CC BY
38
УДК 543.544
КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ТАБЛЕТОК «ПЕНТАМАКС» МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Г.Б. Голубицкий*, В.М. Иванов
(кафедра аналитической химии)
Предложена методика количественного анализа нового многокомпонентного лекарственного препарата «Пентамакс» методом ВЭЖХ. Методом "введено-найдено" проанализированы модельные смеси, содержащие все действующие и все вспомогательные вещества таблеток, показано отсутствие систематической погрешности определения. Проанализированы опытно-экспериментальные образцы таблеток. Полученные результаты соответствуют требованиям нормативно-технической документации и технологическим загрузкам.
Таблетки "Пентамакс" - новый оригинальный ства» (г. Курск). В состав препарата входят следую-
пятикомпонентный лекарственный препарат противо- щие компоненты: парацетамол (I), ибупрофен (II), кофе-
простудного, жаропонижающего и спазмолитическо- ин (III), дротаверина гидрохлорид (IV), фенобарбитал
го действия, разработанный и подготовленный к (V), а также ряд вспомогательных веществ и наполни-
производству на ОАО «Фармстандарт-Лексред- телей (рис. 1).
Рис. 1. Вещества, входящие в состав препарата "Пентамакс"
*ОАО «Фармстандарт-Лексредства», Курск.
Параллельно с отработкой технологии приготовления препарата разрабатывали методики его количественного анализа. Полученные результаты отражены в настоящей статье.
Экспериментальная часть
Реагенты. Для приготовления подвижных фаз (ПФ), а также для растворения стандартных и испытуемых препаратов использовали ацетонитрил для градиентной хроматографии ("Сигма", США) и сверхчистую воду с удельным сопротивлением 18,2 МОм/см, полученную на установке "Direct Q" ("Millipore", США). В качестве стандартов определяемых лекарственных веществ использовали фармацевтические субстанции, проверенные отделом контроля качества предприятия и соответствующие всем требованиям нормативной документации. Все остальные использованные реактивы имели квалификацию не ниже "ч.д.а".
Аппаратура. Хроматографический анализ проводили на хроматографе "Waters Alliance 2695" с ди-одно-матричным детектором "Waters 2996". Величина "мертвого" объема хроматографа (по паспорту) менее 0,650 мл. Использовали колонку размером 150x4,6 мм с защитной предколонкой размером 12,5x4,6 мм. Обе колонки были заполнены обращен-но-фазовым сорбентом "Zorbax SB C8" с размером частиц 3,5 мкм ("Agilent Technologies", США). Тер-мостатирование проводили при 40°С. Для контроля рН элюентов использовали рН-метр-милливольтметр "рН-673М" со стеклянным индикаторным электродом и хлоридсеребряным электродом сравнения.
Приготовление растворов. Для выполнения анализа около 0,160 г (точная навеска) тщательно растертых анализируемых таблеток помещали в мерную
колбу емкостью 100 мл, добавляли 40 мл смеси СИ3СН-вода (1:4), перемешивали 3 мин, доводили до метки этой же смесью и снова перемешивали. Для приготовления раствора стандартных образцов (РСО) около 0,040 г парацетамола и около 0,080 г ибупрофе-на (точные навески) помещали в мерную колбу емкостью 100 мл, добавляли 40 мл смеси СИ3СН-вода (1:4), перемешивали до растворения веществ, добавляли 5,0 мл раствора (А), доводили до метки этой же смесью растворителей и снова перемешивали. Для приготовления раствора А около 0,200 г кофеина, около 0,160 г дротаверина гидрохлорида и около 0,040 г фенобарбитала (точные навески) помещали в мерную колбу емкостью 100 мл, добавляли 40 мл смеси, снова перемешивали до растворения веществ, доводили до метки этой же смесью растворителей и перемешивали. Модельные растворы для подтверждения достоверности получаемых результатов готовили аналогично раствору РСО, но с добавлением соответствующего количества плацебо - смеси всех компонентов препарата, за исключением определяемых веществ. Количество действующих веществ в модельных растворах было разным, охватывая интервал ±20% от заявленных значений.
Все растворы фильтровали через гидрофильный мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм (предпочтительны фторопластовые фильтры, устойчивые в водно-ацетонитрильных растворах).
Проведение анализа, расчет результатов.
Хроматографировали испытуемый раствор и раствор РСО. Состав ПФ изменяли в соответствии с программой, представленной в табл. 1.
Расход ПФ составил 1,0 мл/мин, объем инжектируемых 20,0 мкл, детектирование проводили при 210 нм. Рассчитывали площади пиков определяе-
Т а б л и ц а 1
Программа изменения состава ПФ
Время, мин Состав ПФ, об. %
СН3СЫ : 0,025 М КН2РО4 = 7 : 3 СН3СЫ : 0,025 М КН2РО4 = 1 : 4
0 20 80
4 30 70
16 100 0
17 100 0
18 20 80
21 20 80
Примечание. рН КН2РО4 2,5.
200 250 300 350 400
X, нм
Рис. 2. Нормализованные спектры поглощения парацетамола (1), ибупрофена (2), кофеина (3),
дротаверина (4) и фенобарбитала (5)
мых компонентов и находили количество каждого компонента в анализируемых таблетках по формуле:
(S х mCT X mc)l(SciX mH)
где Би и Бст - средние значения площадей пиков определяемых компонентов на хроматограммах испытуемого раствора и РСО соответственно; тст, тс и тн - масса стандарта определяемого вещества в растворе РСО, средняя масса таблетки и масса навески растертых таблеток, взятая для приготовления испытуемого раствора (г).
