CC BY
7Мир вирусных геп-атитоа 3 (2 009)
Материалы и методы. В работе использованы штаммы НАУ707 ** НАУ027 из коллекции лаборатории. Конечное детектируемое разведенке вирусных суспензий: для штамма НАУ707 - не менее 1х1С"7, штамма НАУ027 - нечиенее 1х10"6. С цглью проведения исследований по устойчивости штаммов к воздействию 70% »танела использовался суспензионный метод и антигенсвязыеающая полимеразная ценная реакция (АС-ПЦР), в основе которой'Лежит связывание вируса сорбированными на твердой фазе специфическими антителами, после чего пооизводигся ипдиксщия вирусной нуклеиновой кислоты, входящей в состав иммобилизованных вирусных частиц, методом ПЦР. Таким образом, вирус детектируется одновременно по двум маркерам - антигену и геному, что с высокой долей вероятности позволяет говорить о его инфе кционт гости.
Результаты. В ходе проведенных исследований было выявлено расхождение в значении снижения концентрации интактных вирусных частил, более, чем на 3 % (значения составили 0,4 и 3,5 соответственно). Поскольку ®а инактивацию простых (не имеюших суперкапсида) вирусов также влияет температура, соотношение дезинфектанта и вируса, белковая нагрузка, был проведен дополнительный опыт по определению Втияш разведения на степень инактивации более концентрированного дШиша НАУ707. Десятикрап тыс разведения суспензии этого штамма оказались более чувствительными к воздействию ■этанола (1,4 и 1,8 - для разведения в 10 и 100 раз соответственно), но при этом значении в 3,5 (з дости1 нуто не было. Филогенетический анализ участка из УГ1/Р2А области показал, что штамм НАУ707 принадлежит к субгенотипу 1А, а штамм НАУ027 - 1В.
Заключение. Впервые проведено изучение устойчивости двух лабораторных штаммов ВГА в отношении такого химического фактора как этанол; показано, что они обладают существенными различиям., в резистентности к воздействию этилового спирта. Это подтверждает необходимость тщательного подбора тест-пггаммов для оценки вирулицидного действия инактивирующих агентов. Необходимы дальнейшие исследования по обнаружению возможных расхождений в устойчивости, как между алаптированными и дикими штаммами ВГА, гак и среди циркулирующих в природе вариантов этого вируса.
82. Клчнико-лабораторные особенности острого гепатита С у лкц среднего возраста
Т.Н. Пономаренко-, Е.В. Войковская2, В.Г. Коптюг2, АД. Лазарев2, Н.Ю. Жерпбдова:, АЕ. Баранов2 'ОУВПО «Белгородский государственный университет», г. Белгород;
ЛУЗ «Инфекционная клини^ескар больница им. С.Н. Паеловскогс», г. Белгород
Г1о данным литературы острый гепатит С развивается лишь в 10-30% случаев после инфицирования, инкубационный период в среднем составляет 2-3 месяца (Ои£оиг Р., 2004) и в 80-95% случаев заболевание протекает в безжелтушной (атипичной) форме (Ющук Н.Д. с соавт., 2007; Покровский В.И. с соавт., 200'/). Цель: описать течение острого гепатата С у наблюдаемых нами пациентов среднего возраста. Результаты. Мы наблюдали четыре отучая острого гепатита С (генотип 1Ь) с желтушной формой у лип старшего возраста - 43 ± 2 лет, 1 мужчина, 3 женщины. Предположт-гге.тьные пути заражения: посещение стоматолога (?), гинеколога, гемотрансфузии во время оперативного вмешательства и парентеральные вметнательства (внутримышечные и внутривенные инъекции. полученные амбулаторно). Инкубационный период составил соответственно 10 (?), 3, 2 и 1 месяц. Заболевания начинались остро с бoлevi в животе, преимущественно в эгщгастралыюй и правой' додреПерной области, тошноты, чувства тяжести в правом подреберье, слабости и снижения аппетита, у одной бодьной также отмечались кашель и насморк. На 4 + 2 день болезни появились желтушность склеи и кожи, потемнпа моча, прогрессировал диспепсический синдром (усилились боли в животе, присоелинилась рвота) и проявление интоксикации - нарастали слабость и снижение аппетита вплоть до анорексии. Больные были госпитализированы на 5 ± 1 День болезни в среднетяжелом состоянии. При осмотре: умеренная желтушность склер и кожи, язык обложен бе.1гым налетом, при пальпации болезненность в эгхигастр;™ и правом подреберье, печень пальпировалась на 2 - 3 - 4,5 см ниже края реберной дуги, край печени закруглен, гладкии, ^еренно чувствителен. Увеличения селезенки не было. Синдромы интокстжации и диспепсический в остром щериоде сохранялись в течение 7 ± 0,5 дней. Продолжительность желтушного периода составила 18 + 2 дней, вначале исчезла же.лушность кожи, затем посветлела моча, прошла иктеричггость склер, более длительно сохранялась гепатомегалия, но к выписке у всех пациентов наблюдалось сокращение размеров печени. В сыворотке крови у всех пациентов обнаружены анти-ВГС ]§Ы, анти-Соге-ВГС - 1,239-1,563 (< 0,19е»}, анти-ЫЗЗ-ВГС - 0.362-1,839 (< 0,202), анти-К35-ВГС - 0,747-1,317 (< 0,205). у одного больного также определялись анти^Ш В] С - 0,412 (< 0,204). Общий анализ крови - без особенностей. В общем анализе моте у всех пациентов в остром периоде определялись желчные пигменты и уробилин. В биохимическом анализе: билирубин общий -137,8-218,5 мкмолъ/л (КГ - 0- 20,5 мкмоль/л), поямои - 93,6-109,2 мкмоль/л (И -26
Мир вирусных гепатитов 3 {2009)
0-5 мкмоль/л), АтАТ - 176-382 ед/л (М - 0-32 ед/л), АсАТ - 162-365 ед/л (Ы - 5-34 ед/л). Изменения тимоловой пробы, белка и его фракций не наблюдалось. Показатетти билирубина и ферментов снижались до нормы к 21 ± 2 дню болезни.
