CC BY
10Ветеринарный врач. 2022 . № 4 . С. 43-47 The veterinarian. 2022; (4):43-47.
Научная статья
УДК: 615.244:636.2.034
DOI 10.33632/1998-698Х.2021 43 47
Количественное изменение желчных кислот при гепатотропной терапии у овец
Владимир Сергеевич Понамарёв1 , Александр Михайлович Лунегов2
1 Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины, кафедра фармакологии и токсикологии, Санкт-Петербург, Россия, psevdopyos@mail.ru, orcid.org/ 0000-0002-6852-3110 2Лунегов Александр Михайлович, Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины, кафедра фармакологии и токсикологии, Санкт-Петербург, Россия, a.m.lunegov@mail.ru, orcid.org/ 0000-0003-4480-9488
Автор, ответственный за переписку: Понамарёв Владимир Сергеевич, psevdopyos@mail.ru
Аннотация. Публикация посвящена поисковым исследованиям по количественному изменению жёлчных кислот при гепатотропной терапии у овец препаратами «Гепатон-вет» и «Гепатон-вет-М» (разработчик- ФГБОУ ВО «СПбГУВМ»). В настоящее время концепция применения, эффективности и безопасности гепатотропных средств при лечении гепатопатий различного генеза еще не является окончательной, что обусловлено крайне редкими клиническими исследованиями на эту тему, адекватными современными принципами доказательной медицины. Тем не менее, исследования в данной тематике продолжаются, так как изыскание новых лекарственных средств данной группы является актуальным.Патологии гепатобилиарной системы у овец являются доминирующими среди заболеваний неинфекционной этиологии. Некоторыми авторами утверждается, что поражённость составляет до 30% поголовья, что связано как с нарушением технологии кормления и содержания, так и с объективными трудностями диагностики, следовательно, и коррекции данных патологий. Основная цель исследования -определить влияние экспериментальной гепатотропной терапии на количество желчных кислот для определения её потенциальной эффективности. Исследование проводилось на территории Псковской области в частном секторе. На 7 день эксперимента количество общих желчных кислот увеличилось на 14,2% и 21,4% соответственно, на 14 день- на 40% и 60%, в конце опыта- 64,2% и 114,2 % по сравнению с контролем. Начиная с 14 дня терапии количество жёлчных кислот в опытных группах соответствовало референсным значениям. Полученные результаты подтверждают гипотезу о клинической эффективности препаратов на основе желчных кислот и потенцировании их действия L-карнозином при патологиях гепатобилиарной системы. Концентрация желчных кислот в плазме является особо чувствительным методом выявления патологий печени и оценки эффективности препаратов с гепатопротекторной активностью.
Ключевые слова: овцы, гепатопатия, желчные кислоты, гепатотропная терапия, гепатобилиарная
система
Quantitative changes in bile acids during hepatotropic therapy in sheep
Vladimir Sergeevich Ponamarev 1 , Alexander Mikhailovich Lunegov 2
1St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, Department of Pharmacology and Toxicology, St. Petersburg, Russia, psevdopyos@mail.ru, orcid.org/ 0000-0002-6852-3110
2Alexander Mikhailovich Lunegov, St. Petersburg State University of Veterinary Medicine, Department of Pharmacology and Toxicology, St. Petersburg, Russia, a.m.lunegov@mail.ru, orcid.org/ 0000-0003-4480-9488 Corresponding author: Ponamarev Vladimir Sergeevich, psevdopyos@mail.ru
Abstract. The publication is devoted to exploratory studies on the quantitative changes in bile acids during hepatotropic therapy in sheep with the preparations "Hepaton-vet" and "Hepaton-vet-M" (developer - Saint Petersburg State University of Veterinary Medicine). At present, the concept of the use, efficacy and safety of hepatotropic agents in the treatment of hepatopathy of various origins is not yet final, due to extremely rare clinical studies on this topic, adequate to modern principles of evidence-based medicine. However, research in this area continues, as the search for new drugs in this group is relevant. Pathologies of the hepatobiliary system in sheep are dominant among diseases of non-infectious etiology. Some authors claim that the incidence is up to 30% of the livestock, which is associated both with a violation of the technology of feeding and keeping, and with
objective difficulties in diagnosing, and therefore, correcting these pathologies. The main goal of the study is to determine the effect of experimental hepatotropic therapy on the amount of bile acids in order to determine its potential effectiveness. The study was conducted on the territory of the Pskov region in the private sector. On the 7th day of the experiment, the amount of total bile acids increased by 14.2% and 21.4%, respectively, on the 14th day - by 40% and 60%, at the end of the experiment - 64.2% and 114.2% compared with the control. Starting from the 14th day of therapy, the amount of bile acids in the experimental groups corresponded to the reference values.The obtained results confirm the hypothesis of the clinical efficacy of drugs based on bile acids and potentiation of their action by L-carnosine in pathologies of the hepatobiliary system. The concentration of bile acids in plasma is a particularly sensitive method for detecting liver pathologies and evaluating the effectiveness of drugs with hepatoprotective activity.
