 1,33 46 бициклогермакрен 0,10
19 сІ8-сабиненгидрат 0,17 47 В-бисаболен 0,28
Окончание таблицы 2
1 2 3 4 5 6
20 камфор 0,51 48 5-кадинен 0,08
21 борнеол 9,94 49 Т-кадинол 0,16
22 терпинен-4-ол 4,46 50 (Е,Е)-а-фарнезен 1,09
23 и-цимен-8-ол 0,33 51 гермакрен D-4-ол 0,10
24 а-терпинеол 1,83 52 спатуленол 0,83
25 дигидрокарвон 0,08 53 кариофиллен оксид 2,69
26 изоборнилформиат 0,05 54 изоаромадендрен эпоксид 0,07
27 тимол метиловый эфир 0,26 55 кариофилла-3,8( 13)-диен-5 а-ол 0.08
28 куминовый альдегид 0,14
Основными компонентами эфирного масла являются р-цимен (24,75%), карвакрол (18,74%), у-терпинен (10,01%), борнеол (9,94%), 1,8 цинеол (5,74%), тимол (5,27%), терпинеол-4-ол (4,46%), карио-филлен оксид (2,69%), камфен (1,38%).
Душица обыкновенная, произрастающая на территории Российской Федерации, в составе эфирного масла содержит незначительное количество фенолов тимола и карвакрола. Суммарное содержание этих компонентов не превышает 0,5% [15]. Присутствие травы чабреца в сборе повышает содержание в составе его эфирного масла компонентов тимола и карвакрола, которые обладают выраженным противовоспалительным действием, что подтверждает рациональность введения травы чабреца в пропись сбора.
Выводы
Таким образом, в химическом составе сбора «Бронхофит» содержится 16 фенольных соединений, основные из которых флавоноиды - рутин, лютеолин-7-глюкуронизид, лютеолин и галловая кислота. В составе эфирного масла сбора идентифицировано 55 компонентов. Большая часть (53%) приходится на долю р-цимена, карвакрола, у-терпинена (10,01%). Данными фенольными соединениями и компонентами эфирного масла определяется антимикробное и противовоспалительное действие сбора «Бронхофит».
Список литературы
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 15-е изд. М., 2008. 1206 с.
2. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. М., 2000. 970 с.
3. Лавренов В.К., Лавренова Г.В. Полная энциклопедия лекарственных растений. М., 1999. Т. 2. С. 337-340.
4. Мирович В.М., Коненкина Т.А., Федосеева Г.М., Головных Н.Н. Исследование качественного состава эфирного
масла душицы обыкновенной, произрастающей в Восточной Сибири // Химия растительного сырья. 2008. №2.
С. 61-64.
5. Мирович В.М., Федосеева Г.М., Головных Н.Н., Петрова И.Г. Разработка показателей качества жидкого экстракта душит ты // Сибирский медицинский журнал. 2007. Т. 73, №6. С. 85-87.
6. Мирович В.М., Федосеева Г.М., Головных Н.Н. Разработка способа получения и стандартизация душицы обыкновенной травы экстракта жидкого // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб. науч. трудов. Пятигорск, 2008. С. 304-305.
7. Федосеева Г.М., Мирович В.М., Горячкина Е.Г. Дикорастущие и культивируемые лекарственные растения Восточной Сибири. Иркутск, 2010. 192 с.
8. Соснина С.А., Олешко Г.И., Печерская Л.Г., Левинова В.Ф. Виды подорожника: содержание действующих ве-
ществ // Фармация. 2008. №8. С. 21-24.
9. Олейников Д.Н., Samuelsen A.B., Танхаева Л.М. Подорожник большой (Plantago major L.). Химический состав и применение // Химия растительного сырья. 2007. №2. С. 37-50.
10. Респираторная медицина / под ред. А.Г. Чучалина. М., 2007. Т. 2. 816 с.
11. Мартынов А.М., Черняк Б.А. Фитотерапия заболеваний органов дыхания. Иркутск, 2008. 144 с.
12. Мирович В.М., Федосеева Г.М., Карнаухова О.Г., Балтакова Е.Г., Киборт Р.В. Разработка растительного сбора для лечения заболеваний верхних дыхательных путей из растений Восточной // Проблемы экологии: чтения памяти М.М. Кожова : тез. докл. междунар. науч. конф. Иркутск, 2010. С. 330.
13. Мирович В.М., Федосеева Г.М., Асеева Т.А. Фитохимическое изучение сбора для комплексного лечения заболеваний верхних дыхательных путей // Фармация Казахстана: интеграция науки, образования и производства: Материалы науч.- практ. конф. Шымкент, 2009. Т. 1. С. 256-258.
14. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. 11-е изд., доп. М., 1987. 400 с.
15. Ткаченко Г.К. , Ткачев А.В. Компонентный состав эфирного масла Origanum vulgare L., выращиваемой в Ленинградской области // Растительные ресурсы. 2002. Вып. 1. С. 97-101.
Поступило в редакцию 20 октября 2011 г. После переработки 25 декабря 2011 г.
