CC BY
0
НАУЧНАЯ СТАТЬЯ
УДК 616.62 - 006.6 - 073.524 - 076.5:576.385.3
КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ОЦЕНКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЭКСПРЕССИИ РБ-Ь1 В ТКАНИ НЕМЫШЕЧНО-ИНВАЗИВНОГО И МЫШЕЧНО-ИНВАЗИВНОГО УРОТЕЛИАЛЬНОГО РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ
Т.А. Богуш1, К.С. Спиридонова1' 2, Е.А. Богуш3, А.Н. Гришанина1, А .М. Щербаков1, М.И. Волкова4, З. М. Сафаров1, В.Б. Матвеев1, В.С. Косоруков1
1 Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н. Н. Блохина Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова
3 _
Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова (Сеченовский университет)
4 Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования Минздрава России
Автор, ответственный за переписку: Татьяна Анатольевна Богуш, tatbogush@mail.ru
Аннотация. Проведена количественная оценка экспрессии белка РБ-Ь1 в 56 образцах уротелиального рака мочевого пузыря (РМП). Экспрессия РБ-Ь1 выявлена во всех образцах РМП, при этом в ткани немышечно-инвазив-ного (НМИ) РМП показатель медианы в 1,5 раза выше, чем в мышечно-ин-вазивном (МИ) РМП (р = 0,001). Высокий уровень экспрессии РБ-Ь1 >30% выявлен в 20% образцов МИ РМП, а среди НМИ опухолей - в 68% случаев, т.е. 3,4 раза чаще (р = 0,0004). Последний факт обосновывает перспективность начала терапии ингибиторами контрольных точек иммунитета уже в дебюте заболевания - при НМИ РМП.
Ключевые слова: мышечно-инвазивный и немышечно-инвазивный рак мочевого пузыря, РБ-Ы, иммунофлуоресцентный анализ, проточная цитометрия
Б01: 10.55959/Ы8Ш579-9384-2-2023-64-6-559-567
Финансирование. Работа выполнена при поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, соглашение о субсидии № 07515-2021-1060 от 28.09.2021 года, и в рамках НИР ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России 2023-2025 гг., рег. № 123021500076-3.
Для цитирования: Богуш Т.А., Спиридонова К.С., Богуш Е.А., Гришанина А.Н., Щербаков А.М., Волкова М.И., Сафаров З.М., Матвеев В.Б., Косоруков В.С. Количественная иммунофлуоресцентная оценка показателей экспрессии РБ-Ы в ткани немышечно-инвазивного и мышечно-инвазивного уротелиального рака мочевого пузыря // Вестн. Моск. ун-та. Сер. 2. Химия. 2023. Т. 64. № 6. С. 559-567.
© Богуш Т. А., Спиридонова К.С., Богуш Е.А., Гришанина АН.,
Щербаков А.М., Волкова М.И., Сафаров З.М., Матвеев В.Б., Косоруков В.С.,
2023
ORIGINAL ARTICLE
QUANTITATIVE IMMUNOFLUORESCENCE EVALUATION OF PD-L1 EXPRESSION IN NON-MUSCLE-INVASIVE AND MUSCLE-INVASIVE UROTHELIAL BLADDER CANCER
1 12 3
T.A. Bogush , K.S. Spiridonova ' , E.A. Bogush , A.N. Grishani-na1, A.M. Scherbakov1, M.I. Volkova4, Z.M. Safarov1, V.B. Matveev1, V.S. Kosorukov1
1 Federal State Budgetary Scientific Institution «N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology» of the Ministry of Health of the Russian Federation Lomonosov Moscow State University
3 The State Education Institution of Higher Professional Training The First Sechenov Moscow State Medical University under Ministry of Health of the Russian Federation
4 Federal State Budgetary Educational Institution of Further Professional Education "Russian Medical Academy of Continuous Professional Education"
Corresponding author: Tatyana A. Bogush, tatbogush@mail.ru
Abstract. The expression of PD-L1 protein was quantified in 56 samples of urothelial bladder cancer (BC). PD-L1 expression was detected in all BC samples, while in non-muscle-invasive bladder cancer (NMIBC) the median value is 1,5 times higher than in muscle-invasive bladder cancer (MIBC) (p = 0,001). High PD-L1 expression level (>30%) was observed in 20% of MIBC samples and among NMIBC tumors - in 68% of cases, that is 3,4 times more often (p = 0,0004). The last fact justifies the prospect of starting therapy with immune checkpoint inhibitors already at the onset of the disease - at NMIBC.
