CC BY
42
КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ анализ фенозан-кислоты в лекарственных формах методом ВЭЖХ
Берлянд А.С., Плесская Н.А., Прокопов А. А.
ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава», кафедра общей и биоорганической химии, г. Москва
Фенозан-кислота (4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенилпропионовая кислота) (ФК), относится к классу пространственно-затруднённых фенолов и по антиоксидантной активности в два раза превосходит известный препарат дибунол.
Для осуществления контроля качества лекарственных форм ФК нами разработана методика количественного определения ФК в таблетках и суппозиториях методом ВЭЖХ. Состав таблеток: ФК - 0,1 г, картофельный крахмал - 0,197 г, стеарат кальция - 0,003 г; состав свечей: ФК - 0,2 г, твёрдый жир - 1,8 г. Исследования методом ВЭЖХ проводили на жидкостном хроматографе Милихром-1 на стальной колонке с сорбентом «ЗПаБОгЬ С18» (2х120 мм, 6 мкм), в качестве элюента использовали смесь ацетонитрил-фосфатный буфер с рН=6,86 в соотношении 1:1. Скорость потока элюента 100 мкл/мин, аналитическая длина волны УФ-детектора - 278 нм. Время удерживания ФК в этих условиях 4,02 мин. Количественный анализ ФК в лекарственных формах проводили методом абсолютной калибровки по внешнему стандарту. Корреляционное уравнение зависимости высоты пика ФК (К) на хроматограмме от концентрации ФК (С) в интервале концентраций от 0,1 до 0,5% имеет вид: К = 244С - 0,04 ( р=0,95, п=5), коэффициент корреляции г=0,999. В качестве рабочего стандартного образца использовали одну из серий ФК, отвечающую требованиям ФС на фенозан-кислоту.
М е т о д и к а а н а л и з а Ф К в т а б л е т к а х
10 таблеток ФК измельчали в ступке до порошкообразного состояния; навеску, соответствующую средней массе одной таблетки (около 0,3 г, точная навеска), помещали в колбу с 10 мл спирта этилового 95%, энергично встряхивали в течение 1 мин. Полученную суспензию фильтровали через складчатый бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили объём до метки спиртом 95%. 10 мкл полученного раствора вводили в хроматографическую колонку и хроматографировали в указанных выше условиях. Содержание ФК в таблетке рассчитывали по формуле:
0,25(к + 0,04) • тср
Х =-, где
244 • т
К - высота пика ФК на хроматограмме, мм; Щр - средняя масса одной таблетки, г; т - навеска таблеточной массы, г; Х - содержание ФК в таблетке, г. М е т о д и к а а н а л и з а Ф К в с в е ч а х
5 свечей растирали в ступке; 2,5 г образовавшейся массы (точная навеска) помещали в колбу с обратным холодильником, добавляли 40 мл спирта этилового 95%, нагревали на водяной бане при 60 °С до полного растворения основы и образования прозрачного раствора. Раствор охлаждали при -4 °С, образовавшийся осадок растирали, полученную суспензию фильтровали через сухой складчатый бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл. Доводили объём жидкости в колбе до метки спиртом 95%, 10 мкл полученного раствора хроматографировали в указанных выше условиях. Содержание ФК в свече рассчитывали по формуле:
0,5 • (к + 0,04) • тср
Х =-, где
244 • т
К - высота пика ФК на хроматограмме, мм; Щ;р - средняя масса одной свечи, г; т - навеска свечной массы, г; Х - содержание ФК в свече, г.
Для оценки специфичности, правильности и воспроизводимости методики анализ проводили на модельных образцах.
Высокая специфичность методики подтверждается тем, что вспомогательные вещества в таблетках и свечах не мешают количественному определению ФК в выбранных условиях, о чём свидетельствует отсутствие посторонних пиков на хроматограммах модельных смесей таблеток и свечей.
Т а б л и ц а 1
Модельная смесь лекарственной формы ФК Найдено ФК, г Метрологические характеристики (р=0,95; п=5)
Таблеточная масса (0,1000 г ФК; 0,197 г картофельного крахмала; 0,003 г кальция стеарата) 0,1020 0,0990 0,1000 0,1030 0,1010 Х = 0,1010 S = 0,0016 ^ = 0,0007 х Д Х = 0,0019 5 = 1,97%
Свечная масса 0,1999 Х = 0,1987
Материалы X международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва
(0,2000 г ФК; 1,8 г твёрдого жира) 0,1987 0,2002 0,1950 0,1999 S = 0,0022 ^ = 0,0009 Д X = 0,0027 5 = 1,36%
Анализ содержания ФК в таблетках и свечах Т а б л и ц а 2
Лекарственная форма Найдено ФК, г Метрологические характеристики (р=0,95; п=5)
Таблетки 0,1г 0,0970 0,0990 0,0970 0,1010 0,1000 X = 0,0988 S = 0,0017 ^ = 0,0008 Д X = 0,0022 5 = 2,25%
Свечи 0,2 г 0,2001 0,1999 0,1997 0,2000 0,1999 X = 0,1999 S = 0,0032 ^ = 0,0014 X Д X = 0,0039 5 = 1,95%
Из данных, представленных в табл. 1 и 2, следует, что разработана специфическая, воспроизводимая методика количественного определения ФК в таблетках и свечах методом ВЭЖХ с относительной ошибкой среднего результата, не превышающего для таблеток 2,25%, а для свечей 1,95%.
Данная методика может быть включена в НД на таблетки и суппозитории ФК в качестве способа количественного определения действующего вещества.
ЛИТЕРАТУРА
1. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2011г.
2. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2010г.
3. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2009г.
4. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2008г.
5. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2007г.
6. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2006г.
7. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2005г.
8. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2004г.
9. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2003г.
10. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2002г.
11. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2001г.
12. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке», Москва, 2000г.
13. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2011г.
14. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2010г.
15. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2009г.
16. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2008г.
17. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2007г.
18. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2006г.
19. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2005г.
20. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2004г.
21. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2003г.
22. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2002г.
23. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2001г.
Материалы X международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва
