CC BY
91
№ 4 - 2011 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 615.22:543.257.5
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИОДАРОНА В ЛЕКАРСТВЕННЫХ
ФОРМАХ
ВОЛЬТАМПЕРОМЕТРИЧЕСКИМ
МЕТОДОМ
С.В. Терентьева, Е.А. Ивановская, С.В. Чернышева
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития (г. Новосибирск)
Предлагается вольтамперометрическая методика количественного определения амиодарона в лекарственных формах: таблетках и инъекционных растворах. Методика апробирована на модельных смесях, а также на четырех сериях инъекционных растворов и 11 -ти сериях таблеток, валидирована по фармакопейной спектрофотометрической методике.
Ключевые слова: амиодарон, вольтамперометрия, спектрофотометрия, таблетки, инъекционные растворы, контроль качества, валидация
Терентьева Светлана Владимировна — кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры организации здравоохранения и общественного здоровья ФПК и ППв ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития, e-mail: [email protected], [email protected]
Ивановская Елена Алексеевна — доктор фармацевтических наук, профессор, заведующая кафедрой фармацевтической химии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития, e-mail: el-
Чернышёва Светлана Викторовна — соискатель кафедры организации здравоохранения и общественного здоровья ФПК и ППВ ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития, e-mail: [email protected]
В настоящее время при разработке новых лекарственных препаратов наблюдается тенденция к снижению дозы лекарственного вещества в лекарственной форме за счет использования современных технологических приемов производства и использования вспомогательных веществ. В связи с этим актуальными становятся поиск и выбор современных высокочувствительных и селективных методов контроля качества лекарственных средств, к которым относят вольтамперометрию. Поскольку кардиопрепараты, в том числе антиаритмические лекарственные средства, в общем числе
лекарственных средств занимают значительное место, представляет интерес исследование возможности применения вольтамперометрии в оценке качества готовых лекарственных форм. Самым распространенным антиаритмическим лекарственным средством является амиодарон, который выбрали в качестве объекта исследования.
В соответствии с Государственным реестром лекарственных средств амиодарон выпускают в виде инъекционной и таблетированной лекарственных форм состава:
1. раствор для инъекций: амиодарона гидрохлорида — 150 мг;
бензилового спирта — 60 мг; полисорбата 80-300 мг; воды для инъекций — 3,0 мл; азот quantum satis на одну ампулу;
2. таблетки: амиодарона гидрохлорида — 200 мг; лактозы моногидрата 200 меш. — 71,0 мг; крахмала кукурузного — 66,0 мг; поливидона K90F — 6,0 мг; кремния коллоидного безводного диоксида — 2,4 мг; стеарата магния — 4,6 мг на одну делимую таблетку массой 350,0 мг [1].
Для создания модельных смесей использовали субстанции, приобретенные по каталогу Sigma-Aldrich. Модельные смеси инъекционного раствора готовили из расчета на 100 мл. В соответствии с данными по статистической обработке результатов исследования амиодарона в модельных растворах стандартного образца, оптимальная концентрация для количественного анализа лекарственного средства составляет 0,1-100 мг/мл. Модельные смеси готовили на воде бидистиллированной и анализировали вольтамперометрически в соответствии с запатентованной методикой [4], при этом установили, что компоненты модельной смеси не оказывают мешающего воздействия при определении амиодарона, так как форма, границы и локализация сигнала лекарственного средства не претерпевали изменений, при этом соблюдалась линейная зависимость силы тока в электролитической ячейке от концентрации амиодарона. С целью проверки воспроизводимости, точности, чувствительности и линейности результатов определения амиодарона по разработанной методике готовили растворы модельных смесей в объеме 100 мл, в которых изменяли содержание амиодарона (0,5; 1,0; 25,0; 50,0; 75,0; 100,0; 125,0; 150,0; 175,0; 200,0 мг), тогда как количество бензилового спирта и полисорбата оставалось постоянным и составляло 2,0 и 2,7 г соответственно. Затем, в соответствии с предлагаемой методикой, выполнили количественное определение амиодарона в растворах модельных смесей: в кварцевый стаканчик емкостью 20 мл помещали 10 мл фонового электролита, для исключения мешающего влияния кислорода раствор деаэрировали азотом в течение 30 с и проводили электролиз при следующих условиях: потенциал электролиза — (—1,2) В, время электролиза — 300 с. Фиксировали вольтамперограмму при постояннотоковой форме развертки потенциала со скоростью 300 мВ/с. Отсутствие посторонних сигналов на поляризационной кривой свидетельствовало о чистоте фона, затем добавляли 0,01 мл исследуемого раствора амиодарона, перемешивали и проводили электрохимическое накопление при тех же условиях. Аналитический сигнал амиодарона регистрировали как пробу в диапазоне потенциалов от 0,1 до 0,3 В относительно хлор-серебряного электрода. Аналогично фиксировали вольтамперограмму для пробы с добавкой раствора стандартного образца амиодарона.