Mirovich V.M.1 , Konenkina T.A.2, Fedoseeva G.M.1, Karnaukhova O.G.1 COMPONENT COMPOSITION OF PHENOLIC COMPOUNDS AND ESSENTIAL OILS OF VEGETABLE COLLECTION «BRONCHOFIT»
1Irkutsk State Medical University, st. Krasnogo Vosstaniia, 1, Irkutsk, 664003 (Russia), e-mail: mirko02@yandex.ru 2 Siberian Institute of Plant Physiology and Biochemistry Sibirian Division of the Russian Academy of Science, st. Lermontova, 132, Irkutsk, 664054, (Russia), e-mail: grup@sifibr.irk.ru
The component composition of the phenolic compounds and essential oils of vegetable collection «Bronhofit» was studied. 16 phenolic compounds in alcoholic extracts predominant of which are flavonoids - rutin, luteolin, luteolin-7-glucuronide and gallic acid were identified by HELCh method. In the composition of essential oil 55 components, predominant of which are p-tsimen, carvacrol, y-terpinene were identified by GC/MS method.
Keywords: Collection «Bronhofit», phenolic compounds, essential oil, highly effective liquid chromatography, chromatography-mass spectroscopic method
References
1. Mashkovskii M.D. Lekarstvennye sredstva. 15-e izd. [Medicines. 15th ed.]. Moscow, 2008, 1206 p. (in Russ.).
2. Sokolov S.Ia. Fitoterapiia ifitofarmakologiia. [Phytotherapy and phytopharmacology]. Moscow, 2000, 970 p. (in Russ.).
3. Lavrenov V.K., Lavrenova G.V. Polnaia entsiklopediia lekarstvennykh rastenii. [Complete Encyclopedia of Medicinal Plants]. Moscow, 1999, vol. 2, pp. 337-340 (in Russ.).
4. Mirovich V.M., Konenkina T.A., Fedoseeva G.M., Golovnykh N.N. Khimiia rastitel’nogo syr’ia, 2008, no. 2, pp. 61-64 (in Russ.).
5. Mirovich V.M., Fedoseeva G.M., Golovnykh N.N., Petrova I.G. Sibirskii meditsinskii zhurnal, 2007, vol. 73, no. 6, pp. 85-87 (in Russ.).
6. Mirovich V.M., Fedoseeva G.M., Golovnykh N.N. Razrabotka, issledovanie i marketing novoi farmatsevticheskoi pro-duktsii: sbornik nauchnykh trudov. [Development, research and marketing of new pharmaceutical products: a collection of scientific papers.]. Pyatigorsk, 2008, pp. 304-305 (in Russ.).
7. Fedoseeva G.M., Mirovich V.M., Goriachkina E.G. Dikorastushchie i kul'tiviruemye lekarstvennye rasteniia Vostochnoi Sibiri. [Wild and cultivated medicinal plants in Eastern Siberia.]. Irkutsk, 2010, 192 p. (in Russ.).
8. Sosnina S.A., Oleshko G.I., Pecherskaia L.G., Levinova V.F. Farmatsiia, 2008, no. 8, pp. 21-24 (in Russ.).
9. Olennikov D.N., Samuelsen A.B., Tankhaeva L.M. Khimiia rastitel'nogo syr'ia, 2007, no. 2, pp. 37-50 (in Russ.).
10. Respiratornaia meditsina. Ed. A.G. Chuchalina. [Respiratory Medicine. Ed. A.G. Chuchalin]. Moscow, 2007, vol. 2, 816 p. (in Russ.).
11. Martynov A.M., Cherniak B.A. Fitoterapiia zabolevanii organov dykhaniia. [Phytotherapy respiratory]. Irkutsk, 2008, 144 p. (in Russ.).
12. Mirovich V.M., Fedoseeva G.M., Karnaukhova O.G., Baltakova E.G., Kibort R.V. Problemy ekologii: chteniia pamiati
M.M. Kozhova: tezisy dokladov mezhdunarodnoi nauchnoi konferentsii. [Environmental problems: memory read
M.M. Kozhov: Proceedings of the International Conference.]. Irkutsk, 2010, pp. 330 (in Russ.).
13. Mirovich V.M., Fedoseeva G.M., Aseeva T.A. Farmatsiia Kazakhstana: integratsiia nauki, obrazovaniia i proizvodstva: Materialy nauchno-prakticheskoi konferentsii. [Pharmacy Kazakhstan: integration of science, education and industry: Proceedings of the Conference]. Shymkent, Kazakhstan, 2009, vol. 1, pp. 256-258 (in Russ.).
14. Gosudarstvennaia Farmakopeia SSSR: Vyp. 2. Obshchie metody analiza. Lekarstvennoe rastitel'noe syr'e. 11-e izd. [State Pharmacopoeia of the USSR: Vol. 2. Common methods of analysis. Herbal drugs. 11th ed.]. Moscow, 1987, 400 p. (in Russ.)
15. Tkachenko G.K. , Tkachev A.V. Rastitel'nye resursy, 2002, no. 1, pp. 97-101 (in Russ.).
Received October 20, 2011 Revised December 25, 2011
* Corresponding author.