Keywords: sheep, hepatopathy, bile acids, hepatotropic therapy, hepatobiliary system
Введение. В настоящее время концепция применения, эффективности и безопасности ге-патотропных средств при лечении гепатопатий различного генеза еще не является окончательной, что обусловлено крайне редкими клиническими исследованиями на эту тему, адекватными современными принципами доказательной медицины. Тем не менее, исследования в данной тематике продолжаются, так как изыскание новых лекарственных средств данной группы является актуальным [9, 11].
Желчные кислоты оцениваются как сложные метаболические интеграторы и сигнальные факторы, а не только как солюбилизаторы липидов и регуляторы гомеостаза. Поэтому неудивительно, что ряд сигнальных путей, активируемых желчными кислотами, стали привлекательными терапевтическими мишенями для диагностики и лечения метаболических расстройств. Общепризнанно, что механизм действия урсодезоксихолиевой кислоты (УХДК) можно объяснить несколькими различными процесс-сами, которые, по-видимому, одинаково направлены на минимизацию вредного действия накопленных гидрофобных желчных кислот при патологиях гепатобилиарной системы. Поскольку гидрофобные желчные кислоты являются прооксидантами, новые данные in vitro позволяют предположить, что УДХК может достоверно влиять на пул жёлчных кислот в организме. L-Карнозин — дипептид, состоящий из остатков аминокислот Р-аланина и гистидина, который достоверно усиливает ингибирование процессов перекисного окисления липидов как одного из звеньев патогенеза гепатитов, стимулировать антиоксидантную защиту и мощность эндогенной антиокислительной системы организма. Данные соединения являются одними из перспективнейших соединений с гепатотропным эффектом [2].
Печень обладает большой резервной емкостью, а это означает, что прежде, чем проявятся явные признаки её дисфункции, должно произойти обширное повреждение структурно-функциональных единиц. Поскольку функция печени снижается после обширного повреж-
дения, в крови и тканях накапливаются токсичные метаболиты, в т.ч. желчные кислоты [4, 6].
Патологии гепатобилиарной системы у овец являются доминирующими среди заболеваний неинфекционной этиологии. Некоторыми авторами утверждаются, что поражённость составляет до 30% поголовья, что связано как с нарушением технологии кормления и содержания, так и с объективными трудностями диагностики, следовательно, и коррекции данных патологий [3].
Основная цель исследования - определить влияние экспериментальной гепатотроп-ной терапии на количество желчных кислот для определения её потенциальной эффективности.
Материалы и методы. Исследование проводилось на территории Псковской области в частном секторе. Для включения в эксперимент были проведены скрининговые исследования плазмы крови 80 овец (подобранных по принципу аналогов) на количество общих желчных кислот. Отбор крови осуществлялся согласно правилам асептики из ярёмной вены с использованием 5 мл вакуумных пробирок «Vacuette Premium» с диоксидом кремния и разделительным гелем. Для определения количества желчных кислот использовался набор для полуавтоматических анализаторов TBA (Китай).
Критериями включения являлось значение желчных кислот в сыворотке крови меньшее 15 мкмоль/л (низший предел референсных значений, предоставленных исследующей лабораторией). В результате скрининговых исследований было выявлено 33 животных, удовлетворяющих условиям включения в эксперимент, которые были разделены на три паритетные группы.