Keywords: muscle-invasive and non-muscle-invasive bladder cancer, PD-L1, immunofluorescence analysis, flow cytometry
Financial Support. The work was carried out with the support of the Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation, grant agreement No. 075-15-2021-1060 dated 09/28/2021, and within the framework of the research of the N.N. Blokhin National Research Institute of Oncology of the Ministry of Health of Russia 2023-2025, reg. No. 123021500076-3.
For citation: Bogush T.A., Spiridonova K.S., Bogush E.A., Grishanina A.N., Scherbakov A.M., Volkova M.I., Safarov Z.M., Matveev V.B., Kosorukov V.S. Quantitative immunofluorescence evaluation of PD-L1 expression in non-muscle-invasive and muscle-invasive urothelial bladder cancer // Vestn. Mosk. un-ta. Ser. 2. Chemistry. 2023. T. 64. № 6. S. 559-567.
Рак мочевого пузыря (РМП) является одним из десяти наиболее распространенных злокачественных новообразований [1]. К хирургическим методам лечения этого заболевания относятся трансуретральная резекция мочевого пузыря (ТУР МП), радикальная цистэктомия с различными вариантами деривации мочи. В отдельных случаях комплексного лечения возможно выполнение органосохраняющих вмешательств в объеме резекции мочевого пузыря. Консервативное лечение включает в себя адъю-
вантную внутрипузырную иммунотерапию вакциной Bacillus Calmette-Guerin (БЦЖ-терапия), различные варианты химиотерапии, иммуноон-кологическую терапию ингибиторами контрольных точек иммунитета, лучевую терапию как в самостоятельном варианте, так и в составе схем комбинированного и комплексного лечения.
Глубина опухолевой инвазии (категория рТа-Т4Ь) имеет важное прогностическое значение и определяет выбор лечебной тактики. На долю немышечно-инвазивного уротелиального
рака мочевого пузыря (НМИ РМП), категория рТа-Т1, приходится около 70% всех случаев заболеваний [2-4]. Эта форма опухоли характеризуется более высокой частотой рецидивов, но лучшими показателями выживаемости, по сравнению с мышечно-инвазивным вариантом (МИ РМП), однако результаты лечения неудовлетворительны. После ТУР МП, однократной внутри-пузырной инстилляции химиопрепарата и адъю-вантной внутрипузырной БЦЖ-терапии или химиотерапии, в зависимости от прогностической группы (низкий/промежуточный/высокий риск) вероятность рецидива НМИ РМП в течение 5 лет составляет 37, 65 и 84% соответственно [5].
Распространенность НМИ РМП, высокая частота рецидивов и риск развития инфильтративной опухоли являются основанием для поиска новых более эффективных подходов к лечению. Одним из вариантов может стать расширение показаний к иммунотерапии ингибиторами контрольных точек иммунитета. В настоящее время ингибиторы РБ-1 (ниволумаб, пембролизумаб), а также ингибиторы РБ-Ы (атезолизумаб, дурвалумаб и аве-лумаб) применяются при лечении местно-распро-страненного и метастатического РМП [2, 3]. Они могут быть использованы как в монорежиме, так и в сочетании либо с другими иммунопрепарата-ми, либо с цитостатиками при прогрессировании во время или после стандартной химиотерапии с включением препаратов платины. В качестве 1 линии лечения иммунотерапия возможна при наличии противопоказаний к назначению цисплати-на и положительном результате обязательного в этой ситуации РБ-Ы-тестирования. Кроме того, пембролизумаб одобрен для лечения НМИ РМП при БЦЖ-рефрактерных опухолях, однако в клинических рекомендациях Минздрава РФ подобная тактика не утверждена [5].
Данные о высокой мутационной нагрузке опухоли и наличии связи между экспрессией РБ-Ы и эффективностью терапии [6] ставят вопрос о возможном эффективном применении ингибиторов контрольных точек иммунитета на ранних стадиях заболевания. В настоящей работе проведена сравнительная количественная оценка показателей экспрессии РБ-Ы в образцах НМИ и МИ РМП для молекулярного обоснования эффективности такого подхода в целях расширения показаний для иммунотерапии НМИ формы заболевания.
Материалы и методы
В работе исследованы 56 хирургических образцов ткани уротелиального рака мочевого пу-
зыря, полученных в ходе ТУР МП или радикальной цистэктомии. Больные оперированы в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России в 2021-2022 гг.