Заключение Нами выделены следующие клинико-лабораторные особенности острого гепатита С у лиц среднего возраста: острое начало заболевания при нормальной температуре тела, короткий (4 ± 2 дня) преджелтушчьш период, протекавший с синдромами диспепсии и интоксикации, отсутствие улучшения самочувствия при появлении желтухи, длительность желтушного периода 18 ± 2 дней, сохранение гепатомегалии до 4 недель, увеличение ак гивности минотрансфераз в 5-10 раз.
83. Частота выявления HBsAg среди доноров коови и в группах риска инфицирования вирусом гепатита В с использованием тест-системы с чувствительностью 0,01 МЕ/мл
O.E. Попова1, АА Ганина2, H.A. Замятина1, Т.Е. Кожанова1, В.В. Клушкчна1 М.И. Михайлов1 ХГУ ИПВЭ ша. М.П. Чумакова РАМН, Московская обл.; *ЗАО «Эчогаб», г. Элгктоогаоск, Московская обл.
Цель. Основным маркером инфицирования вирусом гепатита В (ВГВ) является поверхностный антиген (НВзА„|. Обнаружение в сыворотке крови HBsAg с помош.ью методов иммунофермен гного анализа (ИФА) имеет решающее значение для диагностики гепатита В. Мутации в S-регионе генима ВГВ, коинфицирование вирусом ¿иммунодефицита человека (ВИЧ) и вирусом гепатита С (ВГС), а также низкий ) ровень репликации ВГЗ копии/мл) могут сопровождаться снижением котщентрации
HBsAg в сыворотке крови менеэ предела чувствительности большинства тест-систем, разоешённых к применению и имеющих диагностическую чувствительность 0,05-0,1 МЬ/мл.
Цель исследования: определение частоты выяв ЬспШ HBsAg среди доноров крови, а также среди лэд, относящихся к группам повышенного риска инфицирование ВГВ с использованием иммупоферментных гест систем с чувствительностью 0,01 МЕ/мл.
Материалы и методы. Исследование проводили с использованием образцов сыворотки крови 2492 доноров крови; 117 ВИЧ-инфицированных пациентов; 222 лиц, практикующих внутривенное введение психоактивных веществ (ПАВ); 233 онкологических больных; 183 пациентов программного гемодиализа (ПГД); 155 медработников. Все образцы первоначально .'естировали на серологические маркере! ВГВ-инфекции (HBsAg в тест-системе с чувствительностью 0,05-0,1 МЕ/мл, анти-НВь и анти-НВс IgG); образцы, неяожителъные по HBsAg тшт анти-HBs исключали из дальнейшего исследования. Образцы, негативные по HBsAg и позитивные но анти-НВс IgG, тестировали на HBsAg в диагностикумах с чувствительностью 0,01 МЕ/мл.
Результаты. Из образцов, полученных от 2492 доноров крови, 124 (4,98%) содержали «изолированные» анти-НВс IgG. В группах риска инфицирования ВГВ частота выявление изолированных апти-НВс IgG была выше, чем среди доноров крови- среди ВИЧ-инсЪицировашхые - 23,9% (28/117), лиц, принимающих ПАВ - 27,93 % (62/222), среди онкологических больных - 12,45% (29/233) (пациентов ПГД - 24,04% (44/183), медицинских работников - 14,84% (23/155). При тестировании анти-НБс-положительных образцов на HBsAg в тест-системах с чувствительностью 0,01 МЕ/мл, были получены следующие результаты: среди доноров крови HBsAg был выявлен в 2,4% случаях (3/124). В группах риска инфицирования ВГВ частота выявление HBsAg среди ВИЧ-инфицированных составила 25% (7/28); лиц, принимающих ПАВ - 9,7% (6/62); онкологических больных - 13,7% (4/29).:-нациентов ПГД - 15,9% (7/44); медицинских работников - 4,3% (1/23). Необходимо отметить, что все данные образцы, положительные по HbsAg в тесте с чувствительностью 0,01 МЕ/мл, были негативными в тесте с чувстьите;тьностью 0,05-ОДМЕ/ин и положительными по анти-НВс IgG л отииательными по анти-ЧВэ. Таким образом, частоты выявления HBsAg с использованием высокочувствительных тестов варьирует от 2,4% до 25%. Выводы. Полученные результаты показали относительно высокие значения в выявлении H3sAg в низких концентрациях среди доноров крови и в группах риска икфицкроьания ВГВ, что указывает на зысокую диагностическую значимость иммуноферментш ix тест-систем для выявлена HBsAg с чувствите;тьностью С,01 МЕ/мл. Таким образом, использование высокочувствительного теста для выявления HBsAg положительно отразится на качестве диагностики вирусного гепатита, что позволит снизить количество случаев «скрытой» инфекции, и будет способствовать более -эффективному выявлению мутантных форм HBsAg. Повышение чувствительности иммуносрерментного теста для выявления HBsAg до уровня, сопоставимого с чувствительностью молекулярпо-генетических методов, позволит' рассматрив тгь ИФА, как метод скрининга донорской крови, а также позволит снизить риск посттранссЬузионного i В. Работа выполнена при поддержке РГНФ, ¿рант Ni 08-(J6-00¡81a.