Результаты и их обсуждение
Оптимальные условия анализа. На рис. 2 представлены спектры поглощения компонентов препарата, полученные в режиме on line с помощью диодно-матричного детектора. Длина волны детектирования (210 нм) установлена с учетом свойств фенобарбитала, имеющего достаточное для надежного определения поглощение только в коротковолновой области спектра.
Кислотность ПФ установили исходя из свойств одного из основных определяемых компонентов -ибупрофена. Для обеспечения его оптимального удерживания и симметричного пика ибупрофен-кис-лоту переводили в молекулярную форму снижением рН ПФ до 2,5. Для обеспечения необходимого разделения "критической" пары пиков* (парацетамола и кофеина) и оптимального времени удерживания последнего пика (пика ибупрофена) в предлагаемую градиентную программу внесли два этапа с разной скоростью изменения концентрации органического модификатора в ПФ. Первый этап (до выхода пика кофеина) более медленный, а второй (до выхода пика ибупрофена) более быстрый. Такие условия позволяют получить оптимальное разделение анализируемой смеси при рассматриваемых условиях (рис. 3), но при использовании других хроматографических колонок в них могут вноситься коррективы.
Анализ модельных смесей. Было приготовлено 17 растворов, количество определяемых веществ в
*СхунмакерсП. Оптимизация селективности в хроматографии. М., 1989. С. 345.
Рис. 3. Хроматограмма испытуемого раствора для анализа таблеток "Пентамакс" : 1 - парацетамол, 2 -кофеин, 3 - фенобарбитал, 4 - дротаверин, 5 - ибупрофен
Т а б л и ц а 2
Метрологические характеристики методики анализа таблеток "Пентамакс"
Компоненты Метрологические характеристики
^макс, г / макс 8 % макс er (ср), % Aer, % er макс, %
Парацетамол 0,00024 5,98х10-8 2,39 -0,051 0,169 -1,33
Кофеин 0,00006 8,16х10-8 2,99 -0,038 0,134 -1,33
Ибупрофен 0,00029 7,17х10-8 1,92 -0,043 0,126 -1,43
Фенобарбитал 0,00001 1,59х10-10 3,40 -0,089 0,108 1,06
Дротаверина гидрохлорид 0,00007 4,34х10-9 3,55 0,024 0,162 1,34
которых составляло ±20% от значений, заявленных по рецептуре. Полученные растворы анализировали по методике, описанной в разделе "Проведение анализа, расчет результатов" и рассчитывали результаты по методу "введено-найдено" с помощью электронных таблиц Excel. Полученные результаты представлены в табл. 2. Сравнение величин средних относительных погрешностей определения компонентов ег(ср) с соответствующими доверительными интервалами Аег показывает, что систематическая по-
грешность отсутствует (ег(ср) < ег). Площади пиков определяемых веществ линейно зависят от их концентраций в указанном интервале (коэффициент корреляции К кор > 0,99).
Анализ образцов таблеток. По предлагаемой методике в настоящей работе проанализированы опытные образцы препарата. Полученные результаты, представленные в табл. 3, соответствуют требованиям нормативно-технической документации и технологическим загрузкам.
Т а б л и ц а 3
Результаты анализа трех опытных образцов таблеток «Пентамакс»
Компоненты Содержание в одной таблетке, г (n = 9; Р = 0,95)
норма по НД •ср s ^ср Д^ср s% ,
0,298 0,002 0,00067 0,00158 0,53
Парацетамол 0,285-0,315 0,306 0,005 0,00167 0,00395 1,29
0,294 0,004 0,00133 0,00316 1,07
0,0492 0,0009 0,00030 0,00071 1,45
Кофеин 0,04625-0,05375 0,0501 0,0007 0,00023 0,00055 1,10
0,0498 0,0006 0,00020 0,00047 0,95
0,389 0,004 0,00133 0,00316 0,81
Ибупрофен 0,380-0,420 0,404 0,005 0,00167 0,00395 0,98
0,395 0,003 0,00100 0,00237 0,60
0,0099 0,0004 0,00013 0,00032 3,19
Фенобарбитал 0,009-0,011 0,0105 0,0005 0,00017 0,00040 3,76
0,0097 0,0003 0,00010 0,00024 2,44
0,0401 0,0007 0,00023 0,00055 1,38
Дротаверина гидрохлорид 0,0370-0,0430 0,0388 0,0007 0,00023 0,00055 1,43
0,0397 0,0008 0,00027 0,00063 1,59
Поступила в редакцию 20.09.07
THE QUANTITATIVE ANALYSIS OF "PENTAMAX" TABLETS " BY A HPCL METHOD G.B. Golubitskii, V.M. Ivanov
(Division of Analytical Chemistry)
The technique of the quantitative analysis of a new multicomponent medicinal preparation "Pentamax" by a method HPLC is offered. In variant " is entered - is found " the modelling mixes are analysed containing all working and all auxiliary substances of tablets and the absence of a regular error of definition is shown. Skilled - experimental samples of tablets are analysed. The received results correspond to the requirements of the normative-engineering specifications and technological loadings.