Для приготовления одноклеточных суспензий образцы опухолей измельчали ножницами и инкубировали в растворе Версена в течение 30 мин при 37 °С. Затем образцы гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе пятикратным осторожным движением пестика и фильтровали через фильтр с размером пор 40 нм. Суспензию клеток центрифугировали в течение 5 мин на скорости 3000 об/мин и ресуспендировали в 4% растворе формальдегида. Иммунофлуоресцентное окрашивание проводили с использование 100 мкл суспензии с концентрацией 200 тыс. кл/мл [7].
Для иммунофлуоресцентного окрашивания использовали первичные кроличьи монокло-нальные антитела, специфичные к PD-L1 (клон SQab1716, Arigo Biolaboratories, Тайвань), в конечном разведении 1:100 и 1:200 и вторичные антикроличьи антитела, коньюгирован-ные с флуоресцентным красителем DyLight650 (ab98729, Abcam, Великобритания), в конечном разведении 1:500.
Для перманентного контроля активности антител при проведении каждого иммунофлуоресцент-ного анализа использовали монослойную культуру клеток аденокарциномы протоков молочной железы человека линии MCF-7 (Американская коллекция типовых культур (ATCC), США).
Для отделения анализируемых клеток от де-бриса и эритроцитов использовали ДНК краситель Hoechst H33258 («Sigma», США) в конечной концентрации 1,2 мкг/мл.
Измерение флуоресценции проводили на проточном цитометре «Navios» («Beckman Coulter», США). Регистрацию сигнала флуоресценции красителей DyLight650 и Hoechst 33258 проводили в каналах FL-6 и FL-9 соответственно. Число окрашенных клеток рассчитывали в программе FlowJo 10.0.8 с помощью метода Колмогорова-Смирнова.
Рассчитаны два показателя экспрессии PD-L1:
1) уровень экспрессии маркёра - процентное содержание в образце клеток, экспрессирующих данный белок;
2) интенсивность экспрессии - среднее количество маркёра, экспрессируемого в расчете на клетке, рассчитываемое как отношение флуоресценции в опытном образце к контролю (инкубация только с вторичными антителами), выражается в условных единицах.
Статистический анализ данных проводили в программе GraphPad Prism 6.0 («GraphPad Software», США). Нормальность распределения показателей уровня экспрессии PD-L1 определяли с помощью критерия Шапиро-Уилка, выборки сравнивали с помощью U-критерия Ман-на-Уитни. Для оценки корреляции использовали критерий Спирмена.
Результаты и обсуждение
На первом этапе работы для выбора адекватных методов статистического анализа результатов проведена оценка характера распределения показателей уровня экспрессии PD-L1 как среди всех исследованных образцов РМП, так и в отдельных группах - НМИ РМП и МИ РМП.
Данные, представленные в таблице, показывают, что характер распределения показателей экспрессии PD-L1 в целом (все образцы) и в подгруппах, различающихся по прогнозу агрессивности течения заболевания, не идентичен. Поэтому, следуя рекомендациям статистического анализа, последующую сравнительную оценку количественных показателей экспрессии PD-L1 проведили с использованием в качестве ориентира медианы.
Графически результаты сравнительной оценки уровня экспрессии PD-L1 во всех образцах РМП и отдельно в подгруппах, отличающихся по прогнозу заболевания и лечебной тактике, представлены на рис. 1. Показатель медианы экс-
прессии РБ-Ы в подгруппе НМИ РМП оказался в 1,5 раза выше по сравнению с МИ РМП - 32,0% vs 22,0% (р = 0,001), что указывает на значительное различие в уровне экспрессии РЭ-Ы между опухолями с благоприятным и неблагоприятным прогнозом течения болезни по показателю мышечной инвазии опухоли.
Статистически значимые различия выявлены также при сравнении МИ РМП с показателем уровня экспрессии РЭ-Ы в общей группе - 28,5% vs 22,0% (р = 0,006).
На рис. 2 визуализированы данные, характеризующие распределение 56 исследованных образцов РМП в зависимости от уровня (рис. 2, А) и интенсивности (рис. 2, Б) экспрессии РЭ-Ы в одном и том же новообразовании. Между этими показателями выявлена сильная корреляция (коэффициент Спирмена г = 0,8), поэтому дальней-шеесравнение групп по экспрессии РЭ-Ь1 проведено по уровню экспрессии маркёра.