Для первой группы (n=11) в качестве гепатотропной терапии назначался комплексный препарат на основе флавоноидов расторопши и урсодезоксихолиевой кислоты «Гепатон-вет» согласно временному наставлению по использованию препарата в течение 21 дня (разработчик-ФГБОУ ВО «СПбГУВМ») [7].
Во второй группе использовался комплексный препарат на основе урсодезоксихо-лиевой кислоты и L-карнозина «Гепатон-вет-М» согласно временному наставлению по использо-
ванию препарата в течение 21 дня разработчик-ФГБОУ ВО «СПбГУВМ») [8].
Оба препарата вводились перорально, наличие сиропа шиповника в обоих препаратах обеспечивало вкусовые характеристики для практически самостоятельного приёма препарата животными. Третья группа являлась интактной.
Каждые 7 дней у животных производилось исследование крови на количественный анализ желчных кислот с целью контроля эффективности гепатотропной терапии. Выявленные в процессе экспериментов количественные показатели проходили обработку с применением ком-
плекса ПО <^айБЙса 6.0». Данные обозначаются как средний показатель «X», стандартная погрешность среднего показателя - «т». Достоверность различий между сериями выявляли посредством ^критерия Стьюдента [10].
Результаты исследований. В ходе эксперимента были получены данные о достоверном различии количества желчных кислот в сыворотке крови у разных групп (таблица 1). Референсные значения лаборатории - от 18 до 166 мкмоль/л.
Таблица 1 - Количество желчных кислот в сыворотке крови овец в течение эксперимента
(мкмоль/л)
Интактные животные Препарат «Гепатон-вет» Препарат «Гепатон-вет-М»
До начала эксперимента 14 ± 2 13 ± 1 14 ± 1
7 день 14 ± 1 16 ± 2 17 ± 1
14 день 15 ± 2 21 ± 3* 24 ± 2*
21 день 14 ± 2 23 ± 2* 30 ± 3*
* — достоверные отличия от интактных животных (р<0,05)
Таким образом, на 7 день эксперимента количество общих желчных кислот увеличилось на 14,2% и 21,4% соответственно, на 14 день- на 40% и 60%, в конце опыта- 64,2% и 114,2 % по сравнению с контролем. Начиная с 14 дня терапии количество жёлчных кислот в опытных группах соответствовало референсным значениям.
Отсутствие значительных изменений в количестве желчных кислот группы связано с особенностью их метаболизма (энтерогепа-тическая циркуляция). После синтеза в печени соли желчи выделяются в желчные протоки, откуда они либо попадают в кишечник, либо хранятся в желчном пузыре. При приеме пищи холецистокинин вызывает сокращение и опорожнение желчного пузыря, вызывая секрецию желчи через желчные протоки в кишечник, где происходит эмульгирование питательных веществ. Подавляющее большинство выделяемых желчных кислот (95%) затем перемещается по портальной циркуляции обратно в печень[3]. Оставшиеся 5% выводятся с калом и заменяются вновь синтезированными желчными кислотами в печени из холестерина.
Экзогенное внесение желчных кислот способно стабилизировать процессы энтероге-патической циркуляции и повысить уровень кислот до пределов физиологической нормы, что позволяет стимулировать как холеретическую, так и холекинетическую функцию гепато-цитов[7].
Более выраженный эффект препарата
«Гепатон-вет-М» связан с наличием в его составе L-карнозина, определяющим его хелатирующую и антиоксидантную функции. Карнозин также способен действовать как антигликирующий агент, снижая скорость образования продвинутых конечных продуктов гликирования.
Заключение. За последние годы большое внимание отведено желчным кислотам, не только как конечным продуктам обмена холестерина и основным компонентам желчи, но и их роли при ряде патологических состояниях организма. Полученные различными исследователями данные показывают, что они могут быть маркерами дифференциальной диагностики между гепатопатиями различного генеза, что делает их одной из перспективных диагностических моделей.
Полученные результаты подтверждают гипотезу о клинической эффективности препаратов на основе желчных кислот и потенцировании их действия L-карнозином при патологиях гепатобилиарной системы.
