CC BY
38
жэне лазерл1 абляциямен 6ipre бул керсетгашт 3,7 есеге азайтты.
НТР эдiсiнiн теменгi жшлшт ультрадыбысын лазерлi сэулемен бiрлесiп колданып 6i3 усынган аллосYЙектi трансплантат жэне корганыс мембранасы жогары терапиялык нэтиже бередi: 92,1% жагдайда пародонтит ремиссиясы 6 айдан кейiн, 12 айда - 94,2%. Операциялык араласу тобындагы наукастарды бакылау мерзiмiнiн керсеткiшi 87,8 жэне 71,1%. Тек мембрананы колданган
еганш1 топ наукастарда ремиссия 6 айдан кешн 88,7%, 12 айдан кешн - 85,4% жагдай. Гель «Хлоргексодент» антимикробты, кабынуга карсы жэне тк кактарын ингибирлеу касиет бар: непзп топта ем журпзгеннен 12 айдан сон ГИ Грин-Вермильон бойынша 1,3 балдан темен, канагыштык индекс! Мюллемана- Коуэлл - 1,5 балла, РМА -20,7 %,салыстыру тобына караганда ПИ Рассель бойынша ПИ 1,5 балга темен.
ЭДЕБИЕТТЕР Т1З1М1
1 Ефанов О.И. (издание) Физические факторы, применяемые в стоматологии. - М.: 2002. - 58с.
2 Корытный Д.Л., Зазулевская Л.Я., Пародонтоз. - Алма-Ата: Наука, 1978. - С. 172.
3 Жолдыбаев, Серик Сабитович. Совершенствование методов комплексного лечения пародонтита с применением различных видов физических факторов(14.00.21) [Text] : автореф. дисс. ... д-ра мед. - Алматы : Б.и., 2007. 29 с.
ПАРОДОНТ Aypy.!APbIH4AFbI ФИЗИКАЛЬЩ ФАКТОРЛАРДЫ ЦОЛДАНУМЕН ЖУРПЗГЛЕТШ КОМПЛЕКСТ1 ТЕРАПИЯ
Тушн: Пародонт тiндерiндегi кабыну- деструктивтi YPДiс кезiндегi комплекстi терапияда лазерлiк абляцияны косатын физикалык факторларды колдану жылдам окшаулайды жэне туракты ремиссияга алып келедi. Ем нэтижесiн айтарлыктай жаксартады. Орта дэрежелi парадонтитпен ауыратын 194 зерттелушi наукастардын 93,6% жагдайында бiз дэстYрлi эдiспен емдеумен салыстырганда емнщ нэтижесiнiн айтарлыктай жаксарганын байкадык. Туйщд свздер: Парадонтит, лазерлi терапия, ультрадыбыс
COMPLEX THERAPY OF PERIODONTAL DISEASES USING PHYSICAL FACTORS
Resume: Combined use of physical factors in the complex therapy by educational and destructive processes in periodontal tissues, including the laser ablation, showed that there is a rapid isolation and induce remission, which significantly improves outcomes. Research has led to the fact that of the 194 patients studied with periodontitis of moderate severity, 93.6 percent received a significant improvement in the results of treatment, which shows better result than most traditional methods of treatment. Keywords: Periodontal disease, laser therapy, ultrasound
УДК 616.314.163-008.87-08-053.2:615.241.2:615.454.1
Г.А. КАРКИМБАЕВА, Д.Ж. БАТЫРБАЕВА, А.Г. СЕРЕКОВ
Казахский Национальный медицинский университет имени С.ДАсфендиярова Кафедра стоматологии детского возраста Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНОЕ ОБОСНОВАНИЕ СИЛЛЕРОВ ДЛЯ ВРЕМЕННОЙ ОБТУРАЦИИ КОРНЕВЫХ КАНАЛОВ У ДЕТЕЙ И РОЛЬ БИОПЛЕНОК В ПОЛИРЕЗИСТЕНТНОСТИ ВНУТРИКАНАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ
На базе кафедры стоматологии детского возраста было обследовано 14 подростков в возрасте 14-16 лет с диагнозом хронический фиброзный периодонтит. Из системы корневых каналов каждого пациента были взяты мазки для дальнейшего посева и идентификации чистых культур Б.тШат и С.а1Ь1сап8. Методом диффузии в агар была изучена чувствительность выделенных штаммов на материалы для временной обтурации корневых каналов «Гриназоль» и «Ледермикс». Далее статическим методом была изучена способность данных микроорганизмов формировать биопленки. Результаты данного исследования имеют важное практическое значение в клинике детской эндодонтии.