Общепринятая практика предполагает при оценке прогностической значимости экспрессии того или иного опухолевого маркёра деление на группы с низким и высоким уровнем экспрессии изучаемого маркёра по медиане показателя. В нашей работе при повторном иммунофлуорес-центном анализе одного и того же опухолевого образца различия не превышали 5%. Принимая во внимание этот факт и ориентируясь на медиану выявленного уровня экспрессии РЭ-Ы, равную
Описательная статистика и характер распределения уровня экспрессии PD-L1 в ткани немышечно-инвазивного (НМИ) и мышечно-инвазивного (МИ) уротелиального рака мочевого пузыря (РМП)
Уровень экспрессии PD-L1, %
Группы РМП (число образцов) медиана [Q1; Q3]* минимальное -максимальное значения Р ** Характер распределения показателей ***
Все образцы (56) 28,5 [21,0; 33,8] 8-70 - Ненормальное (p = 0,001)
НМИ РМП (31) 32,0 [26,0; 41,0] 8-70 0,001 Нормальное (p = 0,21)
МИ РМП (25) 22,0 [20,0; 28,0] 12-34 Нормальное (p = 0,61)
* Медиана уровня экспрессии РБ-Ь1 [нижний квартиль; верхний квартиль]. ** Достоверность различия между показателями медианы в группах сравнения.
*** При оценке характера распределения показателей уровня экспрессии РБ-Ь1 в исследованной группе образцов опухолей, принимали «0» гипотезу: характер распределения показателей не подчиняется закону нормального распределения.
Рис. 1. Уровень экспрессии РБ-Ь1 во всех образцах уротелиального рака мочевого пузыря (РМП) и в группах, отличающихся по прогностической значимости и лечебной тактике: немышечно-инвазивный и мышечно-инвазивный РМП (* различие статистически значимо)
с.
СВ
О
С-
>■
А
80 60 40 20 0
к
0
1
н ж S
•
-• Медиана 28,5%
10 20 30 Б 40 50
• •
• •
• • • • • •
• • • •* •• •• • •• • •
• •
• • Медиана 1,8 у.е.
0 10 20 30 40 50
Коэффициент корреляции Спирмена (г) между уровнем и интенсивностью экспрессии РБ-Ы: 0,8 (р < 0,0001) Сила корреляции - сильная
Рис. 2. Распределение показателей уровня и интенсивности экспрессии РБ-Ь1 в опухолевой ткани уротелиального рака мочевого пузыря. По оси абсцисс: А - номера образцов опухолей, включенных в анализ (ранжированы от минимального до максимального значения уровня экспрессии РБ-Ь1); Б - номера образцов опухоли соответствуют рис. А. По оси ординат: А - уровень экспрессии РБ-Ь1 (%); Б - интенсивность
экспрессии РБ-Ь1 (у.е.)
28,5% (таблица), в настоящем исследовании сравнительный анализ проведен при двух границах деления исследованных образцов РМП на группы с высоким и низким уровнем экспрессии РВ-Ь1 - <25% vs >25% и <30% vs > 30%. Данные о частоте встречаемости опухолей с такими показателями экспрессии РЭ-Ы в подгруппах РМП, различающихся по показателю мышечной инвазии, представлены на рис. 3, 4.
Анализируя результаты рис. 3, прежде всего следует отметить различия между средними значениями уровня экспрессии РЭ-Ы в опухолях с уровнем показателя >25% (таблица на рис. 3) в подгруппах НМИ и МИ РМП - 38,8% vs 29,9% (р = 0,002), и в подгруппе МИ РМП vs все исследованные опухоли (29,9 vs 36,0%, р = 0,004).
При этом в целом по группе исследованных опухолей уровень экспрессии маркёра >25% выявлен в 59%, в подгруппе МИ РМП - в 36%, а среди НМИ РМП - в 77% случаев. Статистическая значимость различий показана между подгруппами НМИ и МИ РМП (р = 0,002).
При оценке частоты встречаемости опухолей с уровнем экспрессии РБ-Ь1>30% в ткани МИ и НМИ РМП выявлены аналогичные закономерности (рис. 4). Видно, что в целом в группе
исследованных опухолей высокий уровень экспрессии маркёра >30% выявлен в 46%, в группе МИ РМП - в 20%, а среди НМИ РМП - в 68% случаев. Статистически значимыми различия оказались между следующими группами сравнения: МИ vs НМИ РМП (р = 0,0004); МИ vs все исследованные опухоли (р = 0,02). Средние значения уровня экспрессии РЭ-Ы > 30% во всех группах сравнения были практически идентичными и составили 38,2; 39,8 и 31,8% (таблица на рис. 4).