Основываясь как на экспериментальных, так и на данных из научной литературы, можно сделать вывод, что препараты на основе желчных кислот имеют в перспективе крайне широкий спектр применения для фармако-коррекции различных патологий гепатобили-арной системы.
Концентрация желчных кислот в плазме является особо чувствительным методом выявления патологий печени и оценки эффективности препаратов с гепатопротекторной активностью.
Список источников
1. Гриневич, В. Б. Физиологические эффекты желчных кислот / В. Б. Гриневич, Е. И. Сас // Русский медицинский журнал. Медицинское обозрение. - 2017. - Т. 1. - № 2. - С. 87-91.
2. Губергриц, Н. Б. Желчные кислоты, неалкогольная жировая болезнь печени и поджелудочной железы: связанные урсодезоксихолевой кислотой? / Н. Б. Губергриц, Н. В. Беляева, Т. Л. Можина // Вестник клуба панкреатологов. - 2020. - № 4(49). - С. 41-48.
3. Долгова, Е. Н. Секреторная функция печени при действии желчных кислот : специальность 03.00.13 : автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Долгова Елена Николаевна. - Киев, 1997. - 22 с.
4. Макарчук, Н.Е. Изменение спектра желчных кислот в желчи крыс при экспериментальном хроническом алкогольном панкреатите / Н. Е. Макарчук, З. А. Горенко, О. А. Гринченко [и др.] // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2013. - № 2. - С. M19-M19a.
5. Миннулина, З.Ш. Количественное соотношение желчных кислот в сыворотке крови здорового взрослого человека / З. Ш. Миннуллина, С. В. Кияшко, К. С. Гусева, Р. Г. Сайфутдинов // Medicus. - 2015. - № 5(5). - С. 19-21.
6. Мироджов, Г.К. Влияние урсодезоксихолевой кислоты на содержание желчных кислот при неалкогольной жировой болезни печени / Г. К. Мироджов, Н. А. Алимова, А. Х. Кадыров, З. Н. Расулова // Здравоохранение Таджикистана. - 2017. - № 4(335). - С. 19-23.
7. Патент № 2742414 C1 Российская Федерация, МПК A61K 31/198, A61K 31/355, A61K 31/575. Препарат комплексный с гепатопротекторной активностью для крупного рогатого скота : № 2020120624 : заявл. 16.06.2020 : опубл. 05.02.2021 / В. С. Понамарев, Н. Л. Андреева, О. С. Попова, В. А. Барышев.
8. Патент № 2762221 C1 Российская Федерация, МПК A61K 31/198, A61K 31/355, A61K 36/28. Препарат комплексный с гепатопротекторной активностью для овец : № 2020141046 : заявл. 11.12.2020 : опубл. 16.12.2021 / В. С. Понамарев, А. М. Лунегов, Н. Л. Андреева [и др.] ; заявитель Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины ФГБОУ ВО СПбГУВМ.
9. Понамарёв, В.С. Биохимические показатели крови экспериментальных животных при лечении препаратом "Гепатон" и препаратами сравнения токсического поражения печени, вызванного дихлорэтаном / В. С. Понамарев, Н. Л. Андреева, Е. С. Королева, А. В. Кострова // Биотехнология: взгляд в будущее, Ставрополь, 16 апреля 2020 года. - Ставрополь: Ставропольский государственный медицинский университет, 2020. - С. 19-21.
10. Попова, О. С. Оценка токсичности с учетом непрогнозируемой неопределенности доклинических и клинических исследований в области ветеринарии / О. С. Попова // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2021. - № 2. - С. 79-81. - DOI 10.17238/issn2072-6023.2021.2.79.
11. Peculiarities of the manifestation of bronchial asthma in cats in metropolis environment / L. Sabirzianova, P. Anipchenko, A. Yashin [et al.] // Journal of Animal Science. - 2019. - Vol. 97. - No S3. -P. 214-215. - DOI 10.1093/jas/skz258.439.
References
1. Grinevich, V. B. Physiological effects of bile acids / V. B. Grinevich, E. I. Sas // Russian Medical Journal. Medical review. - 2017. - T. 1. - No. 2. - S. 87-91.