Ключевые слова: биопленка, биофильм, корневой канал, временная обтурация, внутриканальная микрофлора
Актуальность. Сегодня стоматологический рынок предлагает широкий выбор материалов для временной обтурации корневых каналов. Это в некоторой степени осложняет выбор наиболее подходящего материала в клинической практике врача-стоматолога-терапевта. В настоящее время большое внимание уделяется проблеме эндодонтического лечения зубов с осложненным кариесом. В структуре стоматологических заболеваний периодонтит занимает третье место после кариеса и пульпита, является одной из наиболее частых причин развития воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области и удаления зубов (Боровский Е.В., 2003; Уразалин Ж.Б., Ибрагимова Р.С., 2005; Копбаева М.Т., Жунусова Л.Ж., 2009).
Основной задачей эндодонтического лечения является
полная элиминация системы корневых каналов. Только в случае полной и адекватной дезинфекции полости зуба и корневых каналов исход лечения будет благоприятным. При несвоевременном лечении кариеса возникает осложненный кариес (пульпиты, периодонтиты). [1]
На этапах лечения острых и обострившихся хронических форм периодонтита применяются материалы для временной обтурации корневых каналов в целях более качественной стерилизации и предупреждения осложнений. [2]
Биопленка (биофильм) - конгломерат микроорганизмов, расположенных на какой-либо поверхности, окруженный внеклеточным (экстрацеллюлярным) матриксом. Внеклеточный матрикс - полимерное вещество, выделяемое
микроорганизмами в составе биопленки. [3] Доказано, что биопленки способны образовывать более 90% изученных видов бактерий, а их формирование выявляется более чем при 80% хронических заболеваний микробной этиологии. [4] Характерное свойство всех биопленок - их поразительная устойчивость к физическим и биохимическим воздействиям, включающим
антибиотикорезистентность (АБ-резистентность). [5] Цель и задачи исследования. Целью нашего исследования явилось изучение микробиологической эффективности материалов для временной обтурации корневых каналов: «Гриназоль» и «Ледермикс», применяемых в клинике детской терапевтической стоматологии. Для достижения данной цели были решены следующие задачи:
• Сформировать исследуемую группу детей с диагнозом хронический фиброзный периодонтит. Провести соответствующие клинические исследования.
• Подготовить все необходимые материалы и выбрать основной метод для проведения клинико-микробиологического исследования.
• Обоснование мультирезистентности внутриканальной микрофлоры методом изучения возможности исследуемых штаммов S.mutans и C.albicans образовывать биопленки (биофильмы).
• Провести все необходимые клинико-микробиологические исследования и адекватно интерпретировать результаты.
Материалы и методы исследования. Нами на базе Института стоматологии КазНМУ имени С.Д.Асфендиярова было обследовано 14 подростков в возрасте 14-16 лет с диагнозом хронический фиброзный периодонтит. Исследуемый материал (содержимое корневых каналов) мы получали из каждого корневого канала пациента с хроническим фиброзным периодонтитом с помощью стерилизованных в сухожаровом шкафу абсорбентов (бумажных штифтов) и далее погружали их в пробирки с физиологическими растворами. Пробирки с исследуемым материалом мы доставляли на кафедру микробиологии, вирусологии и иммунологии на посев для последующей идентификации S.mutans и C.albicans. Далее производили посев содержимого корневых каналов из физиологического раствора на кровяной агар и среду Сабуро, чашки Петри помещали в термостат (24 часа, 37°С).
Паста «Гриназоль» - паста для дентального использования. Основное активное вещество - метронидазол, который является противомикробным веществом, производным имидазола, оказывающим действие на анаэробные инфекции.
Паста «Ледермикс» - лекарственное средство для лечения и профилактики пульпитов и периодонтитов. Представляет собой высокоэффективную комбинацию антибиотика (демеклоциклина гидрохлорид) и глюкокортикостероида (триамцинолона ацетонид).
Из корневых каналов всех 14 пациентов нам удалось впоследствии выделить S.mutans и C.albicans. Идентификацию S.mutans проводили по биохимическим свойствам [6], которые дают положительную реакцию с маннитом и сорбитом, а с сахарозой и перекисью водорода отрицательную. Важно отметить, что по классификации Брауна (1919) S.mutans является а-гемолитическим (зеленящим) стрептококком [7], это его основное культуральное свойство.
На среде Сабуро выросло множество колоний грибов. Колонии C.albicans выглядели как беловато-кремовые, выпуклые и округлые сливочки. Мы провели микроскопию колоний (C.albicans образуют псевдомицелий и хламидоспоры), схожих по культуральным признакам с C.albicans и таким образом смогли их идентифицировать Определение активности образцов материалов для временной обтурации корневых каналов проводили методом диффузии в агар с использованием лунок (диаметр 6мм). Результаты оценивали по величине (диаметру) задержки зон роста вокруг образцов мазей.
