CC BY
273
4. Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда: Р 2.2.2006-05. - Екатеринбург: ИД «Урал Юр Издат», 2006. - 111 с.
5. Руководство по оценке риска для здоровья населения при воздействии химических веществ, загрязняющую среду. Р 2.1.10.1920-04. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 129 с.
6. Канцерогенные факторы и основные требования к профилактике канцерогенной опасности // Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 21.04.2008 N 27.
УДК 615.4:547.98
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДУБИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В
УСПОКОИТЕЛЬНОМ СБОРЕ №2
Ивкина О.А., Коган Е.Г., Стрелычева К.А., Кисилёва А.Н.
Научный руководитель — к.ф.н., доцент Кисилёва А.Н.
Смоленский государственный медицинский университет, Россия, 214019, Смоленск, ул. Крупской, 28.
[email protected] - Ивкина Оксана Александровна
Резюме. Целью исследования явилось количественное определение дубильных веществ в составе успокоительного сбора №2 с использованием методов спектрофотометрии и перманганатометрии, а также сравнительная оценка их эффективности. В качестве материала использовали успокоительный сбор №2, приготовленный по стандартной прописи в условиях кафедры. В работе использовали стандартную методику перманганатометрического титрования, предложенную Государственной фармакопеей XIII издания, а также фармакопейную методику спектрофотометрического титрования, модифицированную рядом авторов. В результате было определено количественное содержание дубильных веществ в успокоительном сборе №2 двумя методами. Это позволило сравнить результаты, и предложить метод спектрофотометрического определения дубильных веществ как наиболее предпочтительный, ввиду точности полученных результатов.
Ключевые слова: успокоительный сбор №2, дубильные вещества, спектрофотометрия, перманганатометрия.
QUANTITATIVE DETERMINATION OF TANNINS IN SOOTHING PREPARATION №2 Ivkina O.A., Kogan E.G., Strelycheva К.А.
Scientific adviser — Associate Professor Kisilyova A.N., Candidate of Pharmacy
Smolensk State Medical University, 28, Krupskoy St., Smolensk, 214019, Russia Abstract. The aim of the study was quantification of tannins in the composition of soothing preparation №2 using spectrophotometry techniques and permanganometry and comparative assessment of their effectiveness. As the materialwe used soothing preparation №2, prepared according to the standard recipe at the Department. We used the standard method of titration proposed by the State Pharmacopoeia XIII ed., as well as pharmacopoeial method of spectrophotometry titration, modified by several authors. As a result, we determined the quantitative content of tannins in the soothing preparation №2 by two methods. This allowed to compare the results, and propose a method of spectrophotometric determination of tannins as the most preferred, because of the accuracy of the results.
Key words: soothing preparation №2, tannins, spectrophotometry, permanganometry.
Введение. Успокоительный сбор лекарственную форму (ЛФ), в состав
№2 представляет собой сложную которой входят 5 лекарственных растений.
Совершенно очевидно, что
терапевтический эффект сбора
обеспечивается синергизмом биологически активных веществ (БАВ). В литературных источниках можно заметить некую закономерность, которая показывает, что во многих случаях применение БАВ в чистом виде не дает того эффекта, который возможно получить при использовании суммарной вытяжки из всего растения [2]. Так, одной из групп веществ, которые принимают участие в терапевтическом действии, на наш взгляд, могут являться дубильные вещества (ДВ). Следовательно, можно предложить способ стандартизации успокоительного сбора №2 по ДВ, наряду с основными действующими веществами -эфирными маслами. В Государственной Фармакопее XIII издания (ГФ XIII изд.) предложено два метода определения ДВ в составе лекарственного растительного сырья (ЛРС) - перманганатометрия и спектрофотометрия [5]. В литературе имеется много сведений об определении ДВ в ЛРС методом перманганатометрии [3, 4, 10]. Однако данный метод характеризуется таким серьёзным недостатком, как получение завышенных результатов. Этот недостаток объясняется активным окисляющим действием титранта - раствора калия перманганата. Поэтому в настоящее время широко внедряется в практику наиболее точный и эффективный спектрофотометрический метод определения, основанный на измерении оптической плотности окрашенных продуктов взаимодействия ДВ с железо-тартратным реактивом (ЖТР). Важно также отметить, что на данный момент отсутствует нормативная документация, которая регламентировала бы содержание БАВ в составе успокоительного сбора №2. Именно поэтому, актуальным является
рассмотрение двух основных методов определения ДВ и выбор наиболее оптимального для стандартизации успокоительного сбора №2.