2. Gubergrits, N. B. Bile acids, non-alcoholic fatty liver and pancreas disease: linked to ursodeoxycholic acid? / N. B. Gubergrits, N. V. Belyaeva, T. L. Mozhina // Bulletin of the club of pancreatologists. - 2020. - No. 4 (49). - S. 41-48.
3. Dolgova, E. N. Secretory function of the liver under the action of bile acids: specialty 03.00.13: dissertation abstract for the degree of candidate of biological sciences / Dolgova Elena Nikolaevna. - Kyiv, 1997. -22 p.
4. Makarchuk, N.E. Changes in the spectrum of bile acids in the bile of rats in experimental chronic alcoholic pancreatitis / N. E. Makarchuk, Z. A. Gorenko, O. A. Grinchenko [et al.] // Gastroenterology of St. Petersburg. - 2013. - No. 2. - P. M19-M19a.
5. Minnulina, Z.Sh. Quantitative ratio of bile acids in the blood serum of a healthy adult / Z. Sh. Minnullina, S. V. Kiyashko, K. S. Guseva, R. G. Saifutdinov // Medicus. - 2015. - No. 5(5). - S. 19-21.
6. Mirodzhov, G.K. Influence of ursodeoxycholic acid on the content of bile acids in non-alcoholic fatty liver disease / G. K. Mirodzhov, N. A. Alimova, A. Kh. Kadyrov, Z. N. Rasulova // Health of Tajikistan. - 2017. -No. 4 (335). - S. 19-23.
7. Patent No. 2742414 C1 Russian Federation, IPC A61K 31/198, A61K 31/355, A61K 31/575. Complex preparation with hepatoprotective activity for cattle : No. 2020120624 : Appl. 06/16/2020 : publ. 02/05/2021 / V. S. Ponamarev, N. L. Andreeva, O. S. Popova, V. A. Baryshev.
8. Patent No. 2762221 C1 Russian Federation, IPC A61K 31/198, A61K 31/355, A61K 36/28. Compound preparation with hepatoprotective activity for sheep : No. 2020141046 : Appl. 12/11/2020 : publ. 12/16/2021 / V. S. Ponamarev, A. M. Lunegov, N. L. Andreeva [and others]; applicant Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education St. Petersburg State University of Veterinary Medicine FSBEI HE SPbGUVM.
9. Ponamarev, V.S. Biochemical parameters of the blood of experimental animals in the treatment with the drug "Hepaton" and comparators of toxic liver damage caused by dichloroethane / V. S. Ponamarev, N. L. Andreeva, E. S. Koroleva, A. V. Kostrova // Biotechnology: a look into future, Stavropol, April 16, 2020. -Stavropol: Stavropol State Medical University, 2020. - P. 19-21.
10. Popova, O. S. Evaluation of toxicity taking into account the unpredictable uncertainty of preclinical and clinical studies in the field of veterinary medicine / O. S. Popova // Issues of legal regulation in veterinary medicine. - 2021. - No. 2. - S. 79-81. - DOI 10.17238/issn2072-6023.2021.2.79.
11. Peculiarities of the manifestation of bronchial asthma in cats in metropolis environment / L. Sabirzianova, P. Anipchenko, A. Yashin [et al.] // Journal of Animal Science. - 2019. - Vol. 97. - No. S3. - P. 214-215. - DOI 10.1093/jas/skz258.439.
Вклад авторов:
Понамарев В.С. - проведение эксперимента; написание исходного текста.
Лунегов А.М. - концепция исследования; развитие методологии; доработка текста, итоговые выводы. Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Authors' contribution:
Ponamarev V.S. - conducting an experiment; writing original text.
Lunegov A.M. - research concept; development of methodology; revision of the text, final conclusions.
All authors made an equivalent contribution to the preparation of the publication. The authors declare no conflict
of interest.
Статья поступила в редакцию 05.04.2022; одобрена после рецензирования. 17.052022; принята к публикации 06.06.2022
The article was submitted 05.04.2022; approved after reviewing 17.052022; accepted for publication 06.06.2022
© Понамарев В.С., Лунегов А.М. 2022