Чувствительность культур к пастам подтверждали по наличию или отсутствию зоны задержки роста вокруг сформированной лунки.
В первую очередь мы производили посев штаммов C.albicans на среду Сабуро и S.mutans на кровяной агар в чашки, которые мы предварительно разделили на 2 сектора: сектор 1 - паста «Гриназоль», сектор 2 - паста «Ледермикс». В каждом секторе создавали лунки (углубления на поверхности агара) и помещали в них исследуемый материал для временной обтурации корневых каналов. Затем отправляли чашки в термостат (24 часа, 37°С). Способность исследуемых штаммов формировать биопленки было определено по статической методике, которая была аналогична как в случае со S.mutans, так и с C.albicans [6]. Преимуществом данного метода является возможность увидеть способность микроорганизмов образовывать биопленки на гидрофобной поверхности пластика и на гидрофильной поверхности стекла. Этапы выявления формирования биопленок статическим методом:
1. Стерилизуем покровные стекла (помещаем в емкости с этиловым спиртом). Вносим их в стерильные пластиковые чашки Петри по одному стерильным пинцетом. Подсушиваем закрытые чашки со стеклами в термостате.
2. Ночные культуры тестируемых штаммов в разведении 1:100 (в свежей питательной среде: S.mutans на сахарном бульоне, C.albicans на жидком Сабуро) вносим стерильно по 4 мл в чашки со стеклами таким образом, чтобы клеточная суспензия равномерно покрывала дно чашки. В качестве контроля фона в одну из чашек с покровным стеклом вносим стерильную питательную среду. Чашки помещаем в термостат (28°, 24 часа).
3. На следующий день содержимое чашек нужно аккуратно удалить, чтобы не повредить сформировавшиеся биопленки. Затем вносим в чашки по 4 мл дистиллированной воды и по 400 мкл 1% спиртового раствора кристалл виолета и оставляем при комнатной температуре на 45 минут.
4. Затем окрашенный раствор осторожно отсасываем и 3 раза промываем чашки со стеклами дистиллированной водой, стараясь не повредить окрашенные биопленки, которые образовались на стекле и на дне чашек.
5. Подсушиваем чашки со стеклами. В результате получаем визуально определяемую биопленку, если этот микроорганизм способен формировать биопленки.
Результаты и их обсуждение.
Хронический фиброзный периодонтит у исследуемых подростков развился вследствие осложнения кариеса. Окончательный диагноз ставился на основе данных клинических и рентгенологических исследований [8]. Таким образом, проведенные нами клинико-микробиологические исследования in vitro показали, что:
• штаммы C.albicans 100% нечувствительны к действию материалов для временной обтурации корневых каналов «Гриназоль» и «Ледермикс» (рис.1);
• штаммы S.mutans также 100% нечувствительны к действию данных материалов (паст) (рис.2).
В результате клинико-лабораторных исследований силлеров, применяемых для временной обтурации корневых каналов у детей, S.mutans и C.albicans оказались полирезистетными штаммами. Биологические свойства изученных микроорганизмов показали высокую устойчивость к временным эндо- материалам. Это навело нас на предположение, что данные штаммы микроорганизмов образуют биопленку, которая защищает их от внешних негативных факторов. Большинство микроорганизмов in vivo образуют биопленки, которые представляют собой защитный внеклеточный матрикс, образованный ассоциацией микроорганизмов в его составе [9]. В большинстве случаев разрушить его удается, только комбинируя механические и химические методы воздействия.
Биопленки рассматриваются как фактор более жесткой селекции, увеличивающей способность микроба к адаптации на воздействие внешних факторов. Выделенные штаммы оказались адаптированными, т.е. обладали высокой вирулентной способностью.
Результаты, полученные статическим методом, были таковы, что C.albicans и S.mutans в 100% случаев образуют биопленки. Биопленка визуально определяется в случае с S.mutans как мелкие окрашенные пятна (рис.3), а в случае с C.albicans как участки более интенсивного окрашивания неправильной формы (рис.4). Заключение.
Способность микроорганизмов образовывать биопленки,
говорит об их высокой вирулентной способности. Несмотря на название биопленка не является однородной субстанцией, она гетерогенна в пространстве и во времени, сквозь биопленку проходят водные каналы, несущие питательные вещества и вымывающие продукты жизнедеятельности микроорганизмов [10]. На этапах эндодонтического лечения необходимо комбинировать инструментальные и медикаментозные методы обработки корневых каналов, что обеспечит механическое разрушение образованных множеством ассоциаций микроорганизмов биопленок в макроканале, а также достаточную дезинфекцию и стерилизацию в макро-и микроканалах.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Е. В. Боровский Терапевтическая стоматология. Учебник для студентов медицинских ВУЗов. - М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 385 с.
