CC BY
23
УДК 618. 29 : 611. 71 : 616 - 018. 2 - 007. 7 - 07
КОМПЛЕКСНАЯ ПРЕНАТАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА СОЕДИНИТЕЛЬНОТКАННЫХ СКЕЛЕТНЫХ ДИСПЛАЗИЙ
В.М. Яковлев, Е.Г. Бакулина, А.А. Воинцева, В.В. Ежова
Ставропольская государственная медицинская академия
Соединительнотканные скелетные дис-плазии представляют собой гетерогенную группу врожденных поражений костей, в основе которых лежат расстройства эмбриогенеза производных мезодермального листка, приводящие к различным нарушениям размеров, пропорциональности, формы и плотности костной ткани, проявляющиеся клиническим полиморфизмом (аномалии развития мозгового и лицевого черепа, конечностей, грудной клетки, пороки внутренних органов и систем) [2]. Частота встречаемости скелетных дисплазий составляет 2-3 случая на 10 тысяч новорожденных [3].
Согласно II Международной классификации и номенклатуре конституциональных дисплазий скелета, выделяют локальные изолированные пороки развития опорно-двигательного аппарата; наследственные системные дисплазии скелета (остео-хондродисплазии и дизостозы); первичные метаболические дефекты, приводящие к скелетным дисплазиям; различные аномалии развития костной ткани, входящие в комплекс моногенных и хромосомных синдромов МВПР. Среди огромного разнообразия особое место занимает мендели-рующие синдромы МВПР, системные скелетные дисплазии, многим из которых характерны ранняя манифестация патологических проявлений и высокая степень ин-валидизации и перинатальной летальности [4].
Все классификации по скелетным дисплазиям основаны на клинических, радиологических, патоморфологических данных, а также на результатах молекулярных исследований для нозологических форм с доказанными генетическими изменениями. Одна из международных классификаций, опубликованная в 2002 г., включает около 300 нозологических форм врожденных пороков развития опорно-двигательного аппарата, из которых, по мнению многих исследователей, не более 50 теоретически могут быть диагностированы до рождения с помощью эхографии. Все остальные требуют верификации диагноза после родо-разрешения [5].
До сих пор вопросы унификации ранней пренатальной диагностики скелетных дисплазий остаются на уровне предложений и разработок эхографических подходов верификации соединительнотканных скелетных дисплазий. Наиболее приемлемым вариантом для практической деятельности является алгоритм этапного изучения скелета плода [6]. Отечественные исследователи также предлагают различные алгоритмы проведения пренатальной эхографии с целью улучшения диагностики скелетных дисплазий. Н.П. Веропотвелян [ 1 ] описал модифицированные кластерные системы, ориентированные на ультразвуковые проявления скелетных дисплазий. В их основе лежит алгоритм комплексной оценки головы, лица, грудной клетки, конечностей, пальцев, стоп, позвоночника, костей таза и внутренних органов.
В практическом здравоохранении РФ нет единой пренатальной комплексной диагностики и унифицированной методологии дифференцированной системной оценки и интерпретации скелетных дисплазий.
Как известно, в любой области деятельности методы и методологии выражают систему правил и принципов, на основе которых упорядочивается, делается целесообразной и осмысленной деятельность человека. Каковы методические и методологические причины, приведшие к сегодняшней диагностической ситуации? К наиболее обоснованным и доказательным следует отнести следующие:
1) отсутствие комплексного и системного клинико-генетического подхода в верификации скелетных дисплазий;
2) несовершенство существующих классификаций скелетных дисплазий, затрудняющих дифференциацию наследственных пороков развития костной ткани;
3) большое количество пороков развития скелета, названных по имени авторов, впервые описавших тот или иной синдром, который не имеет обоснованной этиологической и патогенетической характеристики;
4) описание многочисленной группы
системных пороков развития скелета по наиболее характерному ультразвуковому признаку (например, кампомелия - искривление конечностей);
5) описание некоторых пороков развития скелета по предполагаемому ведущему механизму, в частности - гипофосфа-тазия, несовершенный остеогенез и др.;
6) отсутствие внимания к молекуляр-но-генетической и тканевой принадлежности того или иного порока развития костного скелета, которая формирует скелетную дисплазию;
7) трудности пренатальной диагностики, обусловленные разрешающими возможностями ультразвуковой аппаратуры и схожестью УЗ-признаков при различных формах скелетной дисплазии, а также многочисленными комбинациями костных и висцеральных проявлений наследственной патологии.
Изложение лишь минимально отражает несовершенство пренатальной диагностической эффективности скелетных дис-плазий. Современные подходы к созданию системной пренатальной диагностики скелетных дисплазий следующие:
1) совершенствование и разработка комплексной клинико-генетической, биохимической и ультразвуковой дифференцированной диагностики;
2) разработка молекулярно-генетичес-кой и тканевой системной методологии оценки, анализа и интерпретации результатов исследования пре- и постнатально-го периодов развития скелетной дисплазии;
3) совершенствование пренатального клинико-генетического и эхографическо-го консультирования и создание дифференциально-диагностических алгоритмов наследственных и тканевых дефектов развития костной ткани;
4) разработка прогностических рекомендаций оценки жизнеспособности плода на основании степени выраженности поражения скелета и висцеральных аномалий развития органов и тканей.
На основе собственных исследований и литературных данных мы разработали алгоритм клинико-генетического консультирования с использованием методов комплексной диагностики (молекулярно-гене-тической, биохимической, тканевой, ультразвуковой и др.) и системной аналитической оценкой скелетных дисплазий. Ретроспективный анализ зарубежных и отечественных алгоритмов пренатальной ве-
рификации скелетных дисплазий и собственный опыт позволили создать модель диагностического процесса и системной оценки аномалий развития костной ткани у плода, сформулировать основные принципы и последовательность комплексного диагностического процесса и системной оценки соединительнотканных костных дисплазий.