Содержание амиодарона в граммах рассчитывали по формуле:
v А с-уг-у, v
■ (h-h) v> ‘
где II — высота сигнала амиодарона на кривой пробы, мкА; 12 — высота сигнала амиодарона на кривой пробы с добавкой, мкА; C — концентрация аттестованного раствора стандартного образца амиодарона, мг/мл; VI — объем исследуемого раствора, помещенный в электролитическую ячейку, мл; V2 — объем аттестованного раствора стандартного образца амиодарона, помещенный в электролитическую ячейку, мл; Vз — объем приготовленного исследуемого раствора амиодарона, мл; N — разведение.
Полученные результаты количественного определения статистически обработали с использованием оценки параметров линейной зависимости (табл. 1). Исходя из статистических данных, коэффициент линейности составляет 0,999, что свидетельствует о воспроизводимости и точности результатов, предлагаемая методика адекватно отражает изменения в концентрации определяемого вещества, что свидетельствует о ее специфичности.
Таблица 1
Расчет и статистическая оценка параметров линейной зависимости между количеством амиодарона, содержащимся в навеске для приготовления модельного раствора и определенным вольтамперометрическим методом
({ = 8; 1 [(Р; $ при P = 95 %] = 2,23)
X» п п Фнрыа- вагоговшепь X У 1 {М) О < Дх Дг‘100 X г
] МоделшыЙ рассерди* КИКЕЦНЙ 90,15 $1.10 0,993 (0,020) 1,600 алт 3.5Е0 1,050 2.341 2,60 0.999
1 Модельный раствор, прнго-ЮЕ-ПСКН ы к я е к ддя таалсгщНзЬшЯ! 275.00 275.5* 0,^97 <0.024) 1,-173 (7316) 23,061 3,452 1.Ш 2,80 0,999
Для испытания вольтамперометрической методики количественного определения амиодарона в анализе лекарственных форм заводского производства использовали четыре серии инъекционной лекарственной формы (табл. 2), для чего 2 мл инъекционной лекарственной формы помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл спирта 95 %, перемешивали в течение 10 мин, доводили объем раствора тем же спиртом до метки. 1 мл полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора спиртом 95 % до метки и перемешивали. Полученный раствор исследовали вольтамперометрически. Поскольку аналитические сигналы амиодарона на вольтамперных кривых исследуемых растворов не отличались от сигналов, соответствующих стандартному образцу и модельной смеси, пришли к заключению, что компоненты лекарственной формы не мешают аналитическому сигналу определяемого вещества. Валидацию результатов вольтамперометрического анализа осуществили по спектрофотометрической фармакопейной методике количественного определения, при этом исследовали каждую серию в десяти повторностях: 2 мл инъекционной
лекарственной формы помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл спирта 95 %, перемешивали в течение 10 мин, доводили объем раствора тем же спиртом до метки. 1 мл полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора спиртом 95 % до метки и перемешивали. Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 244 нм с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали спирт 95 %. Параллельно измеряли оптическую плотность аттестованного раствора
стандартного образца амиодарона [2]. Содержание амиодарона в мг на 1 мл (Х) вычисляли по формуле:
Д сг0-100 100 1000 _ Д сг01000
где D1 — оптическая плотность испытуемого раствора; Do — оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца амиодарона; a0 — навеска рабочего стандартного образца амиодарона в граммах; a1 — объем лекарственной формы амиодарона, взятой для анализа, в мл. На основании результатов статистической обработки установили, что коэффициент корреляции во всех выборках составляет не менее 0,99 (табл. 2), что свидетельствует о линейности при определении амиодарона в инъекционной лекарственной форме вольтамперометрическим и спектрофотометрическим методами.