2 Календарева Г.А.. Клинико-лабораторное обоснование применения силера для временной обтурации системы корневых каналов при лечении хронического периодонтита : автореф. дисс ... канд. мед. наук - Алматы, 2010. - 89 с.
3 G.C.L.Wong G.A. O'Toole, All together now: Integrating biofilm research across disciplines. MRS Bulletin. - 2011. - 36. - Р. 339-342.
4 Гостев В.В., Сидоренко С.В. Бактериальные биопленки и инфекции. //Журнал инфектологии. - 2010. - 2(3). - С. 4-15.
5 Stewart PS, Costerton JW. Antibiotic resistance of bacteria in biofilms. //Lancet. - 2001. - 358. - Р. 135-138.
6 Романова Ю.М., Алексеева Н.В., Смирнова Т.А., Андреев А.Л., Диденко Л.В., Гинцбург А.Л. Способность к формированию биопленок в искусственных системах у различных штаммов Salmonella Typhimurium. //Журн. Микробиол. - 2006. - №4. - С.38-42
7 В.В. Меньшикова Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.
8 Е. В. Боровский Терапевтическая стоматология // Учебник для студентов медицинских ВУЗов. - М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 385 с.
9 Mah T-FC, OToole GA. Mechanisms of biofilm resistance to antimicrobial agents. Trends Microbiol. - 2001. -9. - Р. 34-39.
10 Solomonov M. Биопленка как эндодонтическая инфекция. Practical_scientific journal Clinisheskaya Endodotiya (Clinical Endodontics) (Russia). - 2008. - № 3-4. - Р. 31-34.
Г.А. КАРКИМБАЕВА, Д.Ж. БАТЫРБАЕВА, A.F. СЕРЕКОВ
С.Д. Асфендияров атындагы Цазац ¥лттъщ Медицина университетi Балалар жасындагы стоматология кафедрасы Микробиология, вирусология жэне иммунология кафедрасы
БАЛАЛАР СТОМАТОЛОГИЯСЫНДА ЦОЛДАНЫЛАТЫН УАЦЫТША КАНАЛДАРДЫ ЭТУ УШ1Н " ГРИНАЗОЛЬ" МЕН " ЛЕДЕРМИКС" СИЛЛЕРДЕРДЩ КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРЛЫ БЕЛГ1ЛЕУ1. ТУБ1Р 1Ш1 МИКРОФЛОРАСЫНЬЩ ПОЛИРЕЗИСТЕНТТ1Л1Г1НДЕ БИОЦАБАТТЫН РОЛ1
Туйш: Балалар жасындагы стоматология мен ортодонтия курсы модулшде 14-16 жастыц аралыгындагы созылмалы фиброзды перидонтит диагноз1мен 14 жасесшр1м тексершдь Эрб1р емделушшщ тамырлы арнасыныц жуйесшен сурт1мдер алынды, содан кешн олардын епй жасалды жэне S.mutans жэне C.albicans б1рдейлест1ршд1. Агарга диффузия эдй аркылы белпленген микроорганиз1мдердщ уакытша каналдарды ету ушш " Гриназоль" мен " Ледермикс" препараттарына ттркендрпштМ аныкталды. Осы микроорганизмдердщ биопленкалар жасау мумгандт статикалык эдс бойынша белгт нысанга келт1р болды. Клиникалык эндодонтиясында осы жумыстыц ете мацызды практикалык магынасы бар. ТYЙiндi свздер: биокабат, биофильмр, туб1р езеп, уакытша каналдарды ету, туб1р mi микрофлорасы
G.A. KARKIMBAEVA , D.Z. BATYRBAEVA , A.G. SEREKOV
Kazakh National Medical University named after S.D. Asfendiyarov Department of pediatric dentistry Department of Microbiology , Virology and Immunology
CLINICAL AND LABORATORY STUDY OF MATERIALS USING FOR TEMPORARY ROOT CANAL OBTURATION IN CHILDREN AND THE
ROLE OF BIOFILMS IN POLYRESISTANCE INTRACANAL MICROFLORA
Resume: Based on the module propaedeutics of pediatric dentistry and orthodontics were examined 14 adolescents aged 14-16 years with a diagnosis of chronic fibrotic periodontitis. From the root canal systems of each patient was taken swabs for further planting and identification of pure cultures S.mutans and C.albicans. The sensitivity of isolated strains for materials for temporary root canal obturation Grinazol and Ledermix was studied by agar diffusion method. Further static method has been studied the ability of these microorganisms to form biofilms. The results of this study are of great practical importance in the children's clinic endodontics. Keywords: biofilm, root canal, temporary obturation, intracanal microflora