Суммируя полученные результаты, следует отметить наиболее важные моменты с точки зрения достижения поставленной в исследовании цели - молекулярно обосновать целесообразность начала терапии ингибиторами контрольных точек иммунитета при немышечно-инва-зивной стадии уротелиального рака мочевого пузыря до применения цисплатина и внутрипу-зырной инстилляции БЦЖ.
Количественная оценка уровня экспрессии мишени иммунопрепаратов, ингибирующих РЭ-Ы, которые уже нашли применение в клинике [8-10], выявила экспрессию РЭ-Ь1 в опухолях всех включенных в исследование больных как с НМИ, так и с МИ РМП, при значительной гетерогенности показателей у разных пациентов. Но
Рис. 3. Частота встречаемости опухолей с уровнем экспрессии РБ-Ь1 >25% в ткани мышечно-инва-зивного (МИ) и немышечно-инвазивного (НМИ) рака мочевого пузыря (РМП)
Рис. 4. Частота встречаемости уровня экспрессии РБ-Ь1 > 30% в ткани рака мочевого пузыря (РМП), различающегося по показателю мышечной инвазии
что наиболее важно, число опухолей с высоким уровнем маркёра (>30%) в группе НМИ РМП было значительно (в 3,4 раза) выше по сравнению с МИ опухолями.
Таким образом, в работе получено молекулярное обоснование перспективности проведения иммунотерапии первой линии НМИ РМП уже в дебюте заболевания, так как в 68% таких опухолей отмечен высокий (>30%)
уровень экспрессии мишени ингибиторов контрольных точек иммунитета РБ-Ы.
Полученные результаты находятся в русле проводимых в настоящее время клинических исследований эффективности ингибиторов контрольных точек иммунитета у больных НМИ раком мочевого пузыря без резистентности к вну-трипузырной БЦЖ-терапии или системной химиотерапии [11-13].
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Richters A., Aben K.K.H., Kiemeney L.A.L.M. // World J. Urol. 2020. Vol. 38. N 8. P. 1895 (DOI: 10.1007/s00345-019-02984-4).
2. Patel V.G., Oh W.K., Galsky M.D. // CA Cancer J. Clin. 2020. Vol. 70. N 5. P. 404-423. (DOI: 10.3322/caac.21631).
3. Unsworth-White S.R., Kitchen M.O., Bryan R.T. // Future Oncol. 2022. Vol. 18. N 1. P. 105 (DOI: 10.2217/fon-2021-0781).
4. Немцова М.В., Кушлинский Н.Е. // Альманах клинической медицины. 2015. № 41. С. 79.
5. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Клинические рекомендации «Рак мочевого пузыря» [Электронный ресурс] // Рубрикатор клинических рекомендаций. 2021. URL: https://cr.minzdrav.gov.ru/schema/11_2 (дата обращения 27.02.2023).
6. Patel S.P., Kurzrock R. // Mol. Cancer Ther. 2015. Vol. 14. N 4. P. 847 (DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-14-0983)
7. Bogush T.A., Basharina A.A., Eliseeva B.K., Kaliuzh-ny S.A., Bogush E.A., Kirsanov V.Y., Davydov M.M., Kosorukov VS. // Biotechniques. 2020. Vol. 69. N. 4. P. 1. (DOI: 10.2144/btn-2020-0024).
8. Szabados B., Kockx M., Assaf Z.J., van Dam P.J., Rodriguez-Vida A., Duran I., Crabb S.J., Van Der Heijden M.S., Pous A.F., Gravis G., Herranz U.A., Protheroe A., Ravaud A., Maillet D., Mendez M.J., Suarez C., Linch M., Pren-dergast A., Tyson C., Stanoeva D., Daelemans S., Rom-bouts M., Mariathasan S., Tea J.S., Mousa K., Sharma S., Aleshin A., Banchereau R., Castellano D., Powles T. // Eur. Urol. 2022. Vol. 82. N 2. P. 212-222 (DOI: 10.1016/j. eururo.2022.04.013)
9. Joshi M., Tuanquin L., Zhu J., Walter V., Schell T., Kaag M., Kilari D., Liao J., Holder S.L., Emamek-hoo H., Sankin A., Merrill S., Zheng H., Warrick J., Hauke R., Gartrel B., Stein M., Drabick J., Degraff D.J., Zakharia Y. // J. Immunother. Cancer. 2023. Vol. 11. N 2. e006551 (DOI: 10.1136/jitc-2022-006551).