Таблица 2
Расчет и статистическая оценка параметров линейной зависимости между количеством амиодарона в инъекционной лекарственной форме для инфузий 150 мг в 3 мл, определенным спектрофотометрическим и вольтамперометрическим
методами
(Г = 8; 1 [^; 0 при P = 95 %] = 2,23)
№ ФврМЯ- у ь (АЪ) *<ДЯ) SI Д* Лг-ЮС т
*
1 п^Санофи -А В снгнс Франс-. Франаня. «ряя 1442, № $ 51,565 54, £35 0,774 (0,103) 14,932 (5,324) ■4,724 10~: ',236 7,215 13,99 0.986
2 кСанофы - Ав снгнс Франс ФранайЯ, ■серия ] 53 £, К 6 48,«0 52,бт0 1,113 (0,091) 1,458 (4,448) 5,695 10-; 1,850 4,191 8,62 0,995
3 «Санофа-Агашс Ф]МНС", Ф^мнаия, ссрн.ч ] 541. Уз 6 50,065 52,420 1,024 (0.073) 1,128 (3.636) 1,056 10-1 1,670 3,724 7,43 0.996
4 «Санлфв-Аивтяс Франс■>, Франция, ■Мрия 1616, Уз 6 50.305 *2.505 1.056 (0,103) 0.546 (5.167) 1,516 10-* 2,300 51,0 10,20 о^:
Модельные смеси для таблетированной лекарственной формы готовили в количестве, соответствующем массе одной таблетки, из которых 0,17 г растворяли в воде бидистиллированной в смеси с 95 % этанолом в мерной колбе на 100 мл и анализировали вольтамперометрически в соответствии с запатентованной методикой [1], при этом установили, что компоненты модельной смеси, так же как и в случае инъекционной лекарственной формы, не влияют на высоту, форму и локализацию сигнала амиодарона в сочетании с сохранением линейного характера зависимости силы тока в электролитической ячейке от концентрации амиодарона (табл. 1). С целью проверки воспроизводимости, точности, чувствительности и линейности результатов определения амиодарона по разработанной методике готовили модельные смеси, в которых изменяли содержание амиодарона (50,0; 100,0; 150,0; 200,0; 250,0; 300,0; 350,0; 400,0; 450,0;
500.0 мг), тогда как количество вспомогательных веществ составляло: лактозы
моногидрата 200 меш. — 71,0 мг; крахмала кукурузного — 66,0 мг; поливидона К90F —
6.0 мг; кремния коллоидного безводного диоксида — 2,4 мг; стеарата магния — 4,6 мг. Полученные навески помещали в мерную колбу на 100 мл, добавляли 50 мл 95 % этанола, перемешивали 10 мин и доводили этим же этанолом до метки, центрифугировали 10 мин и в соответствии с предлагаемой методикой выполняли количественное определение амиодарона в растворе. Полученные результаты количественного определения
статистически обрабатывали с использованием оценки параметров линейной зависимости (табл. 1). Исходя из статистических данных, коэффициент линейности составляет 0,999, что свидетельствует о воспроизводимости и точности результатов, а также специфичности подобранных условий анализа, так как предлагаемая методика адекватно отражает изменения в концентрации определяемого вещества.