Целью нашего исследования явилось количественное определение дубильных веществ в составе успокоительного сбора №2 с
использованием методов
спектрофотометрии и
перманганатометрии, а также
сравнительная оценка их эффективности.
Методика. Объектом исследования явился успокоительный сбор №2, приготовленный по общеизвестной прописи в условиях кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии с курсом фармации ДПО СГМУ. Экстракцию дубильных веществ проводили по стандартной методике, взятой из ГФ XIII изд. «Определение содержания экстрактивных веществ в ЛРС». В качестве экстрагента использовали спирт этиловый 70%, ЛРС брали в соотношении 1:100 и нагревали на водяной бане в течение 30 мин.
Определение содержания
дубильных веществ в составе сбора методом перманганатометрии проводили по методике, представленной в ГФ XIII изд. [5]. Определение содержания дубильных веществ методом
спектрофотометрии проводили
следующим образом: требуемую массу измельченного сырья помещают в коническую колбу ёмкостью 250 мл, добавляют 100 мл экстрагента (спирт этиловый 70%) и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через комок ваты в мерную колбу вместимостью 200 мл. После этого промывают экстрагентом вату с сырьем два раза по 20 мл, доводят объём до метки и перемешивают. Полученный раствор затем подвергают фильтрованию через бумажный фильтр (раствор А). Далее берут три мерные колбы вместимостью 50 мл, в каждую колбу отмеривают по 10 мл воды, в первую колбу отмеривают 10 мл раствора А, во вторую 10 мл раствора стандартного образа (РСО) раствора галловой кислоты, в третью колбу 10 мл воды. После этого в каждую колбу прибавляют по 5 мл буферного раствора с рН=8,2 и по 12,5 мл ЖТР, доводят объемы растворов водой до метки и перемешивают. Для получения значения оптической плотности стандартного
раствора, необходимой в последующем для расчета содержания ДВ, измеряют оптическую плотность второй колбы, используя в качестве раствора сравнения содержимое третьей колбы при длине волны 526 нм с помощью спектрофотометра. Оптическая плотность стандартного образца составила 0,520. После этого измеряют оптическую плотность полученного водного извлечения в первой колбе относительно колбы №3 при длине волны 526 нм [6].
Результаты исследования и их обсуждение. В результате ранее проведенного исследования по изучению химического состава успокоительного сбора №2 установлено, что в составе сбора присутствуют ДВ, это подтверждают следующие качественные реакции: при
X =
А
иссл
-200-50-Ш-100
взаимодействии с 1% раствором желатина появляется муть, исчезающая от избытка реактива; с раствором железоаммониевых квасцов (ЖАК) - черно-синее окрашивание и осадок; при добавлении смеси хлористоводородной кислоты и 40% раствора формальдегида после кипячения образуется осадок, который сначала фильтруют, при последующем добавлении к фильтрату раствора ЖАК и нескольких кристаллов свинца ацетата появляется фиолетовое окрашивание.
Далее устанавливали
количественное содержание суммы дубильных веществ в пересчете на галловую кислоту. В ходе проведенного исследования расчет содержания ДВ при использовании метода спектрофотометрии проводили по следующей формуле:
20000
Ч1ссл
Лст-а-10-100-50-(100-ИО Лст-а-(100-И^)" где X - содержание ДВ, %;
Аиссл - оптическая плотность исследуемого раствора; Аст - оптическая плотность стандарта (галловая кислота); а - масса навески, г;
W - влажность лекарственного сырья, %.