10. Cathomas R., Lorch A., Bruins H.M., Compérat E.M., Cowan N.C., Efstathiou J.A., Fietkau R., Ga-kis G., Hernández V., Espinos E.L., Neuzillet Y., Ribal M.J., Rouanne M., Thalmann G.N., van der Heijden A.G., Veskimâe E., Alfred Witjes J., Milowsky M.I. // Eur. Urol. 2022. Vol. 81. N 1. P. 95 (DOI: 10.1016/j. eururo.2021.09.026).
11. Atezolizumab and BCG in High Risk BCG naïve Non-muscle Invasive Bladder Cancer (NMIBC) Patients (BladderGATE) [Электронный ресурс] // Clinical-Trials.gov. URL: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/
NCT04134000?term=PD-L1&cond=Non-muscle-in vasive+Bladder+Cancer&draw=2&rank=5 (дата обращения: 01.03.2023).
12. Assessment of Efficacy and Safety of Durvalumab Plus BCG Compared to the Standard Therapy With BCG in Non-muscle Invasive Bladder Cancer (POTOMAC) [Электронный ресурс] // ClinicalTri-als.gov. URL: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/ NCT03528694?term=PD-L1&cond=Non-muscle-in vasive+Bladder+Cancer&draw=2&rank=10 (дата обращения: 01.03.2023).
13. A Study of Sasanlimab in People With Non-muscle Invasive Bladder Cancer (CREST) [Электронный ресурс] // ClinicalTrials.gov. URL: https://clinicaltrials. gov/ct2/show/NCT04165317?term=PD-L1&cond=Non-muscle-invasive+Bladder+Cancer&draw=2&rank=4 (дата обращения: 01.03.2023).
Информация об авторах
Богуш Татьяна Анатольевна - руководитель группы молекулярного прогноза опухолей лаборатории молекулярно-генетической диагностики и персонализированной медицины ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, докт. биол. наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ (tatbogush@mail.ru. ОЯСГО: 0000-0002-7673-4284);
Спиридонова Ксения Сергеевна - студентка факультета фундаментальной медицины МГУ имени М.В. Ломоносова, лаб.-иссл. группы молекулярного прогноза опухолей лаборатории молекулярно-генетической диагностики и персонализированной медицины ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России (kseniia.spiridonova@gmail.com, ОЯСГО: 0000-0002-4992-6846);
Богуш Елена Александровна - ассистент кафедры онкологии Института клинической медицины им. Н.В. Склифосовского ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет), канд. мед. наук (labmedchem@mail.ru, ОЯСГО: 0000-0001-5601-3669);
Гришанина Анна Николаевна - науч. сотр. группы молекулярного прогноза опухолей лаборатории молекулярно-генетической диагностики и персонализированной медицины ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России (labmedchem@mail.ru, ОЯСГО: 0000-0002-4277-9222);
Щербаков Александр Михайлович - ст. науч. сотр., и.о. заведующего лаборатории онкопротеомики отдела экспериментальной биологии опухолей ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, канд. биол. наук (якх. scherbakov@gmail.com, ОЯСГО: 0000-0002-2974-9555);
Волкова Мария Игоревна - профессор кафедры онкологии и паллиативной медицины ФГБОУ ДПО РМАНПО, ученый секретарь МРООУ, докт. мед. наук (mivolkova6@gmail.com, ОЯСГО:0000-0001-7754-6624);
Сафаров Зухал Манучехрович - ординатор ФГБУ НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина МЗ РФ (safarov_070898@mail.ru);
Матвеев Всеволод Борисович - заместитель директора ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России по научной и инновационной работе, заведующий хирургическим отделением № 4 (онкоурологии), докт. мед. наук, профессор, член-корреспондент РАН (labmedchem@mail.ru, ОЯСГО: 0000-0001-77489527);
Косоруков Вячеслав Станиславович - директор НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей, зав. лабораторией трансгенных препаратов ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, канд. биол. наук (labmedchem@mail.ru, ORCID: 0000-0002-8462-2178).
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Соблюдение этических стандартов
Все процедуры, выполненные в данной работе, соответствуют этическим стандартам институционального комитета по исследовательской этике и Хельсинкской декларации 1964 г. и ее последующим изменениям или сопоставимым нормам этики. У всех пациентов получено письменное информированное согласие.
Статья поступила в редакцию 05.04.2023; одобрена после рецензирования 12.04.2023; принята к публикации 14. 05.2023.