Испытание вольтамперометрической методики количественного определения амиодарона выполняли на одиннадцати сериях лекарственных форм заводского производства (табл. 3). При получении вольтамперных кривых исследуемых растворов установили, что форма и локализация аналитических сигналов не отличаются от таковых для раствора стандартного образца и модельных смесей, при этом компоненты лекарственной формы не мешают аналитическому сигналу определяемого вещества. Валидацию полученных результатов выполнили аналогично инъекционной лекарственной форме: около 0,17 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл спирта 95 %, перемешивали в течение 10 мин, доводили объем раствора тем же спиртом до метки, перемешивали и фильтровали через бумажный фильтр, отбрасывая первые 20 мл фильтрата. 1 мл фильтрата помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора спиртом 95 % до метки и перемешивали. Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 244 нм с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали спирт 95 %. Параллельно измеряли оптическую плотность раствора рабочего стандартного образца амиодарона [3].
Содержание амиодарона, перешедшего в раствор, в граммах (Х) вычисляли по формуле:
где D1 — оптическая плотность испытуемого раствора; D0 — оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца амиодарона; a0 — навеска рабочего стандартного образца амиодарона в граммах; a1 — навеска измельченных таблеток амиодарона в граммах; b — средняя масса таблетки в граммах.
На основании результатов статистической обработки установили, что коэффициент корреляции во всех выборках составляет не менее 0,99 (табл. 3), что свидетельствует о линейности результатов количественного определения амиодарона вольтамперометрическим и спектрофотометрическим методами.
Таблица 3
Расчет и статистическая оценка параметров линейной зависимости между количеством амиодарона в таблетированной лекарственной форме, определенным спектрофотометрическим и вольтамперометрическим методами
(f = 8; t [(P; f) при P = 95 %] = 2,23)
.N* л п Фирма- ИЇГОЇСЕИІМЬ X У Ь <Д£) a<&z) s(2 Дх At-10( X r
1. ■ АШЇСОАРОН МО iff» (Ї&ЗО, серкл 110310, ЗАО tCci^su Росс») 20J.“li Д06.&0І 0.9 ІЗ (PJ073) Н,766 (14,823) 1,975 io-= '.319 16,321 S ,09 0.99І
•у КОРЛАРОН МО иг» (№30, cepnjrOVOlO, ■.(Санофй- Абєїтїиі ФріНїч, Венгрия* 202,390 206.375 0,476 (<М>&1) 2£.9£9 (16,33?) 6.94S 10-- 6,767 19,551 9,66 0,993
3. КОРДАРОН 200 яг" (Ж ЗО. серия Ю£4; <tCl№j№ АЄЄИЇЙІ ФрІИС-. Фрднцнл) 201.300 2 С 4.665 ОД 19 (0,0 J1) 2 J.S90 (16,333) 3.2“4 1СГ3 10,86 24,233 12,04 0,990
А. «КОРДАРОН МОыг»(К30. серая 10S5, «Санофн- АбЄНТИЇ Фрі НС", Франция) 163^60 197,095 0.95 “ №045) 11.495 (В .651) 4,764 10-; 4.252 9,452 -f;S9 0.99%
5. КОРДАГОН 200 ыг»(Рй30, cepiu 10S6, ■іСанвфн-Авентнс Фрі не-. Фр лиши', 159,640 201.880 L.045 (0Л13) 6.691 (23,629) 1,738 І О"5 10,63 23,721 11,88 0,993
6. ^кордарон 200мГ'>(\»30= cspjpi 105’, ^Санофа-Аеємти;: Фрі не ■■. Франпкя) 200,]]? 203,35 0,9 і 0 №111) 13.14' (22,212) 1,727 ю-= 10.99 1 24.5 10 12,25 0.9S9
АМИОДАРОН 200ир>(\* 10. серия 906 £-&. ОАО "PprSHTTTIJ^ Россия) 200.225 204.460 0.954 <0,099) 13.465 (19,805) 1.104 ІО-: 9,765 21."'!? 10,88 0.991
S. АМИОДАРОН 200 ыг>[№30, серия 009 G 113. ОАО -Оргазіііііа^. Ром «*) 19S,020 202,175 1,026 [0,0 SO) 1,073 (15.S5-I) 2,S4j J0'2 ■,:65 16,200 SIS 0,595