Первый этап исследований - клинико-биохимический: оценка психосоматического статуса родителей, семейная родословная; биохимические исследования на предмет выявления риска возникновения ДСТ.
Второй - генетический (по показаниям). Третий - трехмерная (двухмерная) эхография плода, в частности мозгового и лицевого черепа. Четвертый - измерение трубчатых костей конечностей по общепринятой эхографической методике. Пятый - эхографическая оценка изменений развития кистей и пальцев рук, а также пальцев и костей стоп. Шестой - характеристика отклонений развития грудной клетки. Седьмой - эхографическая оценка состояния позвоночника (шейный, грудной и поясничный отделы), костей таза. Восьмой - изучение двигательной активности и подвижности суставов. Девятый -эхографическое исследование внутренних органов. Десятый - эхографическая оценка околоплодных вод.
В итоге первоочередной задачей комплексной пренатальной диагностики скелетных дисплазий и генетического консультирования является установление факта системного поражения скелета у плода. Во вторую очередь клиницист решает вопрос о дифференцированной оценке соединительнотканной костной дисплазии, используя, помимо трехмерной эхографии, все современные методы пренатальной лабораторной диагностики, а в-третьих - это создание унифицированных диагностических подходов и системной оценки и интерпретации результатов исследования скелетных дисплазий у плода.
На сегодня прогресс ранней пренаталь-ной диагностики скелетных дисплазий зависит от совершенствования генетического консультирования, клинико-ультразву-ковых и информационных технологий, их доступности и широкого внедрения в практическое здравоохранение РФ, в частности в практику центров планирования семьи. Естественно, наша разработка комплексной пренатальной диагностики соединительнотканных скелетных дисплазий не
отражает в полной мере существующей проблемы - это целевой поиск решения одного из важнейших вопросов ранней верификации аномалий развития костной ткани у плода и рациональной профилактики инвалидизации и перинатальной летальности.
ЛИТЕРАТУРА
1. Веропотвелян Н.П.//Эхография в перинатологии и гинекологии. I Ежегодный сборник научных трудов Украинской ассоциации врачей ультразвуковой диагностики в перинатологии и гинекологии. - Кривой Рог, 1993. - С. 273-280.
2. Горшунова Г.П. Современные технологии снижения перинатальных потерь: Автореф. дисс. ...канд. мед. наук. - Владивосток, 2003.
3. Клиническое руководство по ультразвуковой диагностики / Под ред.В.В. Митькова, М.В. Медведева. II том. - М., 1996.
4. Пренатальная эхография / Под ред. М.В. Медведева. - М., 2005. - С. 525-551.
5. Флейшер А., Мэннинг Ф., Дженти Ф., Ромеро Р. Эхография в акушерстве и гинекологии.- М., 2005. -Часть 1. - С. 740.
6. Goncalves L, Espinoza JMazor M, Romero R. // Ultrasound Obstet. Gynec. - 2004. Vol. 24. - P. 115-120.
УДК 611. 018. 2
ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ КЛЕТОК СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ ПРИ ИНКУБАЦИИ IN VITRO
Д.А. Ильин, С.А. Архипов, Л.П. Михайлова, Н.В. Игнатович, Е.С. Ахроменко
Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, г. Новосибирск
Изучение фундаментальных вопросов функционирования, развития и патологии соединительной ткани является одним из наиболее актуальных аспектов биологии и медицины, поскольку имеет не только теоретическое, но и прикладное значение [2]. Это обусловлено широким распространением заболеваний соединительной ткани [1, 3], в основе которых лежат, как правило, воспалительные реакции организма [2, 4]. Кроме макрофагов и фибробла-стов в фибропластических процессах, индуцированных воспалительной реакцией, прямое участие принимают лаброциты, которые в ответ на ряд стимулов выделяют медиаторы, вызывающие таксис имму-нокомпетентных клеток в очаг воспаления [2], что, в свою очередь, регулирует синтетическую и пролиферативную активность фибробластов [2, 5].
Целью нашего исследования было изучение характера морфологических изменений фибробластов при совместном инкубировании с перитонеальными клетками, в клеточный состав которых входят макрофаги, лимфоциты и тучные клетки. Задачи исследования состояли в определении выраженности процессов пролиферации и дифференцировки фибробластов и активности процесса дегрануляции лаб-роцитов в смешанной культуре клеток соединительной ткани.
Клетки инкубировали при температу-
ре 37° С. Препараты фиксировали 50% раствором этанола и окрашивали азур-эози-ном. Культуры клеток были разделены на группы. В первой группе одномоментно вносили взвесь в объеме 1,5 мл, содержащую 100 тысяч фибробластов перевиваемой линии L929 (полученных от мышей линии C3H/He) и 500 тысяч перито-неальных клеток, выделенных из брюшной полости мышей инбредной линии C3H/He. Аналогичным образом формировали культуры второй группы, с той лишь разницей, что взвесь перитонеальных клеток вносили после предварительной инкубации фибробластов в течение 48 часов. Контролем служили интактные культуры фибробластов. Результаты оценивали на 24, 48, 72 и 96 ч инкубации клеток. Все изменения описаны относительно контроля. Подсчитывали численность дифференцированных форм фибробластов и количество клеток в состоянии митоза в 10 полях зрения. Аналогичным образом оценивали количество лаброцитов, определяли процент дегранулирующих и недегра-нулирующих клеток. Была отмечена обратная зависимость между количеством лаброцитов в препаратах и сроком инкубации клеточных культур, поскольку при увеличении времени экспозиции культур тучные клетки дегранулировали более активно. Пик дегрануляции тучных клеток приходился на 72 ч культивирования