Расчет содержания дубильных веществ, при использовании перманганатометрии производили по следующей формуле:
метода
где V - объем калия перманганата раствора 0,02 М, израсходованного на титрование водного извлечения, мл;
VI - объем калия перманганата раствора 0,02 М, израсходованного на титрование в контрольном опыте, мл;
0,004157 - количество дубильных веществ, соответствующее 1 мл калия перманганата раствора 0,02 М (в пересчете на танин), г;
а - навеска сырья или лекарственного растительного препарата, г;
Ж - влажность лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата, %;
250 - общий объем водного извлечения, мл;
25 - объем водного извлечения, взятого для титрования, мл.
Результаты определения ДВ в успокоительном сборе №2 с использованием различных методов представлены в таблице 1.
Исходя из данных таблицы 1, можно заметить, что результаты исследования отличаются в 3 раза. Проанализировав работы других авторов
по исследованию ДВ различными методами, можно говорить о том, что такое различие является адекватным для выбранных нами методов [7]. Результаты
перманганатометрического и
спектрофотометрического определения всегда имеют различие в 2 и более порядка. Это может быть связано в первую очередь с высокой способностью калия перманганата окислять многие природные соединения, а также неточностью перехода
окраски раствора при титровании и, следовательно, трудностью фиксации конечной точки титрования, зависимостью результатов от скорости перемешивания титруемого раствора и освещения и других субъективных факторов со стороны исследователя [9].
Таблица 1. Содержание ДВ в сборе, с использованием различных методов*
Метод Спектрофотометрия Перманганатометрия
Содержание ДВ, % 1,56±0,8% 4,95±0,21%.
*Примечание: - в таблице дано среднее значение 6 определений
Заключение. Таким образом, на является наиболее предпочтительным для
основании результатов исследования и определения ДВ в составе
наших суждений, можно сделать вывод о успокоительного сбора №2, а также для
том, что метод спектрофотометрии его стандартизации по ДВ.
Литература
1. Быстрова М.Н. Исследование влияния режимов экстракции на выход биологически активных веществ успокоительного сбора №3 // Современные проблемы науки и образования. - 2012. - № 3 (6). - С. 30-35.
2. Вещества, содержащиеся в лечебных травах // Лечебные травы 2007-2016. - 18.12.2015. URL: http://www.lsosl.ru/lechebnye-travy
3. Гринько Е.Н. Обоснование выбора метода количественного определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье // Здоровье и образование в XXI веке: сборник научных тезисов и статей. - М., 2010. - Т. 12, № 2. - С. 172-173.
4. Гринько Е.Н. Требования Российской и Европейской фармакопей к методикам определения содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье // Фармация. - 2010. - № 5 (8). - С. 49-53.
5. Государственная фармакопея. XIII издание. - М.: Москва, 2015. - 1004 с.
6. Данилова Н.А., Попов Д.М. Количественное определение дубильных веществ в корнях щавеля конского методом спектрофотометрии в сравнении с методом перманганатометрии // Вестник ВГУ. - 2004. - № 2 (4). - С. 179-182.
7. Иванов В.В., Денисенко О.Н. Количественное определение дубильных веществ в траве горца сахалинского, интродуцированного в условиях кавказских минеральных вод, различными аналитическими методами // Современные проблемы науки и образования. -2014. - № 6. - С. 45-50.
8. Рябинина Е.И., Зотова Е.Е., Пономарёва Н.И. Потенциометрическое определение дубильных веществ в лекарственном растительном сырье // Фармация. - 2012. - № 2 (8). - С. 8-10.
9. Рябинина Е.И., Зотова Е.Е., Ветрова Е.Н. и др. Сравнение химико-аналитических методов определения танидов и антиоксидантной активности растительного сырья // Аналитика и контроль. - 2011. - № 2 (15). - С. 202-208.
10. Тринеева О.В., Сливкин А.И. Применение различных методов при определении дубильных веществ в листьях крапивы // Фармация. - 2014. - № 1 (8). - С. 16-20.