9. АМИОДАРОН 200 яг+(\* 30, cep fm 04$] 10S, ОАО ■ Оргян-да^л, Россия) 200.300 204.610 0.9 Г (0,067) 6.9*0 (13,515) 2.929 io-з 6.442 14,365 7Д7 0,996
10. АМИОДАРОН 2 00 mt»(.V»30, серия 04911 OS. ОАО ■Органика», РйІСИЯ} 20J .155 203.500 0.966 (0,037) 9.065 T.4S3) 1.651 іо--! 3,642 E. J 21 4.04 0,999
11 ■АМИОДАРОН 200 №(№34, серій 052 1 10S. ОАО ■■ Оргазыка if, Россия) 201,640 203,175 1,022 (0,067) 2,950 (15,453) 5,S:j 10-3 6,189 13,£03 6,85 0,99'
Таким образом, на основании выполненного исследования пришли к заключению, что предлагаемая нами вольтамперометрическая методика является
высокочувствительной, селективной и точной, при этом результаты, полученные при количественном определении амиодарона вольтамперометрическим методом, коррелируют с результатами спектрофотометрического анализа, что позволяет рекомендовать вольтамперометрию для анализа инъекционных и таблетированных лекарственных форм с амиодароном.
Список литературы
1. Амиодарон [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных
средств. — Режим доступа :
http://grls.rosminzdrav.m/grls.aspx?s=%u0430%u043c%u0438%u043e%u0434%u0430%u0440 %u043e%u043d
2. ФСП 42—0133—1144—01. АМИОДАРОН.
3. ФСП 42—0133—1145—01. АМИОДАРОН таблетки 0,2 г.
4. Пат. 2246722 Российская Федерация. Способ определения амиодарона (кордарона) методом инверсионной вольтамперометрии / Терентьева С.В., Автунич Е.В., Ивановская Е.А., опубликован 20.02.2005, Бюл. № 5.
QUANTITATIVE DEFINITION AMIODARONE IN MEDICINAL FORMS BY COULOMETRY METHOD
S.V. Terentieva, E.A. Ivanovskaya, S.V. Chernysheva
SEIHPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment» (c. Novosibirsk)
The coulometry technique of quantitative definition of amiodarone in medicinal forms is offered: tablets and injection solutions. The technique is approved on modeling admixtures, and also on four series of injection solutions and 11 series of tablets, the validization is on officinal spectophotometerical technique.
Keywords: Amiodaronum, coulometry, a spectophotometery, tablets, injection solutions, quality assurance, validization
About authors:
Terentyeva Svetlana Vladimirovna - candidate of pharmaceutical sciences, assistant professor of organization of public health services and public health chair at FAT and PCE SEI at HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», an e-mail: [email protected], [email protected]
Ivanovskaya Elena Alekseevna - doctor of pharmaceutical sciences, professor, of head of pharmaceutical chemistry chair SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment» , an e-mail: [email protected]
Tchernysheva Svetlana Viktorovna - the competitor of organization of public health services both public health chair at FAT and PCE SEI at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», an e-mail: [email protected]
List of the Literature:
1. Amiodarone [Electron resource]//the State register of medical products. - an access regimen:
http://grls.rosminzdrav.ru/grls.aspx?s=%u0430%u043c%u0438%u043e%u0434%u0430
%u0440%u043e%u043d
2. OIE 42-0133-1144-01. ami odarone.
3. OIE 42-0133-1145-01. Amiodarone, tablets of 0,2
4. Stalemate. 2246722 the Russian Federation. A way of definition of Amiodarone (amiodarone hydrochloride) a method i инверсионной inversion coulometry / Terentyeva S. V, Avtunich E. V, Ivanovskaya Е. А, Bulletion is published 2/20/2005. №
5.
